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1.
对聚合酶链反应(PCR)特异性扩增犬细小病毒(CPV)衣壳基因的诊断方法与用Grandell猫肾细胞(CRFK)或Madin-Darby犬肾细胞(MDCK)分离病毒和能被CPV特异性抗血清抑制的粪便血凝(HA)试验进行了比较;PCR检测的59例粪样中有1例假阴性(1.7%)。它与用MDCK细胞分离病毒同样敏感,而比用CRFK细胞分离病毒或HA试验更敏感。这些结果表明,PCR可作为粪样CPV检测的常 相似文献
2.
用单克隆抗体(MAb)作酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光试验(IFA)、病毒中和(VN)试验及兔疫沉淀试验证明了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)致细胞病变株87-2552(现地分离)与NADL和Singer(原型株)之间的抗原差异。两个抗BVDV87-2552株的MAb(D11和B7)能强烈中和现地分离株,并对该病毒的48-KDa糖蛋白呈特异性。这两个MAb有不同的亚型,D11为免疫球蛋白G1 相似文献
3.
分别以血清型Ⅱ型马立克氏病病毒(MDV)疫苗株(Z4、SB1)、血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒(HVT)疫苗株(FC126)及二价疫苗(Z4+FC126、SB1+FC126)免疫鸡群,用琼脂扩散试验(AGPT)检查各鸡群MDV强毒攻击后不同时期的羽囊抗原。结果,二价苗能使试验鸡羽毛囊强毒排出高峰推迟,排毒率显著下降。 相似文献
4.
免疫鸡MDV感染后羽毛根HVT的分离及HVT免疫对MDV抗原检测的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
5只HVT免疫鸡,实验感染MDV后的第1~10周期间,分别采用初次细胞分离培养物上清中的自由病毒粒子鉴定,dot-blotDNA杂交和常规AGP试验等方法,对并发感染鸡羽毛根进行了病毒及病毒抗原的动态检测与比较。结果显示,在上述羽毛根中可同时存在HVT粒子和MDVDNA。HVT可分离时间为MDV攻毒后1~7周;MDVDNA最早检出时间为MDV攻毒后的第18~22天,并达到其持续性(22~70d)的检出率最高峰(100%);而AGP法对此期间鸡只羽毛根MDV抗原的最早检出时间在第22天,且检出率很低。因此,羽毛病毒抗原AGP检测法,对免疫鸡只或鸡群MDV感染的诊断仍然是特异的,但较单纯感染的检测,其检出率更低,因而更难以反映出免疫鸡群中MDV感染的真实状况。 相似文献
5.
采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。 相似文献
6.
本文报告了用蔗糖密度梯度离心和光密度分析相结合口蹄疫病毒(FMDV)在单层BHK21细胞中扩增后,其中FMDV 140 S抗原浓度,并同时分析了经BEI(二乙烯亚胺)灭活后,这种抗原含量的改变。结果表明,O型FMDV在单层BHK21细胞中增殖后,其FMDV 140 S抗原浓度降至0.9μg/ml。 相似文献
7.
马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白D基因的分离克隆,定序及其在大肠杆… 总被引:1,自引:0,他引:1
用聚合酶链式反应(PCR)技术,从马立克氏病病毒(MDV)GA株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA中扩增出MDV糖蛋白(gD)抗原基因1209bp编码序列。将该PCR扩增产物于EcoRI和KpnⅠ位点克隆进行pUC18质粒载体中。将gD重组pUC18质粒DNA用Digoxigenin(Dig)标记后,在Southern blot中,该探针能识别MDV基因组DNA的Bam HI-A克隆中的A 相似文献
8.
马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体 总被引:3,自引:1,他引:2
用能表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)的重组杆状病毒感染的Sf9细胞免疫小鼠,制备针对MDVgB的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒GA株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原,同时以免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)来筛选杂交瘤细胞,结果获得了IFA和ELISA均为阳性的2株单克隆抗体细胞株,定名为BA4和BD8。在IFA和免疫沉淀试验中,单抗BD8与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型MDV均呈阳性反应;单抗BA4只对Ⅰ型MDV(包括CVI988疫苗株)呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证2株单抗识别的是MDV糖蛋白B抗原。 相似文献
9.
不同启动子对重组痘苗病毒表达狂犬病病毒糖蛋白基因的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
以血凝素(HA)基因为侧翼,将狂犬病病毒糖蛋白基因cDNA置于不同类型的痘苗病毒复合启动子下游,构建了4种表达质粒。重组表达质粒转染已感染WR株痘苗病毒的BHK21细胞,并通过鸡红细胞吸附试验,筛选、纯化出与表达质粒对应的4组HA-重组痘苗病毒:vSFJ1-10RVgp,vSFJ2-16RVgp,vRJ1-10RVgp,vRJ2-10RVgp。经间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,从4组重组病毒中每组各鉴定出1株阳性重组病毒。Westernblot检测显示,重组病毒感染的BHK21细胞裂解物上清中有1种蛋白与抗RVGP的McAb发生特异反应,分子量为69000。在重组病毒感染早期,RVGP的表达量以vSFJ1-10RVgp最高;而在感染晚期,则以vSFJ2-16RVgp最高。4株重组病毒免疫小鼠,均能够不同程度地诱导小鼠产生抗RVGP特异性抗体。 相似文献
10.
猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较 总被引:7,自引:0,他引:7
在我国吉林省某地猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)抗体阳性猪群的4头2日龄弱仔猪实质脏器中分离到2株PRRSV。间接荧光抗体试验(IFA)结果表明,PRRSV(LV.VR-2332)抗血清与2个分离株呈阳性反应;分离到病毒的弱仔猪血清与参考株(LV.VR-2332)也呈阳性反应;而分离株与HCV、PrV、PPV、TGEV、PEDV和HEV无交叉抗原。以上试验证明,我们已成功地分离到2株地方性PRRSV。进一步用六种PRRSV单抗(A~F)进行IFA试验,结果2个分离株与VR-2332的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。 相似文献
11.
以人工合成的针对血清I号马立克氏病病毒(MDV1)A抗原基因(gA)部分序列的两端寡聚核苷酸为聚合酶链反应(PCR)的引物,分别对马立克氏病病毒血清I型(京-1株,MD11/75C株);2型(SB-1株);3型(火鸡疱疹病毒的FC126株)毒株和GA株BamHI B片段的PACY184克隆重组质粒DNA进行基因扩增反应及其敏感性试验。结果表明,该引物不仅对MDV1具有较强的特异性,而且由此引物引导 相似文献
12.
通过MDCK传细胞从黑龙江某狐场疑似狐狸脑炎病狐的肝脏中分离到对本动物具有较强致病能力的强毒株,定名为FEV-H。经系统鉴定,并与已知国内分离毒株狐狸脑炎病毒FEV-8801,狐喉气管炎病毒FAV-2比较,证实为狐狸脑炎病毒,属犬1型腺病毒(CAV-1)。 相似文献
13.
马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原I型特异性和群共同性决定簇的… 总被引:5,自引:0,他引:5
用能表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)的重组杆状病毒感染的Sf9细胞免疫小鼠,制备针对MDVgB的单克隆抗体,以I型马立克氏病病毒GA株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原,同时以免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)来筛选杂交瘤细胞,结果获得了IFA和ELISA均为阳性的1株单克隆抗体细胞株,定义名BA4和BD8。在IFA和免疫沉淀试验中,单抗BD8与I,ⅡⅢ型MDV均呈阳 相似文献
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15.
将新城疫病毒(NDV)的融合蛋白(F)基因或血凝素-神经氨酸酶(HN)基因插入到火鸡疱疹病毒(FVT)的一个非必需基因中,构建了重组HVT株。NDV抗原的表达受来自劳斯肉瘤病毒的一种强启动子的调控。1日龄腹腔内(IA)接种表达NDV融合蛋白的重组HVT的鸡不仅产生免疫学反应,而且在28日龄可抵抗嗜神经NDV强毒株Texas GB的致死性肌肉攻毒(保护率>90%)。表达NDV HN的重组HVT仅能提 相似文献
16.
李新华 《中国预防兽医学报》1998,(4)
用淋巴细胞杂交瘤技术研制出11株抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体。这些单抗仅与GPV反应,与其它细小病毒(CPV、FPV、PPV)和禽病毒(NDV、IBDV、DHV、DPV)均不反应。腹水单抗的ELISA效价达10-5~10-7,琼扩沉淀效价达120~1512,鹅胚中和效价达130~1122,鹅体中和效价为154~196。GPA1和GPC5两株单抗对人工感染GPV的雏鹅具有良好防治效果。 相似文献
17.
提高鸡传染性支气管炎病毒血凝抗原滴度途径及抗原灭活 总被引:4,自引:0,他引:4
将7株传染性支气管炎病毒(IBV)标准株(M41、H120、Holte、Gray、Connecticut、Iowa609和T株)和6株分离株(NIBV、GIBV、M、SH、J和H株)分别接种于鸡胚,收获尿囊液,经浓缩后,用魏氏梭菌培养液处理,制备血凝抗原。其中,H120株血凝滴度最高,T、M、J和H株无血凝性。应用含有不同滴度IBV母源抗体的鸡胚增殖病毒制备抗原,效价与用SPF鸡胚增殖病毒制备的抗原效价一致。尿囊液经反复冻融后再制备抗原会使血凝价降低。抗原分别用甲醛、高碘酸钠、硼氢化钾和SDS灭活,其中甲醛灭活效果最理想。抗原对氯仿敏感,对乙醚稳定。适宜浓度的Na+、Mg2+可显著提高抗原的血凝性 相似文献
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19.
本试验用差束离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒(AMV)。并以SDS法裂解病毒,用SDS-PAGE分析AMV结构蛋白成分,最后选用(LKB)水平板式电泳系统,经SDS-PAGE比较大量地分离提纯了Pgag27。用Dot-ELISA和琼脂扩散试验检验其抗原活性,并且用SDS-PAGE测定其分子量和纯度。结果表明,提纯的病毒蛋白具有抗原活性,且达到电泳纯。 相似文献
20.
致病性马立克氏病病毒的污染与监测 总被引:2,自引:0,他引:2
马立克氏病( Marek’s disease,MD)是危害世界养禽业最严重的病毒性肿瘤性传染病。MD经羽毛囊排毒,空气传播,传染力极强,是鸡的三大主要疫病之一,可造成重大的经济损失。该病的致病因子为马立克氏病病毒(Marek’s diseasevirus,MDV),属疱疹病毒科成员,根据其嗜淋巴细胞性相似于γ-疱疹病毒,而其基因组结构却相似于α-疱疹病毒[1]。 MDV按其致病性和血清学反应不同分为三个血清型:血清I型(MDVI)包括致瘤致病性的强毒株(如 HPRS- 17、GA、Md/5、BJ-1)… 相似文献