不同禽腺病毒株感染的绒毛尿囊膜和鸡肾细胞培养物制备…

作者对血清学不同的禽腺病毒（ＦＡＶ）感染的绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）和鸡肾细胞培养物（ＣＫＣ）制备的琼脂凝胶沉淀反应抗原进行了比较。结果表明这两种类型的抗原对异源抗血清的灵敏度比对同源抗血清的灵敏度低，在血清型之间存在定量的差异。ＣＡＭ抗原对异源抗血清的灵敏度比ＣＫＣ抗原对异源血清的灵敏度高。含２或３种病毒株抗原的多价ＣＡＭ抗原在检测田间血清样品时可提高其灵敏度，从而使检出率提高。     

PCR法检测血清I型马立克氏病病毒及其敏感性试验的研究

以人工合成的针对血清Ｉ号马立克氏病病毒（ＭＤＶ１）Ａ抗原基因（ｇＡ）部分序列的两端寡聚核苷酸为聚合酶链反应（ＰＣＲ）的引物，分别对马立克氏病病毒血清Ｉ型（京－１株，ＭＤ１１／７５Ｃ株）；２型（ＳＢ－１株）；３型（火鸡疱疹病毒的ＦＣ１２６株）毒株和ＧＡ株ＢａｍＨＩ Ｂ片段的ＰＡＣＹ１８４克隆重组质粒ＤＮＡ进行基因扩增反应及其敏感性试验。结果表明，该引物不仅对ＭＤＶ１具有较强的特异性，而且由此引物引导     

犬瘟热,猫细小病毒,犬腺病毒弱毒株的理化特性及生物学试验

以鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）、猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）、狗肾传代细胞（ＭＤＣＫ）从引进的疫苗中分别分离到犬瘟热ＣＤＶ－Ａ株、猫细小病毒ＦＰＶ株、犬腺病毒ＣＡＶ１株。对三个弱毒株的细胞病变规律,形态特征,病毒滴度,理化特性,核酸型,血清学交叉反应,本动物的安全性及免疫原性等内容进行了试验。鉴定结果表明,３个弱毒株均可作为制苗用毒种     

聚合酶链反应,病毒分离和血凝试验检测犬粪样中细小病…

对聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增犬细小病毒（ＣＰＶ）衣壳基因的诊断方法与用Ｇｒａｎｄｅｌｌ猫肾细胞（ＣＲＦＫ）或Ｍａｄｉｎ－Ｄａｒｂｙ犬肾细胞（ＭＤＣＫ）分离病毒和能被ＣＰＶ特异性抗血清抑制的粪便血凝（ＨＡ）试验进行了比较；ＰＣＲ检测的５９例粪样中有１例假阴性（１．７％）。它与用ＭＤＣＫ细胞分离病毒同样敏感，而比用ＣＲＦＫ细胞分离病毒或ＨＡ试验更敏感。这些结果表明，ＰＣＲ可作为粪样ＣＰＶ检测的常     

马立克氏病疫苗免疫鸡群强毒攻击后羽囊排毒情况

分别以血清型Ⅱ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）疫苗株（Ｚ４、ＳＢ１）、血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗株（ＦＣ１２６）及二价疫苗（Ｚ４＋ＦＣ１２６、ＳＢ１＋ＦＣ１２６）免疫鸡群，用琼脂扩散试验（ＡＧＰＴ）检查各鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原。结果，二价苗能使试验鸡羽毛囊强毒排出高峰推迟，排毒率显著下降。     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。     

应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究

用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ     

几个猫细小病毒毒株间抗原性和基因性的比较

用病毒ＤＮＡ限定酶及抗猫泛白细胞减少症病毒（ＦＰＬＶ）单克隆抗体对源于猫、水貂及犬的１４株猫细小病毒（ＦＰＶ）进行抗原和基因（差异）的比较测定。且在抗原性及基因特性方面与日本的ＦＰＬＶ及水貂肠炎病毒（ＭＥＶ）毒株进行比较。最近从中国东北部分离出来的几株ＭＥＶ和狗细小病毒（ＣＰＶ，“新”抗原型）具更多的相同之处。由于抗原及基因特性所决定我们还是把一份从普通猫粪便中分离出的一个毒株看作ＣＰＶ。用限定酶（ＨｉｎｆＩ）消化显示。早期分离到的一株“新”抗原型ＣＰＶ和分离到的“旧”抗原型ＣＰＶ毒株具有相似的消化片断。包括上述提到的这些特性的测定结果显示．在ＦＰＶ的不同亚种间存在抗原的多相性和基因的多型性。     

鉴别新城疫病毒弱毒株的抗多肽抗体制备

针对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）弱毒株Ｆ蛋白前体（Ｆ０）Ｆ２片段的特异结构,人工合成特异性多肽,将多肽与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）化学偶联制和轩成全抗原后免疫小鼠,制备抗多肽血清。经ＥＬＩＳＡ检测,该抗体与ＭＤＶ弱毒株呈阳性反应,而与鸡痘病毒（ＦＰＶ）,鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）,ＭＤＶ强毒Ｆ４８Ｅ８株和四平析呈阴性反应,试验结果证明该抗体可以用于鉴别ＮＤＶ弱毒株。     

猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较

在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明,ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应;分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应;而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明,我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验,结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。     

单克隆抗体介导抗原捕获酶联免疫吸附试验鉴定传染性支气…

作者建立了一种抗原捕获酶联免疫吸附试验（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）。用对各血清型Ｓ１糖蛋白有特异性的单克隆抗体（ＭＡｂ），对阿肯色（ＡｒＫ）、康涅狄格（Ｃｏｎｎ）、马萨诸塞（Ｍａｓｓ）等血清型的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）进行了检测和鉴定。当Ｓ１特异性单克隆抗体、抗原、鸡血清的血清型相同时，试验（采用双抗体夹心法）结果最为理想。而用群特异性（Ｍ糖蛋白特异性）ＭＡｂ捕获抗原。抗原和异源鸡血清之间有不同程度的交     

狐狸脑炎病毒的分离鉴定

通过ＭＤＣＫ传细胞从黑龙江某狐场疑似狐狸脑炎病狐的肝脏中分离到对本动物具有较强致病能力的强毒株,定名为ＦＥＶ－Ｈ。经系统鉴定,并与已知国内分离毒株狐狸脑炎病毒ＦＥＶ－８８０１,狐喉气管炎病毒ＦＡＶ－２比较,证实为狐狸脑炎病毒,属犬１型腺病毒（ＣＡＶ－１）。     

口蹄疫嵌合病毒疫苗的研究

口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）ＶＰ１（１３２－１５９位残基）的Ｇ－Ｈ环是病毒粒子表面的主要特征，它在疫苗效力，抗原变异和细胞结合中起着主要作用。我们用ＦＭＤＶ的感染性ｃＤＮＡ构建一种Ａ血清型病毒，在该病毒中，其Ｇ－Ｈ环被Ｏ或Ｃ血清型病毒的同源序列取代。这种嵌合病毒的复制滴度高，并表现与野毒相似的噬斑形态。由此证明，Ｇ－Ｈ环可在血清型之间交换。单克隆抗体分析表明，环内所含抗原表位可被转移至嵌合体，并保持由Ａ     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％,混合感染多种病原微生物的海兰蛋白鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ）这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ,能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１的细胞内增殖,用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的难传染性贫血特征性的临床症状和病理变化;用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片,可见特异的核内荧光,分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒变异株的比较研究

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）变异株Ｈ９５提纯样品经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ,证明Ｈ９５株单抗ＤＥ７和Ｍ４１株单抗６ＤＨ８均能识别Ｈ９５株５４０００蛋白多肽。采用单抗、多抗介导间接ＥＬＩＳＡ试验表明,Ｈ９５毒株能与抗ＩＢＶＭ４１Ｎ蛋白单抗６ＤＨ８和ＩＢＶＭ蛋白单抗ＭＣ发生反应,也能与抗Ｍ４１、Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ、Ｔ、Ｈ５２、Ｎ１１５和分离株Ｃ９００１、ＤＬＺ９１１１的多抗血清反应,同时抗Ｈ９５株的４株单抗、多抗血清也能与上述毒株反应。卵磷脂酶Ｃ处理的Ｈ９５株的血凝活性能被相应的Ｈ９５株的单克隆抗体和高免血清所抑制,也能被Ｍ４１单抗和高免血清所抑制。通过ＲＴ－ＰＣＲ获得了Ｈ９５毒株的免疫原基因Ｓ１,经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ和ＩＢＶ的Ｓ探针检测呈阳性。     

禽腺病毒鸽分离株在鸡胚原代细胞上的生长特性和血清学特征

禽腺病毒（ＦＡＶ）在禽类中广泛分布，现有知识大多来源于由１２个血清型（ＦＡＶ１－１２）组成的Ⅰ群鸡腺病毒。ＭｃＦｅｒａｎ等（１９７６）首次报道了鸽的腺病毒，两个分离株被鉴定为ＦＡＶ血清型８。以后的几篇报道表明腺病毒很可能与幼鸽的包涵体肝炎有关。最近有...     

用单克隆抗体检测禽脑脊髓炎病毒抗原

建立了抗禽脊髓炎病毒（ＡＥＶ）的单克隆抗体（ＭＡｂ）ＶＲ９－１。接种ＡＥ鸡胚适应毒Ｖａｎ Ｒｏｃｋｃｌ株、２种疫苗株和２种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞，用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查，结果，均可与ＭＡｂ ＶＲ９－１起反应。该ＭＡｂ也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶染色。试验结果表明，该ＭＡｂ可认别ＡＥＶ毒株的一个共同抗原决定簇，可用于ＡＥＶ检测和定     

人及动物C群轮状病毒编码外壳糖蛋白VP7基因序列比较

测定了牛Ｓｈｉｎｔｏｋｕ和猪ＨＦ，ＷＨ株Ｃ群轮状病毒外膜糖蛋白ＶＰ７基因的核苷酸序列，并与已发表的猪Ｃｏｗｄｅｎ株和人Ｅｈｉｍｅ株的相应序列作了比较。结果发现所有５株ＶＰ７基因都有１０６３个核苷酸，有一编码３３２个氨基酸多肽的ＯＲＦ，氨基酸序列比较表明，Ｃ群轮状病毒血清型相关毒株（ＣｏｗｄｅｎＷＨ和Ｅｈｉｍｅ）间ＶＰ７有８５．２～９７．０％的同一性，而不同血清型（Ｓｈｉｎｔｏｋｕ，Ｃｏｗｅｎ，ＷＨ     

犬瘟热,细小病毒,腺病毒三联弱毒疫苗的研究

以犬瘟热（ＣＤＶＡ）、猫细小病毒（ＦＰＶ）、犬腺病毒（ＣＡＶ１）三个弱毒株为毒种,用ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞、ＣＲＦＫ细胞、ＭＤＣＫ细胞分别增毒制苗,按一定比例与冻干保护剂混合,经冻干工艺精制成冻干三联弱毒疫苗。试验对制苗工艺参数、半成品与成品的检验、疫苗的安全性与免疫原性、疫苗的临床应用等内容进行了研究。结果显示：三联苗对犬、貉、狐等动物预防三种病毒性传染病效果显著。     

猪繁殖—呼吸道综合征病毒（PRRSV）CH—1a株基因型鉴定

根据猪繁殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲型毒株和欧洲型毒株的基因组序列设计合成了２对引物,即１００８ＰＳ／１００９ＰＲ和１０１０ＰＬＳ／１０１１ＰＬＲ。我国分离的ＣＨ－１ａ株用这２对引物均能扩增出与预期大小相符的ＲＴ－ＰＣＲ产物,分别与美洲型代表株（ＶＲ－２３３２）的ＲＴ－ＰＣＲ产物大小相当。特异性试验表明,这２对引物均不能扩增其他常见的繁殖障碍相关病毒的ＲＮＡ或ＤＮＡ以及未感染的ＭＡＲＣ－１４５细胞ＲＮＡ。间接免疫荧光试验也证明,ＣＨ－１ａ株与ＰＲＲＳＶ核衣壳蛋白特异性单克隆抗体以及美洲型毒株抗血清均呈阳性反应。因此初步证实ＣＨ－１ａ株为美洲型ＰＲＲＳＶ。