EDS—BH91毒株血凝特性的研究

本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定。试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵辜、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度产３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４，浓度为０．０１、０．０４、．０．１、０．２Ｍ以     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱

用鸡传染性支气管炎病毒标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｔ、Ｎ１１５、ＩＢＶ６２株及国内华中（ＨＺ）、华东（ＨＤ）、华南（ＨＮ）、华北（ＨＢ）、东北（ＤＢ）及西北（ＸＢ）等地方性分离株试验,研究ＩＢＶ血凝特性。结果表明,ＩＢＶ不直接凝集鸡、牛、兔、小白鼠、仓鼠、猪、鹅、马、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％胰蛋白酶３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞;１０％乙醚３７℃作用ＩＢＶ２ｈ后,可凝集鸡、牛、小白鼠、仓鼠、鹅、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％卵磷脂酶Ｃ３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞。     

不同启动子对重组痘苗病毒表达狂犬病病毒糖蛋白基因的影响

以血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将狂犬病病毒糖蛋白基因ｃＤＮＡ置于不同类型的痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒。重组表达质粒转染已感染ＷＲ株痘苗病毒的ＢＨＫ２１细胞，并通过鸡红细胞吸附试验，筛选、纯化出与表达质粒对应的４组ＨＡ－重组痘苗病毒：ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ，ｖＲＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＲＪ２－１０ＲＶｇｐ。经间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）鉴定，从４组重组病毒中每组各鉴定出１株阳性重组病毒。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测显示，重组病毒感染的ＢＨＫ２１细胞裂解物上清中有１种蛋白与抗ＲＶＧＰ的ＭｃＡｂ发生特异反应，分子量为６９０００。在重组病毒感染早期，ＲＶＧＰ的表达量以ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ最高；而在感染晚期，则以ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ最高。４株重组病毒免疫小鼠，均能够不同程度地诱导小鼠产生抗ＲＶＧＰ特异性抗体。     

对EDS—76病毒快速检测方法的研究

用平板红细胞凝集（ＨＡ）试验对鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ－７６）病毒进行了快速定性检测，并与微量ＨＡ试验进行了对比。结果表明，当病毒ＨＡ滴度在５×２＾１２及其以上时，在１０－２５℃范围内于半分钟可与１０％鸡红细胞（ＲＢＣ）发生极明显的大片凝集。当病毒ＨＡ滴度在５×２＾１０以下时，则凝集片明显较小，且反应时间在２分钟以上。这种凝集现象可被ＥＤＳ－７６阳性血清特异性抑制。此法可用于对大批量样品中高效价病     

黄曲霉毒素B1和乙型肝炎病毒在鸭肝炎,肝癌发生,发展过程中的意义

以ＤＨＢＶ－ＤＮＡ斑点杂交检测鸭血清中病毒，分别给予一定量的ＡＦＢ１，定期剖杀观察肝脏变化及肝癌发生，并在饲料中加硒观察了ＡＦＢ１诱癌的预防效应，实验结果ＤＨＢＶ阳性实验组的肝脏病变重于ＤＨＢＶ阴性实验组：ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阳性对照组，ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１线病变重于ＤＨＢＶ阴性对照组，而ＤＨＢＶ阳性高毒组与ＤＨＢＶ阳性高毒加硒组之间，以及ＤＨＢＶ阴性高毒组与ＤＨＢＶ阴性高毒     

鹅副粘病毒的分类地位初探

对从病鹅体分离的禽副粘病毒（ＧＶＰ）ＹＧ９７株，经红细胞凝集（ＨＡ）和红细胞凝集抑制（ＨＩ）试验证明，与新城疫病毒（ＮＤＶ）存在着极大的相关性。参考ＮＤＶ的３个毒力指标－最小致死量致病鸡胚平均死亡时间（ＭＤＴ）、１日龄雏鸡内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）对ＹＧ９７株进行测定，表明其有与ＮＤＶ速发型类似的毒力，属强毒力的毒株。应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对Ｆ基因重要功能区片段扩增后进行序列测定，并与多株已报道的ＮＤＶ相应片段进行序列比较，经遗传进化树分析后，初步判定其为禽副粘病毒－Ⅰ型，属基因Ⅶ型ＮＤＶ。     

黄曲霉毒素B_1和乙型肝炎病毒在鸭肝炎、肝癌发生、发展过程中的意义

以ＤＨＢＶ－ＤＮＡ斑点杂交检测鸭血清中病毒。分别给予一定量的ＡＦＢ１，定期剖杀观察肝脏变化及肝癌发生。并在饲料中加硒观察对ＡＦＢ１诱癌的预防效应。实验结果ＤＨＢＶ阳性实验组的肝脏病变重于ＤＨＢＶ阴性实验组；ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阳性对照组；ＤＨＢＶ阴性加ＡＦＢ１组病变重于ＤＨＢＶ阴性对照组。而ＤＨＢＶ阳性高毒组与ＤＨＢＶ阳性高毒加硒组之间，以及ＤＨＢＶ阴性高毒组与ＤＨＢＶ阴性高毒加硒组之间无明显差异。提示硒在本实验中无明显预防效应。     

嗜水气单胞菌粘附特性的研究

不同来源的６株嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）对１０种不同红细胞的血凝试验表明，Ｊ－１株能凝集所有的１０种红细胞，而与其他菌株的血凝谱有所不同。血凝图式有２种：人、鸡、麻雀的红细胞凝集快，呈大小不等的絮状；而鲫鱼、绵羊、猪、小鼠、兔、鸭、犬的红细胞凝集慢，且呈均匀颗粒状。这两种血凝均能被Ｄ－甘露糖抑制，但不能被Ｊ－１株Ｒ菌毛抑制。组织粘附试验显示，Ｊ－１株能粘附小鼠和鲫鱼的肠组织和肠绒毛。将提纯的Ｒ菌毛预处理肠组织，或用Ｄ－甘露糖或木瓜蛋白酶消化的Ｒ菌毛抗血清Ｆａｂ片段预处理菌体，都不能抑制上述的粘附作用。Ｊ－１株对ＨＥｐ－２细胞显示强粘附，菌体随机粘附在细胞上，有少数侵入细胞浆内。其余５株菌的粘附特性与Ｊ－１株不尽相同。所有６株菌对草鱼肠组织及肠绒毛、ＥＰＣ细胞（鲤鱼乳头状上皮瘤细胞系）均无粘附性。     

鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究

本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。     

青海细毛羊血红蛋白和红细胞蛋白质多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对４７９只青海细毛羊的血红蛋白和红细胞蛋白质的多态性进行研究。结果发现：①青海细毛羊的血红蛋白基因座上有ＨＢＡＡ，ＨＢＡＢ，ＨＢＡＣ和ＨＢＢＢ四种基因型。ＨＢ＾Ａ，ＨＢ＾Ｃ等位基因频率分别为０．２６４１，０．７３４９和０．００１０；②血红蛋白基因座的基因型频率和基因频率没有性别间差异；③青海细毛羊ＥＰ－１和ＥＰ－２是单态性蛋白质。     

用ELISA和PCB对猪、牛血清中HBV抗原、抗体及DNA的检测

用三个厂家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ＿ｓＡｇ阳性８份，ＨＢ＿ｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢ＿ｓＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均为阴性，未扩增出特异性ＤＮＡ片段。此结果初步表明，无论家畜血清中有无ＨＢＶ－Ａｇ，均无感染性ＨＢＶ粒子存在，因此没有足够的证据担心家畜会在ＨＢＶ的传播上对人类构成威胁。     

醛化鸡红细胞应用于鸡新城疫的诊断和抗体检测

将新鲜鸡红细胞经戊二醛处理后，制成醛化鸡红细胞。该醛化鸡红细胞具有特异性，不发生自凝，保存期可达半年以上，和阴性尿囊液不发生凝集，与新工细胞同时用于血球凝集和血球凝集抑制试验，对疑似鸡新城疫病料和待检测血清进行检测，结果在ＨＡ试验中，新鲜鸡红细胞比醛化鸡红细胞高１－３个滴度，而在ＨＩ试验中，两种红细胞所得结果基本一致，有的则醛化对外开放红细胞比新鲜鸡红细胞高１－２个滴度。由此说明，醛化鸡红细胞完全     

家禽血清,卵黄和牛乳清中HBV标志物与人HBV—DNA的关系

应用反向间接血凝试验（ＲＰＨＡ）、酶免疫测定（ＥＩＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）测定了家禽血清、卵黄和牛乳清中ＨＢＶ标志物及人ＨＢＶ－ＤＮＡ。经ＲＰＨＡ测定发现，ＨＢｓＡｇ阳性率分别为４８／２０５（鸡血清），９／３１（鸭血清），３１／１０７（鸡卵黄）和５／３５（牛乳清）；在ＥＩＡ测定中，ＨＢｓＡｇ的阳性率和滴度均低于ＲＰＨＡ法，而且还发现其他ＨＢＶ标志物（ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ和ＨＢｃＡｂ）阳性的样品。对其中阳性样品应用ＰＣＲ测定ＨＢＶ－ＤＮＡ，结果全部阴性。此外，在ＲＰＨＡ测定中，经热处理的样品中５６．９９％由阳性转阴性；ＲＰＨＡ－ＨＩ测定中，人的阳性对照组明显地被抑制，而畜禽的阳性样品几乎均不能被抑制。根据上述结果，提示存在于家禽血清等样品中的ＨＢＶ标志物可能是由非特异性因素和／或其他交叉抗原所引起，而与人ＨＢＶ无关。     

EDS－BH_（91）毒株血凝特性的研究

本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定．试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵羊、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度为３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４．浓度为０．ｏ１、０．０４、０．１、０．２Ｍ以及浓度为０．ｏ１Ｍ，ｐＨ为５．８、６．８、７．４和８．０的ＰＢＳ作为稀释液进行血凝试验．其血凝滴度无显著差异；０．０５～０．３％的甲醛溶液４℃下处理病毒７２小时以及反复冻融病毒５次，其处理前后的血凝性均无显著差异。８０℃１０分钟就可以破坏病毒血凝性，而５６℃作用１小时对病毒血凝性无影响。０．１２５～０．５００％的胰酶对血凝性的影响不明显；病毒对氯仿不敏感，属于无囊膜病毒。     

对EDS－76病毒快速检测方法的研究

用平板红细胞凝集（ＨＡ）试验对鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ－７６）病毒进行了快速定性检测，并与微量ＨＡ试验进行了对比。结果表明，当病毒ＨＡ滴度在５×２１２及其以上时，在１０～２５℃范围内于半分钟可与１０％鸡红细胞（ＲＤＣ）发生极明显的大片凝集。当病毒ＨＡ滴度在５×２１０以下时，则凝集片明显较小，且反应时间在２分钟以上。这种凝集现象可被ＥＤＨ－７６阳性血清特异性抑制。此法可用于对大批量样品中高效价病毒，特别是种毒的初步选筛。     

用ELISA和PCR对猪,牛血清中HBV抗原,抗体及DNA的检测

用三个家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ４Ａｇ阳性８份，ＨＢｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢｅＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤ     

兔狲血液蛋白质和酶的电泳分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对２只兔狲的４种血液蛋白质表型和３种血液同工酶酶谱进行研究。结果发现：①被检兔狲的血红蛋白（ＨＢ），白蛋白（ＡＬＢ）和后白蛋白（Ｐａ）分别呈单一的ＨＢＡＢ，ＡＬＢＡＡ和ＰａＡＡ型，运铁蛋白（ＴＦ）有ＴＦＡＢ和ＴＦＢＢ两种表型；②血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）由ＡＬＰＡ，ＡＬＰＢ，ＡＬＰＣ和ＡＬＰＤ四种同工酶组成；③血清酯酶（ＥＳ）由ＥＳＩ和ＥＳＩＶ两种同工酶共７条区带组成；④血清乳酸脱氢酶（Ｓ－ＬＤＨ）由ＬＤＨ１，ＬＤＨ２，ＬＤＨ３，ＬＤＨ４和ＬＤＨ５五种同工酶组成，红细胞内只有前四种ＬＤＨ同工酶。     

青海细毛羊红细胞乳酸脱氢酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对１１０只青海细毛羊的红细胞乳酸脱氢酶（ＲＢＣ－ＬＤＨ）同工酶酶谱及其多态性进行了研究。结果发现：青海细毛羊ＲＢＣ－ＬＤＨ同工酶总共有１２条区带；第１条区带“１－Ａ”的电泳迁移率为５５．５％，第１２条区带“１１”的电泳迁移率为９５．０％；ＲＢＣ－ＬＤＨ有两种电泳表型，１０８只羊为Ｉ型，占９８．２％，２只羊为Ⅱ型，占１．８％；ＲＢＣ－ＬＤＨ１型尚可区分为两个亚型：Ｉ－ＢＢ型和     

鸡减蛋综合征病毒的血清学关系研究

利用血凝抑制试验和病毒中和试验对ＥＤＳ地方分离毒ＨＳ－１和国际标准毒ＡＶ－１２７之间的血清学关系进行了研究。分离病毒的血凝特性能够被ＡＶ－１２７高免血清、ＨＳ－１高免血不表所抑制，而不能与ＮＤ阳性血汪民生交叉反应；在病毒中和试验中，ＨＳ－１毒株与国际标准毒株ＡＶ－１２７能够发生交叉中和反应，且两毒株的亲缘值为９５％。结果表明，两者为同一血清型。     

HIV—2gag基因在重组痘苗病毒中的表达

以痘苗病毒ＨＡ基因为侧翼，将ＨＩＶ－２ｇａｇ基因部分序列（简称Ｇ１）和全部序列（简称Ｇ２）分别插入牛痘病毒Ａ型包涵体（ＡＴＩ）和串联１０个（与ＨＡ基因反向）或１６个（与ＨＡ基因同向）痘苗病毒Ｐ７．５组成的复合型启动子下游，构建了４个重组痘苗病毒表达载体质粒。经脂质体转染、鸡红细胞吸附试验筛选和免疫荧光鉴定，获得４株能稳定表达目的蛋白的重组痘苗病毒。实验结果表明，以ＨＡ基因为侧翼构建重组病毒的重组率约为０．１％，阳性重组率为２５％～１００％。实验中还发现，以ＨＡ基因为侧翼的重组痘苗病毒能够引起细胞融合，其可作为筛选重组痘苗病毒的另一种标志。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果表明，表达的Ｇａｇ蛋白能被ＨＩＶ－２血清中的特异性抗体所识别，并能诱导小鼠产生抗ＨＩＶ－２Ｇａｇ抗体。