犬腺病毒研究进展

<正>犬腺病毒(Canine adenovirus, CAV)分为2个血清型，犬腺病毒1型(Canine adenovirus 1,CAV-1)主要引起犬急性败血性肝炎，熊和狐狸脑炎；犬腺病毒2型(Canine adenovirus 2,CAV-2)主要引起犬科动物传染性喉气管炎和传染性腹泻等。CAV是目前已经发现的哺乳动物腺病毒属中致病性强、感染动物广的双股DNA病毒之一，该病毒在全世界范围内普遍存在，     

犬传染性肝炎的诊断与防治

犬 传 染 性 肝 炎(Infectious canine hepatitis,ICH)是由犬1型腺病毒(Canine adenovirus type 1,CAV-1)感染犬引起的一种多发性传染病,该病具有传染性强、发病率高、致死率高的特点,是目前对养犬业危害较大的疾病之一.本文系统的对犬传染性肝炎的病原学、流行病学、...     

犬腺病毒感染

犬腺病毒感染是犬的一种病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国内外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒:犬腺病毒Ⅰ型(CAV-1)是犬传染性肝炎和狐狸脑炎的病原,且能导致眼睛损伤,而其Ⅱ型(CAV-2)则能引起犬的传染性喉气管炎和幼犬肺炎。     

大熊猫血清犬腺病毒抗体调查

腺病毒 (Adenovirus,AV)可感染人和多种动物 ,在国内外有很多报道。已报道的动物感染宿主主要有牛、羊、犬、禽类以及狐狸、狼、貉、丛林狼、臭鼬、浣熊、水貂、雪貂、熊等野生动物 ,1996年 Woods等又发现腺病毒能引起鹿的出血性病变 [1] ,而且还怀疑与鹿表现为同样病变的叉角羚可能也是由于腺病毒感染引起的。犬腺病毒 (Canine adenovirus,CAV)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员 ,是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、感染动物最广的病毒 [2 ,3 ]。CAV分为犬腺病毒 型 (CAV- 1)和犬腺病毒 型(CAV- 2 ) ,其中 CAV- 1又名 :犬传染性肝炎病毒 ,罗巴斯病病毒 (Rubarth disease virus) ,狐狸脑炎病毒 ;CAV- 2又名犬喉气管炎病毒 ,幼犬咳嗽病毒 [2 ] 。CAV- 1是早在 192 5年由 Green等首次发现可导致狐狸脑炎 ,后来经 Rubarth的动物试验证明能引起犬的传染性肝炎的病原 [3 ,15] 。自那以后 ,有关该病毒引起犬和狐等动物的发病病例举不胜数 ,目前世界上大部分国家和地区都有该病的报道 ,198...     

犬腺病毒感染

犬腺病毒感染(Canineadenovirusinfections)是犬的一种病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国内外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒:犬腺病毒Ⅰ型(Canineadenovirustype1,CAV-1)是犬传染性肝炎(或称为“Rubarth”氏病)和狐狸脑炎的病原,且能导致眼睛损伤,而其Ⅱ型(CAV-2)则能引起犬的传染性喉气管炎和幼犬肺炎。1984年,夏咸柱等在我国首次分离到犬传染性肝炎病毒,证实了我国犬中也有犬腺病毒Ⅰ型的感染。1989年,钟志宏等从患脑炎的狐狸中分离到了犬腺病毒Ⅰ…     

犬Ⅱ型腺病毒蚀斑技术的建立和初步应用

犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原,通常只引起轻微的呼吸道疾病[1],但是在其它病毒或细菌继发感染的情况下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎[2],直接影响我国军、警犬和实验犬的培育、训练和使用.本文拟建立一个广泛适用的犬腺病毒蚀斑技术,为进一步以犬腺病毒为载体的重组弱病毒疫苗的筛选提供一个有效的技术方法.介绍如下.     

犬腺病毒感柒

犬腺病毒感染是一种犬的病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒,它们在结构,致病性等方面有所不同。目前比较一致的看法是:犬腺病毒Ⅰ型 (Canine adenovirus typeⅠ,     

感染性犬2型腺病毒全基因组克隆及鉴定

以犬 2型腺病毒 (canine adenovirus type- 2 ,CAV- 2 )自然弱毒株 YCA18基因组 DNA为模板 ,经 PCR扩增分别获得其双链两末端 10 13bp(U)和 972 bp(D)的 DNA序列 ,以首尾相接方式克隆入载体 p Poly2 ,获得重组质粒p Poly2 - UD。以 Hind 和 Bst B 双酶切 p Poly2 - UD,回收含载体和部分 U、D的大片段并与 CAV- 2 DNA共转化感受态 E.coli Sure TM,经菌体内同源重组 ,获得含有 CAV- 2全基因组序列的重组质粒 p Poly2 - CAV- 2。后者以 Cla 和 Asc 双酶切 ,释放 CAV- 2全基因组 ,通过脂质体介导转染 MDCK细胞 ,盲传 3代后重复转染 1次 ,4d后 ,出现腺病毒典型病变。细胞上清血凝效价为 1∶ 6 40 ,并可被 CAV- 2抗血清有效抑制。以上结果表明 ,本研究获得了具有感染性的CAV- 2全基因组重组质粒 ,为以 CAV- 2作为重组疫苗载体的系列研究奠定了重要基础。     

犬传染性肝炎的流行与防治

犬传染性肝炎(Infectious canine hepatitis,ICH)是由犬传染性肝炎病毒(ICHV)感染引起,是一种犬的急性、高度接触性败血性传染病,主要发生于犬和狐。犬传染性肝炎病毒又称犬腺病毒(canine adenovirus,CAV),属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员,是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、形态结构也研究得比较清楚的一种动物病毒。犬腺病毒广泛分布于全世界,是对我国养犬业、毛皮动物养     

犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

通过分析对比GenBank公布的几株犬Ⅰ型腺病毒序列,针对犬Ⅰ型腺病毒特有的E3区,设计了1对特异性引物。对引物浓度、退火温度、扩增体系等条件优化后,建立了犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法,并对40份CAV-Ⅰ人工感染银黑狐的粪便样品进行了检测。结果表明,与普通PCR相比,建立的犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性强的特点。该检测方法可用于Ⅰ型犬腺病毒的快速诊断与监测,并能够定量分析CAV-Ⅰ的感染程度。     

同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立

为建立检测多种犬病的多重PCR方法,本研究根据GenBank登录犬瘟热病毒(CDV)的N基因序列、犬细小病毒(CPV)的NS基因序列和犬腺病毒(CAV)的E3基因序列,设计合成3对特异性引物.通过优化反应条件,建立同时扩增CDV (507 bp)、CPV (287 bp)、CAV-Ⅰ (590 bp)和CAV-Ⅱ(1 027 bp)的多重PCR方法.实验结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测以上4种病毒,而狂犬病病毒检测为阴性;CDV、CPV、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的最低检出限分别为101.9 TCID50、101.7 TCID50、101.7 TCID50和102.2 TCID50.利用该方法对由黑龙江省不同地区所采集的30份犬病料样品进行检测,CDV阳性率为23.33％(7/30)、CPV阳性率为20％(6/30)、CAV-Ⅰ和CAV-Ⅱ的阳性率均为3.33％(1/30),证明建立的PCR方法可以用于临床诊断.     

犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重PCR方法的建立及应用

根据犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬腺病毒2型(Canineadenovirus type2,CAV-2)GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物,经试验条件优化,建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法,CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp的目的片段,特异性试验表明建立的方法只能特异扩增CAV-2和CDV,不能扩增犬细小病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、犬钩端螺旋体和犬黄胆出血群、狂犬病病毒。敏感性试验表明,所建立的双重PCR方法可以扩增4.63ng总核酸量。在上述试验基础上继续优化条件建立了能同时检测CAV-2和CDV两种病毒的双重PCR检测方法,并用该方法检测来自辽宁、吉林等15家动物医院134份鼻液和眼眵样品,与商品化试纸条检测结果相比,本方法更加敏感和方便。研究结果表明,本实验建立的方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热病毒和犬腺病毒2型的快速检测和鉴别诊断。     

犬腺病毒2型E3基因自然缺失毒株的分离鉴定及其致病性

犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)是重要的犬呼吸道病原，本试验旨在调查CAV-2在川渝部分地区的流行情况及其分离毒株致病性。采用检测CAV-2的特异性PCR方法，对2021—2022年采集自川渝部分地区的121份患呼吸道疾病的犬鼻咽拭子进行检测，分离流行毒株并研究其基因组特征及致病性。结果显示：CAV-2的阳性率为29.8%,值得注意的是，69.4%的阳性样本在E3基因存在9个核苷酸连续缺失(1 035—1 043 nt),导致4个氨基酸缺失(345—348 aa)。成功分离出1株E3基因自然缺失毒株，噬斑纯化后的细胞半数感染值为10^-9.46TCID₅₀·0.1 mL^-1;该毒株经口鼻感染幼犬后，幼犬出现体温升高、打喷嚏、流鼻涕及咳嗽等典型呼吸道症状。该分离毒株基因组全长31 786 bp,与GenBank中CAV-2基因组的核苷酸相似性为98.8%～98.9%。与已知的CAV-2基因组相比，本研究分离毒株除了E3基因的独特突变外，还在Fiber、Hexon和E1A等蛋白有独特...     

犬腺病毒感染

历史犬腺病毒引起的传染病包括传染性犬肝炎、传染性犬喉气管炎和狐脑炎等。1947年,Rubarth首次确认传染性犬肝炎。1959年,Kapsenberg获得分离病毒,并证明犬肝炎和狐脑炎是由同一种腺病毒引起,称为犬腺病毒Ⅰ型(CAV-1)。1962年,Pitchfield等在加拿大一次犬喉气管炎爆发中分离到一种犬腺病毒,即A-26毒株,称为犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)。两型可用血凝抑制试验和中和试验相区别。     

犬2型腺病毒毒株纤突蛋白基因的比较分析

根据GenBank中犬腺病毒（canine adenovirus,CAV)纤突基因序列，设计合成2对引物。用PCR方法，对犬2型腺病毒沈阳分离株（CAV-2SY株）第5代强毒（SY-V5）、经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒（SY-V60）、SY-V60感犬体上传5代的回收毒（SY-CP5）、美国疫苗毒（US-V20）等4个毒株的纤突基因进行了扩增，PCR产物经纯化后进行基因序列测定，测序结果经拼接后得到1个由1629个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列，编码543个氨基酸。犬2型腺病毒与GenBank中的标准的CAV-2强毒株（Toronto A26/61)纤突蛋白基因序列的比较结果表明：CAV-2SY株强毒株与Tornto A26/61株相同；SY-V60株与SY-CP5相同，与驯化前的SY-V5相比，在1134位发生碱基颠换，编码的氨基酸由原来的天冬酰氨（N）变为赖氨酸（K），并导致N-X-S/T潜在糖基化位点发生改变，US-V20该部位与发生同样的突变，本试测定和比较的CAV-2强毒株有5个潜在的N-联糖基化位点，弱毒株仅有4个位点；US-V20与TorontoA26/61差异较大，有11个碱基发生变化，导致8个氨基酸的变异。     

应用Vk1和激素治疗犬窝咳病的方法和体会

<正>犬窝咳是犬腺病毒2(Canine Adenovirus Vrius Typel2,CAV-2)引起的上呼吸道感染,临床表现主要是传染性咳嗽,也称犬窝咳,对幼犬的生长发育影响很大,也可能继发其它疾病并引起死亡。传统     

犬上呼吸道感染综合症

犬上呼吸道感染综合症,是指由非犬瘟热引起的,伴有明显咳嗽症状的犬呼吸道感染性疾病,一般指的是犬传染性气管支气管炎或犬窝咳。 一、病因 1.病毒性因素包括犬腺病Ⅱ型(CAV-2),副流感病毒(CPI),腺病毒Ⅰ型(CAV-1)、呼肠孤病毒Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,以及犬疱疹病毒。CAV-2和CPI可以破坏呼吸道上皮,引起细菌和支原体的继发感染,造成严重的呼吸道损伤。     

表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒的构建与鉴定

将犬瘟热病毒 ( canine distemper virus,CDV ) H基因表达盒克隆入转移质粒 p VAXΔE3,构建含 CDV H基因表达盒的转移质粒 p VAXΔ E3L PH,用 Nru 和 Sal 分别酶切转移质粒 p VAXΔ E3L PH和犬 2型腺病毒全基因组质粒p Poly2 - CAV- 2 ,将 CDV H基因表达盒定向克隆入 p Poly2 - CAV- 2质粒中 ,构建 E3区部分缺失的包含 CDV H基因表达盒的犬 2型腺病毒重组质粒 p CAV- 2 / CDVL PH。 Asc 和 Cla 对 p CAV- 2 / CDVL PH进行双酶切 ,释放 CAV- 2 /CDVL PH重组基因组 ,利用脂质体将 CAV- 2 / CDVL PH重组基因组与去除 Sal 和 Nru 片段的 CAV- 2基因组两端片段共转染 DK细胞 ,盲传和重复转染 3次 ,4 d后出现典型 CAV- 2病变 ,获得重组病毒 CAV- 2 / CDVL PH。用 CDV H基因特异性引物经 RT- PCR扩增重组病毒 DK细胞培养物 ,能够扩增出相应的核酸片段 ,表明 CAV- 2 / CDVL PH在DK细胞繁殖的过程中能够转录 CDVL P H的 m RNA,重组病毒免疫犬 ,可以诱导犬产生特异的抗 CAV- 2 HI抗体和抗 CDV中和抗体     

犬腺病毒1型和2型的差异

犬腺病毒是腺病毒科典型的成员。根据其血凝抑制作用和中和作用的不同划分为两个血清型,即犬1型腺病毒(CAV-1)和犬2型腺病毒(CAV-2)。以前认为 CAV-1是狐狸脑炎和犬传染性肝炎的致病因子,而 CAV-2是犬喉气管炎的病因。事实上,犬腺病毒两个成员之间不但致病性不同,而且病毒的肜态结构、抗原特性、血凝特性、组织培养特性乃至基因组成上都存在着明显的区别。     

犬传染性肝炎微量HA诊断研究

作者对犬传染性肝炎(ICH)微量血凝诊断法(MHA)从试剂、术式和样品处理方面进行了研究。肝脏样品采用60℃加热,3000 r/min离心的处理方法。术式采用总量为0.1mL的3排微量法,即血清样品的第1、2排分别加4单位1型犬腺病毒(CAV-1)和2型犬腺病毒(CAV-2)HA抗原,第3排加稀释液作为血清对照,同时测定CAV-1和CAV-2的HI抗体;检测肝脏和培养物样品HA效价,则用HA增强法,即第1、2排分别加稀释液和CAV-2血清为测定排,第3排加CAV-2和CAV-1两种血清为特异性抑制排。结果60份肝脏样品、80份细胞培养物和60份血清样品全部正确检出,与微量补反(MCF)检验结果全部相符。另外进行了新鲜和醛化人O型RBC比较试验,结果两者完全一致。