鳜传染性脾肾坏死病毒重组主衣壳蛋白免疫效果的初步验证

将大肠杆菌重组表达的鳜(Siniperca chuatsi)传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)主衣壳蛋白(MCP),以不同剂量(20μg,尾、50μg/尾、100μg/尾)腹腔注射免疫幼鳜(2月龄),测定各免疫组的血清抗体效价变化规律、头肾淋巴细胞增殖刺激指数(SI)、肝脏Mx蛋白表达及相对免疫保护率(RPS).结果表明,各免疫组抗体效价在第14天时达到峰值,其中50 ug/尾免疫组的抗体效价最高,随后各组的效价均下降,至第35天时与对照组无差异;头肾淋巴细胞经LPS、ConA刺激后,50 μg/尾免疫组及100 μg/尾免疫组的刺激指数均升高,其中50 μg/尾免疫组的刺激指数最高,20μg/尾免疫组与对照组无差异;在免疫后48 h各剂量免疫组Mx蛋白均有低量表达,对照组无表达,各免疫组表达量无显著差异;免疫后第36天攻毒,50μg/尾免疫组的相对保护率最高,为64.3%.研究结果表明,重组MCP蛋白有较好的免疫原性,可以激发鳜特异性免疫及非特异性免疫应答,当免疫剂量为50μg/尾时,免疫保护效果最好.     

如何提高猪场免疫效果

<正>生产中,养猪户虽能积极做好免疫工作,但免疫后猪群所产生的免疫效果往往并不理想,抗体水平亟待提高。根据生产实践和调查分析、总结,笔者认为猪场(大户)在免疫中必须正确使用疫苗,以确保猪体免疫后能够产生安全、可靠的免疫效果。     

高剂量钼对鸡免疫指标的作用

通过对鸡饲喂含钼饲料(钼含量:500mg/kg),研究高剂量对其免疫器官重量、生长指数、组织学变化及外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率的影响。结果表明:试验组鸡脾脏充血、出血、萎缩;法氏囊肿胀、萎缩。3周后免疫器官的重量、生长指数、外周血T淋巴细胞的ANAE阳性率低于对照组,5周后差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。说明500mg/kg饲料的钼可以抑制鸡免疫器官的生长发育及外周血T淋巴细胞的活化,造成免疫器官的病理损伤,导致免疫功能下降。     

猪场以周为单位免疫消毒效果好

<正>某猪场实行以周为单位的免疫消毒措施,多年来无疫情发生。其措施有,一是每周消毒一次;二是免疫:公猪第一周猪瘟免疫4头份,第二周免疫伪狂犬苗3mL,第三周链球菌苗3mL,每半年免疫一次。母猪第一周(哺乳20d)猪瘟4头份,第二周乙脑和细小病毒苗各3mL,第三周伪狂犬苗3mL,第四周链球菌苗3mL,每胎免疫一次(母猪因病、返情等原因延误免疫的要登记造册,适时补针),母猪产前增加腹泻疫苗免疫。     

轮状病毒免疫途径

<正>1膜免疫(口服接种)口服疫苗有Rota Shield、Rotarix、Rota Teq。由于轮状病毒是肠道病毒,肠道黏膜免疫是机体非特异性免疫的第一道防线,口服免疫可有效地刺激黏膜免疫细胞产生分泌型Ig A并引起全身免疫。2被动免疫何家惠等用RV弱毒株Na86F90制成的疫苗有良好的免疫原性,免疫效果可靠,特别是与大肠杆菌苗同时免疫效果十分明显。     

传染性造血器官坏死病灭活疫苗的制备及免疫保护效果

为了研发用于预防传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)灭活疫苗,实验以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)在胖头鱥上皮细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)上对传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)进行连续传代培养,通过测定各代病毒滴度,结合病毒收获时间确定最佳增殖方案;采用不同浓度的β-丙内酯(β-propanolactone,BPL)在24℃下灭活,经安全性实验验证后确定最佳灭活条件。以不同剂量腹腔注射免疫虹鳟,以磷酸盐缓冲溶液(PBS)为阴性对照组,通过检测攻毒后相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)、免疫相关因子表达量及血清中和抗体效价来分析该疫苗的保护效果。结果显示,最佳增殖方案为以MOI为0.000 1接种,15℃培养3 d;最佳灭活条件为以终浓度3.0 mmol/L的BPL将IHNV在24℃下灭活24 h;以最佳免疫剂量10μL/尾腹腔注射免疫虹鳟,免疫后7、21、45和60 d的相对免疫保护率分别为91.37%、84.28%、84.15%和47.5%,免疫后60 d时RPS显著低于其他时间点免疫组;免疫相关基因的实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,RT-qPCR)结果显示,与阴性对照组相比,Mx-1和IFN-γ表达量在免疫后7、15和30 d脾脏和头肾中均显著上调,在第7天时达到最大值(5倍);CD4和IgM表达量在免疫后15 d脾脏和头肾中均显著上调;在免疫后第30、45和60天虹鳟血清IHNV中和抗体效价依次为67.25、43.40和29.78,呈下降趋势且各组间差异显著。研究表明,该灭活疫苗可诱导虹鳟产生特异性免疫和非特异性免疫反应,对虹鳟具有显著的免疫保护作用。本研究为IHNV灭活疫苗研发提供参考。     

初探母源免疫处理草鱼母本及其子代5种免疫因子含量的周年变化规律

为探究草鱼母源免疫因子传递特性,实验借助酶联免疫吸附实验(ELISA)和实时荧光定量PCR (qPCR)技术分别检测分析了草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)弱毒疫苗免疫草鱼母本及其子代(即母源免疫子代)早期胚胎阶段至1龄期间5种免疫因子(IgM、C3、LZM、MBL和Bf)蛋白活性和基因表达水平的周年变化规律。结果显示,草鱼母本经GCRV弱毒疫苗免疫后,血液中5种免疫因子蛋白活性及基因表达水平在产卵期均显著高于对照组1.5倍以上,至免疫后第11个月与对照组无显著差异。母源免疫子代发育至水花(4 d)时,IgM、C3、MBL和Bf的基因表达水平均高于对照组;发育至乌仔(15 d)时,IgM、C3和Bf的蛋白活性水平均略高于对照组;发育至5～11月龄时,5种免疫因子在肝脏、脾脏、肾脏和头肾等免疫器官中仍存在高表达。研究表明,GCRV弱毒疫苗促使母源免疫因子在亲本和子代体内富集表达具有一定的时效性,最长可维持至11个月,为实际生产中草鱼母本疫苗免疫程序的制定提供参考依据。     

嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟后的免疫应答反应与保护效果

为了研究嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟(Acipenser schrenckii Brandt,1869)后的免疫应答反应与保护效果,本研究采用福尔马林灭活法制备嗜水气单胞菌灭活疫苗。通过腹腔注射途径免疫健康施氏鲟,对施氏鲟外周血的红细胞和白细胞数量、白细胞组成、吞噬活性、吞噬指数、血清酸性磷酸酶活性、血清溶菌酶活性、血清中和抗体效价等免疫指标及疫苗保护效果进行测定。结果显示,免疫组红、白细胞数量迅速上升,于免疫后第4天达峰值,分别为(8.50±0.17)×10~8个/mL和(8.96±0.44)×10~6个/mL;单核细胞和嗜中性粒细胞分类百分比于第7天达峰值,分别为10.50%和15.53%,极显著高于对照组(P0.01),淋巴细胞分类百分比在第21天才达峰值73.51%;吞噬指数和吞噬百分比均于第4天达到最高值,分别为4.53和30%;血清中溶菌酶活性和酸性磷酸酶活性分别在免疫后第7天和第14天达到峰值,极显著高于对照组(P0.01);血清抗体效价于免疫后第21天达到峰值1:203,极显著高于对照组(P0.01)。攻毒感染实验结果表明,免疫组的相对免疫保护率为76.84%。由此可见,嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫施氏鲟后,能够显著诱导施氏鲟体内的免疫应答反应,增强鱼体的免疫保护能力。本研究为养殖鲟因嗜水气单胞菌感染引起疾病的免疫预防技术研究奠定了前期基础。     

蚯蚓提取物对肉鸡免疫功能的影响研究

80只1日龄爱拔益加肉仔鸡(AA肉鸡),随机分为4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ～Ⅳ组为试验组,各组分别在日常饮用水中添加0、0.5%、1.5%及3%的蚯蚓提取物,研究其对肉鸡免疫器官发育及免疫功能的影响。结果表明:在日常饮水中添加0.5%、1.5%的蚯蚓提取物,肉鸡增重效果明显,其中以1.5%效果更好(P<0.01),并能显著提高肉鸡的免疫器官指数、外周血ANAE+淋巴细胞百分率、血清溶血素,增强机体的免疫功能(P<0.05)。而在此基础上添加3%的蚯蚓提取物,肉鸡生长缓慢,并在49日龄时体重明显降低(P<0.05),且机体免疫器官指数、细胞免疫及体液免疫机能等均有所回落(P>0.05)。     

一例猪伪狂犬病和大肠杆菌感染的诊断

<正>某规模猪场饲养生猪10 000头,其中,种猪1 000头,育肥猪5 000头,仔猪4 000头。该猪场按程序对生猪进行免疫,首次免疫猪瘟疫苗(0日龄),再次免疫猪瘟疫苗(28日龄),免疫链球菌疫苗(42日龄),免疫猪伪狂犬疫苗(56日龄),免疫猪肺疫疫苗(保育期后),配种前、后分别免疫猪细小病毒疫菌和伪狂犬疫苗。2014年11月8日,猪群开始发病,经该场兽医诊治后,治     

罗氏沼虾胞质锰超氧化物歧化酶的功能

为了解超氧化物歧化酶 (SOD)分子生物学特性和免疫功能,实验克隆了罗氏沼虾胞质锰SOD基因 (MrcMnSOD),制备多克隆抗体,并分析在嗜水气单胞菌感染下该基因的表达模式。结果显示,嗜水气单胞菌感染可显著诱导MrcMnSOD在转录水平和蛋白质水平进行高表达。为探究MrcMnSOD参与免疫应答的机制,进一步的抑菌实验表明,该蛋白质可显著抑制3种革兰氏阴性细菌 (大肠杆菌、副溶血性弧菌、嗜水气单胞菌)和2种革兰氏阳性细菌 (无乳链球菌、金黄色葡萄球菌)的生长,且抑制作用与蛋白质浓度的关系不显著。研究表明,MrcMnSOD可能作为一种免疫相关分子参与免疫应答反应。本研究初步探讨了MrcMnSOD的免疫生物学功能,旨在为深入研究罗氏沼虾SOD的功能奠定相关基础。     

地塞米松对ND免疫鸡主要免疫器官及抗体滴度的影响

将75只1日龄非免疫健康罗曼蛋鸡随机均分为地塞米松高剂量组(12.5mg/mL)、低剂量组(6.25mg/mL)和阴性对照组,同时进行了鸡新城疫免疫接种;分别于免疫后7、14、21、28、35d随机取5只心脏采血后分离血清,检测鸡新城疫HI抗体效价,同时摘取脾脏、胸腺和法氏囊并称重,计算免疫器官指数。结果表明,试验组的ND抗体效价与免疫器官指数显著低于对照组(P<0.05),而且高剂量组低于低剂量组。     

免疫多糖对日本蟳抗溶藻弧菌能力的影响

通过对日本蟳(Charybdis japonica)分别注射生理盐水(对照组)、溶藻弧菌(攻毒组)、免疫多糖(免疫组)、免疫多糖+溶藻弧菌(免疫攻毒组)后,再测定4组肝胰腺及肌肉中溶菌酶(LZM)和超氧化物岐化酶(SOD)的活性变化,探讨免疫多糖对日本蟳抗溶藻弧菌能力的影响。结果表明:日本蟳肝胰腺中LZM和SOD的酶活均高于肌肉中的酶活,且免疫多糖对肝胰腺的免疫增强效应显著高于肌肉;免疫组肝胰腺和肌肉中LZM酶活,在注射后24h时显著升高至峰值(P<0.05),分别为(11.2±2.78)U/mg和(3.75±1.05)U/mg,肝胰腺和肌肉中的SOD酶活也在24h达到最高值,分别是对照组的2.2倍和1.4倍;免疫攻毒组在72h时,肝胰腺和肌肉中的LZM酶活分别高出攻毒组62.8%和75.2%,两组织中SOD酶活同样显著高于攻毒组(P<0.05),是攻毒组的3.5倍和4.2倍。由此可见,免疫多糖能提高日本蟳抗溶藻弧菌能力,且在72h达到最佳免疫保护效果。     

近期猪病防控方案

<正>猪瘟本病尚无治疗方法。关键是选择好疫苗,按照免疫程序做好免疫注射。平时做好综合防控措施:1.饲养管理:做好通风和保暖工作;2.生物安全:戊迪-25 1:200比例稀释全面消毒被污染的场地、圈舍、用具;3.疫苗免疫:加强种猪免疫(一年最好4次免疫,母猪除做好跟胎免疫外,在春秋两季各普免疫1次),仔猪的首免日龄不宜太早(28日龄左右),新购进的猪都要及时免疫,可选择南农高科瘟克清     

杀鲑气单胞菌灭活疫苗的制备及其在大菱鲆体内的免疫效果

为了预防大菱鲆疥疮病,本研究将杀鲑气单胞菌菌株HHSM1905经甲醛灭活制备成灭活疫苗,通过腹腔注射途径免疫健康大菱鲆;对免疫后大菱鲆血清抗体效价、血清溶菌酶(LZM)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性及疫苗保护率进行测定;以β-actin为内参,对免疫相关基因(IL-1β、TLR-5、MHCⅠ、MHCⅡ-α、CD4)表达情况进行定量PCR分析。结果显示,在免疫后2周时,疫苗组血清抗体效价显著高于对照组并达到最大值;疫苗组LZM活性在免疫2周时达到峰值,4周时仍与对照组保持显著差异;疫苗组ACP活性在免疫后的2周达到峰值,与对照组差异显著;灭活疫苗相对保护率(RPS)为72.72%。免疫组与对照组相比,IL-1β、TLR-5、MHCⅠ、MHCⅡ-α、CD4的表达量均呈上调趋势,与对照组差异显著。本研究成功制备了大菱鲆用杀鲑气单胞菌灭活疫苗,其对大菱鲆疥疮病能够起到一定的预防作用,可为大菱鲆养殖过程中疾病预防提供新方法。     

猪口蹄疫免疫程序和抗体水平研究

选用口蹄疫普通疫苗对生猪进行免疫注射,利用血清学试验检测其抗体水平,探索免疫应答。其一次免疫后抗体水平较低,难以产生保护力;二次免疫有效,但维持时间不长;三次免疫能达到有效免疫效价(log27以上),且能稳定维持较长时间。     

异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗对罗非鱼的免疫效果

为了研究异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗免疫罗非鱼后的免疫效果, 本研究采用 10%甲醛溶液灭活法制备了无乳链球菌 HN0901 和 GX1101 胞外产物灭活疫苗, 通过腹腔注射途径免疫健康奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus♀×O.aureus♂), 在免疫后 28 d 用同/异源无乳链球菌攻毒, 测定了免疫后和攻毒后罗非鱼的免疫应答反应和血清抗体效价, 并比较了罗非鱼在腹腔注射 1×108 CFU/尾无乳链球菌后的相对免疫保护率和交叉免疫保护率。 结果显示, 免疫鱼谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)在免疫后 28 d 显著高于对照组, 但在攻毒后显著低于对照组; 与对照鱼相比, 免疫鱼的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平在免疫和攻毒后均有不同程度的提高, 丙二醛(MDA)显著降低(P＜0.05)。实时定量 PCR 结果显示, 炎性细胞因子基因 TNF-α、IL-1β 和 TGF-β, 体液免疫相关基因 HSP70, MHC Ⅱ和 IgM 在免疫和攻毒后也呈现显著升高趋势, 并显著高于对照组(P＜0.05)。血清抗体效价于免疫后第 28 天达到 1∶6400, 显著高于对照组(P＜0.05)。攻毒实验结果显示, 免疫组在同源和异源无乳链球菌攻毒后相对的免疫保护率在 31.6%~47.4%。结果表明, 研制的灭活疫苗免疫罗非鱼后, 能够显著诱导罗非鱼体内的免疫应答, 产生中等疫苗效力, 对同/异源无乳链球菌都具有免疫保护能力。本研究结果为深入研究罗非鱼链球菌病的免疫预防技术和研制二价疫苗奠定了基础。     

近期猪瘟防控方案

猪瘟本病尚无治疗方法。关键是选择好疫苗,按照免疫程序做好免疫注射。平时做好综合防控措施:1.饲养管理:做好通风和保暖工作,强化消毒用劲碘每周消毒2~3次;2.生物安全:戊迪-25 1:200比例稀释全面消毒被污染的场地、圈舍、用具;3.疫苗免疫:加强种猪免疫(一年最好4次免疫,母猪除做好跟胎免疫外,在春秋     

人IgG诱导尼罗罗非鱼特异性抗体分泌细胞的ELISPOT检测

通过酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测了经人 IgG 免疫后尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)头肾、外周血和脾脏中的特异性抗体分泌细胞(antibody secreting cell, ASC)数量。结果表明, 首次免疫 1 d 后可在头肾中检测出 ASC, 而外周血和脾脏第 3 天才能检测出 ASC; 头肾、外周血以及脾脏中的 ASC 均在第 12 天达到峰值, 随后头肾, 外周血中的 ASC 数量显著减少, 而在脾脏中 ASC 数量减少不显著。二次免疫 1 d 后在头肾、外周血和脾脏中均可检测到 ASC, ASC 数量均在第 9 天达到峰值, 时间早于首次免疫, 且在首次免疫和二次免疫中, 头肾组织的 ASC 数量均是 3 个组织中最高的。酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对首次免疫和二次免疫后血清中的抗体水平检测发现, 其变化趋势与 ASC 数量变化规律相同。研究结果表明, 尼罗罗非鱼在初次免疫后产生了免疫记忆, 在二次免疫过程中产生了更多的 ASC 和抗体, 头肾是 ASC 的主要来源组织。该结果可为鱼类的免疫记忆研究提供重要的科学依据。     

温州地区高致病性禽流感免疫效果的监测与评估

用H5亚型禽流感疫苗进行免疫,采用血凝抑制(HI)试验,对本市一个年度所抽检的568个养禽场的鸡、鸭、鸽子等共计10233份血清样本进行抗体检测,分析其免疫效果。结果表明,温州市养禽场的免疫抗体合格率平均为72.0%,免疫合格禽场所占的比率为73.1%。对不同地区、不同禽场、不同禽类的免疫效果分析也存在差异。在11个县(市、区)之间比较,以鹿城区的抗体合格率最高,达到92.4%;在568个不同禽场之间比较,以鸭场获得的合格比率最高,达到82.9%;在鸡、鸭、鸽等3个不同禽类之间比较,以鸭获得的免疫效果最好,免疫抗体合格率达到79.5%,与鸡比较差异显著(P<0.05),与鸽比较差异极显著(P<0.01)。