近交系大鼠DNA指纹图稳定性的研究

为建立ＤＮＡ指纹技术在近交系大鼠遗传监测中的方法，采用ＤＮＡ指纹图对国内已知的７个品系近交系大鼠群体进行了分析，并对相同ＤＮＡ进行了多次ＤＮＡ指纹图重复实验，其结果表明：不同品系之间ＤＮＡ指纹图差异较大，其平均图带数为（１６．３６０±２．１７８），共有带率为（０．０６１±０．００８），相似系数为（０．０６２±０．００８），相同ＤＮＡ指纹图概率为３．６９１×１０－２３。相同ＤＮＡ不同次制作的ＤＮＡ指纹图谱基本一致（Ｐ＞０．０５）。同一个体不同组织的ＤＮＡ指纹图也基本相同，从而证实了该方法具有高度的稳定性和可重复性。     

鸡DNA指纹的研究与应用

ＤＮＡ指纹技术（ＤＦＰ）是八十年代中后期发展起来的分子遗传学新技术，在生命科学的各个领域，包括家禽研究方面都有广泛的应用。本对鸡ＤＮＡ指纹研究的发展历史及最新成果进行综合论述，分析探讨ＤＦＰ在家禽种质测定测定、品系鉴定及育种方面的应用前景。     

通过随机扩增的多态性DNA鉴别七种艾美球虫的研究

通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）随机扩增的多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）鉴别艾美球虫。用七种长度１０到２０个核苷酸的引物任意同七种艾美球虫卵囊的ＤＮＡ结合产生唯一的ＤＮＡ指纹。在不同的反应申合成了长度２００—２２００碱基对（ｂＰ）的ＤＮＡ片Ａ。在大多数情况下观察到种特异性ＤＮＡ片断迁移率图谱。在几次试验中，合成了多种ＤＮＡ片断，在大多数试验中，较易鉴别出艾美球虫种类．在４９次试验中，仅６次没有产生ＤＮＡ片断。     

鸡的DNA指纹应用研究

鸡的ＤＮＡ指纹应用研究王金玉，龚允陈，陈国宏（扬州大学农学院２２５００１）陈宽维（江苏省家禽研究所２２５００３）鸡的ＤＮＡ指纹技术研究始于１９８８年，Ｒｙｓｋｏｖ等人证明用Ｍ１３噬菌体作为探针与ＢｓｐＲⅠ酶切的鸡ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，可产生...     

鸡DNA指纹技术的发展与现状

鸡ＤＮＡ指纹技术的发展与现状王金玉，龚允陈，陈国宏扬州大学农学院（２２５００１）陈宽维江苏省家禽研究所（２２５０００）ＤＮＡ指纹技术是在分子生物学技术基础上发展起来的。１９７５年Ｓｏｕｔｈｅｒｎ提出了ＤＮＡ转移技术，结合特定的已标记基因片断（称为探针...     

DNA指纹的研究及其在畜禽遗传育种上的应用

ＤＮＡ指纹的研究及其在畜禽遗传育种上的应用刘丑生，魏绍征利用遗传标记，可以用来反映动物群体或个体的遗传特征。自５０年代以来，许多学者从血型、血液蛋白质（包括同工酶）多态型，ＤＮＡ限制性内切酶酶切片段长度多态型（ＲＦＬＰ）等方面进行了深入研究。尽管ＤＮ...     

DNA指纹图谱法在动物遗传分析中的应用及操作方法

ＤＮＡ指纹图谱法在动物遗传分析中的应用及操作方法黄晓东，徐士清，王维洪（浙江省农业科学院畜牧兽医研究所）１ＤＮＡ指纹图谱法（ＤＮＡｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ）的基本概念在真核生物的染色体基因组中普遍分布着一些高可变区（ＨｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅＲｅ...     

四神叶形吸虫的DNA含量及蛋白质电泳分析

四种叶形吸虫成虫初级精母细胞核ＤＮＡ含量测定表明，寄生于较高等鱼类宿主的中华叶形吸虫和鳗鲡叶形吸虫的ＤＮＡ含量较高（Ｃ值分别为０．２５ｐｇ和０．２６ｐｇ），而寄生于较低等鱼类宿主的鲶叶形吸虫和巴氏叶形吸虫的ＤＮＡ含量较低（Ｃ值分别为０．２１ｐｇ和０．２０ｐｇ）。这四种叶形吸虫成虫全蛋白质浓度梯度凝胶电泳分析进一步显示，中华叶形吸虫与鳗鲡叶形吸虫构成一近缘亚群（Ｓｍ＝０．６５７９，Ｄ＝０．４１８７），而鲶叶形吸虫和巴氏叶形吸虫构成另一近缘亚群（Ｓｍ＝０．６１７６，Ｄ＝０．４８１９）；这两个亚群间的相似系数值（Ｓｍ）小于０．５３，遗传距离值（Ｄ）大于０．６４。以上结果从分子水平上再次证实将叶形吸虫属划分为两个亚属是有根据的。     

甘肃黄鸡随机扩增多态性DNA指纹的分析

为了解甘肃黄鸡的种质特性和选育水平，从分子水平上估测其遗传纯度和遗传潜力，以ＳＲ９２黄鸡和浦东鸡作为对照，对甘肃黄鸡进行随机扩增多态性ＤＮＡ指纹（ＴＡＰＤ）的分析研究。ＲＡＰＤ分析结果很好地反映了鸡群的育种历史，甘肃黄鸡种群内的遗传相似系数量子（０．８７１），说明甘肃黄鸡的群内遗传变异较小，应当考虑引入适当的外来血源。甘肃黄鸡与浦东鸡、ＳＲ９２黄鸡间的平均百分差异均值（ＭＡＰＤ）（分别为２１．６７％和２１．６２％）较大，表明甘肃黄鸡与浦东鸡、ＳＲ９２黄鸡之间有一定的遗传距离，可初步认为甘肃黄鸡是与ＳＲ９２黄鸡和浦东鸡不同的新鸡种。     

新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析

为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。     

家蚕微孢子虫孢子DNA的提取、克隆及部分DNA序列分析

报道家蚕微孢子虫（Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ简称Ｎ．ｂ）孢子ＤＮＡ的提取、克隆及部分ＤＮＡ序列测定的结果。采用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ将孢子破碎，用苯酚一氯仿法提取孢子的ＤＮＡ。将Ｎ．ｂ孢子ＤＮＡ与ｐＴＺ１８Ｒ质粒重组，转化于大肠杆菌ＤＨ５，获得４个阳性克隆株：ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ１，插入片段为１ｋｂ；ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ２，为１．２ｋｂ；ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ３为１．８ｋｂ及ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ４为１．９ｋｂ，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，证实插入的ＤＮＡ片段为家蚕Ｎ．ｂ孢子所特有。与ＭＧ１（Ｎｏｓｅｍａｓｐ．），蓖麻蚕微孢子虫、蓝萤叶甲微孢子虫及蚕卵的ＤＮＡ均无同源性。用双脱氧链终止法测定４个克隆株插入片段的部分ＤＮＡ的序列，经检索尚未发现同源性的基因序列。讨论了ＰＣＲ技术诊断家蚕微孢子虫孢子与近缘种的问题。     

不同种、株鸡球虫DNA多态性的比较研究

对鸡的４种球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ、Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ、Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｉ、Ｅ．ｍａｘｉｍａ）基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）比较分析，发现多数引物能使不同种球虫产生完全不同的谱带，因此证明ＲＡＰＤ技术完全可用于同宿主艾耳球虫虫种的分类鉴定。并应用ＲＡＰＤ技术对Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ早熟株、鸡胚株、亲本毒株和Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ早熟     

产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA探针的制备及应用研究

用纯化的产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６）病毒（Ｈ９１毒株）悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现１条分子量较大、背景清晰的核酸带。用ＢａｍＨＩ酶消化产生４个片段，大小分别为１７ｋｂ、１０ｋｂ、４．０ｋｂ和２．０ｋｂ。将其中的２．０ｋｂ片段克隆进ｐＵＣ１８ＤＮＡ载体中，重组质粒ＤＮＡ用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，在ｄｏｔｂｌｏｔ中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ、鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）ＤＮＡ、ＳＰＦ鸡基因组ＤＮＡ等核酸反应，只与３株ＥＤＳ病毒（ＥＤＳ标准毒株ＡＶ－１２７、ＥＤＳＨ９１毒株和从健康鹅体中分离的ＥＤＳＹ８１毒株）ＤＮＡ呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后２４ｈ即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出ＥＤＳ病毒ＤＮＡ，在感染后３５ｈ仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用ＳＰＦ鸡胚分离病毒，并用ＨＡ和ＨＩ试验检测分离病毒的特异性；在感染过程中，同时检测了血清中ＨＩ抗体的消长情况。结果表明，人工感染鸡排毒至少可以维持２个月左右，而且血清中ＨＩ抗体即使很高，也不能阻止感染鸡的排毒。     

家蚕微孢子虫孢子DNA的提取、克隆及部分DNA序列分析

报道家蚕微孢子虫（Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ简称Ｎ．ｂ）孢子ＤＮＡ的提取、克隆及部分ＤＮＡ序列测定的结果。采用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ将孢子破碎，用苯酚一氯仿法提取孢子的ＤＮＡ。将Ｎ．ｂ孢子ＤＮＡ与ｐＴＺ１８Ｒ质粒重组，转化于大肠杆菌ＤＨ５，获得４个阳性克隆株：ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ１，插入片段为１ｋｂ；ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ２，为１．２ｋｂ；ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ３为１．８ｋｂ及ｐＴＺ１８ＲＮ．ｂ４为１．９ｋｂ，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，证实插入的ＤＮＡ片段为家蚕Ｎ．ｂ孢子所特有。与ＭＧ１（Ｎｏｓｅｍａｓｐ．），蓖麻蚕微孢子虫、蓝萤叶甲微孢子虫及蚕卵的ＤＮＡ均无同源性。用双脱氧链终止法测定４个克隆株插入片段的部分ＤＮＡ的序列，经检索尚未发现同源性的基因序列。讨论了ＰＣＲ技术诊断家蚕微孢子虫孢子与近缘种的问题。     

应用DNA指纹图谱法对湘白猪群体遗传结构的研究

本文采用Ｊｅｆｆｒｅｙｓ小卫星探针３３．６和３３．１５检测了４个湘白猪品系（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ）和５个亲本品种（大约克、长白、杜洛克、大围子、沙子岭）的ＤＮＡ指纹图谱。根据指纹带型计算了每个群体的相似系数、平均等位基因频率和最低杂合率。４个湘白猪品系的分析结果表明：湘白猪各品系内的相似系数为０．４５－０．４９，接近于欧美引进品种长白猪（０．４８－０．５０），具有较好的遗传纯合性。根据９个品种（系）的群     

两个家系猪的DNA指纹图谱遗传分析

本文用人源小卫星探针３３．６和３３．１５获得了两个家系猪的ＤＮＡ指纹图谱。通过对Ｆ１和Ｆ２代家系分析，证实ＤＮＡ指纹图带以孟德尔方式遗传。在家系２（探针３３．６）的１个后代中发现了一条新突变带。文中还对这两个探针检测到的位点数进行了估测     

四种叶形吸虫的DNA含量及蛋白质电泳分析

四种叶形吸虫成虫初级精母细胞核ＤＮＡ含量测定表明，寄生于较高等鱼类宿主的中华叶开骸虫和鳗丽叶形吸虫的ＤＮＡ的含量较高（Ｃ值分别为０．２５ｐｇ和０．２６ｐｇ），而寄生于较低等鱼类宿主的鲶叶形吸虫和巴氏叶形吸虫的ＤＮＡ含量较低（Ｃ值分别为０．２１ｐｇ和０．２０ｐｇ）。这四种叶形吸虫成虫全蛋白质浓度梯度凝胶电泳分析进一步显示，中华形吸虫与鳗丽叶形吸虫构成一年缘亚群（Ｓｍ＝０．６５７９，Ｄ＝０．４１８７）     

马立克氏病病毒（MDV）糖蛋白D基因的分离克隆,定序及其在大肠杆…

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，从马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）基因组ＤＮＡ中扩增出ＭＤＶ糖蛋白（ｇＤ）抗原基因１２０９ｂｐ编码序列。将该ＰＣＲ扩增产物于ＥｃｏＲＩ和ＫｐｎⅠ位点克隆进行ｐＵＣ１８质粒载体中。将ｇＤ重组ｐＵＣ１８质粒ＤＮＡ用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ（Ｄｉｇ）标记后，在Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ中，该探针能识别ＭＤＶ基因组ＤＮＡ的Ｂａｍ ＨＩ－Ａ克隆中的Ａ     

家禽DNA指纹标记及其在遗传育种上应用的研究进展

家禽ＤＮＡ指纹标记及其在遗传育种上应用的研究进展顾志良，周勤宣（江苏省家禽科学研究所２２５００３）１９８０年，Ｗｙｍａｎ和Ｗｈｉｔｅ，发现人类基因组ＤＮＡ中含有高变区（ＨＶＲｓ），并证明了这些高变区是一系列的可变数目申状重复序列（ＶＮＴＲｓ），即小卫...     

畜禽DNA指纹的研究与应用

综述了ＤＮＡ指纹技术的原理，方法，以及在个体（品种）鉴别，亲缘关系分析，群体遗传变异分析，连锁分析等方面的研究进展。