参薯愈伤组织诱导及其悬浮细胞培养体系的建立

为确定参薯愈伤组织诱导的最佳激素浓度及悬浮细胞培养条件，以3种基因型参薯(Dioscorea alata)组培苗的腋芽茎段为材料，采用三因素三水平正交实验来探究不同浓度组合的6-BA、NAA和毒莠定(picloram, PIC)对愈伤组织诱导率的影响；为了初步建立愈伤组织悬浮细胞培养体系，采用单因素实验探讨初始悬浮细胞接种量、蔗糖浓度、摇床转速、酪蛋白浓度和光照时间对其细胞生物量的影响。实验结果表明：在1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L PIC激素浓度组合下，参薯Da70号组培苗(Da70)的愈伤诱导率为90%，愈伤状态较好，不同激素对愈伤诱导率的影响分别为NAA>PIC>6-BA。在单因素悬浮细胞培养实验中，10 mL的初始悬浮细胞接种量、10 g/L的蔗糖浓度、100 r/min的摇床转速、50 mg/L的酪蛋白浓度和0 h光照有利于细胞生物量的增加。参薯悬浮细胞生长总体上呈现“S”型，且在第18天时，鲜重为0.159 3 g，干重为0.042 3 g，细胞活力OD值为0.485 0，达到峰值。本研究为后续原生质体的分离以及功能基因的...     

金钱松细胞悬浮培养关键技术研究

目的:建立金钱松细胞的悬浮培养体系,并筛选出金钱松细胞的最佳培养基配方和其培养条件.方法:利用金钱松叶原基诱导产生的翠绿色、较分散的愈伤组织为悬浮培养材料,通过研究其不同激素配比、接种量、蔗糖浓度以及pH值对金钱松细胞悬浮培养的影响.结果:在金钱松细胞的悬浮培养过程中,最佳的培养基配方为MS+2,4-D 0.3 mg/L+6-BA 1.0mg/L,并且选择的最佳蔗糖浓度为40 g/L、pH值为6.0以及接种量为2.0 g/L.     

国内外造纸法再造烟叶总灰分和水不溶灰分含量对比分析及其相关性研究

为明确国内外造纸法再造烟叶产品灰分含量差异,测定41个国内外造纸法再造烟叶样品的总灰分、水不溶灰分以及酸不溶灰分的含量,对测定结果进行分析,并对总灰分和水不溶灰分间的相关性进行分析。结果表明：造纸法再造烟叶样品的灰分含量明显高于烤烟,国内样品总灰分、水不溶灰分以及酸不溶灰分的含量分别为17.33%、12.46%和0.55%,低于国外样品（分别为19.18%、14.34%和0.59%）,国内外样品总灰分和水不溶灰分含量有极显著差异;基于总灰分、水不溶灰分和酸不溶灰分含量的聚类分析表明41个国内外样品可以分为3组;造纸法再造烟叶总灰分和水不溶灰分呈极显著正相关,可以用y=9.951e^0.051x（式中x表示水不溶灰分,y代表水不溶灰分）表示。     

烟草细胞培养生产辅酶Q10的动力学研究

烟草细胞培养是获得辅酶Q10的一条有效途径。在黄花烟草细胞株培养过程中，对生物量、总糖、辅酶Q10的含量进行监测，建立起在烟草细胞悬浮培养过程中细胞生长、 蔗糖消耗、辅酶Q10生成的动力学方程模型，各方程曲线与实验点拟合较好，相关系数均达到99%以上。     

毛叶枣黑斑病的病原鉴定及其生物学特性研究*

毛叶枣黑斑病菌是半知菌类链格孢属链格孢Alternaria alternaria。病菌生长和产孢温度范围10～35℃,适宜温度25～30℃;PDA培养基最适宜病菌生长和产孢;病菌在pH3～11时均能生长和产孢,pH6～7最适生长,pH5最适产孢;孢子萌发率在20～30℃和pH5～9时较高,25℃和pH为7时萌发最好;在饱和湿度再加水滴的条件下孢子才能很好萌发;1%葡萄糖液和毛叶枣汁液对孢子萌发有促进作用。     

玉米获白×莱1029的悬浮细胞系的建立及其再生植株的研究

利用玉米获白×莱1029的未成熟胚诱导的愈伤组织,系统地研究了愈伤组织的改良、悬浮细胞系的建立及其分化。结果表明,获白×莱1029的愈伤组织在高硝态氮的培养基上,经过调节2,4-D的浓度、渗透压和NaCl的浓度,选择得到了黄色、小颗粒状结构、不分泌粘液、快速生长和易于悬浮的松脆愈伤组织;在悬浮培养初期,经过高浓度2     

棉花胚性细胞悬浮系的建立及其影响因素分析

对棉花悬浮细胞系建立过程中激素的配比和浓度、培养基成分、悬浮细胞的生长过程及衰老过程中PCD的发生系统研究结果表明:MS 2,4 D0.5mg·L 1 KT0.1mg·L 1和MS 2,4 D0.1mg·L 1 KT0.1mg·L 1培养基有利于细胞分裂,能产生体积较大,均匀一致,细胞活力强的单细胞和小细胞团,适合于进行细胞生长调控等研究。而MS IBA0.5mg·L 1 KT0.1mg·L 1和MS IBA0.1mg·L 1 KT0.1mg·L 1培养基则有利于形成大的细胞团和不同时期的胚状体,适合于进行胚状体的发育研究。钾盐、肌醇有利于细胞的分裂增殖,且能抑制胚状体的发生。可通过增加钾盐(K )、肌醇含量来调节细胞的生长状态和细胞活性,以建成分裂增殖快、细胞活性强的悬浮细胞系。在悬浮培养过程中,管状细胞渐渐消失,被球状的单细胞和小细胞团所替代。棉花胚性愈伤悬浮细胞的生长曲线呈S形,在起始培养的0～3d是生长的延迟期;在第3～15天是指数增长期;到第15天以后,生长速度降低,是静止期。悬浮培养的棉花细胞必须在15d以前进行继代,以保持其旺盛的分裂能力和细胞活性。     

冬小麦籽粒生长特性及其遗传研究

研究了小麦籽粒生长特性及其遗传交异和性状相关。结果表明,不同材料间籽粒生长特性在显著差异。籽粒生长特性与穗下节长,小穗密度以及开花期显著相关,根据籽粒生长特性互补原则评选出佳杂交组合。     

利用水稻悬浮细胞系检测白叶枯菌致病菌株的研究

水稻与白叶枯菌互作是研究植物-病原细菌互作的模式系统之一.为了在实验室从白叶枯菌P6突变体库中检测出能够克服Xa23基因抗性的致病菌株,本试验建立了携带Xa23基因水稻品种中野1号的悬浮细胞系,系统研究了悬浮细胞系与白叶枯菌P16及其突变体致病菌株的互作,结果发现中野1号悬浮细胞系与致病菌株互作中存在强烈的过敏性反应(HR),互作细胞系经溴酚蓝染色后,其抽提液的颜色和OD595值可以作为鉴别致病菌株与非致病菌株的指标,从而成功建立了利用水稻悬浮细胞系检测P6致病突变体的实验系统.     

贯叶连翘不定根悬浮培养的初步研究

为了给贯叶连翘不定根的大量扩繁提供可靠的理论依据,以贯叶连翘不定根为材料进行悬浮培养,对不定根生长的培养基种类、糖种类以及IBA浓度进行优化筛选,再通过观察贯叶连翘不定根的生长情况,测量其鲜物重和干物重,计算干物率和增殖系数,来确定最佳的悬浮培养条件。不同的培养基种类对贯叶连翘不定根的生长影响较大,MS对促进不定根生长的效果最好;蔗糖可明显增加贯叶连翘不定根的鲜物重和干物重,分别为8.29 g、0.46 g;当IBA浓度为1.0 mg/L时,贯叶连翘不定根的鲜物重﹑干物重﹑干物率以及增殖系数均达到最大值,分别为8.98 g﹑0.49 g﹑5.46%和13.97。贯叶连翘不定根在MS+IBA 1.0 mg/L,蔗糖作为其碳源的悬浮培养基中生长,增殖效果最好。     

剑麻悬浮细胞体系的建立

为了获取良好的剑麻悬浮细胞体系,以剑麻无菌幼苗嫩叶为诱导材料,对剑麻胚性愈伤组织的获得,建立细胞悬浮系和影响悬浮细胞增殖的主要影响因子进行了探讨。结果表明:幼叶在培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA上诱导的愈伤组织,经1～2次继代培养后获得了颗粒状、浅黄色的胚性愈伤组织;接种于液体培养基接种量为2 g (鲜重),继代周期为7 d,经4～5次继代震荡培养建立了细胞悬浮系,细胞生长符合"S"型曲线,细胞浓度可达6.1×105～4.6×106个/m L以上;在悬浮细胞生长前期,pH值明显下降,在细胞对数生长期,pH值略有升高,并趋于平缓;最适宜的细胞悬浮培养基为(MS+1.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L6-BA+350 mg/L水解酪蛋白, 30 g/L蔗糖, pH值为5.8)。通过建立剑麻悬浮细胞培养体系的方法,为进一步应用于剑麻悬浮细胞转化体系和多倍体育种等研究。     

不同生长调节剂对金丝梅组培快繁的影响

本研究以云南野生金丝梅(Hypericum patulum)带休眠芽的茎段为外植体,研究了不同植物生长调节剂对其离体培养的影响,以建立金丝梅离体快繁技术体系。研究结果表明,腋芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达90%;适合腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.1 mg/L,增殖系数可达5.12;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.1 g/L,生根率为96.69%。炼苗移栽到草炭土∶珍珠岩=2∶1的基质中,成活率达100%,移栽到苗圃后成活率为100%。研究结果为金丝梅高效快速繁殖以及优良品种选育提供科学依据。     

蔗糖对鼎湖山紫背天葵组培苗生长和花色素苷积累的影响

为了解决鼎湖山紫背天葵快繁体系中组培苗叶片褪红返绿的问题,以球茎芽丛为试验材料,采用蔗糖浓度筛选法对紫背天葵花色素苷的合成进行研究。结果表明,在基本培养基（MS＋NAA 0.3 mg/L＋IBA 0.2 mg/L＋卡拉胶 7.0 g/L）中,适当上调蔗糖浓度至45~60 g/L,有利于紫背天葵组培苗的健壮生长及花色素苷的积累,其相对含量达0.417 μmol/(g?FW)。但蔗糖浓度≥75 g/L时,则对组培苗的生长起明显的抑制作用。     

甘草悬浮培养细胞与甘草草药、植株中甘草酸的检测

采用不同的萃取剂从甘草的根、茎、叶、草药和甘草悬浮培养细胞中萃取甘草酸。结果表明,选择含氨0.5%、浓度为10%的乙醇溶液作为萃取剂,萃取得到的甘草酸粗品含量均高于50%乙醇萃取的萃取含量,检测出在优选甘草悬浮培养细胞中所含的甘草酸铵的含量高于其他材料,其中通过细胞悬浮培养,获得的甘草酸铵含量最高可达160.81 mg/g。     

贯叶连翘无菌苗茎尖诱导变异体研究

以研究贯叶连翘离体诱变及筛选变异体为目的,用贯叶连翘无菌苗茎尖为供试材料,研究了平阳霉素处理浓度、时间、外源添加物对供试茎尖存活率以及激素配比对茎尖不定芽诱导率的影响。结果表明：平阳霉素80mg/L的20min处理可作为适宜诱变处理,添加椰汁有利于茎尖存活;6-BA0.5mg/L、NAA0.01mg/L的激素组合有利于诱导正常型不定芽和获得较高的诱导率。通过研究,建立了贯叶连翘变异体诱导技术程序,获得了金丝桃素含量提高的变异体材料。     

西番莲细胞悬浮系建立与培养条件优化

本研究旨在建立西番莲细胞悬浮培养体系,并优化悬浮系培养条件,为西番莲遗传工程提供基础。本研究以西番莲无菌苗为材料,研究西番莲愈伤组织的诱导和建立细胞悬浮系,并结合单因素试验与正交试验优化悬浮系培养条件。结果表明,西番莲愈伤诱导的外植体最佳选择是幼苗胚轴,愈伤诱导激素选择2 mg/L 2,4-D为宜,出愈率达83.3%。以疏松健康的愈伤组织培养细胞悬浮系,经单因素试验和正交试验,细胞悬浮系培养最佳培养培养基为MS培养基+2 mg/L 2,4-D+0.2 g/L Glutamine+30 g/L蔗糖,培养基pH 6.1,起始细胞用量为6.0 mg/mL,摇床转速为100 r/min,28℃暗培养,此条件下建立的细胞悬浮系均匀一致,细胞生长旺盛,西番莲悬浮细胞生长曲线呈“S”型,继代最佳时期为12~18天。本研究为后续利用细胞悬浮系建立西番莲高效细胞工程及遗传转化技术体系提供良好的材料和技术基础,对加强西番莲种业发展具重要意义。     

贯叶连翘茎段和叶片的离体培养及植株再生研究

以贯叶连翘的叶片和茎段作为外植体,培养在含有不同种类及浓度激素的MS基本培养基上,进行愈伤组织、丛生芽、根的诱导实验,并进行试管苗的移栽。结果表明,2,4-D有利于贯叶连翘愈伤组织的形成;加有6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合丛生芽的形成;诱导生根较好的培养基是MS+IBA 0.5 mg/L +NAA 0.5 mg/L和MS+IBA 1.0 mg/L。     

贵州金丝桃组培快速繁育技术研究

为了建立贵州金丝桃快繁再生体系,对贵州金丝桃进行了组织培养研究.结果表明:茎段为贵州金丝桃组织最适外植体,初代培养最适宜芽诱导的培养基配方为1/4 MS+TDZ0.5 mg/L+ NAA0.01 mg/L;芽继代增殖最适宜的培养基配方为1/4 MS+ ZT 1.5 mg/L+ NAA 1.0 mg/L;最适宜壮苗生根的培养基为1/4 MS+ ZT 0.1 mg/L+ NAA 1.0 mg/L.     

水稻悬浮培养研究进展

悬浮细胞培养是现代植物生物技术和植物细胞的分子机理研究的最重要方法之一.其中水稻悬浮培养足近年来的研究热点.本文从水稻悬浮培养外植体的选取、基因型的选择、愈伤组织的诱导、悬浮培养方法的优化、悬浮细胞的彤态特征和生理生化变化以及其在生命科学研究中的应用等方面进行了概述,并提出了目前水稻悬浮培养中尚待加强研究的问题.