生防放线菌原生质体融合条件的研究

利用重寄生链霉菌F46与生防放线菌SC1和SC11进行原生质体融合,以原生质体的形成率和再生率为指标,研究了Gly、蔗糖、酶及其质量浓度对原生质体融合的影响,并确定了最佳的酶解时间及灭活时间。结果表明,3个菌株培养液中加入Gly和蔗糖的质量浓度以0．5和30 g／mL为宜。对菌株SC1和SC11,分别用10 mg／mL和15 mg／mL,溶菌酶酶解60 min和100 min较合适;对菌株F46,以蜗牛酶(10 mg／mL)和溶菌酶(10 mg／mL)体积比为1:1的混合酶液酶解75 min为宜。菌株F46在55℃条件下热灭活45 min,菌株SC1和SC11则需在55℃条件下热灭活15 min;菌株F46,SC1和SC11的紫外灭活时间分别为16,2和3 min。     

苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生研究

主要研究了茵龄、酶浓度、酶解时间和酶解温度对苏云金芽孢杆菌原生质体制备和再生的影响。通过正交试验确定了苏云金芽孢杆菌制备和再生的最佳条件,当酶浓度为1．Omg／mL,酶解时间为80rain,酶解温度为30~C时,原生质体的制备率和再生率达到最高,分别为98．14％和58．14％。     

纳豆激酶液体发酵条件的优化

以纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subitilis natto）为出发菌株，对其液体发酵生产纳豆激酶（Nattokinase，NK）的培养基组成（碳源、氮源、碳氮比和金属离子组成）和培养条件（温度、pH值，发酵时间、接种量和装液量）对产酶量的影响进行了研究。结果表明：液体发酵培养基的最佳碳源为木糖，浓度为1．5％；最佳氮源为大豆蛋白胨，浓度为2．0％；添加无机盐组分为MgSO4 0．05％、CaCl2 0．02％、K2HPO4／KH2PO 40．1％／0．1％。发酵培养的最佳温度为37℃，pH7．0时有利于菌体产酶，最适装液量为100mL／250mL，接种量以2％为最佳，最适种龄为18h；发酵周期为3d。通过优化培养基和发酵条件，产酶量达到1081 U／mL。     

短短芽孢杆菌JK-2菌株抑茵活性物质产生条件的优化

短短芽孢杆菌JK-2菌株对多种植物病原真菌和病原细菌具有明显的抑制作用。以JK．2发酵液对番茄枯萎病菌的抑制作用为活性指标,对其培养基成分和培养条件进行了优化。由正交试验和单因素试验得出的最佳培养基配方为淀粉1,0％、牛肉浸膏0．5％、蛋白胨0．3％、蔗糖1．0％、酵母粉0．5％和CaCl2 0．5％,初始pH值7．0。在30℃、170r／min振荡培养条件下,最佳发酵时间为48h,装液量100mL／瓶,接种量1％。     

南方亚麻微生物脱胶技术及其理论研究 V.环状芽孢杆菌A6的产酶条件

为了开发亚麻酶法脱胶新技术,提高高效脱胶菌种A6产果胶酶的能力,对影响环状芽孢杆菌A6的产酶条件进行了研究,结果表明,A6菌的最佳产酶条件为：亚麻茎粉7％,硫酸铵1％,磷酸氢二钾0．15％,pH17．5,温度35℃,菌龄24h,接种量5％,250mL三角瓶装液量70mL,摇瓶转速200r／min,产酶时间20h,果胶酶酶活高达7800U／mL,适合亚麻沤麻酶制剂的开发研究.     

一株巨大芽孢杆菌J1的生胞培养及优化

以巨大芽孢杆菌J1为材料,利用溶磷圈法测定了菌株的解磷能力,优化了菌株的最佳发酵条件、最适培养基。结果表明,此菌株溶磷效果明显;此菌株生长的最适培养时间为28 h,最适接种量为6.7%,最适pH值为8.5;最佳碳源为玉米粉与葡萄糖的复合碳源,最佳氮源为大豆粉与硫酸铵的复合氮源。摇瓶培养的接种量为6.7%,pH值为8.5,250 mL三角瓶中最适装液体积为30 mL,培养温度为30℃,培养时间为28 h,最适宜转速为180 r/min的摇瓶培养条件下,巨大芽孢杆菌活菌数各影响因素最佳组合为:玉米粉20 g/L,葡萄糖5 g/L,大豆粉7.5 g/L,硫酸铵0.33 g/L,各因子对巨大芽孢杆菌活菌数的影响由大到小依次为:硫酸铵浓度玉米粉浓度葡萄糖浓度大豆粉浓度。     

豆豉芽孢杆菌原生质体形成及再生条件的初步研究

为选育出适宜于工业生产豆豉的重组菌株,对4株豆豉芽孢杆菌原生质体形成与再生条件进行了初步研究。结果表明:溶菌酶浓度、酶解时间和温度与原生质体的形成率成正相关,与再生率成负相关。不同菌株对溶菌酶的敏感度不同,适宜形成原生质体的酶浓度为0.05~0.50 mg/mL,酶解时间5~20 min,酶解温度35℃,原生质体形成率达90%,原生质体再生率为8%左右。     

高效油脂降解菌的筛选及其降解影响因素的初步研究

以豆油作为唯一碳源,经过2个月驯化后筛选获得具有高效油脂降解能力的细菌1株,编号为S16,经鉴定为芽孢杆菌。对影响S16降解能力的几个因素进行了初步研究,结果表明,在初始pH为7．0,初始含油量为400mg／mL,摇床转速为200r／min,培养温度30℃条件下,该菌株生长旺盛,发酵72h后对豆油的降解率可以达到73．5％。     

刺槐愈伤组织原生质体的分离和 PEG 融合1）

以刺槐未成熟合子胚的愈伤组织为材料,试验通过正交试验设计,对酶液质量分数（纤维素酶R－10、果胶酶Y－23、离析酶R－10）、分离时间和分离液渗透压（即甘露醇质量分数）3个影响因素分析,并采用蔗糖等密度离心法中的上浮法纯化后,得到分离最佳条件：纤维素酶R－10质量分数为2．5％,果胶酶Y－23质量分数0．6％和离析酶R－10质量分数1％,甘露醇质量分数11％,酶解时间10 h。在此条件下,原生质体产量达22．4×106个/mL,活力为92．13％,原生质体净得率为2．06×106个/mL。在此基础上,采用PEG诱导法,对原生质体的融合时间和融合剂PEG6000质量分数等相关影响因素进行了相关探讨,结果表明最佳融合条件为25％的PEG6000诱导下,融合30 min,融合率达到10．97％。     

影响木素过氧化物酶合成和活性的因素研究

在限碳静置、限氮振荡不加藜芦醇的环境下，研究发酵条件对黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）合成木素过氧化物酶（Lignin peroxidase，Lip）的影响。结果显示，限碳静置培养时，起始pH值4．5，温度30℃，100mL三角瓶装液30mL，70h酶活最高，酶活可达1193U／L，碳源以葡萄糖（0．04％）和糊精（0．16％）同时存在比单一葡萄糖作为碳源获得较高的酶活；苯甲醇可一定程度上代替藜芦醇，其最佳浓度为6．0mmol／L有机萃取葡萄皮渣粗提藜芦醇可提高酶活。限氮振荡培养时，起始pH值4．5，温度37℃转速175r／min培养48h后降低温度为30℃，转速为100r／min，100mL三角瓶装液量30mL，所得酶活可达980U／L。发酵条件下各因子对合成木素过氧化物酶存在着复杂的交互作用。     

利用Dot-ELISA检测Bt棉杀虫蛋白的研究

用苏云金芽孢杆菌HD-1和HD-68晶体杀虫蛋白的碱溶产物作为抗原,制备相应的抗血清,建立了检测Bt杀虫蛋白的Dot-ELISA,可检测Bt杀虫蛋白的最低水平为87.5ng/ml。用Dot-ELISA对2个转基因抗虫棉和它们的亲本进行了检测,并与生物学测定的抗虫性进行比较,结果基本一致。因此,对测定大批量转基因抗虫棉的抗虫性,Dot-ELISA是一个快速、敏感、特异、有效的方法。     

肠道肠球菌AUH-HM195原生质体制备与再生条件初探

应用正交试验研究菌龄、酶浓度、酶解时间和渗透压稳定剂种类对肠道肠球菌(Enterococcus hirae)AUH-HM195原生质体制备与再生的影响。结果表明:菌龄与酶浓度的交互作用对原生质体的制备和再生影响最大。最优组合为:菌龄6 h,溶菌酶浓度5 mg/mL,酶解时间1 h,渗透压稳定剂在制备时使用0.7 mol/L KCl,再生时使用17%蔗糖,制备率为93.2%,再生率为14.5%。     

水酶法提取南瓜籽油的研究

[目的]研究水酶法提取南瓜籽油的最佳工艺条件。[方法]分别采用单因素试验和正交试验确定南瓜籽油热处理工艺、酶解工艺的最佳条件,并试验纤维素酶和果胶酶的总添加量及添加比例对南瓜籽油提取率的影响。[结果]热处理工艺的最佳条件为热处理温度90℃,热处理时间10 min。酶解工艺的最佳条件为酶解时间6 h,酶解温度50℃,酶解pH 7,蛋白酶添加量3%,料水比1∶5;在该条件下,南瓜籽油的提取率为83.32%。维素酶和果胶酶的总添加量为2%,最佳添加比例为2∶1。[结论]水酶法工艺条件温和,适合油料作物油脂的提取。     

酶解条件对黄瓜原生质体分离效果的影响

[目的]研究黄瓜原生质体分离的最佳酶解条件.[方法]以黄瓜子叶和悬浮细胞为材料,研究不同酶解条件对其原生质体的分离效果的影响.[结果]黄瓜子叶获得高质量的原生质体的最佳条件为：酶液组合2％纤维素酶＋1.0％果胶酶,酶解时间8h,酶液浓度0.7 mol/L,酶液pH 5.5.[结论]该试验研究了不同酶解条件对黄瓜原生质体的分离效果的影响,为黄瓜的进一步开发利用提供依据.     

罗汉果蛋白酶对酒糟中蛋白质的水解作用研究

[目的]为酒糟中蛋白质的水解提供新方法。[方法]采用酶解法,用罗汉果蛋白酶提取酒糟中的蛋白质,测定酶解酒糟上清液中蛋白质的含量,计算单位体积蛋白质增量。在加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值单因子试验的基础上,采用正交试验确定酒糟中蛋白质的最佳提取条件。[结果]各因素对单位体积蛋白质增量的影响依次为:pH值>水解时间>加酶量>水解温度。酶解酒糟的最佳条件为:pH值8.0,水解时间10 min,加酶量0.75 ml/100 g湿酒糟,温度65℃。在最佳条件下,单位体积蛋白质增量可达98.78%。[结论]该研究确定了酶解法提取酒糟中蛋白质的最优条件,使酶解上清液中蛋白质含量增加了近1倍。     

鲶鱼内脏鱼油的提取工艺研究

本文探讨了鲶鱼内脏中提取鱼油的工艺条件。以鱼油的感官质量和提取率为观察指标,以几种常用有机溶剂为提取剂,以中性蛋白酶为水解酶,通过单因素和正交试验确定提取溶剂的种类和酶解工艺参数。结果表明:提取剂以正己烷-异丙醇(3︰2)最好;提取的工艺条件为:先以中性蛋白酶进行酶解,设定料液比为1︰6,加酶量为1 400 u/g,酶解温度为45℃,酶解时间为2 h;经过滤后,按料液比1︰5加入正己烷-异丙醇(3︰2),振荡萃取25 min。在此条件下,鱼油的提取率为25.3%,产品为淡黄色、澄清透亮的液体;经测定,鱼油的酸价(mg KOH/g)、过氧化值(g/100 g)、碘价(g I2/100 g)分别为3.88、0.067 1、127.4。所以,采用有机溶剂和中性蛋白酶处理相结合对鱼油进行提取,鱼油的感官质量好,提取率高。     

冬虫夏草无性型菌丝体的原生质体制备条件研究

以冬虫夏草无性型中国被毛孢为原材料,通过液体培养获得菌丝体,经酶解处理后在不同条件下获得原生质体,以研究酶的种类及浓度、渗透压稳定剂及浓度、酶液pH值以及酶解时间等不同因素对中国被毛孢原生质体制备的影响。结果显示,中国被毛孢菌株原生质体的最佳制备条件为:使用浓度配比分别为4和3 mg·mL-1的Yatalase和Glucanex酶,在1.0 mol·L-1KCl作为渗透压稳定剂,酶液pH值为6,酶解3 h,所得原生质体量最多。     

黑莓汁加工中关键工艺参数优化研究

以新鲜黑莓为原料,研究了黑莓汁加工中酶解工艺及黑莓汁配方的参数优化。结果表明:最佳酶解条件为复合果胶酶添加量0.18%、酶解温度49℃、酶解时间2.4 h。在此条件下,黑莓的出汁率达78.2%。黑莓汁最佳滋味配方为:黑莓汁93%、果葡糖浆7%、柠檬酸钠0.05%、阿魏酸0.10%。     

Bt杀虫晶体蛋白-肠溶性微囊制备方法的初步研究

[目的]研究Bt(Bacillus thuringensis)晶体蛋白肠溶性微囊的制备方法,为进一步研究它对防止紫外线损伤晶体蛋白及促进晶体蛋白在害虫中肠快速释放等方面的作用奠定基础;[方法]用复相乳液法制备肠溶性微囊,并应用L16(45)正交试验设计研究相关因子对微胶囊包封率的影响;[结论]采用复相乳液法可以制备Bt晶体蛋白的肠溶性微囊.5个因子对包封率有显著影响.影响大小依次为乳化转速>HPMCP浓度(壁材)>Bt晶体蛋白含量(芯材)>蓖麻油含量(助剂)>甲基纤维素浓度(亲水胶体).以500m1分散系为条件,筛选出的肠溶性微胶囊较佳工艺为:8.6mg/mL Bt晶体蛋白溶液1ml,20mg/mL HPMCP溶液50ml及蓖麻油2ml,三者混合并在匀化器转速6000r/min下乳化.而后分散于2.1%或3.3%甲基纤维素钠溶液中成囊.     

酶法优化有机婴幼儿米粉基料工艺条件研究

通过单因素试验和正交实验,采用中温α-淀粉酶降解有机大米碎米淀粉,探讨了酶解工艺对有机婴幼儿米粉基料产品的还原糖含量和糊化度的影响,得出最优酶解工艺条件如下:料液比1∶1、加酶量0.30%(w/w)、酶解温度60℃、酶解时间25 min。在此最佳条件下,所得基料成品中的还原糖含量和糊化度最高,且其冲调分散性和稳定性得到改善,易于消化吸收。