猪脂联素mRNA竞争性PCR定量方法的建立

脂联素是由脂肪组织特异表达分泌的一种细胞因子,随血液循环运输到肌肉和肝脏,调节葡萄糖及脂肪酸代谢。在人、猴子、小鼠中研究发现,当脂肪过度沉积时,脂肪组织中脂联素基因的表达量及血液脂联素水平均降低,而体重下降时,脂联素的表达量和血液脂联素水平又升高。所以体内脂联素的表达与脂肪沉积密切相关。但是脂肪沉积如何调控脂联素基因的表达还不清楚。     

羽毛球运动对肥胖大学生骨骼密度及血浆内脂素、脂联素的影响

探讨羽毛球运动对肥胖大学生骨骼密度及血浆内脂素、脂联素的影响。选取某校2014届肥胖大学生136名作为研究对象,采用随机数字表法将其分为运动组和对照组,各68名。所有受试者均给予饮食控制,运动组在此基础上给予羽毛球运动训练指导。3个月后,观察对比两组骨骼密度、血浆内酯素、脂联素水平变化情况。干预前两组研究对象体脂率、肥胖程度和WHR均无显著差异(P0.05),干预后均显著降低(P0.05),且两组差异具有统计学意义(P0.05);干预前后两组骨密度差异均无统计学意义(P0.05),但运动组干预后均有改善趋势,且右侧前臂骨密度和干预前比较差异有统计学意义(P0.05);干预前两组研究对象血浆内酯素和脂联素水平均无显著差异(P0.05),干预后内酯素水平显著降低,而脂联素水平显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05),且干预后运动组和对照组也具有显著差异(P0.05)。羽毛球运动可以改善肥胖大学生的肥胖程度和WHR,对骨密度和血浆内酯素、脂联素也具有显著调节作用。     

奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血及犊牛静脉血脂联素与犊牛初生重相关性研究

为探究奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血和犊牛静脉血中脂联素之间及与犊牛初生重的相关性,选取规模化养殖场正常分娩奶牛54头,按犊牛初生重将奶牛分为3组:A组,≤40kg,9头;B组,40~45kg,25头;C组,≥45kg,20头。分别采集分娩奶牛颈静脉血、胎盘组织、脐静脉血及犊牛颈静脉血,ELISA法检测血液及胎盘组织脂联素水平,相关分析法分析各样品之间及与犊牛初生重的相关性。奶牛静脉血脂联素水平((29.15±4.02)mg/L)高于脐静脉血((13.79±1.14)mg/L)与犊牛静脉血((13.46±0.94)mg/L)脂联素水平,差异极显著(P0.01),脐静脉血脂联素水平高于犊牛静脉血脂联素水平,但差异性不显著(P0.05);奶牛静脉血脂联素水平与胎盘组织、脐静脉血、犊牛静脉血脂联素水平以及胎盘组织脂联素水平与脐静脉血、犊牛静脉血脂联素水平相关性均不显著(P0.05),脐静脉血脂联素水平与犊牛静脉血脂联素水平极显著正相关(P0.01);犊牛初生重与奶牛静脉血脂联素水平无显著相关性(P0.05),与脐静脉血、胎盘组织脂联素水平极显著正相关(P0.01),与犊牛静脉血脂联素水平显著正相关(P0.05);奶牛静脉血、胎盘组织、脐静脉血脂联素水平及犊牛静脉血脂联素水平在公、母犊间差异均不显著(P0.05)。脐静脉血、胎盘组织脂联素水平对犊牛初生重有非常显著的影响,犊牛静脉血脂联素水平对犊牛初生重具有一定影响,而奶牛静脉血脂联素水平对犊牛初生重的影响不显著;奶牛静脉血、脐静脉血、胎盘组织及犊牛静脉血脂联素水平在公、母犊间差异均不显著。     

淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及脂联素的发育差异

为探明淮南猪与长白猪脂肪代谢酶及血清中脂联素的发育差异,对45日龄、90日龄、135日龄和180日龄健康长白猪和淮南猪进行血清中脂联素含量、肌内脂肪含量及脂肪代谢酶测定。结果表明:相同品种猪的肌内脂肪含量随着猪日龄的增加而增加;相同日龄不同猪种间肌内脂肪含量淮南猪显著高于长白猪(P0.05);同一品种猪血清中脂联素的含量随日龄增加而增加,135日龄和180日龄分别与45日龄间差异显著;淮南猪和长白猪脂肪组织中的脂肪酸合成酶(FAS)和激素敏感脂酶(HSL)含量随日龄的增加而增加,均以180日龄最高;脂联素及脂肪代谢酶变化趋势均随日龄的增加而增加,具有强脂肪沉积能力。     

染料木素对高脂诱导肥胖小鼠肝脏炎症及脂联素信号通路的影响

【目的】探讨染料木素对高脂饮食导致肥胖小鼠肝脏的治疗作用及其潜在机制。【方法】30只ICR雌性肥胖小鼠随机分为对照组(ND)、高脂组(HFD)和高脂染料木素组(HFD-G),每组各10只。对照组饲以普通饲料,高脂组饲以高脂饲料,高脂染料木素组饲以高脂-染料木素预混料。干预14周后测量小鼠肝脏重量、葡萄糖耐受情况,通过甘油三酯、总胆固醇测定试剂盒检测小鼠血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量;通过油红O染色观察肝脏的组织形态和脂滴沉积情况;qRT-PCR检测肝脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体-1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)以及脂联素受体-2(adiponectin receptor 2,AdipoR2)mRNA表达水平;ELISA法检测血清中TNF-α和IL-6的表达。【结果】饲喂14周后,高脂组体重、肝重显著高于对照组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著高于对照组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的mRNA表达水平显著低于对照组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及ELISA结果显著高于对照组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂组较对照组肝脏的脂质沉积情况显著加重(P0.05);高脂染料木素组体重、肝重显著低于高脂组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著低于高脂组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的m RNA表达水平显著高于高脂组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及细胞因子分泌水平显著低于高脂组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂染料木素组较高脂组肝脏的脂质沉积情况显著减轻(P0.05)。【结论】染料木素能够显著缓解由高脂饮食引起的肝脏病变,其机制可能是通过提高脂联素表达水平同时抑制肝脏中的炎性因子来实现的。     

奶牛静脉血和脐静脉血脂联素、瘦素及IGF-1表达水平与犊牛初生体质量相关性研究

为探究奶牛静脉血及脐静脉血中脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)与犊牛初生体质量间的相关性。选取规模化养殖场54头正常分娩奶牛,按犊牛初生体质量划分为A(≤40kg),B(40~45 kg),C(≥45 kg)3组,采集分娩奶牛静脉血及脐静脉血,用ELISA方法检测静脉血中脂联素、瘦素和IGF-1的表达水平,分析其间的相关性及与犊牛初生体质量的相关性。结果表明,奶牛静脉血脂联素、瘦素和IGF-1表达水平两两之间均呈极显著正相关(P0.01),但奶牛静脉血脂联素、瘦素和IGF-1表达水平与犊牛初生体质量相关性均不显著(P0.05);脐静脉血脂联素、瘦素和IGF-1表达水平两两之间均呈极显著正相关(P0.01),脐静脉血脂联素、瘦素和IGF-1表达水平均随犊牛初生体质量增加而逐渐升高,且分别与犊牛初生体质量呈极显著正相关(P0.01);奶牛静脉血脂联素、瘦素和IGF-1表达水平均极显著高于脐静脉血(P0.01),而奶牛静脉血脂联素、瘦素和IGF-1的表达水平与脐静脉血中表达水平相关性均不显著(P0.05)。据此得出,奶牛静脉血和脐静脉血中均有脂联素、瘦素和IGF-1表达,奶牛静脉血中及脐静脉血中脂联素、瘦素和IGF-1均各自相互协调发挥作用;奶牛静脉血脂联素、瘦素和IGF-1均对犊牛初生体质量影响不显著,但脐静脉血脂联素、瘦素和IGF-1均对犊牛初生体质量影响极显著,该结果可为进一步研究脂联素、瘦素和IGF-1对犊牛初生体质量的影响机制奠定基础。     

马齿苋口服液对高血脂大鼠脂质代谢的影响

研究了马齿苋口服液对高血脂大鼠瘦素(Leptin,LEP)、脂联素(Adiponectin,ADPN)、总胆固醇(Total triglyceride,TC)、总甘油三酯(Total triglyceride,TG)的影响。选取健康雄性SD大鼠65只,随机分为模型对照组(15只)和正常对照组及马齿苋口服液低、中、高剂量组和罗格列酮组(每组10只);正常对照组大鼠饲喂基础饲料,模型对照组大鼠饲喂高脂饲料,其余组大鼠饲喂高脂饲料,并进行药物干扰,喂养12周后,测定大鼠血清瘦素、脂联素、TC、TG的含量。结果表明,1瘦素:与正常对照组相比,罗格列酮组显著升高,模型组、马齿苋水煎剂低、中剂量组瘦素极显著升高,高剂量组升高不显著;与模型对照组比较,其余组均极显著降低;与低剂量组比较,中剂量组显著降低,正常组、高剂量组均极显著降低;马齿苋水煎剂高剂量组与罗格列酮组血清瘦素差异不显著。2脂联素:与正常对照组相比,其余组脂联素含量极显著降低;与模型组比较,其余组脂联素含量均极显著升高;马齿苋水煎剂低剂量与中剂量组差异不显著,低剂量组显著低于高剂量组,马齿苋水煎剂高剂量组与罗格列酮组差异不显著。3TC、TG含量表现一致,均为马齿苋口服液低剂量组、模型对照组极显著高于其余组;高剂量组显著低于中剂量组;正常对照组、高剂量组、罗格列酮组间差异不显著。马齿苋口服液可能是通过提高大鼠血清中脂联素,降低瘦素、TC、TG含量来预防大鼠高血脂的。     

猪脂联素基因启动子克隆及多态性研究

[目的]为脂联素基因作为脂肪沉积候选基因的研究提供依据。[方法]通过猪BAC文库筛选及primer—walking的测序方法获得脂联素基因的启动子序列,采用PCR—RFLP技术对蓝塘猪、大花白猪、大白猪、长白猪和杜洛克猪5个品种共290头猪的脂联素基因启动子区的多态性进行了分析。[结果l脂联素基因的5’侧翼区-1010bp（G／A）的SNP位点,本地猪种中GG基N型频率明显高于外来猪种;-394bp（T／C）的SNP位点,本地猪种基因型分布较为丰富,而在外来猪种申却没有检测到CC基因型,且外来猪中T等位基因频率较高。[结论]脂联素基因上游-1010bp（G／A）的SNP位点突变可能会引起该基因转录水平的改变,而-394bp（T／C）的SNP位点与基因转录水平及与脂肪沉积可能无关．     

人脂联素基因的克隆及序列比较分析

目的:克隆人脂联素基因,为进一步重组蛋白表达和生物活性等基础研究与临床应用奠定基础。方法:应用RT-PCR法自人大网膜脂肪组织的总RNA中克隆人脂联素全长基因,采用T-A克隆法重组到pMD18-T中,通过菌液PCR鉴定阳性克隆后,测序鉴定。并采用聚类分析等对其序列进行比较分析。结果:克隆人脂联素基因全长为735bp,并登录GenBank(登录号:EU420013);其编码244个氨基酸,理论分子量为26413.64Da,预测的等电点为5.42。邻接法聚类分析表明,人脂联素与已报道的其它哺乳动物的脂联素相似性达83%～96%。结论:成功地克隆了人脂联素基因全长序列,人脂联素与已报道的其它哺乳动物的脂联素序列具有很高的同源性。     

脂联素对能量代谢调控的研究进展

脂联素是脂肪细胞分泌的一种细胞因子,其主要功能是敏化胰岛素作用、调控机体的能量代谢、促进血管生长等。文章综述了脂联素的结构和分布、对能量代谢的调控及机制以及能量代谢对脂联素分泌的影响。     

文昌鸡中脂联素受体CDH13基因的表达

以文昌鸡为实验材料,利用 RT-qPCR的方法检测在文昌鸡不同组织及腹部脂肪组织生长发育过程中CDH13的表达情况,为鸡CDH13基因的功能研究奠定基础。研究结果显示,CDH13基因在心脏、回肠、脂肪组织、小脑及肌胃中表达量较高,脂联素表达情况与之相似;CDH13基因在文昌鸡腹部脂肪组织生长发育过程中均稳定高表达,并育肥4周龄时,表达量达到最高。     

2型糖尿病合并高血压患者血清脂联素和内脏脂肪素水平的变化

目的:了解2型糖尿病合并高血压患者血清脂联素和内脏脂肪素的变化,探讨脂联素和内脏脂肪素与2型糖尿病合并高血压的相关性.方法:选取高血压患者40例,2型糖尿病患者38例,2型糖尿病合并高血压患者40例,健康对照者40例作为研究对象,测定其血清脂联素和内脏脂肪素水平,同时测定血压、血糖、血脂和体质量指数等指标,并分析以上指标与脂联素和内脏脂肪素的关系.结果:单纯2型糖尿病组和单纯高血压组内脏脂肪素水平明显高于正常对照组,分别为(18.26±1.22)ng/mL,(17.31±1.26)ng/mL和(13.32±1.31)ng/mL(p<0.05);2型糖尿病合并高血压组(24.99±1.36)ng/mL又明显高于单纯2型糖尿病组和单纯高血压组.2型糖尿病组和高血压组脂联素水平明显低于正常对照组,分别为(8.75±1.29)μg/mL,(9.71±1.28)μg/mL和(12.67±1.48)μg/mL(p<0.05);2型糖尿病合并高血压组(5.73±1.23)μg/mL又明显低于单纯2型糖尿病组和单纯高血压组.2型糖尿病组和高血压组的脂联素和内脏脂肪素水平差异不具有统计学意义(p>0.05).相关分析显示2型糖...     

泌乳初期奶牛相关脂肪因子及生理生化指标与脂肪肝的相关性

为探究泌乳初期奶牛血清脂肪因子及生理生化指标与脂肪肝的相关性,选取四川某规模化奶牛场1~4胎围产期奶牛64头,分别于产后第7、14天早饲前尾静脉采血,检测产后第14天奶牛血清谷草转氨酶、血糖、游离脂肪酸水平,根据脂肪肝判定公式判定是否发生脂肪肝,检测并分析血清脂肪因子及生理生化指标与肝功能指标和能量代谢指标之间的相关性。结果显示,脂肪肝奶牛血清瘦素、脂联素水平显著低于健康奶牛(P<0.05),TNF-α水平显著高于健康奶牛(P<0.05),IL-6水平差异不显著(P>0.05)。瘦素水平与血糖、白蛋白呈显著正相关(P<0.05),与游离脂肪酸、β-羟基丁酸、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、总蛋白呈显著负相关(P<0.05),提示泌乳初期奶牛能量负平衡是脂肪肝发生的重要原因。脂联素水平与游离脂肪酸、β-羟基丁酸、谷草转氨酶呈显著负相关(P<0.05),与总蛋白、白蛋白呈显著正相关(P<0.05),提示泌乳初期脂肪肝奶牛存在着明显的肝功能损伤与脂质代谢紊乱。TNF-α水平与总胆红素、直接胆红素、谷丙转氨酶呈显著正相关(P<0.05),与血糖、白蛋白呈显著负相关(P<0.05);IL-6水平与谷丙转氨酶呈显著正相关(P<0.05),与总蛋白、白蛋白呈显著负相关(P<0.05),提示泌乳初期脂肪肝奶牛存在着明显的炎性反应。血清瘦素与脂联素水平呈显著正相关(P<0.05),与TNF-α呈显著负相关(P<0.05);TNF-α与脂联素呈显著负相关(P<0.05),与IL-6呈显著正相关(P<0.05),提示泌乳初期脂肪肝奶牛存在着糖脂代谢调控紊乱。综上所述,泌乳初期奶牛能量负平衡导致体脂动员,使得奶牛血清脂联素和瘦素水平下降,造成大量脂质合成于肝脏,肝脏功能受损,诱发炎性反应,TNF-α与IL-6水平随之上升,进而导致奶牛脂肪肝的发生,脂联素、瘦素和TNF-α可作为预测产后奶牛脂肪肝发生的指标。     

猪脂联素基因启动子克隆及多态性研究（摘要）

[目的]为脂联素基因作为脂肪沉积候选基因的研究提供依据。[方法]通过猪BAC文库筛选及引物步移法（primer-walking）的测序方法获得脂联素基因的启动子序列,具体步骤：通过已经发表的部分猪脂联素基因cDNA序列设计特异引物用于BAC克隆的筛选。以超级池DNA为模板进行第1次PCR反应,筛出含阳性克隆的超级池;以挑出的阳性超级池的3维池DNA为模板进行第2次PCR反应,根据阳性板池、列池、行池序号得到可能的阳性克隆号;依照阳性克隆号从工作文库中取出相应的BAC克隆,平板划线37℃倒置培养20 h。待菌落长好后,做菌体PCR鉴定,以确认克隆的正确性。将获得的BAC阳性克隆平板划线,37℃摇菌过夜培养,进行BAC的提取、纯化与酶切回收。先以M13引物向BAC两端测序,再以发表的cDNA序列外显子1设计测序引物采用primer-walking的方法,获得连续的DNA序列。采用PCR-RFLP技术对蓝塘猪、大花白猪、大白猪、长白猪和杜洛克猪5个品种共290头猪的脂联素基因启动子区的多态性进行分析。[结果]脂联素基因的5′侧翼区-1 010 bp（G/A）的SNP位点,本地猪种中GG基因型频率明显高于外来猪种;-394 bp（T/C）的SNP位点,本地猪种基因型分布较为丰富,而在外来猪种中却没有检测到CC基因型,且外来猪中T等位基因频率较高。[结论]脂联素基因上游-1 010 bp（G/A）的SNP位点突变可能会引起该基因转录水平的改变,而-394 bp（T/C）的SNP位点与基因转录水平及与脂肪沉积可能无关。     

持续游泳训练对大鼠杏仁核cAMP浓度的影响

采用大鼠环磷酸腺苷cAMP ELISA法,检测持续游泳训练后大鼠杏仁核cAMP浓度变化,以探讨运动应激引起机体反应的机制。结果表明,持续游泳训练后,除1 h时cAMP浓度显著低于对照组外(P0.01),即刻、0.5 h、2 h大鼠杏仁核cAMP浓度均显著高于对照组(P0.05);训练后即刻,大鼠杏仁核cAMP浓度快速升高,至0.5 h时达到最高值,之后1 h时cAMP浓度急剧下降,2 h时其浓度回升,高于对照组的水平,随后4 h时下降至略低于对照组水平,但差异不显著。整个浓度变化曲线呈锯齿形。持续游泳训练后杏仁核cAMP浓度变化具有时相性;持续游泳训练可激活大鼠杏仁核环磷酸腺苷(cAMP)通路,进而影响机体的后续反应。     

草莓果实中七次跨膜受体蛋白生物信息学及时空表达特征分析

以草莓为试材,基于拟南芥(Arabidopsis thaliana)、人(Homo sapiens)和家鼠(Mus musculus)等数据库信息,采用同源比对方法,结合ClustalX 2.0序列比对及MEGA 5.0系统进化树分析,对草莓基因组中7TMR的基础生物信息进行了分析。结果表明,草莓基因组中含有84个7TMR,包括23个亚家族。半定量RT-PCR分析表明,该家族全部成员中有33个成员随果实发育表达量明显上调,17个成员表达量明显下调;Real-time PCR分析进一步确认,部分7TMR成员的基因表达与果实发育及成熟过程的整个进程有着密切的关系。此外还发现,草莓中7TMR家族中含有一类特殊的亚家族蛋白,该亚家族与人和家鼠中的脂联素受体高度同源,表明草莓中7TMR存在着非G-蛋白偶联信号转导途径。草莓中类似脂联素受体亚家族ADIPOR包含5个成员,对这5个成员的时空表达和刺激应答进行了分析,发现其中某些成员不仅与果实发育进程关系密切,且对糖信号应答,暗示着该类蛋白在草莓果实发育和成熟调控中可能起着重要作用。     

八段锦对多囊卵巢综合征患者体征、性激素及卵巢超声的影响

目的 探究八段锦对多囊卵巢综合征（PCOS）患者的体征、性激素及卵巢超声的影响。方法 将60例PCOS患者随机分为观察组与对照组各30例,两组均以低热卡饮食为基础,均不接受药物治疗,观察组有组织地进行八段锦运动6个月,对照组除日常活动外,不刻意进行体育运动。比较运动前后两组患者的体征、性激素水平以及B超下卵巢形态的变化。结果 观察组痤疮评分、体质指数（BMI）及腰臀比（WHR）较运动前及对照组均下降（P<0.05）,黄体生成素（LH）及其与卵泡刺激素（FSH）的比值（LH/FSH）、睾酮（T）水平较运动前及对照组降低（P<0.05）,B超双侧卵巢平均卵泡个数（MFN）较运动前及对照组减少（P<0.05）,但多毛评分、卵泡刺激素（FSH）、催乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E2）水平及B超双侧卵巢平均体积（MOV）较对照组及运动前差异无统计学意义（P>0.05）。结论 八段锦可以改善PCOS患者痤疮症状,降低BMI及WHR,降低LH/FSH、T水平以及改善卵巢形态,是一种有效的辅助治疗手段。     

白鹅脂联素基因内含子多态性检测及群体遗传分析

以扬州鹅、四川白鹅、皖西白鹅、豁眼鹅和浙东白鹅5个鹅品种为试验材料,每个品种各60只,公母各半,根据鹅脂联素基因序列设计了1对引物扩增部分内含子,用PCR-SSCP方法进行单核苷酸多态性分析,并对不同品种进行群体遗传学分析。结果表明,在鹅脂联素基因内含子上发现2个单碱基突变位点,分别为第16、26位点的A-G、T-C。鹅群中表现出3种基因型(AA、AB、BB);除豁眼鹅与皖西白鹅、浙东白鹅外,3种基因型在鹅品种两两之间分布无显著差异(P0.05)。群体遗传分析表明,豁眼鹅杂合度和多态信息含量最高,皖西白鹅最低,所有品种均表现为中度多态性。本研究表明鹅脂联素基因在不同品种中具有丰富的单核苷酸多态性,可以进一步作为候选基因来分析其与脂肪性状的关联性。     

体育锻炼与城市社区居民心理健康关系的研究

为进一步探讨体育锻炼与城市社区居民心理健康之间的关系。以广州市云景花园社区的部分居民为 研究对象，采用自制问卷，从个体身心健康水平、锻炼场所的选择、锻炼时间安排、锻炼频次以及锻炼项 目选择等方面对他们的情况进行了调查。研究结果表明：身体健康状况的改善可以有效地促进心理健康的 水平；选择营业性健身场馆与相对固定的锻炼时间安排有助于提高运动锻炼的质量，促进身心健康水平； 体育锻炼的频次与心理健康有一定的正相关；首选球类运动和场馆健身运动的人群，心理健康状况优于平 均水平。     

YOGA护眼疗法对青少年假性近视的疗效观察

目的观察YOGA护眼疗法对青少年假性近视的临床疗效．方法将符合纳入标准的136名7～15岁青少年假性近视患者作为研究对象,YOGA护眼疗法为试验组,眼保健操组为对照组,比较两组研究对象视力恢复情况．结果对照组3个月后视力高于试验前,但差异无统计学意义（P〉0．05）;试验组3个月后视力高于试验前,差异非常显著,具有统计学意义（P〈0．01）;试验组3个月后治疗效果明显高于对照组试验后,两组疗效差异具有统计学意义（P〈0．01）,结论通过YOGA护眼疗法练习的试验组恢复效果明显高于对照组及试验前,表明YOGA护眼疗法对青少年假性近视恢复具有显著疗效．