鸡志贺氏菌凝集抗原及其标准血清的研制

利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌,分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原,并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清.结果显示,制备细菌抗原的最佳培养基是1%葡萄糖营养琼脂,抗原最佳灭活温度和时间为121℃和120 min,凝集抗原合适浓度为40亿/mL,最佳稀释液为pH 7.2的0.5%石炭酸生理盐水.制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌阳性血清经效价测定分别可达8 log2和10 log2,阴性血清与鸡志贺氏菌凝集抗原作用无凝集反应发生.通过研究同时确定了平板凝集试验反应的合适温度为20～35℃,结果判定时间为3～5 min.研制的凝集抗原及其标准血清具有特异性强、稳定性好、使用方法简便、便于保存和检测结果准确可靠等优点,便于在基层生产单位推广应用.     

志贺氏菌显色培养基在饲料检测中的应用研究

探讨志贺氏菌显色培养基在饲料志贺氏菌检测中的应用。将痢疾志贺氏菌、福氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌和宋氏志贺氏菌标准菌制备成10-5、10-6、10-7梯度稀释的菌液,对志贺氏菌显色培养基、HE琼脂、SS琼脂、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂进行检测灵敏度的评价。利用人工污染饲料样品进行显色培养基和上述四种普通培养基检出率的测试。结果表明:志贺氏菌显色培养基和普通培养基的检测灵敏度均为10-7;对混合污染样品的检测中,显色培养基优于普通培养基。志贺氏菌显色培养基用于饲料志贺氏菌的检测,具有菌落形态易于分辨的特点,适合于饲料中志贺氏菌的检测。     

一起牦牛腹泻致死病因的调查与治疗

门源种马场饲养的牦牛出现腹泻症状,严重者死亡,经致病菌分离培养、动物致死试验、PCR检测及测序鉴定,结合其临床症状,综合判定牦牛死亡原因为弗氏志贺氏菌与边缘无浆体中央亚种合并感染所致。对分离的致病菌弗氏志贺氏菌进行的药敏试验结果显示,该菌对氧氟沙星和左氧氟沙星敏感,可作为临床治疗的首选药物。     

藏鸡志贺氏菌的分离鉴定及药敏试验

通过对西藏地区某藏鸡饲养场的腹泻病料进行分离培养、染色镜检、生化反应,确定分离菌为革兰氏阴性小杆菌,该菌在SS琼脂和麦康凯琼脂上均能生长,生化反应中该菌可发酵葡萄糖产气,但乳糖、蔗糖等反应呈阴性;16 S rRNA序列分析显示该菌与志贺氏菌为100%同源,系统进化分析中该菌与福氏志贺氏菌位于同一分支,确定该分离菌为福氏志贺氏菌。药敏试验结果显示该分离菌对普通青霉素类、四环素类等高度耐药,对头孢类药物高度敏感。这是国内首次在藏鸡中发现福氏志贺氏菌感染,对藏鸡的安全养殖具有重要借鉴意义。     

从阿根廷进口冻鸡爪检出福氏志贺氏菌

从阿根廷进口冻鸡爪检出福氏志贺氏菌尹旭陈惠清叶奕优隋文陈维俊（皇岗动植物检疫局深圳５１８０４５）汕头某公司从阿根廷进口一批冻鸡爪,于１９９７年３月２８日到达深圳皇岗口岸,经扦样检验,检出福氏志贺氏菌。这是首次从皇岗口岸进境的动物产品中检出福氏志贺氏菌...     

西宁市售鲤鱼鳃中志贺氏菌的检测及血清学分型

志贺氏菌是最常见的肠杆菌科的病原菌,可引起人类肠道传染病。应用常规细菌分离法对西宁市售的80份鲤鱼鳃样品进行了志贺氏菌的检测,同时对阳性菌株进行了血清学分型。结果显示,在80份鲤鱼鳃样品中共检出志贺氏阳性6份,阳性率为7.5%(6/80)。通过形态学观察、生化试验和血清学鉴定为志贺氏菌A群2株,其血清型为痢疾志贺氏菌1型;B群4株,其血清型为福氏志贺氏菌1b型。此次检测为以后西宁地区志贺氏菌流行病学的调查和相关疾病的防治提供了理论依据。     

志贺氏菌对第三代头孢菌素的耐药机制初步研究

通过对福氏志贺氏菌的诱导及其诱导耐药菌MIC与β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测，探讨福氏志贺氏菌对三代头孢菌素的耐药机制。结果表明，随诱导代数的增加，诱导菌对抗菌药的MIC值亦逐步增大，诱导至30代时，三代头孢对诱导菌的抗菌活性显著降低，MIC范围为2μg／mL-32μg／mL。当对福氏志贺氏菌诱导5代时，已有β-内酰胺酶的产生；诱导至15代时，已有ESBLs产生。诱导至30代时，ESBLs已大量产生。志贺氏菌对三代头孢菌素的主要耐药机制为超广谱β-内酰胺酶的产生。     

隐孢子虫——一种多感染性的原生动物(续)

<正> 流行病学发病率及病的流行隐孢子虫见于世界上大多数地区,与腹泻疾病有关,其发病率堪与弯杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌、兰伯氏贾第虫(Giardia lamblia)所致者相匹敌(10,35,39,40,56,69),在大量检测研究中,以     

体外法评估不同植物精油对需氧菌的抑菌活性

本试验采用琼脂平板法,测定肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油、丁香酚和山苍子油对产肠毒大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、乙型溶血性链球菌的最低抑菌浓度,从中选出抑菌能力较强的精油,继续测定其对产肠毒大肠杆菌、出血性大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和乙型溶血性链球菌的抑菌效果,筛选出具有替抗潜力的精油并评估精油作为抑菌剂应用在饲料中的前景。本试验采用琼脂平板培养法,在固态培养基中添加不同浓度的肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油、丁香酚和山苍子油,分别接种产肠毒大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、乙型溶血性链球菌,测定其最低抑菌浓度,初步筛选出抑菌作用较强的精油,利用同样的方法,继续测定其对产肠毒大肠杆菌、出血性大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和乙型溶血性链球菌的最低抑菌浓度,最终筛选出抑菌能力较强的精油。结果表明:①通过初筛,发现肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油和丁香酚的抑菌效果较好,选择该五种精油进行复筛;②复筛结果表明,精油对供试菌株的抑菌能力由强到弱为百里香酚>肉桂醛>香芹酚>牛至油>丁香酚,其最低抑菌浓度分别为为0.02%～0.07%、0.02%～0.08%、0.03%～0.07%、0.04%～0.09%、0.07%～0.18%;③百里香酚、肉桂醛、香芹酚、牛至油作为饲料添加剂具有极好的潜力。     

吉林市郊区猪场仔猪细菌性腹泻病原的调查与药敏试验

为了明确引起吉林市郊区猪场仔猪细菌性腹泻的病原菌,筛选防治敏感药物,试验对225份粪便样本进行细菌分离培养与鉴定,并对主要致病菌进行了药敏试验。结果表明:样本中大肠杆菌检出率为100%、志贺氏菌检出率为77. 78%、沙门氏杆菌检出率为31. 56%,分离菌对恩诺沙星、左氧氟沙星、盐酸环丙沙星、阿奇霉素、诺氟沙星、硫酸新霉素高度敏感。说明引起该地区仔猪细菌性腹泻的主要病原菌为大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏杆菌,而恩诺沙星、左氧氟沙星是防治该地区细菌性仔猪腹泻的敏感药物。     

志贺氏菌检测和分群PCR方法的建立

为弥补目前志贺氏菌分子生物学检测方法的不足,根据志贺氏菌的invC、rfc、wbgZ和rfpB等基因,分别设计引物建立了鉴定志贺氏菌属、福氏志贺氏菌、宋内志贺菌和痢疾志贺氏菌的PCR方法。同时,以根据ompA基因设计的引物作为参照,通过特异性试验和人工接种试验等,对该方法进行验证。结果显示:17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性反应;对增菌肉汤直接进行PCR检测时,在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为1~3 cfu/(25 g·mL~(-1)),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤12、27和≤27 cfu/(25 g·mL~(-1));分离培养后再对可疑菌落进行PCR鉴定时,所有样品检出限均为1~3 cfu/(25 g·mL~(-1)),与传统培养法检出限一致。结果表明,该PCR方法快速、敏感、特异,适合用于志贺氏菌的常规检测分析。     

进口越南食蟹猴检验检疫情况报告

采用实验动物国家标准(GB/T 14926.47-2001)的检验方法,对进口的330只食蟹猴进行了结核病、猴B病毒(BV)、沙门氏菌、志贺氏菌和肠道寄生虫检测.检出猴B病毒抗体阳性7只,阳性率2.1%,志贺氏菌阳性1只,吸虫阳性1只,绦虫阳性1只,线虫阳性2只,鞭虫阳性11只.对检出阳性的猴子均按有关规定进行处理,防止疫病传入我国.     

高海拔地区圈养成年大熊猫冬季粪便可培养细菌鉴定——以云南野生动物园为例

为了研究云南野生动物园圈养大熊猫冬季肠道微生物菌群结构,试验利用传统方法和现代分子生物学手段(16S rDNA分析)对其冬季粪便进行可培养细菌的分离、纯化和鉴定。结果表明:对冬季粪样通过传统方法分离鉴定的细菌种属有埃希氏菌属(Escherichia Castellani and Chalmers)、志贺氏菌属(Shigella Castellani);通过16S rDNA分析,鉴定的菌群归属于鲍氏志贺菌(Shigella boydii)、大肠杆菌(Escherichia coli)、弗氏志贺菌(Shigella flexner)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。在高海拔地区的环境条件下,大熊猫的肠道优势菌群为埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)、弗氏志贺菌(Shigella flexner)、鲍氏志贺菌(Shigella boydii)。     

金黄色葡萄球菌小菌落突变株研究进展

Jacobsen(1910)分离到一种异常的伤寒埃伯泽氏菌株,并依其特殊的表型特征命名为小菌落突变株(small colony variants,SCVs)。自此,人们开始了对SCVs的研究。深入研究发现,许多细菌(如表皮葡萄球菌、头葡萄球菌、绿脓杆菌、洋葱伯克氏菌、霍乱弧菌、志贺氏菌、羊布鲁杆菌、大肠埃希氏杆     

志贺氏菌检测和分群实时荧光PCR方法的建立

为对志贺氏菌属细菌进行快速、准确检测和分群鉴定,根据志贺氏菌invC、rfc、wbgZ和rfpB基因,分别设计引物和探针,建立了鉴定志贺氏菌属以及福氏志贺氏菌、宋内志贺氏菌和痢疾志贺菌氏菌实时荧光PCR方法,同时将根据ompA基因设计的引物和探针作为内参照,并通过特异性试验和人工接种试验等对该方法进行验证。结果显示,该方法对17株志贺氏菌和19株非志贺氏菌均出现100%的特异性;用增菌肉汤直接进行PCR检测,发现在消毒奶、冰淇淋、酸奶、奶酪、熟肉和香肠等即食食品中的志贺氏菌检出限为1～3 cfu/25 g(mL),在原奶、生肉和奶粉中的检出限分别为≤8 cfu/25 mL、12 cfu/25 g和≤12 cfu/25 g;分离培养后再对可疑菌落进行实时荧光PCR鉴定,发现所有样品的检出限为1～3 cfu/25 g(mL),与传统培养法检出限一致。结果表明,该实时荧光PCR方法是一个快速、敏感、特异的检测方法,适合于志贺氏菌的常规检测分析。     

猕猴肠道几种病原菌自然带菌状况调查

结合猕猴的出口检疫,我们对浙江省某猕猴场的104头猕猴进行了肠道沙门氏菌、志贺氏菌的检测,并对其中26头进行了肠道白色念珠菌的检测,初步摸清了该场猴子肠道三种病原菌的自然带菌状况,并对分离到的沙门氏、志贺氏菌株进行了药敏测定,从临床和管理等方面讨论了如何防制这些肠道病原菌的传播。     

家禽体外寄生虫红螨的控制新策略

红螨是一种家禽体外寄生虫,在世界范围内广泛流行,在某些国家的流行率高达90%.它对家禽业产生的影响涉及禽类、哺乳动物甚至人,会导致家禽产蛋下降,贫血病和死亡率增加.红螨被认为是许多病原体的传播载体,与家禽农场的疫病暴发息息相关.近来研究显示红螨可作为肠炎沙门菌的生物学载体,不仅传播沙门菌而且可作为其天然携带者.有证据显示皮刺螨尤其是红螨对于传播多种病原体具有重要作用,采用分子技术对肠道菌进行鉴定进一步证实,这种螨虫可以携带大肠杆菌、志贺氏菌和葡萄球菌.     

生物素标记LT基因探针检测产肠毒素性大肠杆菌

用碱变性法提取重组质粒pEWD299,经Hind Ⅲ酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳,用电洗脱法回收LT基因850bp的核酸片段,再用二步法缺口翻译反应制备生物素标记的LT基因探针.通过菌落杂交试验表明,在严格去蛋白和RNA的条件下,该探针与试验中所有产LT和ST,或仅产LT的ETEC发生杂交反应;而与所有仅产ST的ETEC、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、普通大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、小肠结肠耶尔森氏菌、霍乱弧菌均无杂交反应.其检测提纯的LT—DNA的敏感性水平为25pg,检测食品模拟标本中产LT大肠杆菌的敏感性达到130个细菌/g的水平.     

鸡志贺氏菌感染的血清流行病学调查

利用研制的鸡志贺氏菌平板凝集抗原及微量平板凝集试验，对我国河南、山东等不同地区35家鸡场具有拉稀病史的670只鸡血清灭活样品进行了检测。通过检测对鸡志贺氏菌病的发病率、流行地区、品种，日龄及其混合感染等进行血清流行病学调查。结果表明：我国部分地区存在有鸡志贺氏菌感染，其血清抗体阳性率较高，达28．3％（155／547）～33．7％（226／670），已远远超过鸡白痢鸡伤寒（1．4％）。目前该病在我国部分地区已广泛流行，不同品种和日龄的鸡均可发生，但血清阳性率存在显著差异，其中固始鸡和罗曼鸡血清阳性率高于其他品种，幼雏血清阳性率高于成鸡。鲍氏血清型阳性率高于痢疾型，并以二者混合感染为主，而该病与鸡白痢鸡伤寒的混合感染很少发生。     

饲料中志贺氏菌的PCR快速检测方法的建立

为建立饲料中快速检测志贺氏菌的有效方法,本研究根据志贺氏菌(Shigella)侵袭性质粒抗原H基因(invasion plasmid antigen H,ipaH)设计了一对引物,PCR扩增片段长度为386bp。通过对引物的特异性检测发现,4株志贺氏菌的PCR结果均为阳性,12株非志贺氏菌的检测结果均未扩增出特异性片段。PCR对志贺氏菌纯培养物的检测灵敏度达120cfu/ml,检测快速、便捷。该方法操作简单、检验周期短、特异性和灵敏度高,能够快速地实现对饲料中志贺氏菌的检测和监控。