杂交一代（尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂）及春亲本基因组ＮＤＡ的比较

采用ＲＡＰＤ技术，用２０个随机引物对尼罗罗非鱼，奥利亚罗非鱼及其杂交一代的精巢ＤＮＡ进行扩增反应，发现引物ＯＰＺ－１４和ＯＰＺ－１８在尼罗罗非鱼和奥利亚鱼之间扩增出有差异的ＤＮＡ片段，作为鉴定两种鱼的分子标记有较高可信度，对这两种鱼的杂交一代基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ扩增能获得中够的多态性，２０个引物中有８个引物扩增出差异性产物，表明杂交一代基因杂合性增强，这是杂种优势得以形成的重要遗传物质基础之一。     

雌核发育鲢RAPD指纹和蛋白质电泳研究

用２３个随机引物对雌核发育鲢子一代（普通鲢作对照）进行了ＲＡＰＤ—ＰＣＲ反应,在２３个引物中除一个引物无扩增产物外,其它均可得到１～１０条ＤＮＡ带,平均每个引物产生５３８条带。其中７个引物产生多态现象,占总引物的３１４％。多态座位达１３６８％。用Ｓｈａｎｎｏｎ指数对ＲＡＰＤ数据进行遗传多样性（Ｈｏ）分析,得出所研究样本的Ｈｏ为０１７５。用血清酯酶和血清蛋白电泳作对比时没有发现在蛋白质水平的多态现象,说明ＲＡＰＤ技术是一种比较灵敏实用的ＤＮＡ多态检测方法。以ＲＡＰＤ所得数据进行了雌核发育鲢子代和普通鲢个体间的遗传相似性与遗传距离分析,为鲢选育提供了依据。     

鲤鱼抗寒性状的 RAPD分析

鲤鱼抗寒性状的ＲＡＰＤ分析ＲＡＰＤＡＮＡＬＹＳＩＳＦＯＲＴＨＥＣＨＡＲＡＣＴＥＲＯＦＣＯＬＤ－ＴＯＬＥＲＡＮＣＥＯＦＴＨＥＣＯＭＭＯＮＣＡＲＰ梁利群孙孝文沈俊宝闫学春（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨１５００７０）ＬｉａｎｇＬｉｑｕｎＳｕｎ...     

牙鲆和大菱鲆养殖群体的分子标记和遗传变异

用１６个１０碱基随机引物对养殖牙鲆（Ｐａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓ ｏｌｉｖａｃｅｕｓ）和大菱鲆（Ａｃｏｐｈｔｈａｌｍｕｓ ｍａｘｉｍｕｓ）进行基因组随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）遗传分析。发现：（１）多个引物具有种的特异性扩增带。其中引物Ｓ７扩增的６９０和１１６０ｂｐ带,引物Ｓ２扩增的６８０ｂｐ带为牙鲆的种的特异性谱带;而引物Ｓ７扩增的６５３和８８９ｂｐ带,引物Ｓ２扩增的６５０、８７０、９９０及１１     

鳜鱼病毒核酸随机引物扩增与克隆↑（*）

从感染鳜鱼病毒（ Ｓｉｎｉｐｅｒｃａ ｃｈｕａｔｓｉ Ｖｉｒｕｓ,简称ＳＣＶ） 的鳜鱼体中分离病毒,提纯核酸作模板。通过ＲＡＰＤ 法,用带酶切位点的引物进行病毒核酸随机引物扩增,获得扩增带谱。从带ＥｃｏＲⅠ酶切位点的引物扩增产物中,用琼脂糖凝胶电泳回收大小约为０ ．４ 和０ ．５ Ｋｂｐ 的片段,经ＥｃｏＲⅠ酶切处理制备成带粘性末端的片段,分别插入质粒ｐＵＣ１９ 的ＥｃｏＲⅠ位点。ＥｃｏＲⅠ酶对重组子进行了酶切鉴定,获得２ 种带插入ＳＣＶ 核酸ＰＣＲ扩增产物的重组子。     

中国对虾黄渤海沿岸群亲本及子一代RAPD分析

１９９７年３月从山东海阳市近海捕获中国对虾,取两尾单独暂养,产卵后培育出子代,用随机扩增多态性ＤＮＡＡ（Ｒａｎｄｏｍ Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术对亲本和子代的基因组ＤＮＡ进行多态性研究,目的是在分子水平上解亲本与子一代之间的遗传结构,比较了两个家系的遗传差异。结果表明,使用ＯＰＧ系列２０个引物,有１６个引物获得了谱带清晰且重复性好的产物,扩增的多态性片段分子     

三疣梭子蟹抗乳化病相关基因的初步研究

在梭子蟹疾病高发季节,从宁波市梅山岛养殖场分别采集了三疣梭子蟹幼蟹得乳化病即将死亡个体１０只和健康个体８只,用ＲＡＰＤ技术对此１８个个体的进行了检测。从２０个随机引物中筛选出６个,对每只梭子蟹的ＤＮＡ进行扩增。结果表明,每个引物扩增出２～８条清晰可辨且重复性强的条带,并在引物Ｓ９６对２组蟹的检测结果中,从得病组里得到了１条分子量在８４７ｂｐ左右的特异性条带,进而推测此条带应与抗乳化病能力的强弱有关。     

镢鱼病毒核酸随机引物扩增与克隆

从感染鳜鱼病毒（Ｓｉｎｉｐｅｒｃａ ｃｈｕａｔｓｉ Ｖｉｒｕｓ,简称ＳＣＶ）的鳜鱼体中分离病毒,提纯核作模板。通过ＲＡＰＤ法,和带酶切位点的引物进行病毒核酸随机引物扩增,获得扩增带谱。从带ＥｃｏＰＩ酶切位点的引物扩增产物中,用琼脂糖凝胶电泳回收大小约为０．４和０．５Ｋｂｐ的片段,经ＥｃｏＲＩ酶切处理制备成带粘性未端的片段,分别插入质粒ｐＵＣ１９的ＥｃｏＰＩ位点。ＥｃｏＲＩ酶对重组子进行了酶切鉴定,     

用RAPD分析对罗非鱼遗传变异的研究及其对杂种优势的应用

应用ＲＡＰＤ技术检测了一个奥利亚罗非鱼养殖群体和湘湖、美国和沙市三个尼罗非鱼和尼罗罗非鱼在群体内或群体间存在遗传差异。ＯＰＺ０６、Ｐ）Ｚ１０、ＯＰＺ１２和ＯＰＺ１９四个引物都有一个扩增片段具有种的特异性,可以作为临别尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼的遗传标记。群体内遗传相似性指数（Ｓ）表明,湘湖、美国和沙市三群体尼罗罗非鱼都保留了较高水平的遗传变异（Ｓ分别为０．７９８、０．７９５和０８２４）,而奥利亚罗非     

不同鲤鱼种间DNA遗传标记多态性

用８４个随机引物对黑龙江野鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ ｈａｅｍａｔｏｐｔｅｒｕｓ Ｔｅｍｍｉｎｃｋ ｅｔ Ｓｃｈｌｅｇｅｌ）和柏氏鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ Ｔｃｈａｎｇ）进行种间ＲＡＰＤ分析,结果共扩增出４８４个片段,二者共有扩增片段为１３个,黑龙江野鲤特有的为２３３个,柏氏鲤特有的为２２５个,这些特异片段可做为黑龙江野鲁和柏氏鲤的分子遗传标记。并对     

Genetic diversity in common carp stocks assayed by random-amplified polymorphic DNA markers

The common carp (Cyprinus carpio L.) is one of the major aquaculture species, contributing nearly 35% to the inland fish production in Karnataka, India. Stocks collected from Hungary (2), Indonesia and Vietnam were assessed alongside two local stocks in a series of culture performance trials with the objective of setting up a base population for developing a breeding programme. The present study deals with the genetic divergence and polymorphism in these six stocks using random‐amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. A total of 180 decamer random primers were screened for polymerase chain reaction (PCR) amplification (OPA 1‐20, OPB1‐20, OPC1‐20, OPD1‐20, OPE1‐20, OPF1‐20, OPG1‐20, OPP1‐20 and OPM1‐20). Eight primers were selected for analysis of common carp genotypes (OPA‐7, OPA‐20, OPB‐17, OPF‐10, OP F‐9, OPG‐4, OPG‐9 and OPP‐16). Out of 492 bands recorded, 57.1% were polymorphic. Stepwise regression analysis was carried out to find best combination markers affecting body weight (P<0.001). The results demonstrate major differences in the genetic structures between different stocks. Dendrogram data showed grouping of individuals according to stocks and corresponding data variables revealed the per cent homology within the stock and also found markers correlating to the body weight.     

陕西省养殖水产品重金属含量状况调查及评价

2014年至2015年,在陕西省的西安市、渭南市、宝鸡市、汉中市、安康市、榆林市和铜川市采集草鱼、鲤、鲫、鲢、鳙、罗非鱼、乌鳢、俄罗斯鲟、鲶、虹鳟和大鲵等11个水产品品种共计274份样品,分别检测Zn、Cu、Hg、As、Cd和Pb 6种重金属(含类金属As)含量。这6种重金属元素在不同水产品肌肉中残留量分别为2.49~25.15、0.1L~2.15、0.000 15L~0.364 3、0.01L~0.161 9、0.000 1L~0.031 5和0.002 5~0.4 mg/kg(鲜重)。6种重金属在11种水产品中的平均含量均低于我国限量标准,综合污染指数等级为Ⅳ级,污染程度属无污染,重金属含量总体状况良好。不同养殖品种间重金属的含量水平有一定差异,大鲵体内Zn的含量水平最高,其次为鲤、鲫、鲶及罗非鱼;鲫体内Cu的含量水平显著高于其它鱼类,其次为鲤;Hg在乌鳢体内含量水平明显较高,其次为大鲵、鲢、鳙和俄罗斯鲟;As在虹鳟体内含量水平最高,其次为俄罗斯鲟和鲢。Cd和Pb的含量在11种水产品间无明显差异。分析结果表明陕西省养殖水产品重金属含量目前虹鳟、俄罗斯鲟、鲢和鳙重金属综合污染指数相对较高,潜在污染风险相对较大,重金属指标中As和Hg的潜在污染风险相对较高。     

斑马鱼SSLP标记检测鲤鱼种间的遗传多态性

用500对斑马鱼SSLP标记引物对黑龙江野鲤（Cyprinus carpio haematopterus Temminck et Schlegel)和柏氏鲤（Cyprinus Pellegrini pellegrini Tchang)进行种间遗传差异分析，共发现110个斑马鱼标记在鲤鱼种间表现出差异，故可作为黑龙江野鲤和柏氏鲤间的分子标记，也可作为建立遗传连锁图谱的遗传标记。     

基于黄河鲤新品系IGF2b基因SNPs获取体系的建立及在该品系选育中的应用

为了建立鲤 IGF2b (insulin-like growth factor 2)基因全基因组信息 SNPs (single nucleotide polymorphism)的获取体系,并验证该获取体系在黄河鲤新品系选育中运用的适用性,本研究首先对 10个不同鲤品种的 33个鲤个体重测序数据进行分析,整体上了解 IGF2b 基因的单核苷酸位点及其在基因组上的分布情况。然后在基因组 DNA 水平上分段获取 IGF2b 基因的 SNPs 信息,并以不同的鲤品种验证引物的适用性,最后在黄河鲤新品系中检测其应用。研究结果:获得 8 对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)引物进行分段克隆的结果,并通过直接测序和限制性片段长度多态性来获取相应的 SNPs。经过直接测序,本文对黄河鲤、建鲤、黄河鲤和建鲤的正反交后代进行 PCR 检测发现条带单一,目地片段正确;结合黄河鲤新品系的体重数据,本文又以 IGF2b3#引物检测到一个与体重明显相关的 SNPs,同时检测到一个与该基因表达量相关的另一个 SNPs。本研究的方法能够在该基因全基因组范围内开展鲤分子育种中 SNPs 的检测,并验证发现黄河鲤新品系 IGF2b3#引物 227 号位点处,出现的突变位点使体重降低,且有一处 SNPs 与其表达量有关。这将为其他物种、其他功能基因的多态性分子标记研究提供思路。     

鲤野生和养殖群体遗传多样性分析中的微卫星(SSLP)分析

采用7个微卫星标记,研究了鲤(Cyprinus carpio)、高寒鲤和荷包红鲤抗寒品系(Cyprinus carpio var.wananensis)三个群体的遗传变异。结果显示,鲤野生群体、高寒鲤、荷包红鲤抗寒品系的平均杂合度分别为0.276、0.147、0.0952,平均无偏倚杂合度期望值为0.431、0.355、0.305。鲤野生群体的杂合度明显高于其他两个养殖品种,说明其较其他两个养殖品种的遗传多样性丰富。     

雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cDNA全序列克隆及表达分析

为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列.结果显示,4种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白,而且编码的蛋白都含有与其他CDK激酶相当保守的序列PSTAVRE;同源性分析发现,4种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6％,说明Cdc2蛋白在这4种不同倍性鱼中具有高度保守性.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)对cdc2基因在G3、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫及四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析,结果发现,G3cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高,比四倍体鲫鲤的表达水平低.该研究从分子水平证明了G3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞.同时,研究表明,cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着G3多次进入S期却不经历M期导致二倍体配子的产生.     

斑马鱼微卫星分子标记检测鲤鱼种间多态性

用6072对斑马鱼（Danio rerio）微卫星引物对黑龙江鲤（Cyprinus carpio haematopterus Temminck et Schlegel）、荷包红鲤（Cyprinus carpio var．wuyuanensis）和柏氏鲤（Cyprinus pellegrini Tchang）进行种间遗传差异分析，共发现563个斑马鱼微卫星标记在鲤鱼种间表现出多态性。从中随机抽选25个标记，对斑马伍和3种鲤鱼的遗传多样性进行分析，使用Phylip3．63软件按照Nei氏标准遗传距离计算种间遗传距离，再用MEGA3．0软件绘制NJ系统发生树，并进行1000次bootstrap检验系统树。结果显示，黑龙江鲤与荷包红鲤首先聚类，然后是柏氏鲤、斑马鱼。这些具有多态性的斑马鱼微卫星标记可用于鲤鱼种间种质鉴定，同时，借用模式生物斑马鱼的丰富遗传标记资源，增加同科的鲤鱼遗传连锁图谱上遗传标记的密度，必将对鲤鱼遗传育种进入分子育种时代起到促进作用。     

依主成分分析法建立鱼类食用品质评价模型

采用主成分分析方法评价泥鳅Misgurnus anguillicaudatus、黄鳝Monopterus albus、鲫Carassius auratus、鲤Cyprinus carpio、乌鳢Channa argus、黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco,和虹鳟Oncorhynchus mykiss等7种常见食用鱼的食用品质价值,对其17种氨基酸进行综合评价。通过建立鱼类食用品质评价模型,构造综合评价函数计算综合得分并排序,来反映该种鱼类的食用品质。结果显示:虹鳟综合得分最高,其次是鲫,而黄颡鱼排在最末。通过主成分分析模型建立可量化的评价指标和新的评价方法,为鱼类营养价值评价提供更为准确、客观的方法。     

鱼食性与肠道菌群关系的初步研究

对淡水养殖池中的乌鳢、鲢鱼、鳊鱼、鲫鱼不同食性鱼的后肠菌群进行了定性、定量分析,结果表明:四种鱼的后肠壁和后肠内容物都是厌氧菌总数远大于好氧菌总数;后肠内容物菌数远大于后肠壁菌数;不同的鱼,后肠壁的好氧菌总数差别很大,而厌氧菌总数差别不大;后肠内容物中的厌氧菌总数和好氧菌总数为:乌鳢>鲫鱼>鲢鱼>鳊鱼;而后肠壁细菌含量与食物没有明显的关系;后肠内容物和后肠壁中的双歧杆菌数为:乌鳢>鲫鱼>鲢鱼>鳊鱼。表明后肠内容物中的细菌总数、后肠内容物和后肠壁中的双歧杆菌数都与食性相关。大肠杆菌、肠球菌和乳酸菌在后肠的分布没有规律,说明它们与食物相关性不强。     

芙蓉鲫(芙蓉鲤♀×红鲫♂)及其原始亲本的形态学分析

本研究随机采集芙蓉鲫及其原始亲本(芙蓉鲤、红鲫、散鳞镜鲤、兴国红鲤),测定了7项可数性状和12项可量性状,研究芙蓉鲫与其原始亲本之间的表型差异。结果表明:芙蓉鲫(Cyprinus capiofurong.♀×Carassiusauratusred var.♂)可数性状稳定,介于父母本之间,可量性状中芙蓉鲫有5项偏向父本,3项偏向母本、4项超父母本。聚类分析显示芙蓉鲫可量性状更接近于父本红鲫,而与另3种亲本差异较远。判别分析结果也显示芙蓉鲫与红鲫形态更为接近,各组判别准确率依次为芙蓉鲫100%,红鲫96%,兴国红鲤87%,散鳞镜鲤81.3%,芙蓉鲤73.1%。