非洲猪瘟病毒抗原检测试纸条检测方法的建立及初步评价

分别以非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白特异性单克隆抗体3E1株和7A7株作为检测抗体和捕获抗体,建立了ASFV抗原试纸条检测方法。该方法与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;对ASFV P72重组蛋白的最低检测量为2.50μg/L;稳定性试验结果表明,试纸条可在2～8℃条件下保存15个月。对100份临床样品的检测结果显示,该方法与荧光定量PCR的符合率为85%。本研究建立的ASFV抗原检测试纸条特异性强、灵敏度高,可用于临床样品中ASFV抗原的检测。     

口蹄疫病毒抗原胶体金试纸条的研究

利用单克隆抗体技术制备抗口蹄疫病毒的单克隆抗体,特异性试验表明其只与O、A、Asia 1型3种血清型FMDV抗原结合.进而采用胶体金标记技术,以胶体金标记的抗口蹄疫病毒单克隆抗体、多克隆血清抗体和葡萄球菌A蛋白为主要材料,研制口蹄疫快速检测试纸条.该试纸条检测O、A、Asia 1型3种血清型灭活口蹄疫病毒均为阳性,检测水疱性口炎病毒、猪水疱病病毒、蓝舌病病毒、猪蓝耳病病毒4种灭活抗原及小反刍兽疫病毒疫苗株均为阴性,试验结果与口蹄疫实时荧光定量RT-PCR方法的完全一致,表明其具有良好的特异性.敏感性试验结果是,试纸条的检测极限为1∶160稀释的样品,其敏感性相当于实时荧光定量RT-PCR方法的1/64.由于试纸条具有操作方便、检测快速等优点,因此该试纸条可以用于大量临床样品的快速检测和现场检测.     

链霉素胶体金快速检测试纸条的研制

本研究建立了一种基于免疫胶体金技术的链霉素快速检测方法。该方法检测灵敏度10ng·ml-(101ppb),蜂蜜样本检出限是40ng·ml-(40ppb),单个样本检测时间为5～10min。所研制试纸条产品检测变异系数小,批1间、批内检测结果重复性良好,可以应用于蜂蜜样本中链霉素的快速检测和现场筛查,具有较高的市场应用前景。     

用猪瘟胶体金快速检测试纸卡检测牛病毒性腹泻抗体的试验

用猪瘟胶体金快速检测试纸卡和牛病毒性腹泻(BVD)抗体ELISA试剂盒分别对50份免疫场乳牛血清和184份非免疫场牛血清进行BVD抗体检测。结果50份免疫场牛血清阳性率分别为86%和92%,184份非免疫场牛血清阳性率分别为78.8%和82.1%,检测结果相近,说明用猪瘟胶体金快速检测试纸卡检测牛病毒性腹泻抗体水平具有一定的参考价值。     

林可霉素胶体金快速检测试纸条的研制

本文利用胶体金免疫层析技术研制了一种快速检测牛奶中林可霉素的试纸条,经过测试,该试纸条的检测限为20μg/L,检测时间为10min,假阳性率和假阴性率均为0,该方法准确,可靠,使用简便,适合大量样品的现场检测。     

应用免疫金标检测试纸与其它方法检测猪瘟抗体的比较

作者应用免疫金标检测试纸与其它检测猪瘟抗体的方法进行比较，试验结果表明免疫金标检测试纸法检出率与西班牙海博莱公司生产的ELISA试剂盒十分接近，与dot-ELISA也较为接近，与正向间接血凝试验有差异，且与猪圆环病毒等无交叉反应，4℃下保存期大于15个月。     

猪瘟抗体免疫金标检测试纸的妙用

目前国内对猪瘟抗体水平检测方法有：ELISA检测法，DOT－ELISA检测法和液体猪瘟正向间接血凝法。这些方法虽然都具有微量、特异的优点，但需要条件较好、设备齐全的实验室和经过专门训练、技术水平较高的人员操作，一次检测至少需要４个小时。这对于缺少仪器设备和专门技术人员的基层兽医站、养猪场，就难以开展此项工作。近年来，随着胶体金免疫层析技术及生化制备技术的发展，在人医上用胶体金免疫层析法检测血清中各种抗体已成为现实。２００１年，经过兽医工作者的努力研究，“猪瘟抗体免疫金标试纸”已研究成功，由厦门市格林沃…     

猪瘟胶体金免疫快速检测技术研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。胶体金免疫技术是一种新型免疫学检测技术,具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、无需特殊仪器等优点,在猪瘟的快速诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。通过概述胶体金免疫技术在猪瘟抗原及抗体快速检测上的应用研究进展,对现状及发展前景作一简要综述,以期为猪瘟的有效防控提供参考。     

猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为探究猪瘟病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用效果,对181份未免疫猪瘟疫苗、71份已免疫猪瘟疫苗的临床猪血清,采用本研究试纸条和北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒分别进行抗体检测,对4头存在母源抗体的不同免疫时间仔猪血清、不同阶段的猪血清,采用本研究试纸条进行抗体检测,并对检测结果进行分析统计。结果显示,本研究试纸条与北京世纪元亨公司的ELISA试剂盒的阴性符合率为100%,阳性符合率为95.77%,经Kappa检验两者一致性良好;初生仔猪首免后,猪瘟抗体滴度有所下降,30 d后加强免疫,抗体滴度逐渐升高,试纸条检测结果与猪瘟抗体衰减变化过程呈正相关;不同阶段猪群的猪瘟抗体阳性率均为100%,抗体平均值较高,离散度较整齐,与规模化养猪场合理免疫程序相吻合。综合表明,本试纸条的临床应用效果较好,可用于实时监控猪群的猪瘟抗体变化,适用于基层规模化猪场的猪瘟抗体快速检测。     

禽流感抗原快速检测试纸条的研究

应用胶体金标记技术(Immunogold Labelling Technique)与免疫层析技术,在玻璃纤维膜和硝酸纤维膜的检测线(T)和对照线(C)上分别喷上胶体金AIV单克隆抗体(Ab2)偶联物和AIV单克隆抗体(Ab2)-羊抗鼠IgG多克隆抗体,制成禽流感抗原检测试纸条。用该试纸检测“AIV琼扩抗原”、“AIV H5N1抗原”、“AIV H7N1抗原”、“AIV H9N1抗原”均显阳性,而对禽源性的其它病毒抗原均显阴性;本试纸与韩国产“禽流感检测试纸条”同时检测相同的样品,结果完全一致,且具有很好的线性(敏感度),是一种微量、特异、快速、简便和结果容易判定的新的检测方法,可作为检测机构和养禽场检测初筛禽流感时使用。     

猪瘟快速诊断金标试纸条的研制及应用

运用胶体金免疫层析技术,建立一种操作简单、特异性好、灵敏度高,适合临床诊断的检测猪瘟病毒的方法。本文通过采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金,选择15 nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体,组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测,结果显示,用试纸条检测猪瘟病毒,15min左右即可显示结果,并与荧光抗体检测方法加以比较,结果表明用此种方法可以检测猪瘟病,并且可以进行推广使用。     

猪瘟抗体消长规律动态研究

采用IHA实验方法监测猪瘟灭活疫苗免疫的猪抗体产生水平，并对仔猪母源抗体的消长规律进行了研究。结果表明仔猪母源抗体水平与母猪抗体水平呈正相关，其首次免疫抗体增长幅度与母源抗体呈负相关，但其抗体水平与免疫次数呈正相关。主动免疫的抗体效价与免疫剂量呈正相关，但与首免日龄无关。     

猪瘟胶体金快速诊断法的研究进展

胶体金免疫层析技术是一种新型的免疫检测技术,具有操作简单、方便快速、特异性强、灵敏度高、无需特殊仪器等优点。本文简要阐述了胶体金技术在检测猪瘟抗原及猪瘟抗体上的应用现状,并提出了该技术目前存在的问题及未来的发展方向。     

猪圆环病毒2型抗体胶体金检测试纸条的研制

应用胶体金免疫层析技术,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,在玻璃纤维膜上包被胶体金标记PCV-2抗原(cap蛋白),在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被PCV-2抗原(cap蛋白)和PCV-2单抗,制成猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸条。该试纸条与猪圆环2型抗体酶联免疫检测试剂盒对比,符合率为94.7%,整个实验过程只需15 min,与ELISA试剂盒比较,具有操作方便、快速、直观的优点。     

猪瘟疫苗的研究进展

猪瘟(classical swine fever,CSF)是危害世界养猪业的主要传染病之一,以很强的传染性和高致死率为特征。目前猪瘟的流行趋势发生了很大变化,呈现典型猪瘟和非典型猪瘟共存、持续感染与隐性感染共存、免疫耐受和带毒综合征共存等现象,给猪瘟的防制带来新的挑战。目前,免疫接种依然是猪瘟防制的主要措施,因而开发新型、高效、稳定的猪瘟标记疫苗具有重要的现实意义。     

犬细小病毒胶体金检测试纸条的制备与初步评价

为快速检测及诊断犬细小病毒及其引起的传染性疾病,应用胶体金免疫层析技术．采用柠檬酸三钠还原法制备25nm的胶体金颗粒,标记抗犬细小病毒单克隆抗体CPV—F1株后包被于玻璃纤维膜作为金标垫,在硝酸纤维素膜上分别包被羊抗小鼠IgG二抗和抗犬细小病毒单克隆抗体CPV—B6株作为质控线和检测线,将吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫分别粘贴于背衬板上制成犬细小病毒抗原胶体金检测试纸条。特异性试验及与血凝试验的对比结果表明,该试纸条具有良好的特异性和敏感性,与进口产品的总符合率为98％。本研究为进一步研发犬细小病毒检测试纸奠定了基础。     

猪瘟病毒的分子生物学研究进展

本文概述了猪瘟病毒的基因结构和功能，猪瘟的分子生物学诊断技术和基因疫苗，以及猪瘟病毒全长感染性cDNA的研究进展。为进一步研究猪瘟病毒的复制机理、毒力及其决定因素、致弱机理、致病机理、基因产物的功能、宿主嗜性及标记疫苗的开发提供理论参考。