聚乙二醇/磷酸氢二钾双水相体系萃取蛋清溶菌酶方法的建立

通过对聚乙二醇(PEG)-K2HPO4、PEG-(NH4)2SO4、PEG-C6H5O7Na3三种双水相体系进行研究,制作相图,分析得出PEG-K2HPO4是萃取蛋清溶菌酶较为合适的双水相体系.选用分子量适中的PEG 2000与K2HPO4组成双水相体系分离萃取蛋清溶菌酶.研究表明,采用PEG-K2HPO4双水蛋相分离蛋清溶菌酶能达到较高的分配系数和回收率,当萃取体系组成为25％ (w/w)PEG 2000-35％ (w/w)K2HPO4时,蛋清溶菌酶的分配系数为416.94,双水相萃取过程回收率为99.47％.     

鸭蛋清中溶菌酶的提取研究

本文采用离子交换法从鸭蛋清中提取溶菌酶，所用树脂为大孔径弱酸性阳离子树脂，用传统的检测方法测定活力。得出较佳的提取条件为：蛋清树脂比为4：1，提取时间3．5h，洗脱液浓度1mol/L，洗脱液用量1．5倍。     

仔猪血清中溶菌酶含量和活力的测定

溶菌酶参与机体内多种免疫反应,测定它在血清中的含量可作为了解机体免疫功能的一个重要指标.试验用36头22日龄仔猪血清为试验样本,利用比浊法和ELISA两种方法测定血清中的溶菌酶.结果表明:ELISA测定法对同一样本3次测定值间的变异系数和对36个仔猪血清样本溶菌酶测定值变异系数均极显著(P＜0.01)小于比浊法测定结果...     

蛋清溶菌酶的改造及其抑菌活性

本研究旨在探讨高温酸性改造的蛋清溶菌酶对两种革兰阳性菌G+(金黄色葡萄球菌Staphylococcus au-reus、枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis)和两种革兰阴性菌G-(大肠杆菌Escherichia coli、鳗弧菌Vibrio anguilla-rum)的抑制作用.采用高温(57.0±0.1)℃...     

不同添加剂对暗纹东方鲀生长和脾脏溶菌酶活力的影响

在基础饲料中添加0．3％硒酵母，0．3％硒酵母＋0．1％芽孢杆菌，0．3％硒酵母＋100ppm有机铬，100ppm大蒜素，投喂暗纹东方Tun73天，测定鱼体的生长和脾脏溶菌酶的活力，结果表明，以上的添加剂对体重的增加有显著性的影响（P＜0．05），添加0．3％硒酵母＋100ppm有机铬，100ppm大蒜素可以极显著的增加暗纹东方Tun脾脏的溶菌酶活力（P＜0．01）。     

蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞的毒性

本研究旨在探讨一定理化条件下形成的蛋清溶菌酶淀粉样纤维对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的毒性作用。采用高温（57±0.1）℃、pH 2.0甘氨酸溶液、振荡条件下孵育100 μmol·L^-1的蛋清溶菌酶蛋白,使其聚集成为蛋清溶菌酶淀粉样纤维;透射电子显微镜观察蛋清溶菌酶淀粉样纤维的超微结构,ANS荧光法测定纤维的疏水性,圆二色谱法测定并计算纤维的二级结构含量;将此纤维作用于培养的SH-SY5Y神经细胞,MTT法检测细胞活力,核染色法检测细胞凋亡状况。透射电镜结果显示,蛋清溶菌酶在孵育4 d后形成了呈短杆状超微结构的淀粉样纤维;与天然蛋清溶菌酶蛋白相比,纤维的疏水性和二级结构β折叠含量均显著提高;且1~3 μmol·L^-1纤维作用于SH-SY5Y细胞12、24和48 h均产生了显著的毒性作用（P<0.01）,1、2和3 μmol·L^-1纤维作用细胞12 h时的细胞活力分别为75.16%±15.51%、67.54%±12.13%和67.89%±10.26%,作用24 h的细胞活力分别为75.78±13.01%、58.41%±5.55%和61.90%±8.94%,作用48 h的细胞活力分别为71.59%±14.75%、55.65%±5.78%和46.45%±6.23%,细胞活力降低呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性,且细胞核染色呈现典型的核凋亡变化。结果提示,蛋清溶菌酶在一定理化条件下可形成具有神经细胞毒性的淀粉样纤维,为解释朊蛋白或其他蛋白质形成淀粉样纤维的机制提供参考。     

不同pH对蛋清溶菌酶形成淀粉样纤维的影响

试验旨在研究不同pH对淀粉样纤维形成的影响。以蛋清溶菌酶（hen egg-white lysozyme,HEWL）为模型蛋白,在不同pH的甘氨酸（50 mmol/L）溶液中（57.0±0.1）℃孵育0~8 d,使其形成不同聚集程度的淀粉样纤维,pH设为2.0、6.5、7.5和8.0;用透射电镜定性观察淀粉样纤维生成状况,采用硫磺素T （ThT）荧光法和刚果红染色法测定淀粉样纤维生长状况,8-苯胺基-1-萘磺酸（ANS）荧光法测定淀粉样纤维疏水性变化,圆二色谱法测定二级结构转化,BeStSel软件预测β-折叠含量。结果显示,透射电镜下观察第8天纤维生长状况发现,pH为2.0时HEWL形成了大量的短杆状淀粉样纤维,同时ThT荧光法结果表明淀粉样纤维生长状况最好（P<0.01）,且生长趋势呈时间依赖性;刚果红染色法显示,在490~510 nm出现红移、540 nm出现特征性肩峰,疏水性显著增强,并且二级结构转化明显,β-折叠含量从天然HEWL蛋白的6.1%增加到37.6%;pH 6.5组仅在透射电镜下观察到极少量的淀粉样纤维,pH 7.5组在视野中未观察到明显的淀粉样纤维,仅观察到大量的球状或杆状蛋白聚集体;pH 8.0组未产生淀粉样纤维。高温条件下,HEWL在强酸性（pH 2.0）条件较易形成淀粉样纤维,且此时疏水性和二级结构转化程度最高,这为解释朊病毒病及其他淀粉样变性疾病的淀粉样纤维形成机制提供了理论基础。     

家蚕溶茧酶收集方法的建立及活性测定

对家蚕溶茧酶的收集、活性测定进行了研究。结果表明,不同的环境条件会影响蚕蛾的羽化率和家蚕溶茧酶的质量。家蚕溶茧酶具有精氨酸酯酶的活力,酶活力大小与其吐出液的颜色深浅有关。     

HF酶制剂中蛋白酶活力的测定

ＨＦ酶制剂中蛋白酶活力的测定山东济宁市化工研究所赵德英，张景宏生物体内的大部分化学反应都是在酶的催化下进行的。要检查酶的存在及其含量，不能像检查化学药品那样直接用重量或体积来表示，而只能用它催化某一特定反应的能力即酶的活力来表示。因此，测定酶活力是研...     

饲料分析中酶活力的测定和酶法分析的应用

简要介绍了饲料中酶活力测定的方法和作用 ,重点论述了酶法分析的特点、方法原理以及在饲料分析中的应用前景。酶法分析具有特异性强、干扰少、操作简便、测定快速精确、灵敏度高等特点 ,能广泛地应用于饲料分析中     

木质素降解相关酶类测定标准方法研究

在比较研究和具体实践的基础上,提出了漆酶、锰过氧化物酶和木素过氧化物酶活力测定的标准方法,详细介绍了各标准方法的具体操作步骤及其在实际研究中的分析应用.     

阳离子交换法提取蛋清溶菌酶的研究

采用静态离子交换法从鸡蛋清中提取溶菌酶,探讨不同条件对溶菌酶收率等的影响,确定了最优操作参数,所用树脂为D152阳离子交换树脂。最佳提取条件为：树脂用量占蛋清体积的30％;吸附时间6h;去离子水洗涤杂蛋白3次;用10％硫酸铵溶液洗脱3次,洗脱时间1h;用洗脱液体积2倍的丙酮沉淀溶菌酶,试验从300mL蛋清中制得溶菌酶0．896g,得率0．295％,比酶活可达9500U／mg左右,纯度为96．3％     

壳聚糖硒对蛋雏鸡生长、组织硒含量及血清肝酶活性的影响

为探索壳聚糖硒对蛋雏鸡生长、组织硒含量及血清肝酶活性的影响,选取135只1日龄SPF蛋雏鸡,随机分为3组:一组为对照组,饲喂基础日粮;二组和三组在基础日粮中分别添加硒水平为0.15 mg/kg的亚硒酸钠和壳聚糖硒。结果显示:14日龄时亚硒酸钠组和壳聚糖硒组的耗料量、血清碱性磷酸酶(AKP)活性和胸肌、心肌、肾脏、全血的硒含量显著高于对照组(P<0.05),壳聚糖硒组心肌和肝脏的硒含量显著高于亚硒酸钠组(P<0.05);28日龄时壳聚糖硒组与亚硒酸钠组的体重、血清AKP活性和肝脏、肾脏、胸肌、心肌、全血的硒含量显著高于对照组(P<0.05),壳聚糖硒组的耗料量和肾脏、心肌、全血的硒含量显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。研究表明:壳聚糖硒能促进鸡的生长和硒的沉积,提高血清AKP活性,且效果优于亚硒酸钠。     

植酸酶活性测定方法

饲用植酸酶酶活性的定量分析至今没有普遍公认的检测方法,本测定方法是在BASF公司1991提出的植酸酶活性的测定方法的基础上进行研究改进,建立了更适合于普通实验室条件下植酸酶产品酶活性的测定。本方法采用绝对法,取二次曲线方程计算,其线性相关性(R2)匀能够达到0.999～1,同一样品同一时间平行测定实验结果相对误差均<2%,同一样品不同时间测定结果相对标准偏差(RSD%)<10%(n=3)。     

溶菌酶抑菌活性及检测方法研究进展

溶菌酶是广泛分布于动物、植物和微生物等生物类群中的酶类,是生物体天然免疫系统的重要组成部分,是一种非特异性的防御机制。作者结合了细菌、真菌和病毒等的生理生化特性对溶菌酶的溶菌原理进行了总结,并对其抑菌活力检测方法进行了综述,最后对其抑菌作用的应用前景进行了展望。     

饲用酶制剂的酶活检测方法及评定

随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步,酶制剂在饲料工业中的应用越来越多：由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用,提高饲料消化率,改善动物生产性能,降低生产成本,因此日益受到饲料界的重视。但是,由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确,分离提纯困难等多种原因,使这类产品有国家标准的不多,即使有国标也存在一些问题。给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。本文简单介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素,仅供广大饲料工作者提供参考。     

酶法提高蛋清粉起泡功能及其机理的研究

为蛋清粉的起泡功能,采用中性蛋白酶水解蛋清蛋白以提高蛋清粉的起泡功能.采用单因素试验分析酶法提高蛋清粉起泡功能的影响因素.结果表明,酶法提高蛋清粉起泡功能的较适水解条件为:pH值7.0、酶添加量1 000 U/g、水解时间75 min、水解温度37℃.与原工艺相比,蛋清粉起泡力由38.22％提高至93.19％,泡沫稳定性由84.95提高至105.19.     

反相高效液相色谱法测定预混料中洛克沙胂的含量

洛克沙胂(Roxarsone,3-硝基-4-羟基苯胂酸)是我国目前使用量比较大的有机砷制剂之一,主要用于提高猪、鸡日增重和改进饲料利用率,改善皮肤营养,促进色素沉积等。在猪鸡饲料中允许添加量为50g/t,过量使用可引起畜禽中毒甚至死亡,其在畜禽产品中的残留以及向环境排出的大量砷元素