铁皮石斛生根壮苗培养基优化及移栽基质选择

以铁皮石斛无菌幼苗为材料,研究不同基本培养基、不同激素对铁皮石斛生根壮苗的影响.同时以优良的试管苗为试材,搭配不同比例的基质,研究其对铁皮石斛试管苗移栽成活率和生长状况的影响.结果显示,以培养基N6+NAA 0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+AC 5 g/L+香蕉汁100 mL/L生根壮苗效果最佳,试管苗根粗叶绿,可达到出瓶效果;移栽基质火山岩+松树皮+活苔藓效果最佳,石斛试管苗成活率可达90％且长势优良,30 d后有新芽萌发.     

铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖研究

为研究铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖技术,以铁皮石斛的种子为外植体。在不同培养基、不同的激素组合进行诱导产生试管苗,用松树皮作为移栽基质。结果表明:铁皮石斛种子在不同激素的培养基上均能萌发;不同培养基对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为改良MS>N6>MS>1/2N6>1/2改良MS>1/2 MS,以改良MS培养基最好;不同激素组合对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为B5>B2>B3>B1>B4;不同激素组合对铁皮石斛生根有影响,其顺序依次为C2>C3>C1。因此,比较适合铁皮石斛种子萌发的激素是1/2MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原球茎增殖、成苗的培养基及激素组合为改良MS+6-BA0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原生苗生根的培养基为改良MS+ABT60.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖15 g/L。在改良MS培养基中不加任何水果汁诱导铁皮石斛种子,获得了大量试管苗,移栽成活率达到90%以上。     

黑节铁皮石斛组织培养技术研究

对黑节铁皮石斛茎尖原球茎诱导和茎尖增殖以及小苗生根进行了初步研究。采用黑节铁皮石斛无菌苗茎尖,经过75%乙醇消毒30 s后,去除表皮,黑节铁皮石斛带节茎尖原球茎诱导与茎尖增殖最佳培养基为1/2MS+5.5 g/L琼脂+0.55 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L土豆泥+20 g/L白砂糖+0.45 g/L活性炭。黑节铁皮石斛生根最佳培养基为1/2MS+5.5g/L琼脂+0.15 mg/L 6-BA+0.55 mg/L NAA+0.1 mg/L AgNO_3+100 g/L香蕉泥+20 g/L白砂糖+0.25 g/L活性炭。     

铁皮石斛组培苗生根条件优化研究

【目的】培养生根优良的铁皮石斛组培苗,提高移栽成活率。【方法】在生根培养基中添加不同激素配比（1.0~3.0 mg/L NAA、0.5 mg/L 6-BA）进行铁皮石斛组培苗生根培养,并采取正交试验考察光照强度、pH和琼脂用量对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。【结果】随着MS培养基中NAA浓度的升高,试管苗的鲜重和生根率呈逐渐降低的趋势,以添加NAA 1. 0 mg/L（处理1）和NAA 2. 0 mg/L（处理3）的试管苗长势最好。极差分析和方差分析结果表明,在3个培养条件中,对试管苗生根的影响大小表现为光照强度>琼脂用量>pH值,生根培养基3因素最优水平组合为光照强度2000 lx,pH 5.5,琼脂用量8.0 g/L。【结论】铁皮石斛试管苗适宜的生根培养基为1/2MS + 10%香蕉泥 + NAA 1.0 mg/L + 2%蔗糖 + 0.05%活性炭,适宜的生根条件为光照强度2000 lx、琼脂用量8.0 g/L、pH 5.5。     

几种外部因子对春石斛组培生根的影响

[目的]为春石斛种苗的规模化生产提供理论依据。[方法]以春石斛组培增殖的不定芽为外植体,研究MS培养基浓度、IBA浓度、活性炭浓度及天然物质等外部因子对春石斛试管苗生根的影响。[结果]MS培养基浓度对试管苗生根影响较大,试管苗在1/2 MS培养基中生根效果较好,生根率达95%,根多且长。在1/2 MS培养基中加入0.5 mg/LIBA和0.5 mg/L活性炭对试管苗生根及生长有明显促进作用。在培养基中添加天然物质对试管苗生根有促进作用,其中添加100 g/L椰子汁时生根效果最佳,生根率可达97%。[结论]当培养基配方为1/2 MS+0.5 mg/LIBA+0.5 mg/L活性炭+100 g/L椰子汁时,春石斛试管苗生根及生长效果较好。     

铁皮石斛组织培养方案优化

对铁皮石斛组织培养最佳IBA浓度和pH值的培养配方问题进行了研究,在进行铁皮石斛组织培养前,查阅相关文献,获得IBA浓度和pH值范围,IBA浓度梯度分别为0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L、0.4mg/L,pH值梯度分别为5.3、5.4、5.5、5.6、5.7的铁皮石斛组织培养基。经过实验对比后得到pH为5.6,Ms+IBA0.3mg/L+香蕉汁100g/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L的铁皮石斛组织培养基是最佳的生根培养基。     

铁皮石斛壮苗生根与移栽种植研究

[目的]筛选出较适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基和移栽基质及移栽管理方式.[方法]以已分化出真叶的丛生苗为试材,通过研究不同植物激素配比和有机添加剂对铁皮石斛壮苗生根的影响,筛选出促进铁皮石斛试管苗快速生根和壮苗的培养基,同时对铁皮石斛试管苗的移栽进行全面研究,设置不同的移栽基质及移栽管理方式,以提高试管苗的脱瓶移栽成活率.[结果]适宜铁皮石斛生根的培养基为1/2MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+ IBA 2.0 mg/L;适宜铁皮石斛壮苗的培养基为1/2MS+ NAA 0.1 mg/L +6-BA0.5 mg/L;适宜铁皮石斛生根壮苗的有机添加剂为20％香蕉汁;适宜铁皮石斛移栽种植的管理方式为单栽,其中运用单栽管理方式适合铁皮石斛移栽种植的基质为1/3泥炭+1/3松树皮+1/3兰石,60d后成活率达80.0％.[结论]建立一套适合铁皮石斛壮苗生根与移栽种植的方法,为铁皮石斛的产业化大规模种植奠定基础.     

不同培养基配方对铁皮石斛生根培养的影响

以铁皮石斛试管苗为试材,研究了不同激素浓度、不同添加物及浓度对铁皮石斛生根壮苗的影响.结果表明,NAA浓度为0.2 mg/L时,生长和生根效果较好;活性炭的添加,有利于石斛苗的生根和生长;果蔬添加剂对石斛苗生根和生长均有促进作用,香蕉泥的效果较好,且浓度为10％最为适宜.确定铁皮石斛生根最适宜培养基为1/2MS+ 0.2 mg/L NAA+1 g/L活性炭+10％香蕉泥.     

铁皮石斛茎段离体培养一次成苗技术研究

【目的】简化铁皮石斛繁育流程,缩短育苗周期.【方法】以铁皮石斛茎段为外植体,研究了铁皮石斛茎段组织培养一次成苗技术.【结果】70%的乙醇30s+1‰升汞10min消毒效果较好,外殖体污染率为43%,诱导率达97%;一次成苗培养基1/2 MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 3mg/L+香蕉泥100g/L+琼脂7‰+蔗糖25g/L增殖及生长情况最好;在该组培系统中铁皮石斛适宜的继代周期为50d,成苗率100%,平均根数5.4,繁殖系数5.6;铁皮石斛丛生芽移栽以腐叶土和腐叶土∶河沙(1∶1)两种基质的成活率高,且生长健壮.【结论】本技术简化了铁皮石斛组培工艺流程,缩短了育苗周期,降低了生产成本,适用于规模化生产.     

铁皮石斛离体快繁技术

以铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为研究对象,通过对不同无机盐浓度、不同培养温度以及不同激素浓度配比等影响因子进行研究,确立以种子无菌萌发为途径的铁皮石斛组培快繁体系。结果表明:25℃时,1/2MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基配方最有利于铁皮石斛原球茎的诱导和幼苗分化;1/2MS+0.5 mg/L NAA培养基配方最适合铁皮石斛幼苗生根,生根率达100%。     

铁皮石斛的离体培养和快速繁殖

以野生铁皮石斛种子为外植体,研究了不同基础培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛种子萌发、原球茎增殖与分化、试管苗生根的影响.结果表明,铁皮石斛种子萌发的适宜培养基为MS 0.5mg/L NAA 10%土豆汁;原球茎增殖与分化的适宜培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA 10%土豆汁;试管苗生根的适宜培养基为MS 0.2 mg/L NAA 10%土豆汁.在此条件下建立的铁皮石斛快速繁殖体系,原球茎在增殖与分化培养基上培养3个月左右,可分化出大量高约1～2 cm的试管苗,转入生根培养基中培养3个月左右后诱导出大量根系,即可进行大田移栽.     

不同培养基对铁皮石斛种子萌发和壮苗生根的影响

以铁皮石斛种子为材料,通过组织培养技术,不添加植物生长调节剂直接得到丛生芽,并比较天然有机物、活性炭等添加物对铁皮石斛丛生芽壮苗生根的影响,优化铁皮石斛组培快繁技术体系.结果显示,铁皮石斛种子分化最佳培养基为MS+6 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+80 g/L香蕉泥;芽苗的壮苗生根试验中,最佳培养基为1/2 MS+0.4 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂+80 g/L香蕉泥+0.5 g/L活性炭,有利于芽苗的壮苗和生根.该研究可以一次性直接得到优质铁皮石斛幼苗,减少了试验步骤,节省人工、降低成本,提高了试验效率,促进原球茎增殖、提高分化率,促进壮苗和生根,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供技术支持.     

铁皮石斛组培快繁技术的研究

为了建立铁皮石斛快速繁殖体系,以其茎段为材料,研究了不同培养基组分、激素浓度对铁皮石斛增殖和生根的影响。结果表明:铁皮石斛在初代培养中用酒精消毒30s后再用0.1%升汞杀菌6min最为适宜;最适培养基为MS基本培养基;在MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.5mg·L-1 NAA中铁皮石斛的增殖效果最佳,在MS培养基中添加3.0mg·L-1 IBA生根效果最好,生根率可达100%;试管苗移栽的最佳基质为苔藓,单独使用成活率可达90.6%。     

不同添加物对铁皮石斛组培幼苗生长的影响

以铁皮石斛试管小苗为材料,以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂为基础培养基,采用正交试验设计方法研究3种不同添加物(普通香蕉汁、食用马铃薯汁、活性炭)对铁皮石斛幼芽生长的影响。结果表明,香蕉汁对铁皮石斛的鲜质量、根数、茎高有促进作用,在促进茎的伸长方面效果较为显著;马铃薯汁对铁皮石斛的根长、茎粗影响不大,但在鲜质量和茎高等方面有显著性促进作用;添加一定量的活性炭可以促进铁皮石斛根的生长。在基础培养基里添加30%香蕉汁、10%马铃薯汁、0.6 g/L活性炭,有利于铁皮石斛的壮苗生根;添加10%马铃薯汁、0.2 g/L活性炭,有利于铁皮石斛原球茎的增殖和芽的分化。     

水杨酸对四棱石斛试管苗生长及多糖合成的影响

利用植物组织培养技术,对含有不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)配比的培养基进行筛选,在最适激素浓度的培养基基础上,施加不同浓度水杨酸培养四棱石斛试管苗,测定不同时期四棱石斛试管苗的多糖含量,从而确定适宜四棱石斛生长和多糖含量较高的水杨酸与激素浓度的最佳配比方案。结果表明,水杨酸浓度为20μmol/L时多糖含量达到最大值。由结果可知,适宜四棱石斛试管苗生长并促进其多糖合成的培养基是MS+1.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+6.5 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+2 g/L活性炭+20μmol/L水杨酸。     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖

实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体,诱导丛生芽,壮苗生根,从而实现大量繁殖.当NAA的浓度为0.3 mg/L,6-BA的浓度为5 mg/L时,铁皮石斛丛生芽的增殖率最高.在MS培养基中,铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS+6-BA(2 mg/L)+20%香蕉汁.不同激素浓度的6-BA对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出,不加6-BA的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少;而加入6-BA后以大幅度提高生根率,尤以在6-BA 0.4 mg/L的培养基中小苗生根快,根数多.从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出,幼苗用MS培养基比用KC培养基培养生长好.铁皮石斛培养60 d左右时生长速度最快.香蕉提取液能促进生长,从而使苗的生长加快.以MS+香蕉汁20%的培养基为最好.     

继代培养期不同培养基对铁皮石斛茎芽生长的影响

继代培养期不同培养基对铁皮石斛茎芽的生长试验结果表明,选用继代培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA的铁皮石斛长势最好。幼苗叶片绿色、较大且舒展,生根率达到100%。     

不同添加物及浓度对铁皮石斛组织培养的影响 x

以无菌播种取得的铁皮石斛无菌苗作为试验材料,研究1/2 MS 培养基中添加不同浓度的添加物对铁皮 石斛的增殖、生根的影响。结果表明;马铃薯汁和木瓜乳有利于诱导芽的增殖,其中又以1/2 MS+NAA 0.2 mg/L +蔗糖 30 g/L+马铃薯200 g/L 培养基最有利于诱导芽的增殖;香蕉乳有利于诱导生根,其中又以1/2 MS +NAA 0.5 mg/L+蔗 糖30 g/L +香蕉100 g/L 培养基最有利于诱导芽生根。     

CCFL光源不同光质比对铁皮石斛原球茎增殖及试管苗生长的影响

以铁皮石斛原球茎及试管苗为试材,采用冷阴极荧光灯(CCFL)光源的白光(W)、红光(100%R)、蓝光(100%B)、60%R+40%B、70%R+30%B、80%R+20%B 6种不同光质配比,以普通荧光灯(PGFL)作为对照,探讨不同光源及不同光质比处理对铁皮石斛原球茎增殖及试管苗生长状况的影响。结果表明:铁皮石斛原球茎在光质比为70%R+30%B处理下增殖效果最好,增殖率为89.01%,比对照提高40.0个百分点。株高随红光比例的增加呈升高趋势,100%R处理达到最大值(53.25mm),比对照提高21.05%。叶数、最大叶宽和根数均在60%R+40%B处理下达到最大值,分别为7.6片、9.95mm、6.9条,比对照提高38.18%、60.48%、27.78%。最大叶长和根长均在80%R+20%B处理下达到最大值,分别为25.52mm和43.91mm,比对照提高2.33%、104.14%。总鲜质量、总干质量均以70%R+30%B处理时最大,分别为1.203 9g和0.104 8g,比对照提高189.05%、113.44%。60%R+40%B处理下叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素a/b、根系活力和可溶性糖含量均达到最大值,分别为0.80mg/g、0.34mg/g、2.35、297.66μg/(g.h)、43.35%,比对照提高33.33%、30.77%、1.73%、150%和12.36个百分点。CCFL红蓝光比例为6∶4时,更有利于铁皮石斛试管苗光合作用以及干物质和糖的积累。