螺旋藻蛋白酶解剂的筛选与优化

[目的]筛选并优化螺旋藻蛋白酶解剂.[方法]采用酶解法初步研究了中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶对螺旋藻蛋白质的水解效果,同时研究了底物浓度和酶的添加量对水解率的影响.[结果]结果表明,蛋白酶按酶解螺旋藻蛋白质的水解率,可由高到低依次排列为:碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶.通过对酶解条件进行优化,发现碱性蛋白酶的作用效果受pH影响最大,最高水解率为60.5％(底物浓度20 g/L、E/S=4％、pH =8.9、55℃、酶解5 h).同时得出,碱性蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶的最佳底物浓度均为20 9/L,最佳酶添加量均为4％,而风味蛋白酶的最佳底物浓度为20 g/L,最佳酶添加量为2％.[结论]研究可为后续功能性多肽的提取利用提供参考依据.     

β-环糊精包合蜂王浆的工艺优化及产物稳定性分析

【目的】评价β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)包合技术制备水溶性蜂王浆的效果。【方法】通过单因素及正交试验优化β-环糊精包合技术制备水溶性蜂王浆的工艺,并对包合产物的水溶性蛋白质稳定性及包合产物水溶性进行测定。【结果】温度、pH、β-环糊精添加量及反应时间能够显著影响包合产物的水溶性蛋白质含量,β-环糊精包合蜂王浆的最佳工艺为27℃、pH 8.7、β-环糊精添加量12.50 mg/mL及反应时间5 h,最佳条件下制备的包合产物水溶性蛋白质含量为(97.28±0.15)%;包合产物水溶性蛋白在酸、碱和热条件下能够维持较高的稳定性,-20℃和4℃条件下保存60 d其外观及水溶性蛋白质含量变化无显著差异(P0.05),包合产物冻干品的水溶性极显著高于蜂王浆冻干品(P0.01)。【结论】β-环糊精包合技术能够显著提高蜂王浆水溶性蛋白的稳定性及蜂王浆水溶性。     

酶解与包合技术制备水溶性蜂王浆

为研究酶解与包合技术制备水溶性蜂王浆的效果,本研究选用4种蛋白酶及β-环糊精,参考不同反应条件,比较酶解及包合产物的水溶性蛋白质提取率。结果显示:木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、β-环糊精4∶1;β-环糊精1∶1以及β-环糊精1∶4的水溶性蛋白质提取率分别为14.10%,13.97%,24.91%,7.20%,89.38%,92.06%,91.21%,酶解及包合产物在热、酸、碱环境中具有较强的稳定性;β-环糊精1∶1、1∶4的包合产物在72 h后的水溶性蛋白质提取率为68.79%,89.45%。采用β-环糊精包合技术制备水溶性蜂王浆明显优于酶解技术,同时包合技术具有条件简易、成本低廉等优势,可用于水溶性蜂王浆的生产。研究显示,制备水溶性蜂王浆的最佳条件为添加β-环糊精1∶4为包合原料,在p H 8.737℃下搅拌反应4 h。     

响应面法优化牛骨肉蛋白液酶解工艺条件

以高压浸提后的牛骨肉蛋白液(蛋白含量2.15%)为研究对象,通过单因素和响应面法优化试验,分别研究风味蛋白酶和复合蛋白酶的酶解条件对酶解液水解度和氨基态氮含量的影响,进而优选出两种酶单独添加时的最佳酶解工艺条件。结果表明:风味蛋白酶的最佳酶解条件为酶解温度45℃、酶解时间4.3 h、酶添加量50 LAPU/g蛋白质,在此条件下水解度为15.88%;复合蛋白酶的最佳酶解条件为酶解温度45℃、酶解时间4.5 h、酶添加量15 000 U/g,在此条件下水解度达到12.78%。     

双酶分步水解低值鱼蛋白的研究

选用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶两种酶对低值鱼蛋白进行分步水解,分析各因素对鱼蛋白水解的影响,以水解度为特征性指标。单因素试验结果表明,先添加中性蛋白酶的水解效果优于先添加木瓜蛋白酶。通过L9(34)正交试验确定水解的最佳条件为水解时间为6 h,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶量比(g∶g)为3∶1,水解温度为55℃,料液比(m/V,g∶mL)为1∶10,水解效果是最好的,在此条件下水解度为35.85%。     

大黄鱼鱼肉蛋白水解制备抗氧化肽的工艺

以大黄鱼为原料,采用不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶)分别水解鱼肉,制备抗氧化肽;研究不同酶的水解效果,筛选出最佳的水解用酶;采用单因素试验,以蛋白水解度及水解液的还原力和超氧阴离子自由基(O-·2)清除力为指标,研究不同水解p H、酶添加量、水解温度、底物浓度和水解时间对水解效果的影响;在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,以水解液的还原力为评价指标,对水解工艺参数进行优化.结果表明,中性蛋白酶为水解大黄鱼的最适用酶,其最佳工艺条件为:底物浓度26.55%、水解温度46℃、水解时间7.2 h、p H 7.0、酶添加量2400 U·g-1,在此条件下,水解液的还原力达到最大(0.967),此时,O-·2清除力为87.46%,蛋白水解度为36.51%.     

蚕蛹蛋白双酶法水解工艺优化

研究了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件.在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,研究温度、脱脂蚕蛹粉浓度、水解时间、加酶量、酶质量比(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,通过正交试验优化水解工艺条件.结果表明,优化的工艺条件为脱脂蚕蛹粉浓度30 g/L,水解时间6h(其中碱性蛋白酶的水解时间为4.5 h,中性蛋白酶的为1.5 h),加酶量3％,温度55℃,酶质量比3:1,碱性蛋白酶处理时pH9.0、中性蛋白酶处理时pH7.5.在此工艺条件下蚕蛹蛋白水解度可达22.99％.     

酶解豆粕制备鲜味肽外切酶筛选与工艺优化

本试验以高温豆粕为原料,以水解度和滋味稀释因子为筛选指标,首先比较了外切酶Flavourzyme和复合蛋白酶的酶解效果,筛选出最佳外切酶为Flavourzyme。再采用单因素试验考察该酶的最适添加量、酶解pH和酶解时间。最后,通过L9(34)正交试验确定了Flavourzyme酶解高温豆粕的最佳工艺组合,即加酶量22 U/g,pH 5.8,酶解时间2.5 h,在此条件下豆粕蛋白水解度高达27.80%。     

优质复配蛋白酶解工艺研究

以优质复合蛋白液为原料,采用复合蛋白酶进行水解,得到富含多肽的多肽液,研究酶种类、酶浓度、酶解温度、酶解时间等因素对多肽浓度的影响。试验以多肽质量浓度和DPPH·自由基清除能力为指标,筛选出最佳蛋白酶和最优复配比例,通过单因素和正交试验对酶解条件进行了优化。结果表明,风味蛋白酶添加量1 000 U/g,碱性蛋白酶、中性蛋白酶按2∶1复配时为复合酶解的最佳配比;其最佳酶解条件为:酶浓度为7 000 U/g,底物浓度为3%,温度为60℃,酶解时间为3 h;在该试验条件下,多肽浓度为17.43 mg/m L。     

胰蛋白酶对核桃蛋白水解条件的优化研究

【目的】确定蛋白酶水解核桃蛋白的最佳工艺条件。【方法】在单因素分析的基础上,采用响应面分析方法对核桃蛋白的水解条件进行了优化。【结果】胰蛋白酶水解核桃蛋白的最佳反应条件为:反应时间4.0 h,底物质量浓度27 g/L,温度53.4℃,pH8.0,加酶量(E/S)8.3 g/kg,各因素对核桃蛋白水解的影响顺序为温度>加酶量>底物质量浓度。【结论】实际验证表明,利用优化的水解条件可取得较好的水解效果,水解度可达14.497%。     

生姜蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

以部分纯化的生姜蛋白酶为酶源，对该酶在水解大豆分离蛋白的最佳条件等方面进行了较为详细的探讨。研究结果表明，生姜蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳条件为：温度60℃、酶加量2．0％、pH值6．O、水解5h，此时其水解度可达7．5％。经酶解处理后的大豆分离蛋白饮料，其离心沉淀率降低，稳定性增大。     

响应面法优化不同蛋白酶制备麦麸膳食纤维

以麦麸为原料,采用3种蛋白酶（碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶）对麦麸蛋白进行水解,制备麦麸膳食纤维。根据单因素实验结果,利用响应面对加酶量、反应时间、反应pH值、反应温度进行优化,确定各酶水解麦麸蛋白的最佳工艺条件。研究结果表明,碱性蛋白酶纯化麦麸膳食纤维的效果优于胰蛋白酶和风味蛋白酶纯化的效果,其最佳工艺条件为加酶量1 136 U.mg-1蛋白,pH值8.91,酶解温度59.94℃,酶解时间2.19 h,此时水解度达24.13%,膳食纤维纯度93.28%。     

内切酶与端肽酶水解牛乳酪蛋白的研究

蛋白质经酶水解得到的多肽往往带有较明显的苦味,限制了其在食品中的应用.为优化牛乳酪蛋白的酶水解条件,采用枯草杆菌碱性蛋白酶Alcalase和风味蛋白酶Flavourzyme协同对牛乳酪蛋白进行水解,得到了Alcalase AF 2.4 L酶水解的最佳工艺条件是:底物浓度2％、pH值8.5、温度为55℃、加酶量为20μL...     

加酶提高发酵豆粕蛋白质水解度的研究

[目的]在枯草芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌这3种菌混合发酵生产发酵豆粕的基础上,通过添加酶来提高发酵豆粕的水解度。[方法]通过添加中性蛋白酶、酸性蛋白酶和纤维素酶进行单因子试验和正交试验优化。[结果]结果表明,最佳加酶条件为中性蛋白酶加酶量为20U/g,酸性蛋白酶加酶量为20U/g,纤维素酶加酶量为6U/g;并且在此加酶优化条件下,发酵豆粕的水解度由优化前的9.32%增加到19.65%。[结论]添加中性蛋白酶、酸性蛋白酶和纤维素酶能显著提高发酵豆粕蛋白质水解度。     

玉米醇溶蛋白的提取及酶解工艺研究

【目的】优化水解醇溶蛋白生产功能肽的工艺,提高玉米醇溶蛋白的应用价值.【方法】通过正交试验获得从玉米蛋白粉中提取醇溶蛋白的最佳提取时间、提取温度、料液比、乙醇浓度等提取条件;通过碱性蛋白酶和蛋白酶K对玉米醇溶蛋白进行水解生产玉米多肽.【结果和结论】通过正交试验获得了从玉米蛋白粉中提取醇溶蛋白的最佳条件,即:料液比1∶4(g/mL),60℃水浴加热,乙醇体积分数为75%,提取3 h.两步酶解法效率高于单酶解法,两步酶解法先加蛋白酶K反应后再加碱性蛋白酶时水解效果最佳.     

碱性蛋白酶水解文冠果蛋白酶的条件研究

[目的]研究碱性蛋白酶水解文冠果蛋白的最佳工艺条件。[方法]选取底物浓度、pH、温度、酶用量和水解时间为影响因素,以文冠果蛋白的水解度作为评价指标,进行单因素分析,并以此为依据采用响应曲面分析法确定碱性蛋白酶的最佳水解条件,然后对最佳条件进行验证试验。[结果]碱性蛋白酶水解文冠果蛋白的最佳工艺条件为底物浓度5%,加酶量4%,pH 9.0;在此优化条件下,水解度为19.75%。[结论]为文冠果蛋白的研究开发提供了技术参数。     

Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用及水解物的性质。[方法]通过单因素试验,研究pH值、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大豆分离蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0、温度60℃、酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,大豆分离蛋白水解度为46.13%。[结论]酶解后大豆分离蛋白的水解度达到了制备大豆多肽的要求。     

复合蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解羊骨粉的研究

为了进一步提高水解程度,以复合蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解羊骨粉,比较同步水解和顺序水解效果,确定较优水解方式和条件。结果表明两种酶的顺序水解效果不及同步水解。双酶同步水解整体上优于单酶水解,且底物浓度9%、pH7.5时各指标均高于底物浓度12%、pH6时的水解效果。本研究确定的这两种酶水解羊骨粉的方式为同步水解,条件为:骨粉添加量9%、复合蛋白酶添加量5%(E/S)、风味蛋白酶添加量为4.25%(E/S)、调节起始pH值为7.5,50℃水解315min,此时的水解度为29.21%、氨基态氮含量为27.29%、多肽生成量为87.13mg·g-1、短肽得率为57.24%,其中多肽生成量和短肽得率极显著地高于单酶水解的67.75mg·g-1和43.39%(p0.01)。     

酶法水解鲢鱼蛋白及活性碳脱腥苦的工艺研究

以鲢鱼为原料,水解度和感官评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解鲢鱼蛋白质的最佳工艺条件,并以活性炭为脱腥苦试剂,确定活性炭对鲢鱼蛋白水解液脱腥苦的最适条件。结果表明:采用微波解冻比自然解冻的水解度要高;双酶(复合蛋白酶和风味蛋白酶)水解的最佳工艺条件为:复合蛋白酶和风味蛋白酶按1∶3(W/W)混合同时水解,酶用量0.4%(W/W)、料液比1∶4(W/V)、55℃、pH6.0、水解4 h,水解度达12.55%;活性炭脱腥苦的最佳工艺条件为:添加量1.5%(W/W)、pH4.5、作用0.5 h,水解度为9.30%。在此酶解和脱腥苦条件下,制得的水解液清亮透明,气味较好,基本没有腥味和苦味。     

胃蛋白酶水解松仁蛋白的研究

[目的]优化得到胃蛋白酶水解松仁蛋白的酶解工艺,并检验水解蛋白清除自由基的效果。[方法]选用胃蛋白酶水解松仁蛋白,并进行酶解工艺优化,同时检测了松仁蛋白胃蛋白酶水解物的还原能力和清除羟基自由基的效果。以可溶性蛋白质量浓度为响应值,进行了单因素及正交试验。[结果]确定了胃蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件:酶添加量7.5 U/g干蛋白质、水解温度50℃、水解时间3.75 h、pH 2.0,各因素对结果的影响程度大小依次为pH、水解时间、酶添加量、温度。抗氧化试验表明,松仁蛋白胃蛋白酶酶解物具有清除羟基自由基的能力和还原能力。[结论]研究可为松仁的精深开发利用提供参考依据。