基因枪在植物遗传转化中的应用

基因枪法 (particlegun)又称微弹轰击法 (microprojectilebombardment,particlebombardment及biolistics) ,是一种新型的遗传转化手段[1～ 3 ] ,已受到人们的普遍重视 ,本文简要综述了基因枪法在植物转基因方面的应用情况     

基因枪轰击法在植物遗传转化研究中的应用(综述)

介绍了目前所用的几种基因枪作用的原理、使用特点及在植物遗传转化研究中应用的现状。分析了影响基因枪转化效率的一些因素。     

基因枪技术在遗传转化上的研究进展

用于植物、动物和微生物遗传转化的技术已有许多,如农杆菌法、PEG 法、显微注射法、电击法等。基因枪技术是近5年刚发展起来的转化手段。本文简明描述了基因枪技术的特点,着重阐述了基因枪技术在遗传转化上的重要进展,并指出了该技术有待解决的问题和应用前景。     

水稻基因枪转化过程中选择标记基因的研究

标记基因的利用是筛选和鉴定基因转化的细胞、组织和转基因植株的有效方法。针对目前植物遗传转化中常用的4种抗性标记基因：卡那霉素抗性基因（nptⅡ）、潮霉素抗性基因（hpt）、草丁膦（Glufosinate）抗性基因（bar）和草甘膦（Glyfosinate）抗性基因（epsps）对水稻遗传转化过程所起的选择作用的差异作了较系统的比较，得到适合水稻遗传转化的合适选择标记基因。     

抗除草剂基因在粳稻恢复系中的基因枪转化及其在后代中的表达

利用基因枪法把抗除草剂基因bar基因导入粳稻恢复系超优一号,经PCR,PCR-southern杂交分析,证明外源基因已整合到水稻基因组中,且能稳定遗传;田间喷施除草剂抗性检测结果表明,bar基因在转基因恢复系及后代中均表达,表现抗除草剂,在恢复系与不育系所配制的杂交种中,高效表达,表现高抗除草剂;部分转基因植株T1代分离比符合孟德尔显性单基因的遗传规律,即3∶1规律,部分不符合。     

基因枪技术与水稻遗传转化

基因枪技术与水稻遗传转化浙江农业大学农学系赵彬薛庆中１９９１年，Ｐ．Ｃｈｒｉｓｔｏｕ等首次应用基因枪技术获得了转基因水稻植株。基因枪转化技术不受植物种类的限制，不需要以原生质体作为转化的受体，可以将外源基因直接导入细胞、组织或器官，因而克服了根瘤农杆...     

荔枝基因枪转化研究初报

荔枝是我国南方重要的亚热带木本果树之一 .近 2 0 a来 ,国内外不少学者致力于将生物技术手段应用于荔枝品种改良研究[1 ,2 ] ,以期为荔枝育种开辟新途径 .2 0 0 0年以来 ,在已建立的荔枝体胚再生系统 [1 - 3] 的基础上 ,笔者采用基因枪法进行 gus基因 (β- gluccuronidaes gene)转化荔枝胚性愈伤组织的研究 ,初步探讨了荔枝基因枪转化的主要影响因素 ,为进一步建立荔枝遗传转化体系提供重要依据 .试验选取旺盛生长的荔枝 (“下番枝”、“元红”等品种 )胚性愈伤组织 ,将它平铺于 9cm培养皿内 (离中心约 2 cm的圆内 ) ,预处理 4h,用基因枪轰…     

植物基因工程中的基因转化系统

本详细介绍了植物基因工程中的两个基因转化系统及其转化方法并对两系统作一简要地比较。     

利用PIG基因枪进行水稻基因转化的研究

我们利用自行安装的ＰＩＧ基因枪瞬时转化水稻悬浮细胞，对其操作参数及转化条件的优化进行了研究。ＰＩＧ基因枪结构简单，操作方便，价格及维持费很低。研究结果表明，在设计参数为轰击持续时间５０ｍｓ及样品室真空度为２９～３０ｉｎ．Ｈｇ时，其它操作参数的优化值为氦气压力６０ＰＳｌ，轰击高度为１７ｃｍ，缓冲网板高度为ｇｃｍ。水稻悬浮细胞在轰击前后分别进行高渗处理（含有０．５Ｍ甘露醇的ＬＳ０．５培养基）４ｈ和１０～１６ｈ可提高转化率４倍以上，在ＤＮＡ吸附过程中，用乙醇进行后处理比用水处理可提高转化率３．８倍。另外，用金粉为ＤＮＡ载体比钨粉效果好，转化量可提高一倍以上。这些结果证实ＰＩＧ基因枪的可靠性及稳定性。这对促进ＰＩＧ基因枪在植物基因工程中的应用有着重要意义。     

植物基因转化方法及在果树上的应用

本文综述了近年来植物基因转化的方法，各种方法在实际应用中的局限性及在果树基因转化方面取得的进展。植物基因转化方法包括及农杆菌介导法和直接转化法。果树基因转化研究已在１０余个树种中取得成功，其中大多数采用杆菌介导转化法。     

水稻基因枪转化的研究

自 198 7年以来 ,基因枪转化被广泛应用于水稻转化 ,转化系统得到了优化 ,在水稻抗病虫、抗逆、品质改良方面取得了长足的进展     

基因枪介导的玉米NPR1基因的遗传转化

[目的]探索玉米基因枪转化的条件。[方法]以玉米自交系7239的幼胚胚性愈伤组织为受体材料,研究了轰击距离、气体压力、真空度和轰击次数对转化率的影响。[结果]转化时以金粉用量100μg/枪、发射点与靶细胞距离9 cm、气体压力1 350 psi、真空度25In.Hg、轰击次数2次的组合最佳。经潮霉素(Hygromycin)筛选,获得了再生植株,PCR分析及Southern杂交结果表明NPR1基因已整合到玉米基因组中,平均转化率为1.76%。[结论]该研究为玉米优良抗病品种的培育奠定了基础。     

基因枪介导转化芦荟获得转基因植株的研究

由于芦荟具有医疗、美容、保健、食用等多种功能，近年来成为研究热点。海藻糖对生物体及生物分子具有良好的非特异性保护作用，并已在食品、化妆品、分子生物学领域得到了广泛应用。将海藻糖合成酶基因转入芦荟，对于改良芦荟的商业价值有重要意义。目前为止，关于芦荟转化还没有报道。本实验将含有海藻糖合成酶otsA基因的pBI-otsA质粒与含有bar基因的pAHC25质粒混合包埋金粉子弹，利用基因枪介导的共转化法轰击预培养4～5d的芦荟茎部外植体，经在含1．0～2．0mg／L glufoslnate筛选剂的改良MS培养基上多次筛选和分化，获得了一定数量的抗性再生芽，对移栽成活的抗性再生植株进行了PCR检测。结果表明，otsA基因、nptH基因、bar基因已经整合到芦荟基因组中，首次获得了芦荟转基因植株。     

农杆菌及基因枪在禾谷类作物遗传转化中的应用

目前，外源基因导入植物细胞的方法有多种，常用的有农杆菌法和基因枪法。本文对农杆菌转化禾谷类作物的基本原理及最新动态作了简明扼要的概述，同时对基因枪类型、原理及使用方面也作了简要的介绍。     

玉米基因枪转化Bt基因的研究

以玉米自交系A188为试材,将含有Bar基因和Bt基因的质粒pBW3导入玉米幼胚内,获得了转基因抗性苗。抗性植株点杂交及Southern杂交结果显示,该基因已整合到抗性玉米植株体内,外源基因在玉米基因组内有4个拷贝。     

影响大豆基因枪转化的几个参数

利用基因枪转化大豆愈伤组织,研究了基因枪不同参数对转化效率的影响。试验表明,ＣａＣｌ２浓度、拟气压力、受体状态对转化频率有重要影响。在基因枪轰击前２４ｈ,用５Ｇｙ辐照处理愈伤组织转化效率提高明显。获得了大量经ＧＵＳ染色为蓝色的抗生愈伤组织。     

植物遗传转化技术在植物病毒抗病基因工程中的应用

本文综述了国内外利用农杆菌介导法和基因枪法等植物遗传转化技术向植物导入抗植物病毒基因的应用现状，并就利用该项生物技术来解决植物病毒病对农业生产的为害的前景进行了展望.     

基因枪介导的西瓜遗传转化研究

为了建立基因枪介导的西瓜遗传转化系统,以西瓜顶芽为受体,pBI121为供体,采用正交试验设计,研究了基因枪的扩散腔类型、轰击次数、受体的预培养和高渗处理对转化率的影响。经方差分析与差异显著性测验,预培养时间与轰击次数对转化率影响显著,而扩散腔类型和甘露醇处理质量浓度对转化率的影响不显著,经组织化学检测,有33.3%抗Kan试管苗为GUS阳性。