西藏八角莲不同部位鬼臼毒素的HPLC分析

[目的]建立了西藏八角莲[Dysosma versipellis（Hance）M.Cheng]不同部位鬼臼毒素的HPLC分析方法,并对鬼臼毒素含量进行检测。[方法]色谱条件为：色谱柱,Whates C18柱（125.0 mm×4.6 mm,5μm）;流动相,甲醇∶水（55∶45,V/V）;流速,1.0 ml/min;检测波长,290 nm;柱温,25℃;进样量,20μl。线性范围为1~200μg/ml,回归方程：y=15121x-46585,r=0.9991。[结果]西藏八角莲根、块茎、叶、叶柄、花和果实中均检测到鬼臼毒素,但是不同部位含量差异较大。其中,块茎中鬼臼毒素含量最高,为（180.50±2.74）（md）μg/g,之后依次为根中（58.83±1.59）（md）μg/g,花中（40.33±1.24）（md）μg/g,叶中（36.93±1.09）（md）μg/g,叶柄中（29.90±0.45）（md）μg/g,果实中（6.03±0.12）（md）μg/g,依次降低。[结论]该检测方法灵敏度高、稳定性好、重复性高、分离效果好,不同组织中鬼臼毒素含量以块茎中最高,果实中最低。该研究可为西藏药源植物功效成分的分析提供理论与实践指导。     

西藏八角莲种胚愈伤诱导的初探

以西藏八角莲成熟种子为材料,研究了外植体的不同处理方法、激素浓度及光照条件对愈伤诱导的影响。结果表明,在暗培养条件下,以带种胚的种子段为外植体,在MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L培养基上可以获得诱导率较高的愈伤组织,诱导率为66.7%。     

天然抗肿瘤药物鬼臼毒素的生物转化研究

[目的]筛选能够转化鬼臼毒素的菌株,得到其转化产物并鉴定结构,以期为高抗肿瘤活性天然药物的获取和研究奠定基础。[方法]采用微生物分批转化法对鬼臼毒素进行结构修饰,利用薄层色谱法和高效液相色谱法对鬼臼毒素及其转化产物进行检测,筛选出能够转化鬼臼毒素的菌株,将其中一株能够转化鬼臼毒素的菌株进行扩大培养,对其发酵液进行乙酸乙酯萃取、常规硅胶柱层析分离提取转化产物,应用现代波谱技术鉴定其转化产物结构。[结果]通过转化鬼臼毒素的研究,筛选出能转化鬼臼毒素的菌株为BS.Str-1、BS.Str-2、BS.Str-3、BS.Str-7、BS.Str-18、BS.Str-21和BS.Str-29;对BS.Str-21扩大培养,提取分离得到唯一的转化产物,经鉴定为苦鬼臼毒素。[结论]该研究表明通过生物转化的方法可以获得鬼臼毒素衍生物,该结果为高抗肿瘤活性天然药物的获取奠定了基础。     

手参组培技术与愈伤组织药用成分研究

本研究以甘孜州野生手参为对象,以手参的茎尖、根尖、侧芽三种外植体类型,结合2,4-D、6-BA、NAA三种植物生长调节剂的浓度与组合,研究不同外植体类型及植物生长调节剂对手参愈伤组织诱导的影响,探索建立手参组织培养技术体系,同时,检测愈伤组织中药用化学成分,阐明药用成分差异,对再生植株进行综合评价。结果显示茎尖的愈伤组织诱导率最高（59.5%）,在0.5mg/L NAA的条件下愈伤组织诱导率最高（59.8%）,同一浓度下,单独添加生长素的愈伤组织诱导率高于生长素和细胞分类素的组合;根尖的褐变率最高（100%）,茎尖的褐变率最低（38.5%）;经检测发现,在NAA愈伤组织中的天麻素和dactylorhin A的含量都要高于2,4-D愈伤组织中的含量。本研究结果为进一步提高手参的品质,增强我国药用植物产业的竞争力,为后续商业化的应用打下坚实的基础。     

八角莲肉桂醇脱氢酶基因的克隆和表达分析

鬼臼毒素是八角莲的重要药效成分。利用同源克隆和RACE的方法,从八角莲的根中克隆了鬼臼毒素生物合成途径肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)基因,长1 098 bp,编码由365个残基组成的氨基酸序列。八角莲CAD蛋白不含有质体定位的信号序列,与毛白杨(Populus tomentosa)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)等物种中CAD蛋白的一致性为67.25%;系统发育分析表明,它与拟南芥的At CAD7、At CAD8和AtCAD6蛋白亲缘关系较近,聚成一个簇。组织表达分析结果表明,八角莲CAD基因在根和茎中有表达,而叶片中表达不明显。本研究获得的CAD基因,为后续进行详细的功能解析,并进一步应用于鬼臼毒素的遗传调控,奠定了基础。     

吉林西部野生桔梗子叶愈伤组织诱导的研究

本试验以吉林西部野生桔梗种子为材料,以桔梗无菌苗的子叶为外植体,通过对不同激素配比,不同培养条件及培养程序的筛选,探索吉林西部野生桔梗子叶愈伤组织诱导的最佳再生体系。结果表明;吉林西部野生桔梗子叶愈伤组织诱导率较低,仅为29.17%。     

茶树根愈伤组织及发状根诱导的研究

为了获得茶树发状根，生产茶叶中的有用物质，以大田茶树的根为材料，在离体培养下对其诱导发状根．结果表明，从茶树根愈伤组织中诱导出的发状根具有生长快、无向地性、密生白色根毛和较强的分枝能力．发状根分枝，存在直接分枝和在发状根上出现瘤状突起后在其附近发生侧根2种类型．发状根及其愈伤组织轮换在不同组分的培养基上继代培养，对发状根的分化与增殖有明显的促进作用．根外植体在本研究的所有培养基上都诱导出了愈伤组织，不同品种的根外植体愈伤组织诱导率存在明显差异．     

杏离体根愈伤组织诱导及起源的研究

以杏离体根段为试材,研究了创伤、培养基对愈伤组织发生的影响及愈伤组织发生过程。结果表明,以离体云皮根段为外植体,ＭＳ为基本培养基,诱导愈伤组织较为适宜。愈伤组织是多起源的,但主要源于形成层。残存的韧皮部也可以脱分化形成愈伤组织,此外,还存在愈伤组织源于木质部的情况。     

茶树愈伤组织诱导和组织培养

茶树愈伤组织诱导培养中,外植体类型、培养基种类、激素对愈伤组织的诱导均有影响。通过对培养条件的优化,得到了愈伤组织生长的适宜培养基：MS 2,4-D 1．0 mg/L NAA 1．0 mg/L 6-BA 0．5 mg/L。同时测定了愈伤组织在45 d内的生长曲线,在培养的第39 d,愈伤组织生长可达到最大值,其鲜重最大增殖倍数为4．14倍。     

番茄的愈伤组织诱导研究

通过配置不同的培养基(MS培养基、B5培养基、以及以上两种的混合培养基)对番茄苗的茎和叶外植体进行培养,结果表明,混合培养基更有利于番茄外植体诱导生成愈伤组织,相比之下,长得快一些,诱导率较高,且褐化现象不明显;其次是MS培养基,最后是B5培养基。茎要比叶生长活力强。     

恩施珍稀濒危药用植物八角莲资源调查报告

通过对恩施土家族苗族自治州珍稀濒危药用植物八角莲[Dysosma versipellis(Hance)M.Cheng exYing]野生资源的分布、生态环境、蕴藏量等方面进行实地调查,并对近年来人类过度采挖野生资源和生态环境被破坏的严重程度进行分析,提出了相应的保护对策与建议,以促进八角莲资源的可持续利用。     

濒危植物矮沙冬青传粉生物学特性研究

[目的]阐明矮沙冬青的传粉机制,揭示影响矮沙冬青传粉成功的因素。[方法]以矮沙冬青的自然居群为研究对象,研究其花粉活力、柱头可授性、花药日散粉进程和传粉昆虫的种类、行为及访花频率。[结果]矮沙冬青花粉活力保持时间较长,I～9d内均能保持50％以上的花粉活力,0～8d内柱头均具有可授性,但柱头可授性下降很快,花后10d柱头丧失可授性：传粉昆虫主要为蜂类。昆虫的访花频率与植物的花药散粉进程高度吻合。花药日散粉、昆虫的传粉频率与环境温度密切相关、[结论]影响矮沙冬青传粉成功的因素主要有访花昆虫的数量、访花昆虫的访花频率和外界因素,     

鸡骨草总皂甙含量的积累规律研究

通过对不同产地、不同生长时期鸡骨草总皂甙含量进行测定,探讨鸡骨草皂甙积累规律。结果表明,产自广西南宁的鸡骨草总皂甙含量最高,产自广西平南的与其相近,重庆的含量最低;不同时期鸡骨草总皂甙含量呈抛物线变化,在12月底含量最高。因此,以皂甙为质量指标的鸡骨草药材宜在12月或稍后采收,这和传统采收季节相吻合。     

峨眉产雅连指纹图谱研究

[目的]建立道地药材峨眉产雅连的指纹图谱,为峨眉产雅连的品质评价提供新方法。[方法]采用RP-HPLC(DAD)法梯度洗脱测定峨眉产雅连指纹图谱,并比较分析各峰相对保留时间的RSD。[结果]初步建立了峨眉产雅连的指纹图谱,得到的指纹图谱显示出11个特征峰;通过与对照品的保留时间比较,确定其中5、7、s号峰分别为药根碱、巴马汀和小檗碱。[结论]RP-HPLC(DAD)法重现性好,可用于峨眉产雅连的品质评价。     

峨眉黄连传粉生物学研究

目的揭示峨眉黄连[Coptis omeiensis（Chen）C.Y.Cheng]开花规律与传粉特征,拟确定其繁育系统类型,为探索峨眉黄连野生居群减少成因与引种繁育奠定基础。方法观察峨眉黄连的花部综合特征与开花动态过程;运用杂交指数、花粉-胚珠比、套袋传粉实验等方法综合评价。结果峨眉黄连花期可分为3个时期,其杂交指数为4,花粉-胚珠比在474～907之间,其雄蕊-花粉粒、雌蕊-胚珠发育正常,能形成种子。结论峨眉黄连的繁育系统为兼性异交,部分自交亲和,需要传粉者,具有异花传粉的结构,又有自花传粉的趋向,在自然条件下50%以上的胚珠能形成种子,可进行种子繁育引种。     

超声波提取醉马草中生物碱的研究

[目的]研究醉马草中生物碱的超声提取工艺。[方法]采用40 kHz超声波水处理醉马草草粉,水提去渣得到滤液后,分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,在回收溶剂的情况下用减压蒸馏获取生物碱,经薄层层析和红外鉴定。[结果]正交试验选取各因素的最佳水平组合为A1B2C2D2,即最佳提取工艺条件为以料液比1∶7.5（g/ml）、温度60℃、超声功率250 W,超声时间60 min;在此条件下生物碱的提取率为2.06 mg/g;新草的生物碱的提取率为14.04 mg/g。结构鉴定结果显示,醉马草混合碱中含有苦马豆素。[结论]该方法快速有效,准确度高,可用于醉马草中生物碱的提取。     

东北地区野生花楸树种子重量·生活力和发芽能力变异研究

[目的]研究东北地区野生花楸树[Sorbus pohuashanensis（Hance）Hedl.]种子的重量、生活力和发芽能力等,为野生花楸树成熟种子品质的预测及野生资源的科学利用提供依据。[方法]以东北分布区内6个天然群体新采集种子和低温密封贮藏2年的种子为试材,研究了种子重量、生活力和发芽能力的地理分异特点及贮藏对其影响。[结果]种子重量和生活力在个体间差异极显著,且与极端最低气温呈显著负相关关系;低温贮藏降低了种子重量和生活力的变异幅度;种子发芽能力以山河群体最高,绥阳和八家子群体较低,其余群体中等。[结论]花楸树种子具有极好的耐寒性,且在贮藏过程中进行了生理后熟代谢。     

中国拟凹背蝗属的分类研究(蝗总科:斑腿蝗科)

研究了分布于中国拟凹背蝗属的种类,记述了1个新种,即无齿拟凹背蝗Pseudoptygonotus adenta-tussp.nov.,并提供了分种检索表。模式标本保存于陕西师范大学动物研究所昆虫标本室。     

壮药四方麻的显微鉴别研究

利用显微镜观察了四方麻根、茎、叶的横切面及其粉末特征。结果表明,四方麻根皮层有石细胞散在,内皮层明显,韧皮部内有石细胞,有髓部;茎韧皮部外侧有石细胞和石细胞群,中空;叶上、下表皮的气孔均为不定式气孔;粉末中可见腺毛和石细胞等。