油橄榄活性物质对大鼠运动性骨关节损伤的保护作用

油橄榄(Olea europaea L.)是一种产于地中海地区的木本油料兼果用树种,油橄榄叶及其提取物的主要活性成分是橄榄苦苷,具有抗氧化、抗炎、激活AMPK的作用。本研究试图揭示油橄榄叶提取物橄榄苦苷(OLE)对大鼠运动性骨关节损伤(EOI)的保护作用及机制。通过剪断大鼠右膝关节前后交叉韧带联合间歇性中等强度运动建立EOI大鼠模型。将大鼠分成5组：Control组、EOI组、EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组(n=12)。研究结果表明,与EOI组比较,EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组的PWT升高(P<0.05),血清SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),膝关节组织形态明显改善。与EOI组比较,EOI+25OLE组、EOI+50OLE组和EOI+100OLE组的膝关节组织p-AMPKα、PGC-1α、NRF1和TFAM蛋白表达水平升高(P<0.05)。初步结论认为：橄榄苦苷可有效减轻运动性骨关节损伤大鼠的疼痛、氧...     

艾叶黄酮异泽兰黄素对运动损伤大鼠炎症和抗氧化系统的影响

为了考察艾叶黄酮异泽兰黄素(eupatilin, EPT)对运动损伤大鼠炎症和抗氧化系统的影响。本研究将SD大鼠分组,每组20只。处理组大鼠分别灌胃不同浓度的异泽兰黄素溶液,灌胃4周。通过力竭运动诱导的运动损伤大鼠模型。对照组大鼠不建模,处理组大鼠在灌胃异泽兰黄素当天开始进行建模。分别检测了大鼠的力竭时间、心肌损伤指标(LDH, CK和c TnI)、心肌TUNEL阳性率、心肌氧化应激(SOD, CAT和MDA)和炎症(IL-1β, IL-6和TNF-α)指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2和p38 MAPK/NF-κB信号轴的蛋白表达水平。结果显示,3种剂量的异泽兰黄素均提高了大鼠的力竭时间,降低了血清LDH、CK和cTnI水平,降低了心肌组织TUNEL阳性率,升高了心肌组织SOD和CAT水平,降低了心肌组织MDA水平,降低了心肌组织IL-1β、IL-6和TNF-α水平,升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白相对表达量,降低了心肌组织Keap1蛋白相对表达量,降低了心肌组织p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化水平(P<0.05)。总之,异...     

野茼蒿提取物对CFS大鼠抗疲劳、运动行为能力和免疫力的影响

野茼蒿提取物是一种天然植物提取物,具有多种生物活性成分,其抗氧化、抗炎和抗病毒作用可能对CFS具有干预和缓解作用。本研究旨在探讨野茼蒿叶提取物对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠对抗疲劳、运动行为能力和免疫力的调节作用。通过对48只清洁级SD大鼠分组和建模,进行21 d不同剂量野茼蒿或安慰剂喂食,最后1次喂食后12 h进行股静脉采血,24 h后进行运动能力测试。经过21 d干预,疲劳和炎症指标BUN、TNF-α、IL-1β、MDA,L组和H组血清水平显著低于MC组(P<0.05);评价运动行为能力的悬挂运动测试、冷水力竭游泳测试旷场实验,L组和H组的实验结果显著优于MC组(P<0.05);机体免疫力指标lgA和lg G,L组和H组的水平显著高于MC组(P<0.05)。以上指标,H组和L组均无显著差异(P>0.05)。野茼蒿通过提升CFS大鼠抗氧化酶和免疫球蛋白水平,抑制自由基和促炎因子浓度,达到缓解疲劳、减轻抑郁焦虑和提高免疫活性的效用。     

竹叶黄酮活性物质对运动性骨骼肌损伤大鼠的干预作用及机制

竹叶提取物中的主要生物活性物质为黄酮类化合物,荭草苷作为一种竹叶提取物中主要的黄酮类化合物,本研究旨在揭示竹叶中的主要黄酮类化合物荭草苷(Orientin, ORI)对运动性骨骼肌损伤(EISMI)大鼠的干预作用及机制。将大鼠分成5组(n=12):Control组、EISMI组、EISMI+20ORI组、EISMI+40ORI组和EISMI+80ORI组。研究结果表明：与EISMI组比较,EISMI+20ORI组、EISMI+40ORI组和EISMI+80ORI组的骨骼肌形态明显改善,血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),骨骼肌SOD和GSH-Px水平升高,骨骼肌MDA水平降低(P<0.05)。与EISMI组比较,EISMI+20ORI组、EISMI+40ORI组和EISMI+80ORI组的骨骼肌p38MAPK的磷酸化水平降低(P<0.05)。与EISMI组比较,EISMI+20ORI组、EISMI+40ORI组和EISMI+80ORI组的骨骼肌Nrf2的mRNA和细胞核Nrf2蛋白相对表达量升高,Keap1的m RNA和蛋白相对表达量降低(P...     

药用植物虎杖的活性物虎杖苷对急性运动过程中骨骼肌炎症反应及氧化应激的影响

虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)是蓼科虎杖属多年生草本植物,其中一种天然活性成分虎杖甙是药用植物虎杖的提取物,具有抗炎、抗氧化、抑制血小板聚集和改善微循环等作用。本研究旨在探讨虎杖苷通过MAPKs通路对急性运动过程中骨骼肌炎症反应及氧化应激的影响。研究结果表明:通过HE染色观察,与对照组相比,模型组细胞形态崩塌,出现炎症浸润现象;与模型组相比,给药组新生肌细胞数量增多,形态趋于正常。ELISA检测结果显示,与对照组比较,模型组TNF-α、IL-6和MDA含量均显著升高(P<0.05),SOD活力显著降低(P<0.05);与模型组相比,给药组TNF-α、IL-6和MDA1表达水平均显著降低(P<0.05),SOD活力显著升高(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,模型组p-ERK1和p-ERK2蛋白表达水平降低(P<0.05),p-p38蛋白表达水平升高(P<0.05),p-JNK蛋白表达水平无显著差异(P>0.05);与模型组相比,给药组p-ERK1和p-ERK2蛋白表达水平...     

脂多糖诱导奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的研究

为了初步探讨大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎发生机制,进而为后续筛选出作用于关键信号通路靶点的药物奠定基础。试验通过组织块培养法和传代培养分离纯化得到奶牛子宫上皮细胞(Bovine endometrial epithelial cell,bEEC)。30μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激bEEC 12 h后,收集细胞用于奶牛子宫内膜上皮细胞体外炎性损伤模型的研究。通过荧光定量RT-PCR检测LPS作用于bEEC 2、6、9、12 h后细胞内IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达,然后通过Western-blot检测LPS诱导bEEC NF-кB和MAPKs相关蛋白的表达。结果表明：30μg/mL的LPS作用b EEC细胞2、6、9、12 h可极显著(P<0.01)诱导IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达。LPS可上调MAPKs相关蛋白P38、ERK、JNK的磷酸化水平(P<0.01),促使NF-κB抑制蛋白IκBα的降解(P<0.05)。说明LPS可激活MAPKs和NF-кB信号通路,诱导大量炎症介质的...     

山楂提取物牡荆素鼠李糖苷对力竭训练大鼠心肌损伤的保护作用

山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)提取物牡荆素鼠李糖苷(vitexin-2"-O-rhamnoside, VOR)是一种黄酮苷类化合物,具有心脏保护作用。本实验旨在考察牡荆素鼠李糖苷对力竭训练大鼠心肌损伤的保护作用。本实验通过力竭游泳建立了力竭训练大鼠模型,训练当天对大鼠分别灌胃3个剂量(20, 40和80 mg/kg)的牡荆素鼠李糖苷,共给药4周。然后检测了大鼠的力竭时间、心肌损伤指标(LDH, CK和cTnI)、心肌形态、心肌氧化应激(SOD, CAT和MDA)和炎症(IL-1β, IL-6和TNF-α)指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2、Keap1、HO-1、NQO-1、p38 MAPK、p-p38 MAPK、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果表明,3种剂量的牡荆素鼠李糖苷均提高了大鼠的力竭时间,降低了血清LDH、CK和cTnI水平,升高了心肌组织SOD和CAT水平,降低了MDA水平,降低了心肌组织IL-1β、IL-6和TNF-α水平,升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白相对表达量,降...     

纳米硒对热应激虹鳟血清抗氧化指标和免疫指标的影响

为研究纳米硒对热应激下虹鳟血清抗氧化指标和免疫指标的影响,选取平均体质量约80 g的8月龄虹鳟600尾,随机分为3组,其中,对照组饲喂基础日粮,处理组分别饲喂添加了5,10 mg/kg纳米硒的日粮,在虹鳟适宜生长水温(18℃)条件下饲喂9 d在24℃(虹鳟产生热应激)下热应激48 h;分别在热应激前(18℃,0,3,6,9 d)和热应激(24℃,4,8,12,24,48 h)每组随机取10尾鱼,采集血清,测定抗氧化和免疫指标。结果发现,相比对照组添加纳米硒显著提高了血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和球蛋白(GLB)含量;热应激下谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量降低,过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)的含量升高,纳米硒提高了GSH-Px、SOD和CAT含量,降低了MDA含量;热应激使对照组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的含量逐渐升高,5 mg/kg纳米硒组在热应激4 h相比对照组TNF-α和IL-1β的含量显著提高,热应激12 h相比对照组IL-1β的含量显著降低;免疫球蛋白M(IgM)在热应激4 h含量下降,热应...     

黑木耳凝集素对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究

为解决黑木耳凝集素对RAW246.7细胞分泌IL-6、IL-1β、TNF-α、NO释放量与免疫调节作用的问题,通过40%(NH₄)₂SO₄沉淀法对黑木耳凝集素进行分离提纯,并伴随凝血活性检测、氨基酸组分检测,得到黑木耳凝集素粗品。经过AKTA蛋白纯化系统得到黑木耳凝集素纯品。使用SDS-PAGE电泳对凝集素分子量进行分析。格里斯法检测巨噬细胞RAW264.7分泌NO的情况。ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α的释放量。结果表明,黑木耳凝集素分子量约为20 kDa。通过检测发现,黑木耳凝集素对巨噬细胞RAW264.7分泌细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α有促进作用,且呈现剂量依赖,具有免疫调节的作用。     

山茱萸新苷对力竭训练大鼠心肌损伤的保护作用

山茱萸新苷(cornuside, CNS)是山茱萸(Cornus officinalis Sieb. et Zucc.)中的一种环烯醚萜苷化合物,具有心脏保护作用。为考察山茱萸新苷对力竭训练诱导的大鼠心肌损伤的保护作用,本研究通过力竭游泳建立了力竭训练大鼠模型,训练当天对大鼠分别灌胃3个剂量(10, 20和40 mg/kg)的山茱萸新苷,共给药4周。然后检测了大鼠的力竭时间、能量代谢指标、心肌损伤指标、心肌炎症和氧化应激指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2和NF-κB信号转导途径相关蛋白的表达。结果表明,3种剂量的山茱萸新苷均提高了大鼠的力竭时间,升高了肝糖原、肌糖原和NEFA水平,降低了LA和BUN水平,降低了血清LDH、CK和cTnI水平,降低了心肌组织IL-1β、IL-6和TNF-α水平,升高了心肌组织SOD和CAT水平,降低了MDA水平,升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白相对表达量,降低了Keap1和p-NF-κB p65蛋白相对表达量(P<0.05)。山茱萸新苷对上述指标的影响具有剂量依赖性(P<0.05)。本研究表明山茱萸...     

羊口疮病毒ORFV118蛋白对山羊睾丸支持细胞周期、凋亡及免疫细胞因子的影响

旨在探究羊口疮病毒ORFV118蛋白对山羊睾丸支持细胞周期、凋亡以及诱导机体免疫应答相关的4种细胞因子(IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α)表达水平的影响.在ORFV118基因克隆基础上,成功构建真核表达载体pEGFP-ORFV118;将pEGFP-ORFV118转染山羊睾丸支持细胞,Western Blot...     

苦丁茶甲醇提取物对过氧化氢诱导巨噬细胞炎症的影响

通过苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对过氧化氢诱导巨噬细胞(RAW264.7)的处理,分析苦丁茶提取物和绿原酸对氧化应激模型一氧化氮(NO),IL-6及TNF-α的影响。结果表明,苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对巨噬细胞不产生毒性,但呈剂量依赖性显著降低过氧化氢(H_2O_2)诱导巨噬细胞的NO水平(p0.05),并且显著提高过氧化氢诱导巨噬细胞的IL-6水平(p0.05)和TNF-α水平(p0.05)。苦丁茶甲醇提取物和绿原酸可降低巨噬细胞的NO来减少其氧化应激,但对过氧化氢诱导巨噬细胞的IL-6和TNF-α显著提高,似乎与过氧化氢一起促进其细胞凋亡。苦丁茶甲醇提取物和绿原酸对巨噬细胞的影响较为复杂,需要进行更进一步研究。     

传统中药黄芩苷对急性力竭运动后大鼠心肌损伤保护作用

黄芩苷(Baicalin)是从双子叶唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根中提取分离出来的一种黄酮类化合物,具有显著的抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉等生物活性。为了试图探究黄芩苷对急性力竭运动后大鼠心肌损伤的影响及可能机制。研究结果显示,与对照组比较,力竭运动组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和射血分数(LVEF)显著降低(P<0.05),左心室收缩期直径(LVIDs)和舒张期直径(LVIDd)显著升高(P<0.05);与力竭运动组比较,中、高剂量黄芩苷组大鼠LVFS和LVEF显著升高(P<0.05),LVIDs和LVIDd显著降低(P<0.05),而低剂量黄芩苷组各指标无显著变化(P>0.05)。对照组大鼠心肌组织细胞排列紧密且规则,结构清晰,染色较为均匀;力竭运动组大鼠心肌组织细胞排列紊乱,细胞质中出现空泡,染色不均匀;中、高剂量黄芩苷组心肌组织细胞排列紊乱和染色不均现象较力竭运动组大鼠得到明显改善。与对照组比较,力竭运动组大鼠心肌组织MDA含量显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px水平显著...     

乳酸抑制肿瘤坏死因子α诱导的仔猪空肠上皮细胞凋亡初探

为探讨乳酸菌主要代谢产物乳酸抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的仔猪空肠上皮细胞凋亡的作用以及保护肠黏膜屏障的部分机制,分别使用TNF-α(200μg/L)、乳酸(100μL/L)、TNF-α(200μg/L)+乳酸(100μL/L)处理仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)组,并设空白对照。用MTT法检测各组的细胞活力;用ELISA方法检测各组caspase-3的蛋白表达量和蛋白活性。结果表明：TNF-α组的细胞存活率极显著低于对照组(P＜0.01),乳酸+TNF-α组可显著升高细胞存活率(P＜0.05)。乳酸+TNF-α组caspase-3蛋白量和活性显著低于TNF-α组(P＜0.05)。乳酸可以抑制TNF-α诱导的IPEC-J2细胞损伤,抑制TNF-α诱导的caspase-3蛋白表达量和蛋白活性的升高,提示乳酸菌主要代谢产物乳酸可通过抑制上皮细胞凋亡来保护肠上皮细胞,进而保护肠黏膜屏障。     

β-谷甾醇对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究

为了探究β-谷甾醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用及其可能的机制,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定β-谷甾醇对RAW 264.7细胞产生肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。给BALB/c小鼠鼻腔滴注LPS(0.5mg/kg)构建小鼠急性肺损伤模型,滴鼻24 h后检测各指标。ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中(BALF)的炎性细胞因子含量;称重法检测肺组织湿/干重比和肺含水量;HE染色法观察肺组织病理形态学变化;应用蛋白印迹法(western blot)检测小鼠肺脏中核转录因子-κB (NF-κB)信号转导通路中相关蛋白的含量变化。结果表明,β-谷甾醇能剂量依赖性降低RAW 264.7细胞上清及ALI小鼠BALF中TNF-α和IL-6的表达水平。肺脏称重结果和病理形态学结果显示β-谷甾醇可明显减轻LPS诱导的肺水肿和炎症反应。另外,western blot结果表明β-谷甾醇不仅能够下调NF-κB p65 的活化,还抑制了NF-κB阻断剂IκBα的磷酸化。β-谷甾醇对LPS所致的小鼠急性肺损伤有较好的保护作用,其保护机制可能与阻止炎症因子(TNF-α、IL-6)的释放和下调NF-κB信号转导通路的活化有关。     

红景天苷对呋喃所致小鼠肝损伤的保护作用研究

将Balb/c小鼠随机分为5组,建立试验模型,30 d后检测氧化指标MDA,SOD,GSH-Px,GST,ALT,AST和免疫指标TNF-α,IL-6,IL-10并进行数据分析,制备HE切片观察肝组织形态变化。结果表明,呋喃导致AST,ALT,MDA,TNF-α,IL-6含量升高,SOD,GSH-Px,GST,IL-10含量下降,而红景天苷各剂量组的小鼠中AST,ALT,MDA,TNF-α,IL-6水平低于呋喃组,SOD,GSH-Px,GST,IL-10含量有所回升,肝组织形态有所改善。红景天苷可以有效减缓呋喃引发的小鼠肝组织损伤。     

板蓝根粗多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

将试验小鼠分为对照、模型和剂量(低、中、高)组,建立免疫抑制模型。对照组、模型组饲喂基础饲料,剂量组分别饲喂含不同板蓝根粗多糖的饲料。6周后测小鼠血常规指标、脏/体比、血清白介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果表明,免疫抑制小鼠的白/红细胞数、血小板数和血红蛋白值均随粗多糖剂量的增加而增大;体增质量对照组最大,低、中、高剂量组和模型组依次递减;各剂量组脏/体比均明显小于对照组;各剂量组小鼠血清中IL-2和TNF-α水平均显著上升。说明板蓝根粗多糖能提升小鼠免疫功能,但对小鼠的发育有一定影响。     

脂多糖与β葡聚糖对迟钝爱德华氏菌亚单位疫苗的免疫促进效果研究

为了研究脂多糖与β葡聚糖的协同免疫促进效果,本论文重组表达了迟钝爱德华氏菌的一个高效亚单位疫苗候选蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）,利用纯化的重组GAPDH（rGAPDH）蛋白单独或混合脂多糖和β葡聚糖免疫牙鲆,免疫后通过检测牙鲆抗体水平、免疫相关基因表达及免疫保护力三方面指标变化对脂多糖和酵母β葡聚糖的免疫促进效果进行研究。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结果显示,脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆的抗体效价在免疫后第14和30天均显著高于单独免疫rGAPDH蛋白的牙鲆,在第30天时其效价为211.76;荧光定量PCR检测结果显示,相比PBS对照组,牙鲆在注射免疫后脾脏组织中IL-1β、IL-6、MHC-IIα、IgM、TCRα及C型溶菌酶6种免疫相关基因表达量均出现不同程度的上调,而其中脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆在免疫后多个时间点其基因表达水平均显著高于单独免疫rGAPDH蛋白的牙鲆;免疫保护性实验结果同样显示,脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆在攻毒后累计死亡率显著低于对照组和单独免疫rGAPDH蛋白组,直至第14天累计死亡率为30%,相对免疫保护率为68%。研究表明,脂多糖和β葡聚糖作为疫苗免疫刺激剂使用可显著增强牙鲆的免疫应答水平,提升亚单位疫苗的免疫效果。     

家兔子宫内膜细胞炎症模型的建立

摘要：胶原酶消化法分离和培养家兔子宫内膜细胞,大肠杆菌细菌脂多糖（LPS）诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段培养上清液,ELISA法测定TNF-α、IL-1β的含量。结果表明,100ng/mL LPS是体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症的最适浓度。炎症模型组培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量比同期空白组高（P＜0.01）,表明炎症模型建立成功。     

坦布苏病毒囊膜蛋白诱导的小鼠免疫应答

为了研究坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的免疫原性,利用大肠杆菌表达系统高效表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并对其诱导小鼠免疫应答进行了研究。结果表明,E蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫组小鼠血清中抗体效价均可达1∶51 200以上;同时,E蛋白可显著诱导血清中细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达,免疫组小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量均极显著高于对照组(P0.01),IFN-γ含量则显著高于对照组(P0.05);此外,与对照组相比,E蛋白还可极显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,上述结果表明,E蛋白免疫后,小鼠机体可产生显著的体液免疫和细胞免疫反应。攻毒保护性试验结果显示,攻毒后,经荧光定量RT-PCR检测,E蛋白免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏、卵巢、肾脏中坦布苏病毒载量均显著低于对照组,表明免疫E蛋白可有效抑制坦布苏病毒在小鼠各个组织中的增殖。结果表明,大肠杆菌表达的坦布苏病毒E蛋白可作为坦布苏病毒亚单位疫苗的候选抗原,为进一步预防和控制坦布苏病毒病奠定理论基础。