真姬菇子实体ITS序列和RAPD分析

为真姬菇种质资源的评价和遗传育种提供分子水平的依据和基础,采用内转录间隔区(ITS)序列和RAPD技术分析了真姬菇不同子实体的遗传差异.结果表明:供试的5个白玉菇子实体和1个蟹味菇子实体ITS序列长度均为594bp,与已报道的真姬菇菌株ITS序列相似度为99％以上;供试的6个子实体间的遗传相似度变化范围为0.4123～...     

ISSR和ITS分子标记在黑龙江省野生黑木耳遗传多样性上的应用

利用ISSR和ITS标记对黑龙江省采集的33株野生黑木耳菌株和8个黑龙江省常见栽培菌株进行遗传多样性分析,利用PCR-ISSR体系,选出9个ISSR引物对菌株DNA进行扩增,通过聚类分析对遗传多样性进行分析。结果表明,9个ISSR引物扩增条带103条条带,其中多态性条带95条,多态性比率为92.2%,平均每对引物扩增出条带11.4条,平均每对引物扩增出多态性条带10.6条,平均多态性比例为91.7%。多态性信息含量(PIC)变化在0.063~0.924之间。通过ITS序列对黑木耳菌株进行亲缘关系分析,利用软件ClustalX 1.83和MAGA 4.1进行系统发育分析分析。结果表明,黑木耳ITS1、5.8S、ITS2三个区信息为点比例达到52.1%,遗传位点丰富。两种标记方法均显示黑木耳野生菌株间遗传多样性优于栽培菌株。ISSR和ITS两种方法联合使用可得到较好结果。     

利用ITS和SRAP分子标记对黑龙江省野生黑木耳菌株进行遗传多样性分析

利用ITS和SRAP标记对黑龙江省境内采集的14株野生黑木耳菌株和一个南方栽培菌株进行遗传多样性分析.ITS序列分析结果显示:供试菌株的ITS序列变异程度较小,仅存在碱基的变化,无区域长度变异,菌株之间的遗传差异较小.利用8对引物对15个供试菌株进行SRAP扩增,共得到215条条带,其中155条为多态性条带,多态性比率...     

苦荞全基因组SSR位点挖掘及遗传多样性分析

苦荞是一种重要的杂粮作物.利用GenBank数据库中苦荞的8条染色体基因组序列进行SSR标记挖掘,并基于Primer 3.0设计SSR引物,筛选多态性高的引物进行遗传多样性评价.共检测到51 485个SSR位点,平均发生频率为114.07 Mb-1,二核苷酸重复型最多(78.20％),其次为三核苷酸重复型(17.76％...     

云南大花香水月季居群遗传多样性的SSR分析

利用简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)分子标记技术对云南省分布的8个大花香水月季天然居群遗传性进行了分析,结果表明:所选用的12对SSR引物,共扩增出72个位点,其中多态性位点70个,占总条带数的97.22%;在物种水平上,总居群的Nei's基因多样性指数(He)和香农指数(J)分别为...     

利用ITS和SRAP分子标记对中国白灵菇和欧洲侧耳属菌株进行亲缘关系鉴定

为了评价白灵菇的分类地位,采用内转录间隔区(ITS)序列分析和相关序列扩增多态性(SRAP)两种分子标记技术,系统分析了包括中国白灵菇商业菌株和欧洲Pleurotus nebrodensis菌株在内的34株侧耳属菌株的DNA多态性.ITS序列分析结果显示:供试菌株的ITS序列变异不仅表现在碱基的变异,也表现在区域长度的变异.利用7对扩增条带清晰、多态性较丰富、稳定性较好的引物对34个供试菌株进行SRAP扩增,共得到420条条带,且均为多态性条带.ITS序列分析和SRAP分析结果均显示:白灵菇和Pleurotus nebrodensis具有很近的遗传关系.将ITS和SRAP两种标记联合使用能得到更好的结果.     

黑果枸杞基因组SSR标记开发及遗传多样性分析

【目的】开发黑果枸杞基因组SSR标记并验证其有效性,为黑果枸杞SSR分子开发应用提供依据。【方法】利用Illumina Hiseq 2500测序平台对2年生的黑果枸杞Lr-01无性系的基因组进行PE150测序,用MISA软件对获得的基因组序列进行检索与分析。在此基础上,以18份宁夏枸杞、1份中国枸杞、23份黑果枸杞和6份其他枸杞种质为供试材料,利用Primer 3.0设计SSR引物,进行SSR引物筛选和多样性验证。【结果】在黑果枸杞中共检索到2 326条Scaffolds, 含有2 494个SSR位点,每5.29 kb就有1个SSR位点,优势重复基序为单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸,分别占总SSR位点的59.18%,27.11%和11.75%。重复基元类型共21种,其中类型最多的为单核苷酸重复A/T,占总数的56.05%;其次为二核苷酸重复AT/AT,占总数的12.35%。从设计的SSR引物中,随机挑选合成150对引物进行PCR扩增,筛选出10对高多态性SSR引物,分析其在48份枸杞种质中遗传参数,结果共检测到186个等位基因,平均为19个;观察杂合度、期望杂合度和多态信息含量平均值分别为0.615,0.834和0.817。UPGMA聚类分析结果表明,48份枸杞种质被分为2个类群,其中类型Ⅰ包括23份种质,全部为黑果枸杞;类型Ⅱ包括25份种质,主要为宁夏枸杞。分析结果显示,48份枸杞种质群体结构和群体种质资源遗传结构均可分为2个类群,与聚类分析结果基本一致。【结论】通过高通量测序技术开发黑果枸杞SSR标记是一种简单而高效途径,这些SSR标记为黑果枸杞种质资源的遗传多样性分析及遗传图谱构建等研究提供了可靠的标记选择。     

苎麻副产物栽培真姬菇技术研究

研究了苎麻副产物含量、p H、含水量和添加剂等栽培基质对真姬菇栽培的影响,结果表明,培养基中苎麻副产物含量50%、水分含量65.0%、p H 6.0、并添加1%的碳酸钙和1%的白糖时,栽培真姬菇的效果较好,生物学效率达158%以上。与对照棉子壳栽培效果差异不显著,表明苎麻副产物可以代替50%的棉子壳用来栽培真姬菇。     

基于家蚕转录组测序的SSR序列分析

本研究对家蚕中肠、脂肪体进行转录组测序,分析SSR位点的分布规律和特征.结果表明,从17915个Unigene中共检测到1339个SSR位点,分布在960个Unigene中.SSR位点的基序长度以1 bp为主,随着基序长度的增加,SSR位点数量逐渐减少,SSR位点间的距离和平均长度逐渐增加.家蚕SSR单核苷酸基序类型以...     

延边膜荚黄芪rDNA ITS区域克隆与序列分析

用PCR方法克隆延边地区膜荚黄芪的核糖体DNA ITS区域并进行序列分析。结果表明:延边地区膜荚黄芪ITS1的序列长度为228bp,5.8SrDNA长度为164bp,ITS2的序列长度为210bp;序列分析表明延边地区和甘肃的ITS1和5.8SrDNA完全一致,而ITS2第82位处有1个碱基的置换(T/C)。     

SSR特异标记在真姬菇中的可传递性

以真姬菇SIEF3133菌株的原生质体单核体、孢子单核体及与真姬菇SIEF3136孢子单核体的杂交菌株为材料,研究特异SSR标记H35在上述材料中的分布及传递性.结果显示:特异标记H35在真姬菇SIEF3133的原生质体单核体交配型为A2B2核中有分布,该标记与交配型因子A2存在一定的连锁性,并能跟踪具有A2交配型单核体的杂交菌株.     

海鲜菇凝固型酸奶的研制

[目的]以海鲜菇和鲜牛奶为主要原料,研制海鲜菇凝固型酸奶。[方法]以海鲜菇添加量、蔗糖添加量、接种量、发酵时间为因素,采用单因素和正交试验设计,确定最佳配方和工艺参数。[结果]海鲜菇酸奶的最佳工艺配方为,海鲜菇添加量70g·L~(-1)牛奶,蔗糖添加量9%,接种量5%,42℃下发酵5h。[结论]研制出海鲜菇酸奶新产品。     

长白山斑玉蕈的生物学特性及致濒机理

对长白山野生斑玉蕈生物学特性的研究结果表明:斑玉蕈菌丝生长利用多糖和有机氮的能力较强,菌丝生长的最适温度为25℃,最适pH值为5,最适培养料含水量为65%。在人工条件下,虽然斑玉蕈容易形成子实体原基,但子实体的发育及孢子的大量弹射所需的环境条件范围较窄、对基物的选择范围较小,这些因素可能是其野生种群稀少的内在原因。而适宜其生存的原始森林面积锐减可能是导致其种群分布面积狭小的外在原因。因此,要加强对野生斑玉蕈资源的生态调查和保护斑玉蕈的的生存环境,从而提高其种群数量。     

真姬菇的特征特性及栽培技术要点

真姬菇(Hypsizygus marmoreus)又名立蕈、立荤、斑立蕈、假松茸,其味道鲜美,营养丰富,含有种类齐全的氨基酸和抗肿瘤成分,自然分布于欧洲、北美、西伯利亚和日本等地,是一种著名的世界性食用菌,深受各国消费者的青睐,由于真姬菇独特的口感及丰富、特有的呈味物质,其售价昂贵,生产和经营效益十分可观,近年来风靡美、日、韩等国家和中国台湾地区市场.我国目前主要在山西、河北、河南、山东、福建省有小面积的栽培,随着我国农业产业结构的调整和加入WTO,真姬菇这一高档珍稀食用菌将会在我省得到很大的发展,成为农民朋友劳动致富的一个新途径.为了给我省真姬菇的栽培提供技术指导,我们经过2 a的栽培实践,初步掌握了真姬菇的栽培习性和栽培技术要点,现介绍如下.     

真姬菇富硒栽培及其成分的研究

为了对富硒真姬菇营养价值进行评估,采用真姬菇‘白玉10号’为试验菌株,菌草24号、本地配方作为富硒培养基进行栽培,对真姬菇产量、转化率、子实体性状、含硒量及子实体成分进行研究。结果表明:硒的添加浓度、添加方式及培养料差异均会对产量、转化率及性状产生影响。在硒浓度设计范围内,本地配方可获得硒含量在0.46~52.29mg·kg~(-1),是本地CK含硒量的2.7~307.6倍,24号配方可获得含硒量在1.18~84.92mg·kg~(-1),是24CK的6.94~499.53倍,子实体的含硒量与硒浓度呈正相关性。成分方面,子实体含水量、灰分和粗蛋白与硒浓度呈负相关性,而硒对子实体多糖合成有促进作用,但对总糖、脂肪的合成没有明显的促进或抑制作用。     

真姬菇多糖的提取和组分研究

研究了真姬菇多糖的提取工艺和多糖组分。结果表明,真姬菇多糖的最佳提取工艺为：浸提比1：15,浸提时间1h,浸提温度100℃;真姬菇多糖的组分为半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖。     

真姬菇热激蛋白70(HmHSP70)的纯化

SDS-PAGE电泳分析显示,经过不同浓度梯度的IPTG诱导,获得了带有重组质粒pET32a-c(+)/HmH-SP70的大肠杆菌产生可溶性重组蛋白的最佳诱导条件。当IPTG的终浓度为0.15mmol/L时,诱导可溶性重组蛋白的量最高,重组蛋白浓度为22.5mg/ml。同时SDS-PAGE显示得到蛋白分子量约为90KDa的融合蛋白。并对诱导过程中产生的包涵体进行了变性和透析复性,使其变为可溶性蛋白;通过镍亲和层析的纯化以及肠激酶的酶切作用,最终得到纯度较高的HmHSP70,纯化后的目的蛋白分子质量约为70KDa,与预期结果吻合。     

无公害食品真姬菇工厂化生产技术规程

本规程规定了无公害食品真姬菇工厂化生产的产地环境、设施要求、生产技术、采收与分级、病虫害防治及生产档案等技术要求。适用于山东省无公害食品真姬菇的工厂化生产。     

真姬菇菌种质量评价方法的优化研究

通过液体培养、可见光谱分析,探究碳源、氮源单因素及正交优化设计对真姬菇SIEF4104与SIEF4078菌株LBL评价方法的效应,并确立了优化液体培养基组成.结果表明:不同碳源和氮源对同一菌株存在显著性差异,而碳氮源对于优劣菌株间的评价效应差异不显著,即碳氮源因素对于优劣菌株间评价结果的作用相当;相对于添加无机氮源的液体培养基,添加有机氮源的液体培养基的DR值普遍较低.