远红外辐射对萎凋叶氧化酶活性及红茶品质的影响

基于远红外特有的光热效应以及光萎凋在茶叶加工中的优越性,通过单因素试验深入分析不同时长和强度的远红外光萎凋对多酚氧化酶(PPO)活性、过氧化物酶(POD)活性及红茶生化成分和感官品质的影响.结果 表明,萎凋叶中多酚氧化酶(PPO)活性随远红外光强度的上升而上升,随远红外光时间的延长呈现先上升后下降的趋势,POD活性变化...     

栀子(Gardenia jasminoides)GGPPS基因小亚基的克隆及表达分析

香叶基焦磷酸(geranyl pyrophosphate,GPP)是单萜的前体物质,而单萜是栀子内重要的活性成分。香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)在萜类化合物、类胡萝卜素类化合物生物合成中处于关键位置,GGPPS主要分为香叶基香叶基焦磷酸合成酶大亚基(GGPPSlsu)和香叶基香叶基焦磷酸合成酶小亚基(GGPPSssu)。为了研究栀子GGPPS基因在栀子萜类生物合成中的作用,本研究成功从栀子品种‘林海一号’中提取RNA反转录合成cDNA,根据转录组测序拼接结果设计引物扩增得到栀子GGPPSssu的cDNA序列,分别命名为GjGGPPSssu1和GjGGPPSssu2,ORF区分别为1053 bp和915 bp。通过构建基因进化树,栀子GGPPSssu基因和其他植物的GGPPSssu基因聚为一类,属于香叶基香叶基焦磷酸合成酶小亚基基因。通过蛋白质序列比对表明GjGGPPSssu1有一个CxxxC(x为碱性氨基酸)的保守基元和一个FARM的保守基元,没有SARM保守基元,与SSUⅡ类基因相似;GjGGPPSssu2有两个CxxxC的保守基元,没有FARM保守基元和SARM保守基元,与SSUⅠ类基因相似。荧光定量PCR试验结果表明,GjGGPPSssu1在T4和T5时期有较高的表达水平,GjGGPPSssu2在栀子各生长时期的根部和果实中有较高水平的表达。推测GjGGPPSssu1基因与栀子黄色素合成相关,GjGGPPSssu2基因与单萜合成相关。本研究初步解析了栀子GGPPS基因的功能,为提高栀子药用品质提供了理论依据。     

一种小麦子粒赤霉素含量测定方法的建立

建立一个测定小麦(TriticumaestivumL.)子粒赤霉素含量的方法。赤霉素与浓硫酸反应,生成三环芳烃衍生物,在414nm处具有最大吸收值,在一定浓度范围内,吸光值与赤霉素的浓度成正比,符合比尔定律。通过扣除小麦子粒赤霉素提取液在414nm处的本底吸光值,排除其他杂质对赤霉素测定的干扰。小麦子粒整粒提取和磨碎提取赤霉素的效果相似。对小麦子粒样品中的赤霉素提取、净化、浓缩等过程进行了优化,建立了一套简单、快速、准确的测定小麦子粒赤霉素含量的方法。该方法的赤霉酸回收率达到97.1%。与经典的荧光测定法相比,本文建立的方法更加简便。利用该方法对几个小麦品种子粒赤霉素含量的测定结果表明,不同小麦品种子粒赤霉素含量具有较大的差异。     

利用新的外植体建立棉花高效转化系统的研究

利用陆地棉 (Gossypium hirsutum cv.Cok-er3 1 2和 G.hirsutum.晋棉 7号 ,冀合 3 2 1 ) 8～1 2 d无菌苗侧根 1 0 mm切段作为新的外植体与农杆菌 L BA440 4 p BK9(3 5 s∶∶ LUC∶∶ Nos)共培养将外源基因导入棉花 ,成功的获得转基因工程植株 ,提高了愈伤组织和转基因工程植株的转化效率。 p BK9质粒上携带的萤光素酶基因 [Lucif-erous(lux) ]为报告基因 (reporter gene) ,新霉素磷酸转移酶基因 (npt II)为选择标记基因 (markergene) ,经选择获得的转基因工程植株通过 VedioImage System进行整株活体萤光素酶基因 (lux)活性表达检测 ,获得 To 代和 T1代萤光素酶基因(lux)阳性表达植株。进行 DNA分子杂交 (South-ern blot)分析 ,证明外源基因已经整合到棉花基因组中。转基因工程植株萤光素酶基因 (lux)和新霉素磷酸转移酶基因 (npt II)在自交后代中得到保持 ,外源基因呈核基因单一位点显性遗传。     

棉花中一个钝叶醇14α-脱甲基酶基因同源基因（GhCYP51G1）的克隆、序列特征和表达分析

为研究植物固醇在棉花纤维细胞生长发育中的作用和信号传导机制,通过筛选棉花EST数据库并对目标EST序列进行整合和分析,从陆地棉栽培品种徐州142正在发育的纤维中克隆了植物固醇合成途径的重要酶基因——钝叶醇14α-脱甲基酶基因的同源基因,命名为GhCYP51G1 (GenBank登录号为EU727154)。该基因编码486个氨基酸残基,其分子量和等电点分别为55.2 kD和8.87。推导的氨基酸序列与烟草、马铃薯和葡萄等物种中CYP51家族成员有较高的同源性。而且具有钝叶醇14α-脱甲基酶序列中的典型保守结构域,如多个底物结合位点和血红素结合域。说明该克隆基因是钝叶醇14α-脱甲基酶基因的同源基因。实时定量RT-PCR的结果表明GhCYP51G1基因在快速伸长期的纤维中具有较高的表达水平,而在子叶、雌蕊和雄蕊以及开花后6 d胚珠、开花后0 d和2 d的胚珠纤维中表达水平较低。在开花后8 d的纤维细胞中GhCYP51G1的表达水平最高,这些结果说明该基因在纤维细胞的伸长生长中具有重要作用。同时在纤维生长过程中,由于生长素能够下调GhCYP51G1基因的表达,暗示植物固醇在植物激素,特别是油菜素类固醇物质和生长素的相互作用中具有一定作用。     

不同处理对冷藏“安哥诺”李果实软化相关酶活性的影响

以“安哥诺”李为试材,分别进行1-MCP+GA3、1-MCP+6-BA处理,0℃冷藏75 d,通过测定硬度和4种软化相关酶活性,研究不同处理对“安哥诺”李果实软化的影响。结果表明,1-MCP+GA3和1-MCP+6-BA处理均有效延缓了冷藏期间“安哥诺”李果实硬度的下降,并有效抑制了软化相关酶活性,从而延缓果实软化,1-MCP+GA3处理保持果实硬度效果优于1-MCP+6-BA处理。     

羊草自交不亲和性相关基因TrxLc的克隆、表达和酶活性分析

羊草是一种重要的禾本科牧草，主要分布于远东地区。硫氧化还原蛋白H (Trx h) 是一大类广泛分布于动物、植物和微生物中的小分子蛋白。在一些禾本科植物中，一种在成熟花粉中表达的Trx h，与植物的自交不亲和性有关。在本研究中, 我们克隆了羊草花粉硫氧还蛋白基因(TrxLc)的DNA和cDNA序列, 与其他禾本科植物Trx h的cDNA序列相     

以鱿鱼内脏为原料酿制鱿鱼酱油的工艺研究

以鱿鱼内脏为原料加食盐酿制鱿鱼酱油,以氨基态氮、可溶性氮和挥发性盐基氮为指标,并结合感官评定方法,研究发酵温度、pH值、加盐量等对酿制效果的影响。最终确定酿制条件如下:料液比1∶1,食盐质量分数15%,温度45℃,发酵pH值7,发酵30 d。在上述条件下酿制原料利用率高,产品色泽风味好,可溶性盐基氮、氨基态氮含量高,挥发性盐基氮含量低。     

两种不同方法对膨化食品中铝含量的检测对比

近年来,食源性疾病对人类的生命和健康造成重大危害,食品安全已成为全球性的重大战略问题。最近膨化食品中的铝超标事件频繁发生,引起了有关学者的重点关注。然而采用国标方法检验膨化食品中的铝含量还有一定的不足。对铝含量的国际检验方法进行了改进,改进后的铝含量测定方法简便,容易控制,结果精确。     

鱿鱼内脏的营养及其开发利用

按照国标方法,对鱿鱼内脏的营养成分进行检测。结果表明,鱿鱼内脏营养丰富,每100 g鱿鱼内脏中含脂肪21.15 g,蛋白质21.24 g,钙51.46 mg,铁609.07μg和磷95.88μg。此外,鱿鱼内脏消化液中还含有18种氨基酸(包括全部人体必需氨基酸),鱿鱼内脏油脂脂肪酸中含有10.58%的EPA和15.23%的DHA,非常值得研究开发与利用。     

鱿鱼内脏制备功能性短肽的初步研究

为了选取水解鱿鱼内脏效果较优的蛋白酶,并对鱿鱼内脏的水解液进行分析,测定水解液的分子量分布范围,并对洗脱液的DPPH自由基清除能力进行分析。试验选取碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对鱿鱼内脏进行水解,通过测定水解液的总氮含量、氨基态氮含量,比较各水解液的水解度、氮收率以及水解得率。经大孔树脂对胰蛋白酶水解液进行水、20%、60%、80%甲醇-水梯度洗脱,经液相质谱(LC-MS)进行分析。结果发现水解液短肽分子量范围在100~2400,其中以60%梯度洗脱的水解液分子量分布范围较为集中,且以分子量在200左右的化合物为主,对各洗脱梯度水解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力分析可知60%梯度洗脱水解液DPPH清除能力为40.21%。胰蛋白酶为水解鱿鱼内脏较优的蛋白酶,且60%甲醇-水为最优洗脱浓度。     

同步检测PMWaV-1、PMWaV-2和PMWaV-3的三重RT-qPCR方法的初步建立

目前我国菠萝产区已相继报道3种菠萝凋萎相关病毒(PMWaV-1、PMWaV-2和PMWaV-3)。通过建立这3种菠萝凋萎相关病毒实时荧光定量RT-PCR(RT-q PCR)同步定量检测方法,为菠萝凋萎病毒的定性定量研究提供技术手段。根据这3种菠萝凋萎相关病毒的外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物和Taq Man水解探针,在优化PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR反应体系后,以PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3 CP基因目的片段的重组质粒为标准品绘制标准曲线,初步建立了PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR检测方法。其中PMWaV-1标准曲线为y=-3.283logx+39.02,其扩增效率达101.7%,线性相关系数R2=0.999;PMWaV-2标准曲线为y=-3.393logx+37.53,其扩增效率为97.1%,线性相关系数R2=0.998;PMWaV-3标准曲线为y=-3.171 logx+38.48,其扩增效率为106.7%,线性相关系数R2=0.996;这表明3种菠萝凋萎相关病毒质粒标准品在同一反应体系中可稳定扩增,且线性关系表现良好,可用于后续试验。灵敏度试验数据表明,该方法对PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3的最低检测线分别为99,98,868拷贝;重复性试验表明PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR扩增曲线的标准差小于0.267,变异系数小于1.44%。这表明建立的三重RT-q PCR检测方法可快速、准确、稳定地定量检测PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3等3种病毒,为PMWaV的定性定量研究和复合侵染机制的探索提供了技术基础。     

鱿鱼墨黑色素提取及其抗紫外线性能初探

利用超声辅助碱提取法从鱿鱼加工废弃物鱿鱼墨中提取黑色素,在单因素试验的基础上通过响应面优化提取工艺,确定的最优提取条件为NaOH浓度0.68 mol/L,超声时间58 min,提取温度40℃,在此条件下的提取率可达18.2%。将制备得到的鱿鱼墨黑色素以海藻酸钙微球包埋,并应用于防晒霜中,评价其抗紫外线能力,结果表明,添加鱿鱼墨黑色素包埋的海藻酸钙微球的防晒霜吸收紫外线能力强,具备较好的防晒效果。研究结果为未来天然防晒剂的开发提供了一种选择。     

超临界CO_2萃取鱿鱼内脏油的研究

采用超临界CO2萃取法提取鱿鱼内脏油,以提油率为评价指标,研究萃取鱿鱼内脏油夹带剂、萃取压力、萃取温度、萃取时间对提油率的影响,得到最佳提取工艺条件为:无夹带剂,萃取压力30 MPa,萃取温度40℃,萃取时间30 min,在此条件下鱿鱼内脏的提油率为64.79%。气相色谱分析结果表明,提取的鱿鱼内脏油脂肪酸组成为:辛酸(2.97%)、十三酸(14.11%)、豆蔻酸(1.90%)、硬脂酸(5.30%)、油酸(14.64%)、反亚油酸(2.17%)、γ-亚麻酸(18.02%)、花生酸(9.49%)、花生油酸(4.35%)、山嵛酸(3.84%)、EPA(8.10%)、DHA(15.10%)。     

钼酸铵法测定水稻过氧化氢酶活性

钼酸铵法测定植物CAT活性,具有准确、方便、高效的特点.以内两优6号、秀水09的剑叶为材料,通过与紫外吸收法准确度和精确度的比较,来验证该方法的可靠性.结果表明,两种方法结果均值接近,没有显著性差异.紫外吸收法的变异系数分别是0.78%和0.58%,钼酸铵法的变异系数分别是0.35%和0.42%.     

干燥工艺对鱿鱼干燥效果和品质的影响

采用4种干燥工艺干制鱿鱼,结合鱿鱼的干燥曲线、干燥时间、最终水分含量和设备的单位能耗除湿量,评价干燥效果;同时测定鱿鱼干的挥发性盐基氮(TVB-N)含量,进行微观结构分析和感官评价,研究干燥工艺对鱿鱼干燥效果和品质的影响.结果表明:热泵干燥和真空冷冻干燥有利于抑制鱿鱼TVB-N值的增加,减少干燥过程中的肌纤维结构破坏,色泽变化较少;相比热风干燥,热泵干燥更节能,但两种低温干燥方式的干燥时间都比热风干燥时间长,样品香气不足,感官上存在不足.     

MTT法检测大鼠外周血淋巴细胞增殖反应探讨与应用

为了更精准简捷地评价机体的细胞免疫状态,采用MTT比色分析法检测大鼠外周血淋巴细胞的增殖能力,并对试验的最适条件进行了探讨,然后将该法应用到Transwell共培养体系中以评价H9N2 AIV感染内皮细胞后对跨内皮淋巴细胞增殖能力的影响。结果表明：在96孔细胞培养板中接种密度为1.25×10⁶个/mL的淋巴细胞于含10% FBS的RPMI 1640培养基中培养的最适时间为48 h。感染病毒后,跨内皮淋巴细胞的增殖明显受抑制;内皮完整状态下,淋巴细胞和病毒共孵育后,活病毒的量降低,而当内皮不存在或被病毒感染后,这一现象消失。结果证明作为机体细胞免疫功能评价指标之一的淋巴细胞增殖能力可采用改良后的MTT法检测。