不结球白菜子叶原生质体培养再生植株

用 1 0g/ 10 0mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,0 1g/ 10 0mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及 10mmol/LCaCl2 ·2H2 O ,0 7mmol/LKH2 PO4 和 0 5mol/L甘露醇的混合酶液 ,从 14～ 18d苗龄的不结球白菜子叶上分离出高产率的原生质体。原生质体培养在KM8P1附加 2 ,4 D 0 5mg/L、 6 BA 0 2 5mg/L、NAA 0 5mg/L、葡萄糖 9 0g/ 10 0mL、蔗糖 1 0g/ 10 0mL、半乳糖0 0 3g/ 10 0mL液体培养基上 ,分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱导和生根培养 ,获得了再生植株。     

甘蓝型油菜子叶原生质体培养及植株再生研究

以甘蓝型油菜中双6号子叶为材料制备原生质体,采用固液结合培养,探讨了其原生质体分离、培养与再生的优化条件,获得了再生植株。结果表明:混合酶液(0.5%纤维素酶+0.1%果胶酶+0.2 mol/L甘露醇+80 mmol/L CaCl2)与SCM溶液按3∶7的比例混合,酶解14 h可获得高产率中双6号子叶原生质体;原生质体在前人设计的B、C固液相结合培养基上培养效果好;最佳分化培养基为E培养基+1.0 g/L 6-BA+0.1 g/L NAA+0.02 g/L GA3+30μmol/L AgNO3;所有再生芽均在无激素的MS培养基上生根。研究结果为建立成熟的甘蓝型油菜原生质体再生体系提供了新的配方与依据。     

矮牵牛叶肉原生质体分离条件的优化

以幼嫩叶片为试材,探讨了渗透压(甘露醇浓度)、水解酶浓度、酶解时间等关键因素对矮牵牛叶肉原生质体分离效果的影响。研究结果表明,以2%纤维素酶R-10+0.2%果胶酶Y-23+0.4%离析酶R-10+20 mmol/L 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)+0.1%牛血清白蛋白(BSA)+0.11%无水氯化钙(CaCl_2)为酶解液,在0.5mol/L甘露醇浓度下静置酶解5h,1 100r/min离心2min沉淀原生质体,原生质体产量及活性分别为2.90×106个/g和88.1%,可为后续原生质体培养及融合提供材料。     

水稻原生质体制备条件的优化及其细胞壁变化的快速检测

以疣粒野生稻和栽培稻02428的成熟种子为材料,对愈伤组织的诱导和继代、胚性悬浮细胞系建立、原生质体制备、再生细胞团分化及植株再生进行研究。结果表明:(1)水稻愈伤组织诱导的最佳2,4-D浓度为0.014mmol/L;(2)胚性悬浮细胞系建立的最佳条件为AA悬浮培养基+0.009mmol/L 2,4-D,每25mL液体培养基加入0.4g愈伤组织的初始接种量,7d的继代周期;(3)原生质体制备的最佳条件为20g/L纤维素酶+1g/L果胶酶,酶解5h,800r/min离心5min;(4)用荧光增白剂(VBL)细胞壁染色液可以快速、准确的检测原生质体制备及培养过程中细胞壁的变化情况。     

铜锌复合胁迫对菜薹种子萌发、幼苗生长及子叶生理代谢的影响

【目的】研究铜锌复合胁迫对菜薹种子萌发、幼苗生长及子叶生理代谢的影响,为探索菜薹生长发育的耐铜锌范围提供参考。【方法】以菜薹为试验材料,采用单因素随机设计,通过种子萌发试验研究铜锌复合胁迫处理(Cu~(2+)和Zn~(2+)的8个复合浓度分别为0 mmol/L+0 mmol/L、0.20 mmol/L+0.17 mmol/L、0.40 mmol/L+0.34 mmol/L、0.80 mmol/L+0.68 mmol/L、1.20 mmol/L+1.02 mmol/L、1.60 mmol/L+1.36 mmol/L、2.00 mmol/L+1.70 mmol/L和2.40 mmol/L+2.04 mmol/L)对菜薹种子萌发、幼苗生长等指标的影响。菜薹子叶中的SOD活性、CAT活性、可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸的含量均随铜锌复合胁迫的增加呈先增后减的趋势,均以处理T4 (0.80 mmol/L Cu~(2+)+0.68 mmol/L Zn~(2+))的最大,其值分别为30.76 U/(g·min)、327.81 U/(g·min)、11.24 nmol/g、15.46 mg/g、452.96μg/g;MDA含量、氧负离子产生速率(O2–)呈先减后增的趋势,以处理T4 (0.80 mmol/L Cu~(2+)+0.68 mmol/L Zn~(2+))的最小,其值分别为15.17 nmol/g和17.86 nmol/(g·min);POD活性和相对电导率呈上升趋势;发芽率、苗高、最长根长、单株鲜重和子叶光合色素含量均呈下降的趋势,均以处理T1(CK)的最大,其值分别为68.00%、1.64 cm、2.99 cm、18.32 mg、0.79 mg/g、0.20 mg/g、0.99 mg/g、0.19 mg/g。【结论】在受到铜锌复合胁迫时,菜薹种子萌发和幼苗生长受到抑制,但同时菜薹对较低的铜锌复合胁迫(0.80 mmol/L Cu~(2+)+0.68 mmol/L Zn~(2+))表现出一定的耐性。     

顶头孢霉原生质体制备、再生及带vgb基因的质粒DNA转化条件的研究

对头孢菌素C的工业生产菌种顶头孢霉(Cephalosporium acremonium)原生质体形成和再生条件进行了研究。优化后的制备及再生条件为:在蛋白胨固体培养基上培养110~120 h的菌丝体,30℃条件下经1%蜗牛酶和1%纤维素酶混合液酶解3.5 h,原生质体得率最高可达2.377×107个/mL;在以KC(0.6 mol/L KCl+25mmol/L CaCl2.2H2O)为渗透压稳定剂的再生培养基上进行培养,再生率可达40%。用pMK4-LV质粒通过电击法对原生质体进行转化,成功得到了重组子,转化率约为10个转化子/μg质粒DNA。转化子的PCR鉴定结果表明,外源基因已转入顶头孢霉基因组。     

黑果腺肋花楸原生质体分离研究

为建立有效的原生质体分离体系,研究了黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)原生质体酶解分离纯化条件。结果表明:黑果腺肋花楸愈伤组织在20g/L纤维素酶+0.5g/L果胶酶+13%甘露醇+5mmol/LMES酶解液中黑暗静置酶解10h,可获得高产量高活力的原生质体;采用500r/min离心8min分离纯化效果最好;愈伤组织比组培苗叶片分离获得的原生质体产量与活力更高。     

紫薇叶片原生质体的分离及瞬时转化

【目的】研究紫薇叶片原生质体的分离方法,并对制备的原生质体进行瞬时转化,为紫薇本源物种的基因功能分析提供技术支持。【方法】以F₁株系S047（以屋久岛紫薇（L. fauriei）为母本、紫薇品种‘Pocomoke’为父本杂交获得）及‘Ebony Embers’和‘Pocomoke’3个紫薇品种幼嫩叶片为材料,对其进行酶解,筛选最适紫薇品种,在此基础上,采用单因素试验初步筛选纤维素酶、离析酶质量浓度（5,10,15,20,25,30 g/L）及甘露醇浓度(0.4,0.6,0.8 mol/L),之后采用3因素3水平正交试验筛选纤维素酶（10,20,30 g/L）、离析酶(3,5,7 g/L)和果胶酶(2,4,6 g/L)的最适质量浓度,确定分离紫薇原生质体的最优条件。用聚乙二醇（PEG）介导法将质粒pSuper1300::GFP转化紫薇原生质体。【结果】分离原生质体的最适紫薇品种为S047株系,其在酶解过程中无褐化现象,分离液呈明亮绿色,可得到完整的原生质体;其他2个品种未分离到原生质体。单因素试验结果显示,最适的纤维素酶质量浓度为15~20 g/L,离析酶质量浓度为5~10 g/L,甘露醇浓度为0.6 mol/L。正交试验结果表明,10 g/L纤维素酶、5 g/L离析酶、4 g/L果胶酶和0.6 mol/L甘露醇混合液为最佳酶解溶液,在黑暗条件下酶解紫薇幼嫩叶片5 h,可成功分离出紫薇原生质体,其产量达28×10⁵ g^-1,破损率为14%。将纯化的原生质体进行PEG介导的转化后,在激光共聚焦荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,表明基因转化成功。【结论】获得了紫薇叶片原生质体分离体系,并成功进行了基因瞬时转化。     

菜豆叶片原生质体的分离条件

以菜豆幼嫩叶片为材料,研究了预处理、酶液组合、酶解时间、酶解方式、甘露醇浓度及纯化时的离心转速对菜豆叶片原生质体分离的影响。结果表明:菜豆叶片质壁分离1 h后,在2%纤维素酶+1%离析酶+10%甘露醇+0.1%BSA+5 mmol/L MES+10 mmol/L CaCl2·2H2O,pH为5.8的混合液中,(25±1)℃黑暗条件下振荡酶解12 h可获得大量有活力的绿色原生质体。纯化时400 r/min离心3 min效果较好。     

灵芝原生质体电融合选育高产多糖菌株的研究

采用灵芝原生质体电融合技术选育高产多糖菌株,通过电融合方法对紫芝(Ganoderma sinese )和赤芝(Ganoderma lucidnm)原生质体电融合条件进行了研究,表明灵芝原生质体电融合的最佳条件为:脉冲强度10 kV,脉冲间隙24 μs,脉冲次数3次/s,最高融合率为0.038%.10 L罐发酵结果,选育的融合菌株GL-18的生物量和多糖含量分别为17.52 g/L和1.88 g/L,均高于亲本菌株.     

农民专业合作社外部融资渠道影响因素实证研究——基于福建省调查数据

我国农民专业合作社普遍面临着资金短缺的问题,现有主要资金来源是内部融资渠道,外部融资发挥的作用较少。基于福建省农民专业合作社实地调研数据,采用回归统计分析的方法,分析了合作社外部融资渠道正规融资体系和非正规融资体系两个方面变量,探讨合作社外部融资渠道的影响因素。结果表明,合作社外部正规融资渠道影响最为显著的因素是合作社盈利能力以及负责人收入水平,有过融资历史的合作社更加容易获得正规渠道的融资;外部非正规融资渠道影响最为显著因素是负责人年龄、文化程度、合作社非正规融资历史、地区GDP、非正规融资利率,有过非正规融资历史的合作社更加容易获得非正规渠道的融资。最后从提高合作社负责人自身素质与实力,合作社提高盈利能力,合作社成员的收入水平和合作社公益性担保基金建设等方面促进农民专业合作社外部融资渠道建设,以此促进农业现代化建设。     

图书馆上游出版发行渠道建设探析

图书馆上游出版发行渠道建设与文献资源建设紧密相关，观察出版动态，研究图书市场，已成为图书馆工作的重要研究内容。     

昆虫离子通道及抗性的研究进展

对钠、氯、钾和钙离子通道的结构、药理、分子抗性及基因调控机理的研究进展进行了综述，认为研究昆虫离子通道对于害虫抗性治理和开发新农药具有重要意义。     

基于分销渠道角度的新疆兵团特色水果营销对策研究

基于新疆特色林果业销售与生产之间存在较大矛盾、竞争力比较薄弱等问题,分析了新疆生产建设兵团林果业发展现状,并从分销渠道角度探讨新疆生产建设兵团特色林果产业发展的营销对策。     

河南省上蔡县小麦品种利用现状

介绍了河南省上蔡县小麦品种市场销售的现状,阐述了正确选择优良品种是确保小麦优质高产、高效的关键技术措施,是农业生产技术中最基本、最可靠、最经济的增产途径。     

新疆混凝土渠道冻害原因及其防治措施

混凝土衬砌渠具有水利用系数大、耐久性好、强度高、便于养护管理等优点,而它的缺点是在在新疆的气候条件下易遭冻胀破坏,影响了渠道的使用功能,因此在渠道设计、施工及运行管理中要充分重视渠道的冻害。     

供应链视角下的黑龙江乳业集团营销渠道冲突预警机制研究

基于供应链原理,以揭示供应链管理与营销渠道管理的关系为前提,在分析黑龙江乳业集团营销渠道冲突管理问题及症因的基础上,探索性地建立了服务于营销渠道冲突管理的供应链模型和基于供应链视角的营销渠道冲突管理预警机制,系统地说明了两个模型构建与运行的基本规律,提炼出营销渠道冲突预警机制既可以克服传统营销渠道冲突管理内在缺陷,又能够适应于新竞争模式带来外在压力的特有优势。     

论我国村镇银行的融资问题

村镇银行作为新型农村金融机构,在其发展的四年时间中暴露出诸多的问题,其中融资问题而导致的资金来源不足已成为制约村镇银行发展的瓶颈。从内源融资和外源融资渠道,分析了村镇银行融资困境产生的原因,进而提出放宽主发起人资格限制、给予税收优惠和利率贴息、加强对村镇银行的资金监管、提高村镇银行知名度和信誉度、改善村镇银行服务体系以及扩大村镇银行融资渠道的建议。     

信息传播渠道对消费者了解转基因食品的影响——以南京市为代表

研究消费者对转基因食品的认知程度有利于增强消费者对转基因食品的了解和建立规范的转基因市场体系。而信息传播渠道对消费者了解转基因食品的认知程度存在着显著性的差异,对此,主要以问卷的形式调查了南京市消费者对转基因的认知程度,问卷的分析主要运用方差分析进行显著性检验,得出结论:目前消费者对转基因食品的认知程度为听说过但不了解或者了解一点,主要的了解渠道是电视或广播,而可信度最高的传播渠道是食品监管机制或消费者协会等部门,而且不同信息传播渠道之间也存在显著性差异。最后,从信息传播渠道及保证消费者的知情权的角度对政府正确宣传转基因提出了一系列的意见和建议。     

信息与农村经济·生产发展的实证分析

信息社会,信息对每个人都会产生影响,而要让农民富裕起来就要研究信息对农民的作用、对农村经济及生产发展的影响。通过大样本调查,实证性地揭示了农民获取信息与农民的年龄、文化程度、通讯工具、行业了解与选择、投资、家庭收入等方面有内在关联;认为信息对农民科学决策、理性选择有显著影响。