KT和TDZ对药用植物山乌龟组织培养的影响

为了快速获得药用植物山乌龟完整植株,优化组织快繁技术,本研究以山乌龟嫩茎段为实验材料,研究激动素(kinetin, KT)和噻苯隆(N’-phenyl-N’-1,2,3-thidiazol-5-yl-urea, TDZ)对山乌龟不定芽诱导、增殖和生根培养的影响,以获得最佳的培养条件。结果表明,0.2%次氯酸钠(NaClO)浸泡15 min为最适合山乌龟嫩茎段消毒的方法,污染率仅为8.31%;最有利于山乌龟不定芽萌发的培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+KT 0.5 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone, PVP) 1 g/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L,诱导不定芽数为8.42;不定芽增殖最佳培养配方为MS+KT 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭1 g/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L,增殖系数10.87;最适生根配方为1/2MS+KT 0.2 mg/L+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖15 g/L。本研究优化了山乌龟组培快繁技术,提高了繁殖系数,对其规模化生产...     

美女樱种子诱导芽组织培养

以美女樱(Verbena hybrida)种子为外植体,利用组培方法诱导成苗,成苗后进行继代和生根,建立一套美女樱种子的组培体系。结果表明：试验前一晚用蒸馏水浸泡种子达到的效果较好,并且种子需要切除两端0.01 cm处以破坏种皮才可诱导成苗,若不破坏种皮便不可生苗;所有灭菌时间只有空白对照全部污染,其余的污染率均为0,当灭菌时间为17 min时成活率和生长情况最好,为61.11%;MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.05 mg/L+GA30.5 mg/L培养基为最适诱导的培养基;MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA₃0.5 mg/L培养基为最适继代的培养基;再生苗移植到1/2MS+NAA 0.05 mg/L培养基上,植株健壮,生根率为100%;将生根培养的美女樱幼苗移栽到营养土∶珍珠岩∶蛭石=4∶2∶1的混合基质中,成活率为82.35%。本试验研究的美女樱苗具有优良性状,既解决了内蒙古园林花卉种类单一的问题,又在运输方面大大降低成本及亏损率。本研究为将非乡土树种的美女樱快速引种到内蒙古城市园林建设中提供一定借鉴作用。     

太行菊组织培养研究

对太行菊生长期间茎顶芽和带腋芽的茎段进行组培试验。结果表明,对外殖体应用0.1%的HgCl2进行表面灭菌,5min处理茎顶芽和8min处理茎段的死亡率和感染率较低。外殖体组织分化有直接生成愈伤组织、小植株体,愈伤组织和不定芽同时生成三种形式。     

甘蔗与斑茅杂交后代的SSR标记鉴定方法

为简化甘蔗与斑茅杂交后代鉴定程序、缩短鉴定时间,提高检测准确性,本研究在前期简化基因组调研测序开发的SSR引物基础上,选取部分引物对其在甘蔗DNA混液、斑茅DNA混液、主要栽培种及甘蔗与斑茅杂交后代DNA的扩增情况进行分析。结果表明,选取的381对引物在斑茅DNA混液和10个甘蔗栽培种DNA混液中有363对引物在斑茅混液中检测到扩增产物,其中86对只在斑茅混液检测到扩增产物。将上述86对引物在192个甘蔗栽培种中进行扩增分析,筛选得到4对仅在斑茅及甘蔗与斑茅的后代有特异扩增条带的特异性引物。本研究可实现简单、快速、准确鉴定甘蔗和斑茅杂交后代的斑茅血缘,有利于高效地获得真实的杂种后代,加快甘蔗和斑茅杂交后代育种进程。     

高羊茅高效组织培养再生体系的建立

植物分子育种与基因功能鉴定是建立在高效的组织培养再生体系基础上的。本研究以高羊茅(Festuca arundinacea Schreb)为材料,探讨了不同外植体状态、基本培养基类型、外源激素组合与固化剂种类与浓度对愈伤组织诱导的影响,并进行了愈伤组织分化长芽与生根研究。结果表明:愈伤组织诱导过程中,离体成熟胚比完整种子作外植体愈伤组织出现早、质量优、诱导率高;基本培养基的选择上以N6诱导率最高,MS最低;激素组合研究中高羊茅三个品种(SAFari, FirewarⅡ, Barleduc)在无6-BA培养基中,生长激素选择上都是2,4-D优于IAA,2~2.5 mg/L 2,4-D在三个品种中诱导率都在50%以上,而在添加0.5 mg/L 6-BA时诱导率都偏低;固化剂选择上则以Phytagel与Agarose二都最优,Phytagel固化剂最佳诱导浓度为2~4 g/L。分化长芽最佳培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+20 mg/L AgNO3+2%蔗糖+0.6%琼脂,生根壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.3%Phytagel。本研究为高羊茅的高效转基因体系建立与CRISPR基因功能研究提供准备。     

钙果(欧李)组织培养技术研究

中采用生物技术手段,对钙果(欧李)进行种苗组织培养技术研究,通过无性系建立、增殖培养、生根培养三个步骤,培育获得了健壮的无性系钙果试管苗。实验表明MS+BA1.0+IAA0.2是较好的诱导分化培养基;MS+BA0.5+IAA0.2培养基试管苗增殖培养较好;1/2MS+IAA0.7培养基诱导生根效果较好。     

影响植物组织培养的细胞内生微生物(初报)

在长春花,人参及其它许多植物的细胞内,发现有许多寄生的微生物.目前,尚不能确定其在分频上的位置.由于这种微生物的存在,使得组织培养等有关工作受到影响.为此,我们对它的形态、繁殖方式和寄生的部位进行了初步的观察,并对防治方法进行了初步探讨.     

外源脱落酸(ABA)对怀地黄幼苗生长的影响

本研究以怀地黄组培苗为材料,研究了不同ABA浓度对其幼苗生长效应的影响。在给定胁迫时间下,低浓度的ABA处理(0.5~1 mg/L)对怀地黄幼苗生长表现出一定的促进作用,株高、叶片数量呈现上升趋势,而高浓度ABA处理对幼苗生长表现出强烈的抑制作用,怀地黄幼苗在5 mg/L ABA浓度下为半致死状态,在10 mg/L ABA浓度下为全致死状态。     

‘异株’荨麻组织培养技术体系的建立

‘异株’荨麻是一种一年生或多年生的草本植物,既有食用价值,也具药用价值,研究‘异株’荨麻组织培养快繁技术体系很有意义。本研究以‘异株’荨麻的嫩梢茎段为外植体,采用次氯酸钠配合乙醇灭菌技术对异株荨麻的嫩梢茎段进行灭菌,在对异株荨麻外植体的初代培养、增殖培养和生根培养条件进行研究的基础上,建立了‘异株’荨麻快速繁殖的组织培养技术体系。该体系为:2%次氯酸钠5 min+75%乙醇0.5 min为最适灭菌方法;最适初代培养基为MS+0.25 mg/L 6-BA+0.25 mg/L IBA+0.25 mg/L KT+0.25 mg/L反-ZT+0.7%琼脂+3%蔗糖;最适继代增殖培养基为2/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA+0.25 mg/L反-ZT+0.7%琼脂+3%蔗糖;最适生根培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+3%蔗糖。     

花叶凤尾竹(Bambusa glaucescens f.albo)组培快繁体系的建立

花叶凤尾竹(Bambusa glaucescens f.albo-variegata)具有很高的观赏价值,但现存量少,需通过组织培养技术实现快速繁殖的目标。本研究以花叶凤尾竹当年生幼嫩带节茎段为外植体进行组织培养,探索花叶凤尾竹组织培养外植体采集时间、消毒条件、增殖和生根的最佳培养基配方。结果表明,以6月下旬采集保留叶鞘的花叶凤尾竹幼嫩带节茎段为外植体,可得到最高的存活率;最佳消毒方式为有效氯浓度1%的NaClO溶液,消毒12 min;最佳丛芽诱导和增殖的培养基为MS+0.08 mg/L TDZ+1 mg/L BA+0.2 mg/L KT;生根培养基为1/2MS+2.5 mg/L NAA。综上建立的花叶凤尾竹快繁体系,无菌苗获得率可达58.88%,增殖系数可达3.65,生根率86.67%,平均生根数3以上。本研究为快速繁育花叶凤尾竹种苗提供技术支持。     

红掌(Anthurium andraeanum)细胞工程研究进展及其在育种上的应用

红掌是一种重要的观花和观叶兼具的草本植物。植物离体培养技术已经成为红掌繁殖主要采用的方法,绝大部分品种可以通过组织培养实现再生,其推动了红掌细胞工程育种的发展。本综述总结了红掌细胞组织培养繁殖途径,包括直接获得无菌苗途径、愈伤组织诱导和不定芽再生途径、体细胞胚胎发生途径、原球茎和类原球茎途径、原生质体途径等方面的研究进展,及其花器官培养,多倍体诱导,物理化学诱变,遗传转化,体细胞无性系变异及筛选的研究在育种中的应用。并提出了红掌细胞工程研究当前存在的问题和以后的研究方向,以期为将来红掌的研究提供借鉴。     

槭属(Acer L.)植物组织培养技术的研究进展

槭属植物具有较高的观赏价值、药用价值、食用价值与材用价值,离体组织培养可提高其繁殖效率,并保持优良性状,因而成为槭属植物快速繁育的重要途径.本研究从槭属植物组织培养的离体再生途径、外植体选择、基因型、基本培养基、植物生长调节剂、培养环境等方面,总结了历年来槭属植物组织培养技术的研究成果与最新进展,并对亟待解决的问题与发展方向进行探讨与展望.对于加强对槭属不同种类植物组织培养的深入研究,提高其利用价值及种质资源保护具有重要的意义.     

低浓度玉米小斑病菌C小种毒素培养滤液诱导寄主抗性的研究

利用低浓度玉米小斑病菌C小种毒素培养滤液作为激发子诱导玉米获得抗病性。以一对同核异质玉米B37自交系为试材,采用离体叶片接种法检测适宜诱导抗性的低浓度玉米小斑病菌C小种毒素培养滤液作为激发子诱导玉米抗病性的适宜诱导浓度,测定与抗病性相关酶的变化。经用1∶50和1∶60的低浓度玉米小斑病菌C小种毒素培养滤液预处理植株,再接种高浓度(1∶10)毒素培养滤液处理的病斑面积分别为(0.30±0.14)和(0.36±0.17)mm2,而对照为(2.70±0.24)mm2,是处理的7.5~9倍,差异极显著。经0~72 h的动态检测,以1∶60预处理效果为最佳,与对照相比,苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性平均提高了23.4%,过氧化物酶(POD)活性平均提高了65.9%,有害物质丙二醛(MDA)的含量平均降低了28.2%。叶片内部所产生的生化反应与叶片表面的抗性病理反应相吻合,证实低浓度玉米小斑病菌C小种毒素滤液本身能够成功地作为激发子来诱导寄主-玉米获得抗性。     

山胡椒LgCMK基因克隆与生物信息学预测分析

CMK是MEP途径中的第四个关键酶,对于萜类合成代谢具有重要的影响。本研究基于实验室前期获得的山胡椒果实的转录组数据,经过注释筛选出CMK基因,首次从山胡椒中克隆得到萜类生物合成关键基因LgCMK并对其生物信息学预测分析。结果显示:LgCMK基因的开放阅读框为1 221 bp,编码406个氨基酸,分子量为44.78 k D,理论上等电点为6.26,属GHMP蛋白超家族。对Lg CMK蛋白的氨基酸序列理化性质进行分析,发现蛋白亲水性指数为-0.332,不稳定性指数为41.77,属于亲水性不稳定蛋白;亚细胞定位预测结果显示该蛋白定位于叶绿体中。同源性和系统进化分析结果表明,与香樟、博落回和罂粟同源蛋白相似度较高分别为96.8%、75.96%和73.0%,不同物种的CMK具有较近的亲缘关系,与香樟同属一支,亲缘关系最近。通过本研究生物信息学分析将有助于对LgCMK深层次功能探究提供借鉴作用,同时为山胡椒的种质改良提供基因资源。     

马蹄金(Dichondra repens Forst.)组织培养和快速繁殖

为了探究马蹄金组织培养及快繁技术,本研究以马蹄金为材料,使用75%的酒精和10%NaClO对不同外植体(胚根,下胚轴,子叶)进行消毒处理,在不同激素浓度配比的MS培养基中进行丛生芽诱导、愈伤组织诱导及分化,成功建立了马蹄金的组培快繁体系。结果表明:利用马蹄金下胚轴为外植体直接诱导不定芽效果较好,其最适程序为:流水冲洗30 min+75%酒精30 s+10%NaClO 9 min,污染率为5%,成活率为75%;下胚轴不定芽诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导率为93.55%,出芽指数为8.86;胚根愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%,下胚轴愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,诱导率为95.24%,子叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽诱导率为20%,平均芽数为12.83;组培苗诱导生根的最适培养基为不加激素的1/2MS培养基;生根苗以瓶盖全开的炼苗方式移栽到以河沙为基质的育苗盒中成活率为100%,且添加蒸馏水与自来水对植株生长并无明显影响。本研究成功建立了马蹄金组织培养与快繁体系,为马蹄金种质资源改良及优质种苗生产提供了技术参考。