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松材线虫乙酰胆碱酯酶1基因沉默及蛋白抑制剂 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]为提高苦参碱的杀虫效果,对松材线虫的药剂防治靶标乙酰胆碱酯酶1基因(BxACE1)进行研究.[方法]松材线虫采集自广东省内马尾松,贝曼漏斗法分离,灰葡萄孢菌苔上25℃避光培养扩繁线虫.克隆BxACE1基因全长并进行序列分析,通过基因沉默和蛋白抑制2种技术阻断该基因功能,研究苦参碱的杀虫效果,并应用Q-PCR技术鉴定RNAi效果.[结果]5′和3′序列拼接得到基因全长2 145 bp,命名为BxACE1.同源序列多序列比对表明线虫ACE的进化速度与线虫进化速度一致.蛋白质三维结构分析表明,BxACE1由14个α螺旋包围着13个β折叠,鉴于氢键数量越多结合越稳定,利用docking技术筛选出石杉碱甲是松材线虫乙酰胆碱酯酶1蛋白的较佳抑制剂.RNAi明显增加了苦参碱的杀虫效果,石杉碱甲本身对线虫毒性较小,共同施用RNAi和石杉碱甲对线虫毒性仍然较小,但RNAi处理组线虫与Inhibitor(0.03%苦参碱+1μmol· L-1石杉碱甲处理线虫)处理组线虫在24,48及72h存活率差异不显著,表明石杉碱甲处理线虫和BxA CE1基因RNAi处理效果相近.[结论与其他]通过基因沉默和蛋白抑制2种技术阻断BxACE1功能均可以提高苦参碱的杀虫效果,RNAi技术能够简单易行地证明若阻断BxACE1功能可以提苦参碱的杀虫效果,但dsRNA容易降解等因素限制了该技术在生产实践中的广泛应用.石杉碱甲可以与BxACE1稳定结合,鉴定表明石杉碱甲可以提高苦参碱的杀虫效果,具有生防药剂辅剂的开发潜力,可替代基因沉默技术实现抑制BxACE1的目的.因此,通过乙酰胆碱酯酶抑制剂石杉碱甲可阻断BxACE1的功能,进而达到提高苦参碱等植物源药剂杀虫效果的目的.ACEIs通过抑制线虫体内的乙酰胆碱酯酶的活性,使线虫体内的胆碱水平短时间内大量提高,从而导致其中毒死亡.该类具有代表性的杀虫剂是有机磷类化合物和氨基甲酸酯类化合物,大多为非可逆型ACEIs.石杉碱甲是来源于石杉科植物蛇足石杉的一种半萜生物碱,是一种高效、高选择性、可逆性的ACEIs.本研究将石杉碱甲引入松材线虫研究,是对该植物源药剂的一个新尝试. 相似文献
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为了探究圆柏内生真菌的组成、结构及其定殖部位差异,明确呼和浩特市圆柏内生真菌的资源状况,本文对呼和浩特市4种不同地点栽植的圆柏采用组织分离法进行了内生真菌的分离。结果表明:从圆柏各部位共分离到内生真菌384株,未产孢55株。经显微镜形态观察鉴定,384株产孢内生真菌分属于17属,其中交链孢属和青霉属为优势属,分离频率分别为25.0%和14.6%。不同取样部位、不同地点栽植的圆柏内生真菌的种群和数量具有一定的差异,说明圆柏生长环境的不同,内生真菌种群结构会存在一定的差异。 相似文献
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祁连山林区野生食用菌资源的开发利用 总被引:1,自引:0,他引:1
甘肃祁连山地处青藏、黄土两大高原和蒙新荒漠交会地带,境内山势相对高差悬殊,水热条件差异很大。复杂多样的环境造就了丰富多样的植物生态系统,为不同生态习性的野生食用菌繁殖生长提供了良好的自然条件。祁连山林区野生食用菌资源丰富,分布广泛,经济价值逐年上升,保护和合理开发利用林下野生食用菌资源,对于发展林下经济、落实富民兴林政策、实现生态保护和地方经济协调发展具有积极的推动作用。一、祁连山林区野生食用菌资源的分布及特点1.种类丰富。祁连山林区目前已查明的食用、药用真菌有52 相似文献
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蜡伞科野生真菌在抚顺林区中种类较多、分布广泛。其多数种类是食用菌,绿色、营养、保健等功能是一般植物食品不能比拟的。此科真菌很多种类是树木外生菌根菌,对促进林木健康生长具有重要作用。其他潜能随着现代科技的发展也将逐渐被认识。为了解林区野生蜡伞的资源状况,进行了此次专项调查研究。经过对采集的标本整理鉴定,抚顺林区中生长的野生蜡伞真菌为31种。 相似文献
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红树林是生长在热带和亚热带潮间带河口地带的耐盐植物群落,分布在南纬30°与北纬30°之间,具有盐胁迫、高矿物组成、强还原性、频繁的潮汐等特征,也使植物对营养、空间的竞争异常激烈,特殊生境使红树林植物内生真菌多样性丰富,必然会造成不同于其他生态系统的良好生物活性、独特化学结构的活性功能分子。红树属是红树林植物中分布较广泛的一个属,包括8个种,分别是红海榄、红树、红茄苳、美洲红树、Rhizophora harrisonii、R.racemosa、树冬红树和萨摩红树。迄今为止,从红树属分离出内生真菌类群已达23目41科64属,其中对拟盘多毛孢属、青霉属和毛霉属的内生真菌代谢产物研究的最为广泛;从红树属内生真菌中分离鉴定出195种天然产物,包括生物碱类、萜类化合物、香豆素类、色酮类化合物、醌类化合物、杂氧蒽醌类化合物、肽类、酚酸类化合物、内酯类等化合物,从红树属植物中发现许多结构新颖的次生代谢产物,从中国南海红树林红茄苳内生拟盘多毛孢真菌中发现一系列罕见的具有亲脂性取代基的新色酮类化合物pestalotiopsones A-F (107—112),从拟盘多毛孢属JCM2A4中发现2个具有柔性结构的补身烷型倍半萜-环青霉醛酸的新骨架化合物pestalotiopens A和B (83, 84)。此外,许多化合物显示出良好的抗肿瘤、抗菌和抗氧化等生物活性,如化合物pestalpolyol 1(119)具有很强的抑制作用,对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值为4.10μmol·L-1。从内生真菌毛霉QEN-189中分离到的吲哚生物碱rhizovarins A,B和F(46, 47, 50)对肺癌细胞A549抑制作用强,IC50值分别为11.5、6.3和9.2μmol·L-1,对白血病细胞HL-60有强抑制作用,IC50值为9.6、5和7μmol·L-1。 相似文献
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福建闽江源国家级自然保护区长柄石杉群落结构与物种多样性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对福建闽江源国家级自然保护区长柄石杉群落的植物组成、生活型谱、垂直结构和物种多样性进行了调查分析,结果表明:群落有维管植物83科154属198种,生活型谱显示群落包括藤本在内的高位芽植物占总种数的66.67%,其中以小高位芽和矮高位芽植物占优势;地下芽也占一定比例,达14.14%,且以蕨类植物为主。群落垂直结构分化明显,分为乔木层、灌木层、草本层。物种丰富度指数、Simpson指数、Shannon-Wiener指数和Pielou均匀度指数分析表明:群落草本层与灌木层的物种丰富度、物种多样性指数明显大于乔木层与层外层,而群落各层次的均匀度无显著差异。 相似文献
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从健康杨树植株的叶(芽)、皮、枝中分离获得154株内生真菌,经形态观察分类鉴定归属于3个目、5个科、13个属中.利用两点对峙培养拮抗试验、孢子萌发试验和人工接种试验,从中筛选杨树烂皮病病原菌的拮抗菌.试验结果表明所获内生真菌(4属)菌株对病原菌菌丝生长和孢子萌发均存在不同程度的抑制作用,其中,青霉属真菌(Penicillium sp.)的菌株拮抗效果表现最明显.青霉菌可迅速对病原菌菌落包围、覆盖,从而使植物病原菌生长受到抑制,孢子萌发试验中,3 d的培养滤液就可对病原菌孢子萌发产生抑制作用,表现出一定的生防潜能. 相似文献
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红树林真菌的生物多样性和生物工程应用潜力(英文) 总被引:5,自引:0,他引:5
本文对现今红树林真菌研究的热点领域进行了综述,包括红树林真菌的生物多样性,生态作用,新颖的代谢产物和生物工程应用前景四个方面。首先,红树林真菌按照其生态作用被分为腐生,寄生和内生真菌。其中腐生真菌对于红树林生态系统的降解和能量循环方面起着重要的作用,另外,它们也会产生一些毒素:寄生真菌对于红树林的存活,长势和健康程度起着重要的作用;而内生真菌分布于大部分红树之中,所产的活性物质是红树林真菌中最丰富的。其次,虽然已有大量文献报道了红树林真菌可以产生很多新酶和具有’抑菌,杀虫及其它活性的物质,并且很多由内生真菌产生的活性物质被认为对红树起着重要作用,但只有少量研究对此提供了有力的证据,因此,本文对现今应用分子技术来将红树林真菌的生态作用与其代谢产物联系起来的进展进行了讨论。最后,本文还讨论了利用代谢工程和后基因组技术来生产大量新酶和活性物质并将其商业化应用的前景。 相似文献
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为了明确越冬期枣树组织中内生真菌的种类和分布情况,并从中筛选出对枣缩果病病原有拮抗作用的内生菌株,从越冬期健康枣树的树皮、枣股、枝条中分离获得内生真菌225株,共鉴定出12个真菌属,其优势属为茎点霉属、链格孢属、毛壳菌属和镰刀菌属。研究结果表明:越冬期健康枣树组织中内生真菌分布普遍,种类丰富;不同品种、不同部位中内生真菌的种类和数量都有差异。室内平板对峙实验结果表明:在225株内生真菌中,有25株内生真菌对枣缩果病病原茎点霉菌1-2有抑制作用,最高抑菌率为85.45%;有14株内生真菌对病原壳梭孢菌1-5有抑制效果,最高抑菌率为76.00%;内生真菌F7和F8对两种病原菌均有抑菌效果,而且均有明显的抑菌带,这说明上述两株菌均可产生抗菌代谢物质。 相似文献
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本文主要论述兰科植物内生真菌及其内生真菌对宿主植物的入侵生理生态效应,包括促进宿主植物生长,提高宿主植物的抗逆性以及诱导子效应和微生态效应,并探讨内生真菌在兰科植物生产应用和科学研究的方向。 相似文献
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为研究NL351杨树上的真菌种类,对其杨木边材进行了组织分离,通过纯化培养,得到了内生菌热带头梗霉(Cephaliophora tropica)。采用形态特征和分子生物技术相结合的方法对其热带头梗霉进行了确凿鉴定,并确认分布于中国的NL351杨树是热带头梗霉的新寄主,此菌在杨树上发现属于首次报道。 相似文献