细胞凋亡基因P53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义

【研究目的】探讨细胞凋亡基因p53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义;【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统;【结果】p53阳性蛋白表达于法氏囊和胸腺内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核。在不同发育阶段固始鸡法氏囊内均有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于黏膜上皮层与淋巴小结之间靠近上皮层的固有膜内,其次是淋巴小结边缘及淋巴小结与淋巴小结之间的固有膜层内。在1周龄和12周龄固始鸡胸腺内有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于胸腺小叶皮质与髓质交界处,其次是皮质内,很少出现在髓质内。p53在不同发育阶段固始鸡脾脏内均无表达;【结论】在正常生理情况下,细胞凋亡基因p53参与了固始鸡中枢免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

bcl-2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡的关系

用一步法从17 日龄来克亨SPF鸡胚和90 日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总RNA(TRNA),用鸡B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因 (bcl-2) cDNA探针进行Northern blot杂交。发现bcl-2 在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同, 成年鸡bcl-2 的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊, 而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况, 胚胎鸡法氏囊、脾脏和胸腺的细胞凋亡率分别是0.40% , 0.68% 和0.38% ; 成年鸡则是6.98% , 1.17% 和0.61% 。结果表明, 鸡bcl-2 基因通过阻抑细胞凋亡直接调控正常免疫器官的发育, 在淋巴细胞发育过程中bcl-2是免疫细胞亚型选择的重要调节物。     

bcl—2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡？…

用一步法从１７日龄来克亨ＳＰＦ鸡胚和９０日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总ＲＮＡ（ＴＲＮＡ）,用鸡Ｂ－细胞淋巴瘤／白细胞病－２基因（ｂｃｌ－２）ｃＤＮＡ探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。发现ｂｃｌ－２在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同,成年鸡ｂｃｌ－２的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊,而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况,胚胎鸡法氏囊、     

饮水硼对固始鸡中枢免疫器官发育的影响

【目的】研究饮水硼对固始鸡胸腺和法式囊质量、器官指数及组织结构发育的影响,为硼在畜禽养殖业中的正确使用提供理论论据。【方法】将240羽1 d固始鸡随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,饮水中硼质量浓度分别为0,100,200和400 mg/L,试验期6周。每周末每组取鸡10羽解剖,取胸腺和法氏囊,称质量,常规石蜡切片制作,HE染色、显微观察与摄影。【结果】(1)试验Ⅰ组4~6周固始鸡胸腺器官指数显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅲ组胸腺和法氏囊质量及器官指数显著或极显著低于同周龄对照组(P<0.05或P<0.01)。(2)试验Ⅰ组1~2周胸腺和法氏囊组织结构轻微退化,3~6周逐渐恢复并表现较明显的促进作用。试验Ⅱ组器官组织结构变化与试验Ⅰ组相似,但早期退化更为明显,且后期恢复较为缓慢。试验Ⅲ组1~2周胸腺和法氏囊组织结构退化严重,实质因淋巴细胞急剧减少而明显萎缩或急剧退化。【结论】100 mg/L硼对固始鸡中枢免疫器官早期发育有轻微抑制作用,但可明显促进其后期发育;高剂量硼(硼质量浓度≥200 mg/L)对固始鸡中枢免疫器官的发育(尤其是早期发育)有明显抑制甚至毒性作用。     

固始鸡脾脏内淋巴细胞自然凋亡的超微结构研究

为了探讨固始鸡脾脏内淋巴细胞自然凋亡的过程和超微结构的变化。应用透射电子显微镜技术,对固始鸡17日龄胚胎和4,19周龄固始鸡3组正常发育的脾脏内淋巴细胞自然凋亡的超微结构进行了研究。结果表明,脾脏内自然凋亡的淋巴细胞主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增多。核质凝集为新月形、C字形、圆环形、花瓣状等多种形态,凋亡细胞裂解为凋亡小体,最后被巨噬细胞吞噬;固始鸡胚胎和4,19周龄固始鸡脾脏内自然凋亡细胞有逐渐增加的趋势。由此可见,固始鸡脾脏内淋巴细胞存在着自然凋亡现象,凋亡细胞主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增多。     

黄芪对固始鸡免疫性能的影响

在固始鸡饲料中添加不同粒度的黄芪 ,饲养至 1 4日龄 ,对免疫器官指数、新城疫抗体水平、外周血T淋巴细胞含量进行检测 ;结果显示 ,添加黄芪的试验组 3项指标均显著高于对照组 ,并且黄芪加工粒度越细效果越好。     

锌在固始鸡不同组织器官中沉积量的动态研究

用原子吸收分光光度计法对固始鸡0,2,4,6和8周龄时各组织器官(胸肌、腿肌、肝脏、肾脏、心脏、胰脏、胫骨、趾骨、跖骨、法氏囊)的锌沉积量进行了测定。结果表明:(1)心脏中锌沉积量随周龄变化差异不显著(P>0.05);肝脏中锌沉积量随周龄变化差异显著(P<0.05);肾脏、胰脏、法氏囊、胸肌、腿肌、胫骨、跖骨、趾骨中锌沉积量随周龄变化差异极显著(P<0.01)。(2)2周龄之后,锌在骨骼、胰脏、法氏囊中沉积量较高,在肌肉中沉积量较低,其中在胸肌中沉积量最低,明显低于其他组织器官。(3)法氏囊、胸肌、肾脏、胰脏中锌沉积量随周龄的增加逐渐减小,且差异极显著(P<0.01);腿肌、肝脏、心脏、胫骨、趾骨、跖骨中锌沉积量在0～4周逐渐上升,4～6周有下降趋势,但变化规律不明显。     

氯氨酮对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas/FasL蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮对大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Fas蛋白配体(FasLi-gand,FasL)表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机平均分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮再灌注组(缺血30 min、再灌注4 h)及高剂量氯胺酮再灌注组(缺血30 min、再灌注4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与FasL蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注前心肌细胞凋亡指数、Fas蛋白阳性染色指数与炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为4.25±2.04、1.06±0.25和0,心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数、Fas蛋白阳性染色指数和炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为12.58±1.35,11.05±3.02和8.12±3.54,低剂量氯氨酮作用组心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与炎性细胞FasL蛋白阳性染色指数分别为7.36±1.30,7.61±3.41和3.69±3.13;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与炎性细胞的FasL蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和FasL蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

黄芪及当归对增强固始鸡免疫作用的适宜配伍研究

将不同配伍比例的黄芪当归散剂按1%添加量加入到固始鸡饲料中,由0日龄饲养至14日龄,解剖取样,分别测定计算免疫器官指数、新城疫抗体水平和外周血T淋巴细胞含量,结果显示:试验组各项指标均显著高于对照组(p<0.05);黄芪的免疫增强效果优于当归;且黄芪和当归以5:1的比例配伍效果最好。     

猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡和Fas/FasL变化

为了揭示猪卵巢卵泡选择性闭锁机制,采用Real time PCR和HE染色方法,检测猪各阶段卵泡颗粒细胞中Fas和FasLmRNA表达和形态学变化;分析比较不同发育阶段卵泡中颗粒细胞Fas和FasLmRNA表达差异及细胞凋亡程度。结果表明,健康的大(5 mm)、中(3～5 mm)、小(3 mm)卵泡,早期闭锁的大、中、小卵泡以及晚期闭锁的大、中、小卵泡壁层颗粒细胞都有Fas和FasLmRNA表达。早期闭锁卵泡颗粒细胞Fas和FasLmRNA相对表达量高于健康卵泡与晚期闭锁卵泡。早期闭锁小卵泡FasLmRNA相对表达量与大、中、小健康卵泡相比均有显著差异(P0.05);状态相同的大、中、小卵泡间Fas与FasLmRNA相对表达量均无显著差异(P0.05);表明Fas/FasL系统在猪卵巢卵泡选择性闭锁过程中,对颗粒细胞凋亡具有重要的调节作用。     

仙居鸡和固始鸡胸肌肌苷酸含量的分析

采用高效液相技术,测定仙居鸡和固始鸡胸肌肌苷酸的含量。结果表明：①仙居鸡胸肌肌苷酸含量显著高于固始鸡;②仙居鸡和固始鸡胸肌肌苷酸含量性别间表现为公鸡低于母鸡,其中仙居鸡公、母鸡间差异显著;③胸肌肌苷酸含量与12周龄体重相关分析表明,仙居鸡和固始鸡胸肌肌苷酸含量与12周龄体重呈负相关,其中仙居鸡胸肌肌苷酸含量与体重相关达显著水平。     

饮水硼对固始鸡心肌组织结构发育的影响

硼及其化合物因可制成药品、防腐剂、化妆品、洗漱剂、化学肥料及消毒剂等而广泛用于工业、农业、畜牧业和医疗卫生部门[1,2].     

有机锗对雏鸡免疫器官发育的影响

本试验通过对给父母代蛋鸡饲喂在定剂量Ｇｅ－１３２,获取富锗种蛋并孵化出雏鸡,取１８０只富锗雏鸡和１３５只普通雏鸡随机分成４组和２组,采取饲料中添加Ｇｅ－１３２和ＭＤ疫苗接种处理。     

肺缺血再灌注损伤中氧化应激与Fas/FasL系统的关系

目的探讨肺缺血再灌注损伤中氧化应激与Fas/FasL系统的关系。方法采用在体兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,日本大耳白兔40只,随机分为对照组,缺血再灌注1h、3h和5h组,每组10只。对比观察各组血浆超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量和一氧化氮水平,以及肺组织细胞凋亡指数及Fas/FasL mRNA定位表达。结果缺血再灌注组肺组织凋亡指数明显高于对照组(P<0.01);再灌注后Fas、FasL mRNA在肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞及支气管上皮细胞等呈阳性表达,明显强于对照组(P<0.01);丙二醛含量随再灌注时间延长逐渐增加(P<0.01),而超氧化物歧化酶活性与一氧化氮则随再灌注时间延长有所降低(P<0.01)。结论肺缺血再灌注损伤期间,氧化应激参与Fas/FasL系统的激活。     

Penac-T对大鼠生长和免疫器官及肝脏丙二醛含量的影响

[目的]探讨Penac-T对于大鼠生长和免疫器官及肝脏羟自由基生成的影响。[方法]以8~9周龄大鼠为研究对象,分别用1500、300和60 mg/kg Penac-T给大鼠灌胃,以3 ml/kg蒸馏水灌胃为对照,处理15 d后剖检大鼠并测定大鼠的胸腺指数、脾指数和肝脏中丙二醛（MDA）的含量。[结果]试验期间大鼠发育正常,精神状态良好,活动正常,采食及饮水情况良好,无特异性疾病症状。3个试验组大鼠的增重量都比对照组明显提高。胸腺指数中剂量组和低剂量组比对照组升高,脾指数低剂量组比对照组增加。3个剂量的Penac-T对肝组织中MDA的生成都有较大抑制作用。[结论]Penac-T对大鼠的免疫器官有一定的影响。