药性菌质对提高暗纹东方鲀免疫力的影响

[目的]证明药性菌质对提高鱼类免疫力的作用。[方法]以暗纹东方鲀为对象,在中洋集团下属龙洋河鲀养殖厂进行试验,基础饲料中分别添加不同浓度的药性菌质(0.5%、1.0%、2.0%),并与不添加药性菌质的对照组进行比较。试验期间,各试验组的水质基本一致,2个月后对各组个体进行溶菌酶活力、碱性磷酸酶活力、酸性磷酸酶活力和SOD活力的测定。[结果]药性菌质能有效地促进受试组鱼体的生长,明显提高受试鱼的免疫力,其效果与添加剂量和饲喂时间长短有关。以2.0%组效果最佳,其次是1.0%组。4个组免疫能力从大到小的排序依次是:2.0%>1.0%>对照>0.5%。[结论]药性菌质的适宜添加量为2.0%;药性菌质适宜作为饲料添加剂应用在名优鱼种养殖上。     

野生及人工养殖暗纹东方魨肌肉营养成分的比较分析

[目的]为评价暗纹东方触的营养学价值，并对其人工配合饲料的研制提供科学依据。[方法]对野生及人工养殖暗纹东方触的肌肉营养成分和营养品质进行比较分析。[结果]野生暗纹东方鲍的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分含量及氨基酸总量、必需氨基酸总量、半必需氨基酸总量均高于养殖暗纹东方触。野生与养殖暗纹东方自屯4种鲜味氨基酸的总量分别为17．59％和14．44％（干重百分比），必需氨基酸指数（EAAI）分别为52和40，其构成比例均符合FAO／WHO的标准。暗纹东方鲍的第一限制性氨基酸为缬氨酸。[结论]野生及养殖暗纹东方触肌肉均为优质的动物蛋白食品，而野生暗纹东方触的蛋白质营养价值要高于养殖暗纹东方触。     

暗纹东方Tun人工催产研究

通过对暗纹东方Ｔｕｎ培育,人工催产,人工孵化,已获受精卵,表明河Ｔｕｎ人工催产是可行的。     

暗纹东方鲀SRAP-PCR体系的建立与优化

以暗纹东方鲀基因组DNA为材料,利用正交设计L16(45)对影响暗纹东方纯SRAP-PCR反应的5个因素(Mg2、Taq酶、dNTPs、模板DNA、引物)在4个水平上进行正交组合,确立了暗纹东方鲀SRAP反应最佳体系为:20 μL的PCR体系中含有Mg2+ 1.5 mmol·L-1、Taq酶0.5U、模板DNA 75 ng、dNTPs 0.15 mmol·L-1、引物0.2 μmol·L-1.利用30个暗纹东方纯样本对该体系进行验证,结果表明该体系稳定可靠.     

暗纹东方Tun精液冷藏对精子活力,受精率和孵化率的影响

用精液保存液在４℃下冷藏保存暗纹东方Ｔｕｎ（Ｆｕｇｕ ｏｂｓｃｕｒｕｓ）精液,逐日测定保存液中以及扩散到生理盐水和淡水中的精子活动时间及其对成熟卵子受精率和孵化率的影响。结果,靖子活动时间随冷藏保存时间的延长而呈指数下降;冷藏保存４ｄ精液的受精率及保存３ｄ精液的孵化率与原精液差别不明显。因此,用保存６ｄ内的精液生产上是可行的。     

咸淡水培育暗纹东方鲀仔鱼试验研究

利用已处理的池塘水、地下水混合成盐度为4～6的咸淡水培育暗纹东方纯仔鱼，通过静水充气法培育，发现刚出膜3d的仔鱼能忍受从淡水至盐度6的突然变化，平均全长12mm的稚鱼能忍受从盐度6至淡水的突然变化，培育的稚鱼无毒或弱毒，处理后的成淡水对河纯仔鱼和稚鱼无毒、安全，且提高其成活率，使稚鱼间的相互残食习性推迟和减轻。     

咸淡水培育暗纹东方纯仔鱼试验研究

利用已处理的池塘水、地下水混合成盐度为4～6的咸淡水培育暗纹东方纯仔鱼,通过静水充气法培育,发现刚出膜3d的仔鱼能忍受从淡水至盐度6的突然变化,平均全长12mm的稚鱼能忍受从盐度6至淡水的突然变化,培育的稚鱼无毒或弱毒,处理后的咸淡水对河纯仔鱼和稚鱼无毒、安全,且提高其成活率,使稚鱼间的相互残食习性推迟和减轻.     

暗纹东方鲀MyoD基因的克隆及生物信息学分析

提取暗纹东方鲀肌肉的总RNA,采用RT-PCR的方法来克隆暗纹东方鲀MyoD基因的cDNA序列,并通过生物信息学分析,对该基因所编码蛋白的理化性质、亲疏水性、亚细胞定位以及蛋白质结构等进行初步的分析和预测.结果显示,该基因编码区全长为846 bp,共编码了281个氨基酸,编码蛋白为亲水性非跨膜类蛋白,无信号肽结构,其亚细胞定位于细胞核中.系统进化树分析结果表明其与红鳍东方鲀同源性最高,亲缘关系最近.     

暗纹东方鲀精液冷藏对精子活力、受精率和孵化率的影响

用精液保存液在4 °C下冷藏保存暗纹东方鲀(Fugu obscurus) 精液, 逐日测定保存液中以及扩散到生理盐水和淡水中的精子活动时间及其对成熟卵子受精率和孵化率的影响。结果, 精子活动时间随冷藏保存时间的延长而呈指数下降; 冷藏保存4 d 精液的受精率及保存3 d 精液的孵化率与原精液差别不明显。因此, 用保存6 d 内的精液生产上是可行的。     

暗纹东方鲀胃蛋白酶的分离纯化及部分性质研究

为了探明 pH 值、温度及矿物质离子对暗纹东方鲀胃蛋白酶活性的影响效果,用暗纹东方鲀的胃为材料,经柠檬酸缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,CM-纤维素离子交换柱、Sephedex G75 层析柱纯化,获得比活为 7.13μmol/(min·mg)的胃蛋白酶.酶经聚丙烯酰胺电泳,表现为单一蛋白带,经 SDS-PAGE 测得酶的亚基相对分子质量为18 600.酶水解酪蛋白的最适温度为50 ℃,在pH2.5, ℃下酶催化酪蛋白水解的Km值为0.715 mmol/L;pH5.0, 3737 ℃下酶催化 N-卞氧羰酰 L-赖氨酸对-硝基酚酯(CBZ-Lys.pNP)的 Km 值为 0.112 mmol/L.几种矿物质离子对酶活力的影响表明,Ca2+,Mn2+,Mg2+对酶有激活作用,Zn2+,Fe2+对酶有抑制作用.     

芝芪菌质对日本沼虾生产性能和机体免疫的影响

[目的]探讨芝芪菌质对日本沼虾生产性能和机体免疫的影响。[方法]将日本沼虾随机分成2组,每组3个平行,每个平行约45尾,一组为对照组,另一组为试验组,在基础日粮中分别添加500 mg/kg芝芪菌质,饲养35 d后测定日本沼虾生长情况和血清溶菌酶、肝胰脏中碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性及肌肉中超氧化物歧化酶活性。[结果]与对照组相比,添加芝芪菌质的试验组日本沼虾的血清溶菌酶、肝胰脏碱性磷酸酶和酸性磷酸酶以及超氧化物歧化酶活性明显增高。[结论]饲喂适量的芝芪菌质能促进日本沼虾的生长和免疫力提高。     

芝芪菌质水提物抗抑郁作用研究

[目的]探讨通过“固体双向发酵”工程技术生产的药性茵质的抗忧郁功效。[方法]将雄性ICR小鼠随机分为5组,即阴性对照组（0．9％生理盐水）、阳性对照组（市售盐酸氟西汀）、高剂量组（690：0rtig／kg）、中荆量组（345．0mg／kg）和低剂量组（172．5mg／kg）,在灌胃给予受试物15d后对各组小鼠进行开场试验（OFT）、悬尾试验（脚）和强迫游泳试验（耐）,探讨芝芪茵质对小鼠行为学酌影响。[结果]中剂量组芝芪茵质和阳性对照组能显著缩1、ST和FST小鼠悬尾和游泳不动时间;对小鼠开场行为无显著影响。[结论]芝芪菌质水提物具有一定的抗抑郁作用。     

日粮添加“芝芪菌素”对蛋鸡产蛋性能和免疫功能的影响

[目的]通过检测蛋鸡产蛋性能和抗体水平,以探讨芝芪菌素对蛋鸡生产性能的影响。[方法]将140日龄罗曼商品代褐壳蛋鸡1200只随机分为4组,分别在蛋鸡日粮中添加0、0.2%、0.35%、0.5%的芝芪菌素,研究芝芪菌素对罗曼商品代褐壳蛋鸡产蛋性能和免疫力的影响。[结果]0.5%芝芪菌素处理组罗曼商品代褐壳蛋鸡的总产蛋数比对照组提高了2个。0.2%、0.35%和0.5%芝芪菌素处理组1～8月总蛋重分别比对照组提高了0.01%、1.82%和1.25%。添加芝芪菌素对罗曼商品代褐壳蛋鸡的产蛋率、耗料量和料蛋比都有一定程度的影响,但不同处理之间差异不显著(P>0.05)。饲喂芝芪菌素后,鸡血清禽流感-H5抗体都有一定程度的变化,其中40周0.5%芝芪菌素处理组比对照组提高了2.8个滴度。[结论]在蛋鸡日粮中添加一定比例的芝芪菌素可显著提高蛋鸡的产蛋性能和免疫功能,说明芝芪菌素可作为一种优良的蛋鸡饲料添加剂。     

蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量

[目的]用蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量。[方法]研究确定蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中多糖含量的最佳检测条件,测定3批芝芪菌质的多糖含量。[结果]当加入6 ml、0.05%的硫酸蒽酮溶液,在水浴中加热20 min,冷却20 min时芝芪菌质中多糖含量测定条件最优。[结论]3批芝芪菌质多糖的平均含量为0.991 3%。     

蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量

用蒽酮—硫酸法测定芝芪菌质中的多糖含量。研究确定了蒽酮-硫酸法测定芝芪菌质中多糖含量的最佳检测条件,并测定了3批芝芪菌质的多糖含量。研究得出,当加入6.0 ml、0.050%的硫酸蒽酮溶液,在水浴中加热20 min,冷却20 min时,芝芪菌质中多糖含量测定条件最优;3批芝芪菌质多糖的平均含量为0.991 3%。     

芝芪菌质中化学成分的动态变化

[目的]探讨不同发酵工艺下芝芪菌质中化学成分的动态变化,验证芝芪菌质的最佳发酵工艺。[方法]对不同发酵天数下芝芪菌质的有效成分多糖、蛋白质及总皂苷进行动态变化研究,绘制动态变化曲线。[结果]第20~25天是发生次生代谢最旺盛的时候。[结论]结合动物免疫学试验结果,确定第20~25天为发酵终点。     

“芝芪菌质”发酵配方的筛选及主要有效成分的含量测定

[目的]对芝芪菌质的不同发酵配方进行筛选,并且对芝芪菌质中总皂苷和粗多糖含量进行测定,从而为制定质量标准做前期准备。[方法]芝芪菌质的水提醇沉的浓缩液用正丁醇萃取出总皂苷;滤渣用于测定粗多糖;依照05版药典规定用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的含量。[结果]采用紫外分光光度法测定芝芪菌质中总皂苷和粗多糖的平均含量,分别为0.243 3%和1.161 6%。[结论]含2.5%黄芪药材的芝芪菌质效果更优。