嵌合体(综述)

嵌合体(Chimera)与镶嵌体(mosaic)不同,按当前遗传学或胚胎学给二者下的定义:由2或2个以上受精卵发育的复合个体,称为嵌合体;在由1个受精卵发育的个体中因基因失活类型不同或体细胞突变而产生的遗传表现性状不同的细胞群所组成的复合个体,称为镶嵌体。自Spemann(1901)最早获得嵌合体个体以来,人们先后获得了小鼠、大鼠、兔、羊、猪、牛等哺乳动物的种间嵌合体以及家养小鼠-野生小鼠、小鼠-大鼠、绵羊-山羊、牛-印度水牛、马-斑马等属间嵌合体,其中绝大部分是在70～80年代完成的。     

胚胎干细胞显微注射对小鼠和猪胚胎发育影响的研究

旨在为小鼠和猪多能性干细胞嵌合体制作提供参考,探讨胚胎干细胞(Embryonic stem cells或Embryonic germ cells,ES/EG)显微注射及受体胚胎发育时期等对胚胎发育的影响。对小鼠ES细胞和猪EG细胞分别进行研究:(1)将小鼠ES细胞分别注入小鼠桑椹胚和囊胚,比较不同发育时期受体胚胎体外培养的发育率和孵化率,以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的发育率和孵化率。结果表明,显微注射后的桑椹胚体外培养发育率和孵化率分别为94.7%和70.2%,囊胚率分别为84.6%和80.8%,注射后桑椹胚体外培养发育率极显著高于囊胚(P0.01),但注射后囊胚体外培养孵化率极显著高于桑椹胚(P0.01);未注射胚胎(注射胚胎)的体外培养发育率和孵化率分别为96.6%(89.9%)和67.8%(75.2%),未注射胚胎发育率极显著高于注射胚胎(P0.01),但注射胚胎孵化率极显著高于未注射胚胎(P0.01)。(2)将猪EG细胞分别注入猪桑椹胚、早囊、囊胚及孵化囊胚,比较不同发育时期受体胚胎移植后妊娠率以及注射胚胎和未注射胚胎体外培养的孵化率,并对猪EG细胞显微注射针和固定针的规格进行了探讨。结果表明,显微注射的桑椹胚、早囊及囊胚移植后妊娠率为67%,而显微注射的孵化囊胚移植妊娠率为0,桑椹胚、早囊及囊胚移植后受体母猪妊娠率极显著高于孵化囊胚(P0.01),由桑椹胚、早囊及囊胚注射后移植获得了两头嵌合体仔猪;显微注射和未显微注射的猪胚胎其孵化率分别为47.54%和72.97%,未注射胚胎孵化率极显著高于注射胚胎(P0.01)。确定猪EG嵌合体制作过程中,注射针外径约为30μm,内径约为25μm;固定针外直径约为130~150μm,内径约为40μm。嵌合体制作时,胚龄宜早不宜迟,桑椹胚显微注射更易操作,而且导入的时期较早,ES/EG细胞在嵌合体组织中可以有很高的贡献率,故选择桑椹胚进行注射。在本试验条件下,显微注射对小鼠胚胎发育影响不大,对猪胚胎影响较大,说明猪胚胎显微注射条件需要进一步优化。     

鸡胚胎体外操作技术的研究现状和进展（续）

5嵌合体鸡的生产　　嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前，禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作，已成为禽类转基因研究的一个热点。同时，BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体，嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞，则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。　　有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌…     

逆转录病毒载体介导的蜘蛛拖丝蛋白转基因小鼠的制备

为了建立通过转基因动物获得蜘蛛拖丝蛋白的方法,试验利用前期构建的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)逆转录病毒载体侵染小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),通过嵌合体法制备转基因小鼠,并用PCR技术进行鉴定。结果表明:成功获得嵌合体小鼠;目的基因2S-IRES-EGFP已整合入F0代及F1代嵌合体小鼠的鼠尾基因组中。说明利用逆转录病毒可成功获得表达蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)的转基因小鼠。     

猪滋养层干细胞样细胞的分离培养

滋养层干细胞(TSc)是形成胎盘组织细胞的前体细胞,与胚胎着床和胎盘形成密切相关。体外分离滋养层干细胞为研究滋养层的发育与功能提供了研究工具和基础。滋养层干细胞已经成功从小鼠附植前囊胚中获得,在猪上也有相关报道,但并没有关于6 d囊胚中分离到猪滋养层干细胞(pTSc)的报道。本试验通过对6 d孤雌囊胚透明带进行划口处理, 饲养层和基础培养液中附加碱性成纤维生长因子(bFGF)和人白血病抑制因子(hLIF)分离猪滋养层干细胞样细胞。同时,通过采用形态学和基因表达分析的方法对获得的猪滋养层干细胞样细胞进行了初步鉴定。结果显示,本试验分离得到的细胞呈现上皮样细胞形态,细胞间结合紧密,边缘光滑,核质比较大,RT-PCR结果显示表达滋养层干细胞标记基因Cdx2,体现了滋养层干细胞特征。结果表明,本试验成功在6 d孤雌囊胚分离得到猪滋养层干细胞样细胞,为后续研究猪滋养层发育提供了试验基础。     

乙型脑炎病毒与猪细小病毒混合感染猪的血清学调查

乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)均能引起猪的繁殖障碍。藤崎优次郎等首先报道日本在同一猪场内有两种病毒的存在。井出诚弥报道了JEV和PPV两种病毒的免疫试验,但未肯定结论。邬捷等提出JEV和PPV和两种病毒是四川秋季初产母猪死胎的主要原因;其后,他们用JEV苗和PPV苗免疫秋季初产母猪预防死胎的研究,获得良好效果。本文的目的是,以血清学方     

猪细小病毒(PPV)形态发生的研究

猪细小病毒(Porcine Parvovirus,简称PPV)是引起猪繁殖障碍的主要病原体之一,在世界各地广泛传播。Carwright等(1967)首先从猪流产的死胎脏器中分离到本病毒。Mayr(1968)应用电镜测定了病毒的大小。Shahrabai等(1982)应用电镜做了病毒增殖的研究。国内潘雪珠等(1983)和候世宽等(1983)也先后分离获得猪细小病毒。本文是有关猪细小病毒形态发生的报道。     

应用体外培养技术产生的嵌合体牛出生

据日本畜产研究杂志报道,日本山口大学铃木达行等研究人员,利用体外受精及体外培养技术,获得了两头嵌合体牛。其具体方法是,从屠宰场取回褐色和牛和荷兰黑白花奶牛的卵巢,用注射器从卵泡中吸取卵母细胞;用TCM—199(含5％血清和0.01mg/m1FSH)培养21小时(5％CO_2,95％O_2,38.5℃)后,再用利木赞牛和黑色和牛精液进     

猪饲喂甜菜碱和肉碱的研究结果

1.甜菜碱 对在猪日粮中添加甜菜碱(0.1%～0.2%)的大量研究主要集中在育成阶段考察甜菜碱对猪胴体品质的影响。最初Cadogan等(1993)试验报道,在屠宰前35天添加0.125%的甜菜碱,背膘降低14.8%。由于很多重要的试验细节(例如日粮中胆碱和蛋氨酸水平)不能提供,这妨碍了对现在试验结果的对比。然而,Shurson等(1994)对早期的研究进行总结得出结论,在屠宰前30     

猪囊虫病生前快速诊断的试验研究

猪囊虫病不仅影响养猪事业的发展和肉食供应,而且严重地危害人民的身体健康。因此,生前快速诊断猪囊虫病特别重要。近几年来国内已有一些学者研究这一课题,并取得很大进展,如路景泰等(1963)报道了补体结合试验,朱彦鹏等(1976)     

副猪嗜血杆菌病诊治

<正>副猪嗜血杆菌病又称猪格拉瑟氏病,是对由副猪嗜血杆菌(HPS)引起的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等的统称。1病原副猪嗜血杆菌最早在1910年被报道,但到1922年才首次分离得到。1969年研究报道HPS在只存在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(V因子),而无正铁血红素(X因子)的条件下也可以生长,因此副猪嗜血杆菌的名字才得以使用。副猪嗜血杆菌的血清型复杂多样,采用KRG琼脂扩散试验可     

科学家尝试猪体内培育人器官

正【英国广播公司网站6月6日报道】题:科学家在猪体内培育人类器官美国科学家正试图在猪体内培育人类器官。他们把人类干细胞注入猪的胚胎,从而产生异种嵌合体,即"客迈拉"。这是一项研究计划的组成部分。该项研究的目的是解决全球人类移植器官短缺的问题。来自加利福尼亚大学戴维斯分校的研究团队称,这些猪的外形和行为应该和正常的猪一样,只不过有一个器官将由人类细胞构成。     

人猪嵌合体胚胎培育成功

<正>一个国际科研小组1月26日在美国《细胞》杂志上宣布,他们把人类干细胞注入猪胚胎中,首次成功培育出人猪嵌合体胚胎,并在猪体内发育了3到4周时间。人猪嵌合体研究面临巨大的伦理争议,但科学家认为,这项工作最终有助在动物体内培育出可供移植的人类器官,从而解决移植器官来源严重不足的难题。在新研究中,人类细胞发育成了肌肉细胞和其他组织器官的前体细胞,而不是脑细胞的前体细胞。研究人员认为,人猪嵌合体胚胎将能帮助模拟认识许多人类遗传疾病的早期起病过程,并实施药物测试,最终将     

粗糖料作为生长肥育猪能量来源的评价

Mena等(1981、1982)和Fermirl等(1984)曾报道过,用新鲜甘蔗汁全部代替生长肥育猪日粮中的谷物。Marrero和Ly(1976)及Djaz和Marrero(1978)也报道过在猪日粮中使用糖蜜(浓缩甘蔗汁)。在某些管理条件下,用粗糖料代替甘蔗汁或糖蜜可能更有实用价值。然而,用粗糖料作为生长肥育猪日粮的主要能量来源,却很少报道。本研究比较了用粗糖料全部代替猪日粮中的高     

猪支原体肺炎防治

<正>猪支原体性肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性肺炎,又称猪地方流行性肺炎,其病原最早由Mare、Switzer(1965)和Goodwin等(1965)从患肺炎的猪肺组织中分离出,并试验复制出该病,报道后该     

猪肺炎霉形体酶联免疫吸附试验抗原制备

猪肺炎霉形体(Mhp)是猪霉形体肺炎(MPS)的病原。全世界广泛分布。用补体结合(CF)试验和间接血球凝集(IHA)试验诊断本病,有时会造成诊断错误。最近报道用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行MPS的血清学诊断,但Mhp和猪抗絮状霉形体高免血清之间可出现血清学交叉反应。     

囊虫匀浆诱导猪对囊虫病的保护性免疫

绦虫感染在经济、公共卫生上的重要性,促进了寄生虫免疫学的广泛研究。六钩蚴体外短期培养所产生的代谢物,免疫牛、羊等带科绦虫病国外已进入实用阶段。但猪囊尾蚴匀浆直接免疫猪囊虫病尚未见报道。本试验以囊尾蚴(A)、囊液(B)、六钩蚴(C)为免疫原,处理各试验动物组,结合     

斑点酶联A蛋白免疫吸附试验检测猪衣原体抗体方法的建立

动物衣原体感染的诊断主要是病原学检查和血清学试验。血清学试验方法主要有补体结合反应(CF)、间接补体结合反应(ICF)、琼脂免疫扩散试验(AGP)和间接血凝试验(IHA)等。Dot-ELISA是20世纪80年代出现的一项新技术,已广泛用于传染病和寄生虫病的快速诊断。文心田等[1-2]和陈红英等[3]已成功地将Dot-ELISA用于牛和猪衣原体抗体的检测。研究用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(PPA)作为标记物,建立了Dot-PPA-ELISA检测猪衣原体抗体的方法,现报道如下。1材料与方法1.1材料衣原体属特异性抗原,用德国衣原体标准株(B394)制备;待检…     

哺乳仔猪补料中土霉素的适宜添加量

<正> Jukes等(1950)首次报道结晶金霉素对猪的生长促进效应之后,国外养猪业应用抗菌素添加剂三十多年来,获得了肯定的增产效果。Cunha(1977)报道,抗菌素可使猪增重提高6.7—40％,饲料效率改善1.4—15％。关于哺乳仔猪Hansen等报道,在其补料中添加土霉素可使日增重较对照提高38.1％。     

两种氧氟沙星注射剂在猪体内的代谢规律研究

国内外关于氧氟沙星(ofloxacin,OFL)在鸡、兔、羊、狗等动物体内的药代动力学研究都已报道[1-6]。在猪体内的药物动力学[7]仅见静脉给药报道,肌肉注射给药未见报道。本试验以10 mg/kg的剂量(以OFL含量计算)给猪耳静脉注射OFL注射液,肌肉注射OFL注射液和OFL缓释注射液,研究OFL缓释注