苎麻野生近缘种植物基因组DNA提取技术的改进

用CTAB法提取悬铃叶苎麻基因组 DNA.针对悬铃叶苎麻中多糖、多酚、果胶和黄酮类次生代谢物含量高的特点,在裂解液中加入一定量的PVP 和β-巯基乙醇,采用一步抽提一步纯化的方法,并对传统乙醇沉淀法进行改进,使其更利于对基因组 DNA 进行浓缩和纯化.在获得高质量 DNA 的同时,大大节约了提取时间和程序.经实验验证,该方法提取的 DNA 能满足酶切、连接等高精度分子实验要求.     

落花生属植物基因组DNA提取及鉴定

以落花生(Arachis L.)嫩叶为材料,在传统CTAB法的基础上加以改良,建立了落花生基因组DNA的CTAB提取方法。结果表明：所提取的DNA经核酸蛋白含量测定得A260/A280处于1.84～1.95,经琼脂糖凝胶电泳检测各样品均具有一条明亮主带且无拖尾现象。表明改进的CTAB法提取得到的DNA完整性好,纯度高,可有效应用于后续的分子标记等研究。     

高粱的野生近缘种及其利用价值

在高粱的分类学里,高粱野生近缘种遗传资源比较丰富,如苏丹草、突尼斯草、约翰逊草、丰裕高粱、拟高粱等。在这些野生近缘种资源中,蕴含有许多可以利用的基因,如抗病、虫,抗逆境等抗性基因,在高粱品种遗传改良中,有的可以直接利用,有的可以间接利用。例如,利用苏丹草与栽培高粱杂交,其杂交种可以作为饲草高粱在生产上推广利用,我国近年选育的皖草2号、晋草1号、辽草1号等均是野生近缘高粱种利用的实例。而且,随着科学技术的进步,高粱野生近缘种将会得到广泛的利用。     

胡椒栽培种与野生近缘种嫁接技术调查

通过对胡椒野生近缘种蒌叶Piper betle L.作砧木、胡椒Piper nigrum L.栽培种Kuching作接穗的嫁接技术进行调查,调查结果表明：胡椒栽培种与胡椒野生近缘种嫁接亲和力强,嫁接成活率高,嫁接植株主蔓粗壮,生长迅速,生态适应能力明显增强。     

分离芸薹属植物基因组DNA的一种方法

介绍一种比目前较普遍使用的ＣＴＡＢ法能更好地分离植物基因组ＤＮＡ的方法。通过芸薹属不同种植物和不同重量实验材料（０．１—１．２克）的多次试验，证明用该方法分离的基因组ＤＮＡ产率、纯度和分子量都较高，分离的ＤＮＡ可用于限制性酶切．这种方法也完全适用于其它植物基因组ＤＮＡ的分离。     

甘蔗属及其野生近缘植物的杂交研究项目通过鉴定

广西甘蔗研究所承担的国家自然科学基金委员会资助项目“甘蔗属及其野生近缘植物的杂交研究”（编号39070109），经1991～1993年三年的实施，全面地较好完成了既定计划任务，达到了预期的目标和效果。于1997年4月10日通过了广西壮族自治区科学技术委员会组织的专家鉴定。参加鉴定的专家们认为：该项目成果达到国内同类研究的先进水平，对我国今后甘蔗种质资源的有效利用和亲本创新有重大的科学意义和应用前景。该项目利用光周期人工诱导甘蔗亲本抽穗开花，花粉低温冷藏等技术，开展了甘蔗种间、属间的杂交研究，成功地提高了甘蔗抽穗开花诱…     

改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA

以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4%,沉淀时加入0.6倍体积预冷异丙醇、1/2倍体积5 mol/L NaCl、2倍体积无水乙醇时,所提取的DNA纯度较高,电泳条带清晰。且在此条件下,能提出野牡丹科7种植物的DNA。     

不同方法从大豆不同组织中提取基因组DNA效果的比较

从大豆组织中获得高质量和足够产量的基因组DNA,是进行大豆分子生物学研究的基础.为进行大豆基因组的PCR,RAPD,SSR等分子生物学研究,分别以大豆种子和其叶片为实验材料,采用改良的SDS法和CTAB法对大豆基因组DNA进行了提取.对DNA的提取效果,采用紫外分光光度检测、琼脂糖凝胶电泳分析及DNA的限制性内切酶图谱分析进行了综合比较.结果表明,在以叶片为材料时,SDS法和CTAB法的大豆基因组DNA的提取效果差别不大,SDS法稍好于CTAB法.在以大豆种子为材料时,SDS法的提取效果明显优于CTAB法,SDS法可从大豆种子中提取到能够充分满足各种分子操作的高质量和数量的大豆基因组DNA.     

木薯野生近缘种W14与栽培种SC8的光合参数及相关蛋白质表达水平分析

为研究木薯野生近缘种与栽培种间光合特性的差异,选用野生近缘种W14与栽培种华南8号（SC8）为材料,测定其叶绿素含量,同时采用便携式LI- 6400光合作用测定仪,测定2种木薯叶片的净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）、蒸腾速率（Tr）等光合参数,采用Western Blot对光合作用相关蛋白质核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶（Rubisco）、放氧复合体（OEC）及D1的表达水平进行分析,并探讨其叶片光合特性的差异。结果显示：SC8叶片中叶绿素a及总叶绿素含量、Pn、Gs均显著高于W14,而叶绿素b含量、Ci及Tr在两者间并无显著差异,Rubisco、OEC及D1在SC8中的表达水平均高于W14。叶绿素含量、Pn及参与光合作用相关蛋白质表达水平的分析结果表明,栽培种SC8具有较好的光合特性。      

一种适用于PCR检测的苎麻陈年原麻DNA提取方法

本研究以常温干燥保存一年和六年的陈年苎麻原麻为材料,采用改进的CTAB法,对苎麻原麻DNA进行了提取.琼脂糖凝胶电泳结果表明,得到的DNA大小在20kb以上,2010年原麻提取DNA的条带明显比2005年原麻的清晰;PCR扩增实验证明用此方法提取的DNA可直接用于PCR检测.     

两种不同甘蔗基因组DNA提取方法的比较

采用改良CTAB法和SDS法提取甘蔗嫩叶与正一叶基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳与紫外光吸收检测,证明SDS法能获得高质量的DNA,适合分子生物学操作的要求,为后续甘蔗遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础。     

一种高质量的红毛丹基因组DNA提取方法

为了提取高质量的红毛丹基因组DNA,本研究以红毛丹叶片为试材,比较改良CTAB法、改良SDS法和试剂盒法对红毛丹叶片DNA的提取效果。结果表明：3种方法均可从红毛丹叶片中提取DNA,但由于改良CTAB法通过多次洗涤,并联合使用PVP和β-巯基乙醇处理,可有效去除红毛丹叶片中的多糖、多酚和蛋白质等物质,所获得的DNA纯度高且完整性较好,可用于SRAP-PCR等分子标记分析。此结果为后续分子生物学等相关研究奠定了基础。     

青麻总DNA的简易提取和鉴定

青麻成熟组织中酚类、黃酮类等次生代谢物较多,要从中提取出高纯度的DNA比较困难。本研究利用黄酮等次生代谢物未大量合成的青麻幼芽为材料,采用简化CTAB法提取青麻总DNA,可以获得高纯度、高产量的DNA。经实验鉴定,DNA纯度符合分子遗传实验要求。该方法快速、简便,也适于其它麻类作物总DNA提取。     

青麻总DNA的简易提取和鉴定

青麻成熟组织中酚类、黄酮类等次生代谢物较多,要从中提取出高纯度的DNA比较困难.本研究利用黄酮等次生代谢物未大量合成的青麻幼芽为材料,采用简化CTAB法提取青麻总DNA,可以获得高纯度、高产量的DNA.经实验鉴定,DNA纯度符合分子遗传实验要求.该方法快速、简便,也适于其它麻类作物总DNA提取.     

一种改良的大豆DNA提取方法

大豆组织中含有较多的蛋白质、糖类、酚类和脂类物质,要从中提取高质量的DNA比较困难。针对这一情况提出一种改良UREA大豆DNA提取方法(m UREA),该方法用异丙醇沉淀DNA,并配制washing buffer洗涤DNA沉淀。并以大豆叶片和种子为材料,将m UREA法与CTAB法和SDS法进行对比。结果表明,以大豆叶片为材料时,m UREA法提取的DNA产率最高,质量最好;以大豆种子为材料时,m UREA法提取的DNA产率略低于SDS法,但纯度最高。综合来看,m UREA法是一种高效的大豆基因组DNA提取法,从大豆种子和叶片中提取的DNA浓度和纯度都较高,能满足后续各种分子生物学的要求。     

几种麻类作物及其近缘种植物总DNA的提取与鉴定

采用Ｐｉｃｈ和Ｓｃｈｕｂｅｒｔ１９９３年发展的ＳＤＳ方法，经适当改进后，成功地从苎麻，红麻，黄麻，青麻四种麻类作物及其近缘种植物中提取了细胞总ＤＮＡ，并对其得率，质量和纯度进行了鉴定。所得的ＤＮＡ可进行限制性内切酶消化，ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分子标记。     

几种常见方法提取番荔枝基因组DNA的比较

以番荔枝幼嫩叶片为材料,分别采用改良高盐低pH值法、改良的CTAB法、SDS法三种方法提取总DNA,通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法对三种提取方法进行综合比较。结果显示改良的CTAB法所得的DNA纯度和得率较高,SDS法最差。     

几种麻类作物及其近缘种植物总DNA的提取与鉴定

采用Pich和 Schubert 1993年发展的SDS方法，经适当改进后，成功地从苎麻、红麻、黄麻、青麻四种麻类作物及其近缘种植物中提取了细胞总DNA，并对其得率、质量和纯度进行了鉴定。所得的DNA可进行限制性内切酶消化、PCR扩增和RAPD分子标记。本研究发展的这一快速、简便、适于麻类作物及其近缘种植物的总DNA提取方法，将有助于在DNA分子水平研究麻类种质资源的遗传多样性。     

基于苎麻属野生近缘种形态变异类型的系统关系研究

本文从变异性分析、相关分析和构建系统聚类树方面系统地研究了苎麻属野生近缘种5组26种(变种)的基本形态生物学特征。结果表明:1)苎麻、大叶苎麻、序叶苎麻、细野麻这4个野生种形态的丰富变化主要集中在叶色、叶脉色、托叶色、叶缘锯齿这几种表型。2)苎麻属各野生种表型之间叶形与叶基特性的关系非常紧密,其余的形态表型之间没有发现显著的相关。3)苎麻组组内演化关系为微绿苎麻→青叶苎麻→苎麻、贴毛苎麻。苎麻和贴毛苎麻都起源于青叶苎麻。4)苎麻属野生种种间的系统聚类树显示,处在最低位置的苎麻属组群是帚序苎麻组和腋球苎麻组,序叶苎麻组位于中间位置,苎麻组和大叶苎麻组则是位于最高位置的苎麻属组群,苎麻组和大叶苎麻组的亲缘关系更加紧密。该研究结果对进一步研究苎麻属野生近缘种分类及系统演化提供了基础。     

不同方法提取棉花DNA的比较

主要通过选用国丰棉12为材料,对不同方法提取出的DNA进行扩增,然后进行琼脂糖凝胶电泳分析,结果表明:改良SDS法和改良CTAB法分别优于原SDS法和CTAB法,原SDS法和CTAB法分别优于氯仿一异戊醇法,由改进方法提取的棉花基因组DNA质量较高,能满足SSR等后续分子生物学研究的需要.