用组培法培养马铃薯—倍体和双单倍体进行染色体加倍的研究

分别取来自普通栽培种(S.tuberosum)的两个一倍体品系和两个双单倍体品系的茎段和叶片,用两步法进行组织培养来加倍其体细胞染色体数目。在以MS+2.25mg/1 BAP+5mg/1 NAA 为第一步的培养基上,从一倍体和双单倍体的茎段和叶片中获得了许多再生植株,其中约60%的加倍成植株(2n=2x=24或2n=4x=48),此结果表明此法是把单单倍体(以下简称一倍体)和双单倍体转化为纯合同源四倍体的有效方法。     

甘蓝型油菜小孢子单倍体二倍化技术的研究

采用6种方法系统研究甘蓝型油菜（Brassica napus)品系（种）及杂种的小孢子再生苗单倍体染色体加倍技术。结果表明，单倍体苗接种含70－80mg/L秋水仙碱的培养基处理4－5d，植株染色体加倍率50％以上；单倍体小苗移栽前用1－2g/L秋水仙碱液浸泡处理3－6h，加倍率50％以上，由这些方法产生的加倍植株大多是可育花和不育花共生的嵌合体，每株产生的种子很少。分离的小孢子在含10－50mg/L秋水仙三的NLN培养基中处理48h后，接种无秋水仙碱NLN培养基诱导胚状体，再生植株加倍率80％以上，全株的花均能自交结籽，嵌合植株很少。     

亚麻花药培养高频率的植株再生

本文主要研究亚麻花药培养的诱导培养基组成成份的效果,目的是提高愈伤组织的诱导和植株再生的效率.花药接种于改良的MS培养基上(培养基添加了五种不同配比的植物激素).培养基中含有2mg/L2.4-D和1mg/LBAP比相同成分培养基中含有1mg/LNAA和2mg/L6-BA(CK),愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率有显著提高.在五个处理的盐酸硫胺素的实验中,改良的MS培养基含有10mg/L盐酸硫胺素比含有2.4mg/L盐酸硫胺素愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率显著提高.在麦芽糖的五个处理中以培养基中含有6%或9%的麦芽糖,总的植株再生频率最高.蔗糖的浓度主要影响愈伤组织再生苗的百分率,总的植株再生效率、花粉植株的频率以及花粉植株染色体自然加倍的频率.本研究获得的单倍体品系已被应用于育种程序中.     

提高马铃薯双单倍体花药培养产生胚状体及再生植株频率的研究

用三种不同温度前处理和三种培养基相配合对７个从双单倍体马铃薯中随机抽取的品系进行了花药培养，选择出了较好的培养基和前处理的适宜温度及方法，从双单倍体花药中忸产生胚状体及再生植株频率有所提高达２７．５％和８．８％。倍性鉴定表明，从双单倍体诱导的胚状体分人的植株绝大多数为二倍体。而且多数为纯合体，说明这些胚状体来自己减数的配子，可能是由在胚状体发育过程中的体细胞染色体加倍形成的。     

亚麻花药培养高频率的植株再生

本文主要研究亚麻花药培养的诱导培养基组成成份的效果，目的是提高愈伤组织的诱导：和植株再生的效率。花药接种于改良的MS培养基上(培养基添加了五种不同配比的植物激素)。培养基中含有2mg／L2．4-D和1mg／LBAP比相同成分培养基中含有1mg／LNAA和2mg/L6-BA(CK)，愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率有显著提高。在五个处理的盐酸硫胺素的实验中，改良的MS培养基含有10mg／L盐酸硫胺素比含有2．4mg/L盐酸硫胺素愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率显著提高。在麦芽糖的五个处理中以培养基中含有6％或9％的麦芽糖，总的植株再生频率最高。蔗糖的浓度主要影响愈伤组织再生苗的百分率，总的植株再生效率、花粉植株的频率以及花粉植株染色体自然加倍的频率。本研究获得的单倍体品系已被应用于育种程序中。     

提高马铃薯双单倍体花药培养产生胚状体及再生植株频率的研究

用三种不同温度前处理和三种培养基相配合对７个从双单倍体马铃薯（Ｓ．ｔｕｂｅｒａｓｕｍＬ，２ｎ＝２ｘ＝２４）中随机抽取的品系进行了花药培养，选择出了较好的培养基和前处理的适宜温度及方法．从双单倍体花药中诱导产生胚状体及再生植株频率有所提高达２７．５％和８．８％．倍性鉴定表明，从双单倍体诱导的胚状体分化的植株绝大多数为二倍体，而且多数为纯合体，说明这些胚状体来自己减数的配子，可能是由在胚状体发育过程中的体细胞染色体加倍形成的．     

甜菜未授粉胚珠培养的研究

采用38种培养基,173份基因型材料。4年大量反复试验表明:甜菜未授粉胚珠接种在附加单一激素(6BA或K)或激素组合(IAA+K)或(NAA+6BA)的PGOB、MS、1/2MS、改良MS或N6基本培养基上.均可成功诱导单倍体植珠。胚囊发育至成熟阶段的胚珠诱导效果为佳。胚珠植株转移至附加IBA、NAA、IBA+GA、IAA+K或IAA的MS培养基上可诱导生根。分化、扩繁、壮苗培养基为MS基本培养基附加K和IAA。在培养基中附加0.01％秋水仙碱处理1—2天,可使单倍体植株染色体加倍率达66.0％。细胞学观察表明:单倍体胚状体起源为卵细胞或反足细胞。后代遗传学观察表明:同一诱导材料的不同胚珠株系表现出多样性,同一株系个体间性状整齐一致.表现出高度纯合性。胚珠再生植株后代含糖率明显较高,且个体间差异小。     

用未成熟胚离体培养法获得四倍体大燕麦与六倍体裸燕麦杂种植株的研究初报

用 1/ 2 MS培养基和 1/ 2 MS培养基 +2 mg/ L 2 ,4 _ D两种培养基 ,对 12～ 15d的四倍体大燕麦×六倍体裸燕麦的杂种幼胚进行离体培养。结果在 1/ 2 MS培养基上培养的 14个幼胚获得 8棵植株 ,植株产生率 57.1% ;在 1/ 2 MS+2 mg/ L 2 ,4 _ D培养基上培养的 14个幼胚获得 3棵幼苗和 9块愈伤组织 ,植株产生率 2 1.4 % ,出愈率 6 4 .3% ,愈伤块经一次继代培养后 ,转移于不加任何激素的幼苗分化培养基上 ,分化出 31棵植株。     

甘蓝型油菜DH植株创建及其倍性的流式鉴定

以甘蓝型油菜大粒品系和小粒品系的小孢子为试验材料,研究取样时期、花蕾大小、培养基类型及添加成分对小孢子产胚率的影响,利用流式细胞仪对小孢子再生植株及加倍植株进行了准确、快速的倍性分析。结果表明,始花期为最佳取蕾时期,花蕾大小在2.5~3.5mm为宜,培养基以液体培养基最好。培养基中加入0.1mg/L6-BA可以促进小孢子胚的发生,而活性炭对小孢子培养没有明显的促进作用。流式细胞仪倍性检测显示小孢子再生植株加倍后的双单倍体(doubled haploid,DH)占49%,还存在少量的三倍体(11.3%)、四倍体(1.1%)及嵌合体(27.3%)植株。本研究为油菜材料的快速纯合及其DH系群体的构建等提供了新的经验。     

棉花雌雄不育株小孢子发育的细胞学研究

棉花自然单倍体植株发现较早,并已通过孤雌生殖、双胚、种间杂交、半配生殖和辐射处理等获得了棉花单倍体。但棉花的花药培养尚未得到单倍体植株。棉花是二倍体和异源四倍体,染色体数为2n=2x=26和2n=4x=52,自然单倍体的概率很低。产生双胚的频率约为1/2～2.5     

利用青海大黄油菜和芥兰合成大粒甘蓝型油菜

利用青海大黄油菜（QD, 2n=20, AA）与几种不同的甘蓝(CC, 2n=18)正反杂交,辅以幼胚抢救、子房培养和染色体加倍技术人工合成甘蓝型油菜。结果表明：以QD为母本的多个杂交组合获得69株杂种苗,反交组合均未得到正常发育的胚。与中迟芥兰杂交后的QD子房在MS、1/2MS、MS+0.2 mg/L 6-BA三种培养基中得胚率依次为15.5%、8.9%和4.4%,共获得24个杂种胚,而在MS+1.5mg/L 6-BA+0.25mg/L NAA分化培养基上角果内未发现成熟胚。染色体加倍处理结果表明,在培养基中添加秋水仙素后加倍率最高（59.4%～86.4%）。SSR分子标记结果显示：受试材料全部为真杂种,并且没有出现新增带和缺失带。人工甘蓝型油菜在形态上介于双亲之间,千粒重较高,达到5.48g～7.45g,显著高于甘蓝型油菜品种青油14号和中双4号。     

红杨桃胚乳愈伤组织的诱导和三倍体植株再生

以红杨桃成熟干种子为材料,萌发后剥离胚乳进行培养。结果表明,最佳诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D　2mg/L+BA 0.2mg/L,诱导频率可达93.5％:将淡绿色致密的愈伤组织转至MS+ZT　3mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上,经连续继代后,形成芽原基并发育成小植株,壮苗后取茎尖染色体显微观察,证明再生植株多为三倍体,其发生频率可达73.7％。      

神农香菊丛生芽的诱导及植株再生

以神农香菊茎段为外植体,研究植物生长调节剂及活性炭(AC)对神农香菊丛生芽诱导的影响,以建立神农香菊丛生芽诱导及植株再生的高频再生体系。结果表明,丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,最适增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.05 g/L AC,增殖系数为45.3,添加AC可有效促进玻璃化苗恢复;生根诱导的最适培养基为不添加任何生长调节剂的1/2MS,生根率高达100%;将生长良好的再生植株进行移栽,存活率可达100%。     

海巴戟天的离体快速繁殖(简报)

从多果无病虫害的母树中选取的幼嫩侧枝,经表面消毒后切取侧芽并接种到MS基本培养基,附加蔗糖浓度30g/L,BA2mg/L,NAA0.1mg/L初代培养基上,培养40d后,侧芽萌发率达80%以上。增殖培养基与初代培养基相同,以40~50d为一增殖周期,增殖系数达2~3倍。当新芽增殖到足够数量时,切取2~3cm的新芽接种到1/2MS大量元素,全量微量元素,蔗糖浓度为30g/L,IBA1mg/L,活性炭1g/L的生根培养基生根培养基上,生根率高达100%,植株在沙床的移栽成活率均达95%以上。30cm高的植株便可种植到大田。     

甜菜未授粉胚珠培养技术研究

甜菜未授粉胚珠接种在附加不同生长素(IAA、2,4—D)、细胞分裂素(KT、6BA)或激素组合(6BA NAA和IAA KT)的MS、PGOB、1/2MS等培养基上,可成功诱导出胚状体,分化诱导形成单倍体植株,对其用0.1％～03％秋水仙碱溶液处理使染色体加倍,获得了高度纯合的二倍体株系。试验选配了110种诱导培养基、两种分化和3种生根培养基,选择了143种不同基因型材料.不同基因型材料在不同培养基上的诱导率各不相同.     

橡胶树品种云研77-2茎芽诱导体系优化及移栽管理

采用正交设计方法,研究橡胶树品种云研77-2茎段快繁试验中NAA、KT、6-BA 3种激素对茎芽诱导的影响.结果表明,培养基中添加6-BA对茎芽诱导起主导性的作用.橡胶树云研77-2茎芽诱导最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0～0.5 mg/L KT.诱导生根试验中,培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA的生根率可达66.7%.叶片剪去1/2的自根无性系进行移栽的植株平均成活率为43.6%.     

The influence of different hormone concentration and combination on callus induction and regeneration of Rauwolfia serpentina L. Benth

The influence of media composition on callus induction and subsequent regeneration of Rauwolfia serpentina L. Benth has been studied. High frequency (96.43%) callus induction was obtained when nodal segments from in vitro raised shoots were cultured on MS medium supplemented with 0.5 mg L(-1) BA and 2.0 mg L(-1) NAA. The callus differentiated into adventitious shoots when it was subcultured on MS medium supplemented with 2.0 mg L(-1) BA with 0.2 mg L(-1) NAA. Regenerated shoots were best rooted on half-strength MS medium with 1.0 mg L(-1) each of IBA and IAA.     

Chromosome number doubling of 2x potato lines with diverse genetic background through tissue culture

Summary Twelve 2x potato clones of diverse genetic origin were tested for doubling of their chromosome number by placing stem and petiole segments in the regeneration medium (Hermsen et al., 1981). Eleven of the 12 clones yielded doubled plants (2n=4x=48). The percentages of regenerated tetraploid plants varied from 0 to 77% among the genotypes tested. The high rates of successful doubling from many genetically different clones, demonstrates the applicability of this method as a means to convert valuable 2x potato germplasm into the 4x level.     

In vitro study on regeneration of Gladiolus grandiflorus corm calli as affected by plant growth regulators

In this study, in vitro organogenesis of Gladiolus grandiflorus cultivar pink corm segments were evaluated by culturing corm calli in modified MS medium supplemented with 3% sucrose and 0.7% agar with different concentration of BAP (0, 1, 2 and 4 mg L(-1) medium) and NAA (0, 0.5, 1 and 2 mg L(-1) medium) in factorial experiment of Completely Randomized Design (CRD). In order to obtain Gladiolus calli, corm segments (Aprox. 5 x 5 x 1 mm in size) were kept in modified MS medium (Murashige and Skoog, 1962) that was supplemented with 1 mg L(-1) 2, 4-D, 3% sucrose and 0.7% agar. The results showed that increasing the concentration of BAP from 0 to 2 mg L(-1) medium simulated plantlet regeneration but no significantly effect was obtained on shoot and cormel organogenesis between 2 and 4 mg L(-1) BAP concentration in medium. Increasing of NAA content in media without BAP developed rootlet significantly. Interaction results showed that increasing BAP content against decreasing of NAA concentration stimulates the shoot and cormel proliferation.