肉桂离体胚超低温保存研究

对不同含水量肉桂离体胚进行超低温(LN2)保存,采用不同冷冻方式、解冻方式及防冻剂预处理,并测定超低温保存前后的脱氢酶、电导率、α-淀粉酶生理生化指标。结果表明:超低温保存的技术关键是减少保存材料在脱水过程中所受的伤害,以及采用适宜的冷冻和解冻方式和添加适宜的防冻剂。防冻剂预处理可以适当提高保存含水量,增加含水量范围。肉桂离体胚没有添加防冻剂时最适宜保存含水量为30%~40%(w∶w),采用快冻快解处理。防冻剂预处理后的保存效果比没有防冻剂预处理的更佳,采用缓冻快解或快冻缓解处理较为适宜。     

植物种质超低温保存

1植物种质超低温保存基本原理超低温保存是指在一80C（干冰温度）至一196’’C（液氮温度）甚至更低温度下保存生物材料。常以液氮为冷源。20多年来,全世界范围内对100多种植物种质开展了这方面研究,涉及保存的材料有原生质体、悬浮细胞、愈伤组织、体细胞胚、胚、花粉胚、花粉、花药、茎尖分生组织、芽、茎段等。生物的生长和发育都是一系列生物化学反应的结果。而这些生化反应均需以水做基质。若将细胞内液态水转变为固态或气态,那么一切生命过程均会停止;如果在细胞内的水相发生变化过程中,没有发生任何化学组成、物质结构变化,或…     

银杏愈伤组织超低温保存的研究

本文对银杏子叶愈伤组织进行了超低温保存研究。结果表明 ,冰冻保护剂、冷冻速度对解冻后材料相对存活率影响较大 ,冻前预培养和预冻至某一温度停留一段时间也较为重要。在含高浓度山梨醇或甘露醇的培养基上预培养 2d的愈伤组织 ,用 10 %二甲基亚砜 +0 .5mol·L- 1 山梨醇作为冰冻保护剂 ,以 1℃·min- 1 速度降温 ,在 - 15℃、- 35℃分别停留 10min和 30min后 ,投入液氮中保存 1d ,细胞相对存活率可达 6 0 %以上。再培养时 ,细胞能恢复生长。     

木本植物种质超低温保存的研究进展

木本植物种质的超低温保存研究对生物多样性保护和植物生物技术都具十分重要的意义.根据我们的统计,已有40多个属60多个种的木本植物被进行了超低温保存试验,其中大多数是90年代的新报道.种子、胚、胚轴和体胚的保存常用干冻法;茎尖和分生组织的保存大多用玻璃化法或包埋脱水法;愈伤组织和悬浮细胞的保存大多用两步法或玻璃化法.木本植物种质的超低温保存近年来呈现2个特点,一是顽拗型植物胚轴和体胚的冻存报道较多;二是玻璃化法和包埋脱水法等新技术不断应用.     

银杏种质离体保存的研究Ⅱ.银杏胚超低温保存

为了开辟银杏种质保存新途径,以中南林学院经济林研究室选育的湖南梅核Ⅰ号变异类型为材料,对银杏种胚超低温保存进行了研究.结果表明:银杏胚对脱水不太敏感,但胚含水量(胚中水的质量与胚干物质质量的百分比)低于12%时,试管苗生长发育异常;简单无菌风干燥脱水后的胚,液氮保存后恢复生长时,仅观察到子叶有限伸长、胚根生长、胚轴处产生大量白色的愈伤组织;无菌风干燥后的胚再经高浓度冰冻保护剂处理,超低温保存后再接种于培养基上,可产生再生植株.     

LN2保存甜槠种子脱氢酶特性研究

应用超低温(-196℃)手段保存甜槠种子，通过对甜储种子离体胚超低温保存后脱氢酶活性的方差分析和Q检验法多重比较分析，对其长期保存的可行性进行研究，结果表明：含水量是影响甜槠种子离体胚超低温保存的重要因素，超低温保存应进行适度脱水、无防冻剂预处理，在20％含水量，缓冻缓解方式条件下，离体胚脱氢酶活性最高。     

二乔刺槐愈伤组织超低温保存及适宜降温方法

二乔刺槐叶片在添加5 mg·L-16-BA的MS培养基上诱导出愈伤组织.将愈伤组织在冻存液(MS+10%DMSO+0.5 mol·L-1蔗糖)中于4℃预冷2 h,置人程序降温仪以1℃·min-1的速率降温至-7℃停留1 h,再以0.1℃·min-1的冷却速率将样品冷却至-20℃,平衡1 h,接下来以0.3℃·min-1的冷却速率将样品冷却至-40℃投入液氮保存,是适宜的降温方法.液氮保存1天后以38℃温水浴解冻.解冻后将愈伤组织用液体培养基(MS+6-BA 5 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖)洗涤后转入恢复培养基暗培养,14天后放于光照下培养.光培养3天后冻后愈伤组织上开始长出新生愈伤组织颗粒,成活率最高可达52%,新生愈伤组织可诱导成苗.     

鹅掌楸花粉保存条件的比较研究

研究比较了鹅掌楸花粉的几种保存条件。结果表明：（１）新鲜花粉在超低温（－１９６℃，ＬＮ２）条件下可保持５ｄ。花粉存活率（７６．５１％）与对照（新鲜花粉）几乎相同（７５．５５％）。在电镜下观察其超微结构无异常变化。而保存１５ｄ的花粉细胞超向结构发生严重损伤，内膜系统及细胞器降解。２５ｄ后几乎观察不到存活的花粉。（２０在－２５℃保存条件下，以二甲基亚砜为保护剂，添加蔗糖作为辅佐剂保存效果较好。（３）４     

豫杂一号泡桐茎尖的玻璃化法超低温保存方法研究

以豫杂一号泡桐健壮组培苗为研究材料,从低温锻炼时间、预处理时间、装载液处理时间、玻璃化液处理时间及液氮保存时间5个方面研究其茎尖玻璃化法超低温保存方法。结果表明,豫杂一号泡桐茎尖玻璃化法超低温适宜的保存方法为,2 cm的茎尖在附加0.4 mol·L-1甘油和0.3 mol·L-1蔗糖的MS培养基上预培养2天,然后剥取2～3 mm的茎尖,用装载液(MS+2 mol·L-1甘油+0.4 mol·L-1蔗糖)装载60 min,再用玻璃化溶液(PVS2)于0℃下处理1.5 h,换1次玻璃化溶液后迅速投入液氮,保存l h后于40℃水浴中化冻70 s,再转到室温下用去装载液(MS+1.2 mol·L-1蔗糖)洗涤2次,每次10 min。以TTC法检测,豫杂一号泡桐茎尖成活率最高可达85.74%,保存效果较好。     

青皮种子主要储藏条件的研究Ⅰ.种子含水量与测控

水分是影响青皮(Vatica astrotricha Hance)种子活力最关键的内在因素,其中种胚含水量是决定因素。用含水量27—29％椰糠控制种胚含水量在50—52％,也就是控制种子含水量在30—36％,维持种子一定的呼吸强度(32℃下测定为50—60 O_2μl/g·h),种子活力保持最高,能延长寿命。找出了储藏中种子安全含水量的最佳点,此点处于安全含水量下限的内缘,可利用种子本身果翅与种子或大小种子之间含水量的内在关系来测定。这种测定方法准确、快速又简便。可考虑作为确定“顽拗型”种子安全含水量下限的新捷径。     

LN_2保存锥栗种子的生理生化特性研究

运用LN2 ( - 196℃ )保存手段 ,结合添加和不添加防冻剂预处理 ,通过对锥栗种子LN2 保存前后种子质量特性和胚酶活性的分析 ,对其长期保存的可行性进行研究 ,结果表明 :含水量是影响锥栗种子和离体胚LN2 保存的重要因素 ,LN2 保存应进行适度脱水。当无防冻剂预处理时 ,LN2 保存宜采用 15 %～ 2 0 %含水量区间 ,冷解冻方式采用MF MT。当有防冻剂预处理时 ,各种酶活性的保存要比无预处理的要好 ,LN2 保存宜采用2 0 %～ 2 5 %含水量区间 ,冷解冻方式采用MF ST。     

板栗良种铁粒头,石丰,九家种引种试验

经过在湖南省的小面积引种试验,筛选出表现优良的铁粒头、石丰、九家种3个板栗品种。以湖南省主要农家品种——它栗作对照,进一步进行品比试验,获得了与小面积引种栽培试验基本一致的结果;与此同时,还进行了多点试验,参试品种的丰产性能在不同试验点表现基本一致;历时14年的引种试验证明,这3个品种在湖南省自然条件下生长、结实良好,引种获得了成功。     

板栗优良品种（无性系）苗木分子标记鉴别研究）

利用ＲＡＰＤ标记对浙江省林木良种审定委员会审定（认定）和通过省级鉴定的８个板栗品种及无性系进行指纹分析，鉴别出各板栗品种（无性系），实验过程中对６８４个随机核苷酸引物进行了重复筛选，经筛选共获得９个稳定的ＲＡＰＤ标记，构建了板栗的ＮＤＡ指纹图谱，经过大量的实验，确定了鉴别板栗优良品种（无性系）的较为理想的程序，获得了ＲＡＰＤ良好的重复性，建立了较完整的板栗ＲＡＰＤ分析的技术体系，用大田苗进行步验证，结果可靠。     

LN2保存锥栗种子的生理生化特性研究

运用LN2-（196℃）保存手段，结合添加和不添加防冻剂预处理，通过对锥栗种子LN2保存前后种子质量特性和胚酶活性的分析，对其长期保存的可行性进行研究，结果表明：含水量是影响锥栗种子和离体胚LN2保存的重要因素，LN2保存应进行适度脱水。当无防冻剂预处理时，LN2保存宜采用15%～20%含水量区间，冷解冻方式采用MF-MT。当有防冻剂预处理时，各种酶活性的保存要比无预处理的要好，LN2保存宜采用20%～25%含水量区间，冷解冻方式采用MF-ST。     

板栗和锥栗种子发育过程中ABA生理效应的研究

板栗和锥栗种子发育过程中内源ＡＢＡ含量逐渐上升,达到高峰时间是板栗开花后１０５天、锥栗开花后１００天,随后ＡＢＡ含量均逐渐下降。果实成熟采收时ＡＢＡ含量比高峰时小１０倍。随着种子发育,种子和胚对外加ＡＢＡ的敏感性也逐渐下降,１０－５ｍｏｌ／ＬＡＢＡ可以完全抑制开花后１００天的两个树种种子的发芽,但对成熟种子１０－２ｍｏｌ／ＬＡＢＡ亦不能抑制发芽。ＡＢＡ对成熟前期胚的贮藏蛋白质合成无影响,但能促进成熟中后期胚的贮藏蛋白质的积累作用,ＡＢＡ维持板栗和锥栗贮藏蛋白质合成和积累作用表现在转录水平上。     

京北山区板栗林生态系统养分元素含量特征分析

对北京北部山区板栗林生态系统5种主要养分元素N、P、K、Ca和Mg的含量测定的结果表明：地上各部分中不同养分元素在不同器官中的含量特点各不相同;但在根系中含量特征相同,即不同养分元素的含量均随着根系直径的增大而降低,且在根干中的含量最低。板栗林现存生物量5种养分元素贮存量为315．38kg/hm^2,在干中的贮存量最大,占养分总贮存量的36．75％,各器官中养分元素贮存量排序是干＞枝＞根＞叶＞花＞果苞＞果。5种养分元素中以Ca的贮存量最大,占总养分贮存量的33．45％,各元素贮存量排序为Ca＞N＞K＞Mg＞P。     

锥栗人工林营养综合指标诊断研究

在叶片中5种主要养分元素测定和分析的基础上,首次应用判别分析法建立了综合指标诊断判别系统,对不同产量类型的锥栗人工林营养进行了判别诊断分析.当将产量水平划分为2类时,采用1维判别分析进行回判,不同的分类方法可得到不同的正判率,高产类及(中产+低产)类的划分所得到的正判率均为100%;而(高产+中产)类及低产类的划分所得到的正判率分别为88.33%和86.67%.将产量划分为高、中、低3类的情况下,用1维判别进行回判的结果其正判率分别是100%、86.70%和83.33%;用2维判别进行回判,则正判率分别为100%、100%和83.33%.因此,类别的划分及判别函数的维数是影响判别诊断分析效果的重要因子.     

锥栗人工林生态系统养分特征和生物循环的研究

在林分样地调查分析的基础上,研究了３ 个不同生长发育时期即未结果期、结果初期和盛果初期锥栗人工林各器官Ｎ、Ｐ、Ｋ、Ｃａ 、Ｍｇ 的养分浓度及其变化。结果表明：各种养分元素的存留量从未果期到盛果初期逐渐增大,Ｎ 与Ｃａ 的积累占很大比例,Ｋ、Ｍｇ 次之,存留量最少的元素均为Ｐ。在未结果期,Ｎ 的归还量最大,Ｃａ 次之,最小为Ｐ。始果期,Ｃａ 与Ｎ 的归还量仍占首位,其次是Ｋ,Ｐ最少。至盛果初期,Ｋ 的归还量最大,Ｎ 次之,最小为Ｐ。各元素循环速率,从未果期至盛果初期,呈增大趋势,元素周转期则呈缩短。对产生这些变化的原因进行了必要的分析。研究结果可为不同时期养分补偿措施的制定提供参考     

光皮桦种子千粒重、寿命及生命力研究

The thousand-seed weight, germination rate and vitality of seeds for Betula luminifera were studied. The results showed that the thousand-seed weight was different in various habitats, and varied with the age and the part of crown and fruit. The seed had a longevity of 32—37 days in general and with a characteristic of the rapid germination. The seed had a high germination rate during the early stage or perk stage of seed dispersal, and a lower germination rate during the end stage. The germination rate and vitality of mature seed reduced with the increase of the storing time, the change in seed ger-mination was significantly different at the various ages and habitats.     

杉木种子营养化学成分的研究

本文较详细地研究了不同地理分布、种子发芽率在３５％以上的杉木种子营养化学成分。结果表明,杉木种子中可溶性糖、粗蛋白质、脂肪、淀粉的含量分别为４０～７０ｇｋｇ－１、１５０～１６０ｇｋｇ－１、２３０～２６０ｇｋｇ－１、６０～８０ｇｋｇ－１;大量元素含量以Ｎ最高,为２４～２６ｇｋｇ－１;微量元素含量依次为Ｍｎ＞Ｆｅ＞Ｚｎ＞Ｃｕ＞Ｎｉ＞Ｐｂ＞Ｃｄ。该结果可为杉木种子的品质鉴定提供科学依据。