木薯组织培养外植体选择和灭菌研究

以木薯品种华南205为材料,研究外植体类型与不同灭菌方法对其组织培养的影响。试验结果表明:9—10月份室外取材灭菌效果最理想,Hg Cl2灭菌处理7—8月份取的外植体的时间需控制在10 min内,而灭菌处理9—10月份取的外植体的时间需控制在5 min。此外,室内水培木薯茎段和室外茎段的中部均可作为组织培养的良好材料。     

梭梭种子组织培养表面灭菌方法研究

[目的]对梭梭组织培养的灭菌方法及外植体进行筛选,以期为其组织培养提供指导方法。[方法]以梭梭种子为试验材料,研究不同灭菌剂处理的灭菌效果和不同粒径种子对无菌苗成活率的影响。[结果]梭梭种子最佳灭菌方法为75%酒精5 min+0.1%升汞8min;以直径￠2.0 mm的种子外植体,组培能获得较高的无菌苗成活率,可达65%以上。[结论]该研究结果建立了适合梭梭种子组织培养的表面灭菌方法。     

俄罗斯大果沙棘离体快繁研究

为探索俄罗斯大果沙棘组织培养的最佳途径，采用不同培养基，对俄罗斯大果沙棘不同外植体的离体培养技术进行了研究。结果表明：适宜俄罗斯大果沙棘组织培养的最佳途径为诱导休眠芽或幼茎产生不定芽获得无性系植株，并形成完整植株，俄罗斯大果沙棘组织培养的适宜外植体为2月末至3月下旬的休眠枝，不同品种间的离体培养和再生能力有明显差异。     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿（Euscaphis japonica）茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验。通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响。结果表明：对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8min效果最好。以6-BA1.5mg/L＋NAA1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%。     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿(Euscaphis japonica)茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验.通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响.结果表明:对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8 min效果最好.以6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%.     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

黄连木组织培养研究初报

[目的]探寻黄连木的组织培养繁殖技术,为进一步开展品种改良奠定基础。[方法]以2年生嫁接苗茎段为外植体,通过诱导腋芽进行启动培养试验。分别研究不同灭菌剂与灭菌时间、不同抑制剂以及不同光照条件等对黄连木组培效果的影响。[结果]试验初步得出,用0．1％升汞灭菌黄连木外植体较合适的时间为8～12min,半木质化茎是最合适的诱导腋芽的茎段;对于抑制褐变方面,使用聚乙烯吡咯烷酮（PVP）相对较好些;而在培养初期,光照强度对腋芽的诱导情况影响不大。[结论]黄连木组织培养过程中极易出现褐变现象,而且污染率也很高,生产中应注意采取适当的技术措施避免该现象。     

新疆甜菜组织培养及植株再生研究

[目的]以新疆的两个甜菜品系为研究对象,对培养基激素及浓度配比、外植体的选择及两个基因型的再生能力进行了初步的比较分析,以期建立起适合新疆甜菜品种(系)的组织培养体系.[方法]对不同的灭菌方式、培养基激素组合、不同外植体再生能力、不同基因型甜菜再生能力进行比较.[结果]分别对影响甜菜组织培养及植株再生体系的各个因素进行比较后建立了适合新疆甜菜的组织培养及植株再生体系.[结论]确定采用破除甜菜种壳进行灭菌处理的方法灭菌效果最明显.通过筛选,确定了甜菜叶柄再生的最适培养基激素配比,为MS+6-BA 1.0 mg/L,IAA 0.3 mg/L.对不同外植体再生能力的比较分析发现,叶柄的再生能力高于其他外植体,是较为理想的外植体来源.新甜486与413两种基因型的再生能力无明显差异.     

莲不同类型地下芽的初代培养

以莲不同类型的顶芽和腋芽为外植体,开展芽的无菌离体再生组织培养.结果显示:莲的不同类型顶芽/腋芽离体培养效果不同,随着消毒时间的延长,A类型外植体污染率最低,B类型外植体污染率次之,C类型外植体污染率最高.A类型外植体成活率最低,B类型外植体次之,C类型外植体最高.外植体的不同灭菌试验表明,添加生物消毒剂(plant preservative mixture,PPM)后,污染率降低到27.77％.不同的细胞分裂素对初代培养的试验表明,添加3.0 mg/L KT时,诱导率达到74.43％,而且芽生长健壮,是比较适合的莲外植体诱导的激素浓度.     

美国红枫外植体选择及启动培养研究

对美国红枫组织培养中外植体灭菌、褐化预防及外植体启动进行了试验研究。结果表明:以美国红枫半木质化茎段为外植体,用1%次氯酸钠灭菌4 min,外植体的成活率最高为82.22%;在外植体培养初期每隔2 d转移至新鲜培养基中,2~3次后可以彻底去除褐化现象;最佳的启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1,外植体抽芽率可达92.2%。     

蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌和芽增殖的研究

[目的]研究蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌的方法,筛选适宜芽增殖的外植体及激素组合。[方法]用乙醇、次氯酸钠和升汞的不同组合对种子进行灭菌,然后比较顶芽和带腋芽的茎段作为外植体进行继代增殖的效果,探讨不同激素组合对芽增殖的影响。[结果]较好的种子灭菌方法为:75%乙醇30 s+10%NaClO10 min+0.1%HgCl25 min;带腋芽的茎段为较好的继代增殖外植体。6-BA对芽增殖有显著促进作用;KT对芽的增殖效果不如6-BA;芽增殖的最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,增殖倍数为6.74。[结论]获得了较好的种子灭菌方法,筛选出适合继代增殖培养的外植体和激素组合,为蔓性千斤拔组织培养的深入研究提供实验基础。     

木薯外植体表面灭菌与增殖培养的研究

[目的]筛选出适合木薯组织培养的灭菌体系,为加快木薯组织快繁提供科学依据。[方法]以木薯品种GR891的腋芽为外植体,研究经甲基托布津杀菌剂处理和无处理外植体分别采用不同组合、不同处理时间对其表面灭菌的效果,同时研究6-BA和6-BA与NAA组合对丛芽诱导培养效果的影响。[结果]经甲基托布津杀菌剂处理后用体积分数75%乙醇消毒10 s＋质量分数0.1%升汞处理8 min效果最好,外植体存活率为61.3%;以MS＋6-BA 1.5 mg/L＋糖30 g/L＋琼脂6.5 g/L培养基诱导培养芽效果最好,有的丛芽能达到7～9株,丛芽生长速度快,健壮。[结论]建立了木薯GR891组织培养外植体灭菌与增殖培养体系。     

植物外植体灭菌技术研究进展

外植体污染一直是植物组织过程中极难解决的问题,外植体的灭菌效果直接关系着植物组织培养能否成功启动。本文通过研究近几年报道的植物组织培养成功案例,发现在干旱季节或连续的晴朗天气时采取外植体,污染率最低;外植体在进行表面灭菌之前先进行冲洗、黄化、热水浴等处理,一定程度上可以降低污染率;外植体的表面消毒可以使用氯化汞和次氯酸钠等消毒剂;当外植体有严重的内生菌时,则可以使用四环素、链霉素等抗生素进行抑制;此外,纳米材料也已经越来越多地用于植物组织培养中污染物的抑制。     

玉竹组织培养外植体灭菌研究

以邵东玉竹芽为外植体,研究经不同杀菌剂,不同杀菌剂组合、不同处理时间对其灭菌的效果。筛选出适合玉竹组织培养的外植体灭菌体系,为加快玉竹种苗快繁提供科学依据。结果表明：升汞对玉竹外植体上的病原菌有较好的杀灭和抑制作用,所以含有升汞的灭菌组合效果更佳。当2种杀菌剂复合使用时比单一杀菌剂的灭菌效果好。初次灭菌处理用10%次氯酸钠浸泡15min,二次灭菌用0.1%升汞浸泡15min效果最佳,玉竹组培苗污染率为1.67%,成活率为96.67%。另外,在灭菌处理后用超声波清洗仪清洗15min可有效加强除菌效果。初次灭菌处理用0.2%多菌灵浸泡15min,二次灭菌用10%次氯酸钠浸泡15min,再用超声波处理15min,污染降为3.67%,成活率为95.00%,可作为不使用升汞灭菌的替代方案。外植体浸泡杀菌剂的时间在10～15min为宜。     

杧果施用商品有机肥试验初报

有机肥对杧果园土壤改良、促进杧果生长、提高挂果率、改善果实品质具有重要作用,通过杧果园施用商品有机肥不同用量的对比试验,得出华坪县杧果园施用商品有机肥最佳施用量为每亩400 kg。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

楸树组培中材料灭菌的研究

以楸树茎段为材料,研究了不同灭菌方法对离体组织培养的影响,结果表明采用1.25g/l多菌灵浸泡30min+酒精棉球擦拭外植体+(400mg/l青霉素+200mg/l链霉素) 浸泡20min+0.1%升汞8min灭菌效果最好.     

苏州野生水仙繁殖技术研究

采用双鳞片扦插和组织培养的方法进行比较试验,在组织培养中设置不同激素梯度的培养基,筛选苏州野生水仙的最适繁殖方法及条件,以建立其高效快繁体系.试验结果表明:鳞茎经过4~9 ℃低温预处理4~8周较常温中保存在2种方法中均生长较快,且在组织培养中褐化现象较少;组织培养的繁殖系数大于双鳞片扦插方法,水仙耗材较少.组织培养时,灭菌后剥除外层鳞茎片,再进行灭菌,最后切块的外植体生长情况较好;MS+6-BA 4.5 mg/L+NAA 0.4 mg/L+1 g/L AC培养基诱导小鳞茎的分化效果较好,带鳞茎盘的双鳞片分化情况最佳.     

花生不同发育时期种胚离体培养研究

以花生品种农大花103不同发育时期的幼胚为外植体,采用组织培养的方法再生成花生植株。结果表明,花生幼胚通过组织培养能够正常发芽生长成植株的最短发育时期为果针入土后30 d,在该时期内花生幼胚的发芽率为97.99%,成苗率为76.06%,生长状态接近于正常成熟胚。以该品种成熟种胚为外植体,通过组织培养成熟种胚的发芽率达到了100%,成苗率达到了87%。     

雪莲果叶片愈伤组织的诱导

[目的]研究雪莲果叶片愈伤组织诱导的最佳灭菌方法和最佳培养基。[方法]以雪莲果叶片为外植体,用浓度0.1%升汞浸泡不同时间,筛选最佳灭菌方法;以MS为基本培养基,比较不同浓度生长调节物质对愈伤组织诱导的影响。[结果]用浓度0.1%升汞溶液灭菌8 min,外植体污染率为54.55%,死亡率为3.64%;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。[结论]最佳灭菌方法为浓度0.1%升汞对叶片灭菌8 min;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。