桑炭疽病病菌生物学特性研究及药剂毒力测定

分别用不同营养、温度、湿度，ＰＨ值和光照条件进行了桑炭疽病病菌生物学特性的研究，并用７种杀菌剂各３种浓度制成的含毒ＰＤＡ平板培养基测定了对病菌菌丝生长的抑制作用。结果表明：单糖、双糖和多糖作为碳源都能被病菌所利用，以甘露糖为最好。菌丝生长在２４～２８℃、ＰＨ６～７为最适。分生孢子在１％葡萄糖液和２０％桑叶汁液、２０～２８℃、相对湿度１００％及ＰＨ６～７条件下萌发率最高。散射光、黑暗对孢子萌发无明显差异，而紫外光有较强的杀伤作用。４０％禾枯灵可湿性粉剂对菌丝生长的抑制效果最好。     

当归炭疽病菌的生物学特性研究

本试验利用常规方法研究了当归炭疽病菌(束状炭疽菌Colletotrichum dematium)的生物学特性和营养利用能力,为明确当归炭疽病的发生流行规律提供了依据。结果表明,菌落生长和孢子萌发最低温度和最高温度为10 ℃到35 ℃,最适为25 ℃;在pH 5~11间菌落可以生长,最适pH为11;在pH 8~11间产孢,最适pH为10,但中性有利于孢子萌发;该菌对碳氮源利用范围广,但甘露糖、D-半乳糖和氯醛糖抑制其生长;菌落生长和孢子萌发对光照不敏感;相对湿度95%以上分生孢子能萌发,水中萌发率显著高于其他湿度条件(P<0.05),蔗糖能够促进孢子的萌发,但马铃薯汁液抑制其萌发。     

苹果白绢病菌生物学特性及室内药剂毒力测定

在辽宁绥中县发现苹果白绢病发生为害,为明确病原菌种类,将采集病样进行分离培养,并进行柯赫氏法则验证致病性,根据病原菌形态和rDNA-ITS和LSU序列分析对病菌进行分子鉴定,同时进行了病菌生物学特性及防治药剂毒力测定。结果表明,分离株的菌落形态与整齐小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.一致,经分子鉴定,其ITS序列和LSU序列与整齐小核菌的有性型序列同源性达100%,将引起苹果白绢病的病原菌鉴定为整齐小核菌。病原菌在10 ~ 35℃均可生长,25 ~ 30℃时病菌生长最快,病原菌在pH值范围为3 ~ 12时均可生长,碱性环境不适宜病菌生长。室内毒力测定结果显示,5种药剂戊唑醇、吡唑醚菌酯、噻呋酰胺、咯菌腈和氟硅唑均对白绢病菌有抑制作用,其中,噻呋酰胺抑菌效果最好,EC50为0.0565 mg/L。     

2种麦冬炭疽病菌生物学特性的研究

胶孢炭疽菌和黑线炭疽菌是麦冬炭疽病的病原菌.胶孢炭疽菌菌丝体生长、产孢和孢子萌发的最适温度都为28℃,黑线炭疽菌的分别为25,28和25℃.弱酸条件有利于2种炭疽菌菌丝体的生长和产孢,在pH值为4时产孢量都达到最大值,胶孢炭疽菌在pH值为7时孢子萌发率最大,黑线炭疽菌在pH值为8时达最大.光照处理对这2种病菌营养生长和产孢均无显著影响.供试碳源中果糖和葡萄糖有利于胶孢炭疽菌的菌丝体牛长,山梨糖和淀粉有利于其产孢;麦芽糖有利于黑线炭疽菌的菌丝体生长,淀粉有利于其产孢;氮源中有机氮有利于2种炭疽菌生长和产孢,化学氮源则表现抑制作用.胶孢炭疽菌和黑线炭疽菌的致死温度分别为55和50℃10 min.     

10种杀菌剂对柑橘炭疽病菌的室内毒力测定

利用生长速率法,测定了10种杀菌剂对柑橘炭疽病病菌的室内毒力。结果表明：95%苯醚甲环唑抑菌效果最好,EC50为0.0026mg/L,95%咪酰胺次之,EC50为0.0075 mg/L;95%肟菌酯、95%醚菌酯、95%恶霉灵、96%戊唑醇、95%百菌清、 95%甲基硫菌灵、80%代森锰锌和10%多抗霉素毒力依次减弱,EC50分别为0.018124、0.058939、0.075695、5.8693、27.2789、50.3972、62.9007和169.0314 mg/L。     

柿树炭疽病菌的生物学特性及其抑菌药剂筛选

通过十字交叉法和血球计数板法测定柿树炭疽病菌Colletotrichum horri的生物学特性,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定16种常用杀菌剂对该菌菌丝生长的抑制作用和对孢子萌发的影响。柿树炭疽病菌菌丝生长的最适温度为25篊,最适产孢温度为28篊,适合菌丝生长的pH值为4.0~6.0,最适产孢pH值为4.0;最佳碳源为葡萄糖和麦芽糖,最佳氮源为牛肉膏。16种常用杀菌剂中, 33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油和70%代森锰锌可湿性粉剂对柿树炭疽病菌菌丝生长和产孢的抑制效果最好,可作为防治柿树炭疽病的优选药剂,其次为70%代森联水分散粒剂、400 g?L-1氟硅唑乳油和50%福美双可湿性粉剂,可作为备选药剂。该研究结果可为柿树炭疽病的有效防治提供试验依据。     

石榴褐斑病菌生物学特性研究和室内毒力测定

由石榴假尾孢菌（Pseudocercosproa punicae (P.Henn.) Deighton）引起的石榴褐斑病是石榴上发生普遍,为害严重的主要病害之一。本研究对病原菌进行了生物学特性和室内毒力测定研究。生物学特性测定结果表明：P.punicae在5～35℃,pH3～8的条件下均能生长。最适生长温度为25℃,最适生长pH为5。菌丝的致死温度为47℃,10min。24h光照有利于菌丝的生长。菌丝在燕麦琼脂培养基上生长最快。麦芽糖和尿素分别为最佳碳源和氮源。室内毒力测定结果表明：供试杀菌剂在试验浓度下对菌丝生长的抑制率随浓度的增加而增加,各药剂间的EC50各不相同。其中毒力效果最好的是40%氟硅唑乳油（EC）。     

草地螟的生物学特性及室内毒力测定研究

通过田间调查和室内饲养观察,对草地螟Loxostege sticticalis的生物学特性及发生危害特点进行了研究.选择4种农药用浸叶片法对草地螟进行室内毒力测定,结果表明,4种农药对草地螟的毒力为7.2%苦参碱.烟碱乳油》3%高渗苯氧威》25%灭幼脲Ⅲ号悬浮剂》5%吡虫啉乳油,其中以苦参碱.烟碱的毒力最强,半致死浓度(LC50)为10.499 mg/L,致死浓度(LC95)为16.093 mg/L.     

邵阳柑橘炭疽病菌的分离鉴定和药剂筛选初报

【目的】明确邵阳地区柑橘炭疽病病原菌的种类及其致病性,针对性开展防治药剂初筛试验研究,为邵阳柑橘炭疽病防控提供理论依据。【方法】对采自湖南邵阳的炭疽病样品采用病原菌的分离、形态学特征观察和分子生物学的方法进行鉴定,采用室内离体接种的方法对病原菌致病性进行测定,并通过病原菌侵染切片观察分析其侵染特性。此外,采用菌丝生长速率法测定7种不同药剂对病原菌的抑菌效果。【结果】分离到了11株具有相同形态特征的菌株。结合rDNA-ITS、rDNA-GAPDH和rDNA-ACT序列构建系统进化树分析病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）,且发现该菌表现出较强的致病性,多在叶片气孔处侵染为害。在7种供试药剂中,250g/L吡唑醚菌酯抑菌效果最明显,EC50为0.756mg/L。【结论】邵阳主要柑橘产区炭疽病致病菌为胶孢炭疽菌,多在叶片气孔处潜伏侵染为害。250g/L吡唑醚菌酯对柑橘炭疽菌具有良好的室内抑菌效果,有柑橘炭疽病防治的应用潜力。     

百香果采后果腐病菌的生物学特性及其杀菌剂毒力测定

可可毛色二孢（Lasiodiplodia theobromae）引起的百香果采后果腐病是黄果百香果上发生的一种新病害。为明确该病原菌的生物学特性,本研究采用生长速率法测定了不同温度、pH、碳源、氮源和光照对病原菌生长的影响,并测定了14种杀菌剂对该病原菌的室内毒力。结果表明,病原菌的最适生长pH为4.5~5.5,最适生长温度为31~34 ℃;其可利用蔗糖、甘油、D-半乳糖等11种供试碳源;可利用硫酸铵、氯化铵、L-天冬酰胺等11种供试氮源,尿素为最难利用的氮源;不同光照条件对其菌丝生长的影响差异不显著。14种供试杀菌剂对病原菌的菌丝生长均具有一定的抑制作用,其中戊唑醇和丙环唑的毒力较高,其EC50值分别为0.0072 mg·L-1和0.7067 mg·L-1,均小于1 mg·L-1;其EC95值分别为90.5459 mg·L-1和33.1295 mg·L-1,均小于100 mg·L-1。     

柱花草种质对炭疽病原菌的反应

通过盆栽植株接种和离体叶片接种试验,研究45份柱花草种质对中国两种类型炭疽病原菌生理小种CATAS292(A型)和CATAS100(B型)的反应。结果表明,37.8%的接种植株对A型生理小种有抗性,31.1%的对B型有抗性,64.4%的对两种类型炭疽病原菌均易感病。柱花草植株抗病,其离体叶片不一定抗病。感病与抗病柱花草的差异主要表现在其感染和脱落叶片数、菌核数量及病斑扩展方面。     

菟丝子生防菌“鲁保一号”生物学特性及T-DNA插入突变体库的构建

"鲁保一号"菌剂对杂草菟丝子生防效果良好,但是受制于菌种退化问题其进一步应用受到限制。本研究通过对"鲁保一号"菌的生物学性状进行分析,明确其菌种培养特性:最佳培养基为PDA培养基,最佳培养温度为25~28℃,最佳培养pH值为5~8。同时,利用农杆菌介导的遗传转化方法进行"鲁保一号"菌株转化,并初步构建了约含2300个阳性转化子的T-DNA插入突变体库。转化子经连续继代6次培养后潮霉素B抗性稳定,随机挑取的20个转化子均能PCR克隆出潮霉素基因,转化子是由T-DNA插入引起的,且筛选抗性能够稳定遗传。以上研究为后期筛选获得致病力稳定的遗传改良菌株,并进一步应用奠定了基础。     

葡萄炭疽病菌T-DNA插入突变体的表型及致病性变异分析

胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的葡萄炭疽病是葡萄生产中的一种重要病害。本研究对从2100个T-DNA插入突变体库中挑选的11株PDA培养特征变异较大的突变体进行表型和致病性分析,旨在为葡萄炭疽病菌产孢与致病基因网络调控研究奠定基础。结果表明：突变体M112、M247、M1288、M1325、M1386和M1430不能产生分生孢子,其余的5株突变体产孢量降低;突变体M247、M1288和M1325丧失了致病性;突变体M112、C1094、M1386和M2013突变体致病力增强。此外,突变体C1094孢子萌发率明显降低,其余4株产孢突变体的孢子萌发率与野生型菌株WS15无明显差异。     

129株芒果炭疽病菌对多菌灵的抗药性测定

为研究芒果炭疽病菌对多菌灵的抗药性,从国内及泰国、美国夏威夷等芒果产区采集病样分离、纯化菌株,采用生长速率法测定其对多菌灵的敏感性。结果表明,分离获得的129株菌株对多菌灵的EC50值为0.02～111.66 μg/mL,平均值为6.2984 μg/mL,最大EC50值是最小EC50值的5583倍,抗性菌株23株、占17.83%。不同地区和采集部位的芒果炭疽病菌菌株对多菌灵的敏感性不同,来自泰国的菌株EC50平均值最高、广东的次之,分离自叶片的菌株EC50值变化幅度最大。说明芒果炭疽病菌对多菌灵已产生一定程度的抗药性,应高度重视芒果炭疽病菌的抗药性问题。     

柱花草响应炭疽菌侵染的差异磷酸化蛋白质组学分析

磷酸化是重要的蛋白翻译后修饰,在调节植物免疫方面起重要作用,但目前对柱花草与炭疽菌互作的磷酸化知之甚少。本文以太空诱变柱花草抗病株系‘2001-84’和感病株系‘2001-71’为试验材料,通过非标记定量磷酸化蛋白质组学,分析了两种株系接种炭疽菌前后的差异磷酸化蛋白。结果表明：在‘2001-84’和‘2001-71’中分别有138个和106个蛋白的磷酸化丰度特异性响应炭疽菌侵染。蛋白功能与代谢通路富集分析发现两者具有明显的差异：‘2001-84’特异性磷酸化蛋白主要定位在质膜附近,参与胞内信号传导,并显著富集在MAPK级联信号通路、植物激素信号传导、病原菌互作途径等代谢通路;‘2001-71’则更多的定位于细胞器膜上,参与细胞器的分解,代谢通路只在剪接体途径显著富集。通过对‘2001-84’特异性磷酸化蛋白进一步分析,发掘了跟抗病相关的蛋白。本文研究可为后续解析柱花草抗炭疽病的分子机制和培育柱花草抗病品种提供参考。     

抗柑桔褐斑病菌和炭疽病菌宽皮柑桔种质的筛选

由交链格孢菌Alternaria alternata和胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides侵染引起的柑桔褐斑病和炭疽病是重庆万州地区红桔的主要真菌病害。为筛选适合万州地区发展的柑桔品种,采用离体叶片室内人工接种和病情指数抗性评价方法探讨了16份宽皮柑桔种质对柑桔褐斑病菌和炭疽病菌的抗性。结果表明：对于柑桔褐斑病菌,不知火桔橙、W?默科特、春见桔橙和温州蜜柑为高抗种质;对于柑桔炭疽病菌,不知火桔橙、W?默科特、蔓生红桔和苏红为高抗种质。综合考虑,重庆万州地区可选择抗病性较强的鹅蛋红桔、福桔、安江红桔、不知火桔橙和W?默科特等宽皮柑桔进行品种替换和提升。     

兰花炭疽病颉颃细菌Z-62的发酵条件优化

通过单因素试验和正交试验确定了兰花炭疽病颉颃细茵的最佳发酵条件为:葡萄糖3%、大豆蛋白胨3%、FeSO4·7H2O 0.05%、KCl 0.05%、种龄20 h、培养基初始pH值为6.0、250 mL三角瓶装液量30 mL、接种量4%、发酵时间60 h.在该条件下培养得到的发酵液抑菌圈直径可达26,28min,抑菌活性提高了29.4%.