查尔酮对11种芒果病害病原菌的抑菌活性测定

为了研究查尔酮对芒果多种病害病原菌的抑制活性,评价不同病原菌对查尔酮的敏感性。利用生长速率法测定芒果炭疽病、蒂腐病、畸形病等病原菌对查尔酮的敏感性,并以芒果胶孢炭疽病菌菌株A2（Colletotrichum gloeosporioides）对代森锰锌和三唑酮的敏感性作为参照。结果表明,查尔酮对供试病原菌均具有明显抑菌效果,其中查尔酮对芒果小穴壳蒂腐病病原菌菌株PZ5（Botryosphaeria dothidea）的EC50值最小为4.9585 mg•L-1 ,对芒果畸形病病原菌菌株MMD27（Fusarium proliferatum）的EC50值最大为148.6886 mg•L-1。查尔酮对芒果胶孢炭疽菌菌株A2的抑制效果要比代森锰锌强,但比三唑酮的抑制效果稍弱。查尔酮具有开发成新型农药的潜力,值得进一步研究。     

芒果红点病病原菌的鉴定

在海南芒果果实上发现了一种由炭疽病菌引起的芒果红点病,导致芒果的经济价值下降。本实验通过菌种的分离与纯化、致病性测定、形态学观察和rDNA-ITS序列分析,对引起芒果红点病的病原菌进行了鉴定。病原菌回接后,芒果果皮上出现凸起的褐色或黑色坏死斑点,周围有红色或暗红色晕圈,这与田间自然发病果实的症状一致;在PDA培养基上培养后,芒果红点病原菌菌落呈圆形,灰色,气生菌丝绒毛状,后期产生橘红色孢子堆;病原菌的rDNA-ITS基因序列与已有的芒果炭疽菌rDNA-ITS核苷酸序列同源性高达100%。结果表明芒果红点病病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides Penz.）。     

52个柑橘品种对胶孢炭疽菌的抗性评价

由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）侵染引起的柑橘炭疽病是柑橘的主要真菌病害。为研究不同柑橘品种对炭疽病的抗性,本试验采用室内人工接种法,根据病情指数、平均直径、系统聚类分析3种不同抗性评价方法来探讨52个柑橘品种对胶孢炭疽菌的抗性。结果表明：参试的种质资源共分为高抗、抗病、中抗、感病四类,未发现免疫和高感种质,胡柚、晚棱脐橙等8个品种为高抗品种。本文讨论了不同柑橘品种间的抗性差异,为下一步的抗柑橘炭疽病育种提供了理论依据。     

广西珍珠李叶枯病原鉴定

为了明确近年来广西省天峨县发生严重的珍珠李叶枯病原,采集天峨县珍珠李病叶,对病原进行分离和鉴定。本研究从病叶中分离到2种真菌,核糖体DNA内转录间隔区（internal transcribed spacer, ITS）序列分析表明2种真菌分离物分别与GenBank中胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）和拟盘多毛孢菌（Pestalotiopsis sp.）具有99%的相似性。离体致病性测定结果表明,分离菌株均能使健康叶片产生症状,并通过柯赫氏法则（Koch’ postulates）验证。结合真菌分离物的分离比率,将广西天峨县珍珠李叶枯病原初步鉴定为胶孢炭疽菌。     

葡萄炭疽病病原鉴定及防治药剂筛选

采用组织分离法对采自贵阳市花溪区葡萄基地的葡萄炭疽病病样进行分离,致病性测定,结合病原菌形态学特征、rDNA-ITS序列对菌株进行鉴定,并通过菌丝生长抑制法测定了该菌株对7种杀菌剂原药及2组混配药剂的敏感性。结果表明,结合形态学和分子生物学将该菌株鉴定为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides);7种原药中丁香菌酯对该菌株生长抑制作用最强,EC50值为0.18 mg/L,其次为苯醚甲环唑和双苯菌胺,EC50值分别为1.18 mg/L和1.34 mg/L;混配组合中,吡唑醚菌酯与苯醚甲环唑8:1混配时,其共毒系数(CTC)为168.69,啶氧菌酯与苯醚甲环唑1:4和8:1混配时,CTC分别为197.21和192.69,协同增效效果显著。引起贵阳市花溪区葡萄基地葡萄炭疽病的致病菌为胶孢炭疽菌。     

邵阳柑橘炭疽病菌的分离鉴定和药剂筛选初报

【目的】明确邵阳地区柑橘炭疽病病原菌的种类及其致病性,针对性开展防治药剂初筛试验研究,为邵阳柑橘炭疽病防控提供理论依据。【方法】对采自湖南邵阳的炭疽病样品采用病原菌的分离、形态学特征观察和分子生物学的方法进行鉴定,采用室内离体接种的方法对病原菌致病性进行测定,并通过病原菌侵染切片观察分析其侵染特性。此外,采用菌丝生长速率法测定7种不同药剂对病原菌的抑菌效果。【结果】分离到了11株具有相同形态特征的菌株。结合rDNA-ITS、rDNA-GAPDH和rDNA-ACT序列构建系统进化树分析病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）,且发现该菌表现出较强的致病性,多在叶片气孔处侵染为害。在7种供试药剂中,250g/L吡唑醚菌酯抑菌效果最明显,EC50为0.756mg/L。【结论】邵阳主要柑橘产区炭疽病致病菌为胶孢炭疽菌,多在叶片气孔处潜伏侵染为害。250g/L吡唑醚菌酯对柑橘炭疽菌具有良好的室内抑菌效果,有柑橘炭疽病防治的应用潜力。     

贡柑黑腐病病原菌的分子鉴定

贡柑黑腐病是近年来在贡柑上发生的一种新型病害,该病害可导致嫩梢快速枯死,大量嫩叶脱落,严重影响树势和产量。本研究从病区采集发病枝叶,对贡柑黑腐病病原菌进行分离、纯化,并采用rDNA-ITS序列分析技术对其进行分子鉴定。结果表明,贡柑黑腐病病原菌为链格孢属（Alternaria Nees）真菌,rDNA-ITS序列与GenBank中芸薹链格孢菌(Alternaria brassicae (Berk.) Sacc.)和柑桔链格孢菌(Alternaria citri Ellis & Everhart)的ITS序列的同源性为99%。结合形态学特征,推断该病原菌为柑桔链格孢菌。     

柑橘炭疽病研究进展

柑橘炭疽病是常见的柑橘病害,虽然该病被研究多年,取得显著成果,但对该病的探究仍需深入。本文以胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌为主要论述对象,综述了近年来国内外对这两种病原菌的研究状况,包括炭疽菌的种类及侵染循环、鉴定、致病机理和防治方法等。此外,本文还提出了未来该病研究需要解决的问题及发展方向。     

贵长猕猴桃蒂腐病病原菌分离鉴定及防治药剂毒力测定

为明确引起贵长猕猴桃蒂腐病病原菌的种类并筛选出有效防治药剂,本研究从自然发病果实进行病原菌分离,通过菌株致病性测定、形态学及分子生物学鉴定,并针对病原菌采用6种不同杀菌剂对其的抑菌效果研究。结果表明,分离获得的有效菌株中GC-1和GC-2可引发蒂腐病,将有效菌株的序列结果与 NCBI进行核酸 Blast 比对,GC-1和GC-2分别与木贼镰刀菌(Fusariam)和粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的同源性达99 %和100 %,结合GC-1和GC-2病原菌形态特征分析,明确引起贵长猕猴桃蒂腐病病原菌为木贼镰刀菌(Fusariam)和粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)。室内毒力测试结果表明,甲基硫菌灵对木贼镰刀菌抑菌效果最好,EC50值为8.2007 mg/L;其次是异菌脲、咪鲜胺、多菌灵、戊唑醇和苯醚甲环唑,Ec50分别为19.6431 mg/L、23.2454 mg/L、37.7505 mg/L、70.2533 mg/L和139.2179 mg/L。多菌灵对粉红螺旋聚孢霉效果最好,EC50值为7.8540 mg/L;其次是咪鲜胺、苯醚甲环唑、甲基硫菌灵、异菌脲和戊唑醇,其Ec50分别为14.3703 mg/L、28.1615 mg/L、100.7953 mg/L、126.3797 mg/L和135.9008 mg/L。因此,引起贵长猕猴桃蒂腐病的病原菌为木贼镰刀菌(Fusariam)和粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea);甲基硫菌灵和多菌灵分别对木贼镰刀菌(Fusariam)和粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的菌丝生长具有明显抑制作用,该研究结果可为贵长猕猴桃蒂腐病的田间药剂防治提供筛选依据。     

金柑流胶病致病菌的分离与初步鉴定

近年来在金柑上出现流胶现象,施用防治流胶病的药剂没有明显作用,且其致病菌目前报道很少。本实验室通过从金柑流胶病株上分离纯化得到5株真菌,编号为JG1、JG2、JG3、JG4、JG5。致病性测定发现5株真菌的致病程度不同,JG4孢子悬浮液处理发病最重,JG1处理发病最轻。对这5种真菌进行形态学、分子生物学鉴定,发现JG2、JG3、JG4属于链格孢（Alternaria sp.）,JG1属于叶点霉（Phyllosticta sp.）,JG5属于镰孢霉（Fusarium sp.）。这为金柑流胶病的防治和快速鉴定奠定了基础。     

江津龙华W?默科特叶缘黄化相关致病真菌的分离和鉴定

为了探明造成江津龙华W?默科特叶缘黄化的致病真菌,通过组织分离、致病性和分子生物学鉴定,共分离鉴定出7株致病菌,其中4株属于链格孢属(Alternaria sp.);1株与喀斯特炭疽菌(Colletotrichum karstii)有99%的同源性;1株与蚕豆葡萄孢（Botrytis fabae）有99%的相似性;1株与蚕豆叶壳二孢菌（Ascochyta fabae CBS)、豌豆壳二孢菌(Peyronellaea pinodella)和Phoma pinodella有100%的同源性。此研究为江津龙华叶缘黄化的防控奠定基础。     

2种麦冬炭疽病菌生物学特性的研究

胶孢炭疽菌和黑线炭疽菌是麦冬炭疽病的病原菌.胶孢炭疽菌菌丝体生长、产孢和孢子萌发的最适温度都为28℃,黑线炭疽菌的分别为25,28和25℃.弱酸条件有利于2种炭疽菌菌丝体的生长和产孢,在pH值为4时产孢量都达到最大值,胶孢炭疽菌在pH值为7时孢子萌发率最大,黑线炭疽菌在pH值为8时达最大.光照处理对这2种病菌营养生长和产孢均无显著影响.供试碳源中果糖和葡萄糖有利于胶孢炭疽菌的菌丝体牛长,山梨糖和淀粉有利于其产孢;麦芽糖有利于黑线炭疽菌的菌丝体生长,淀粉有利于其产孢;氮源中有机氮有利于2种炭疽菌生长和产孢,化学氮源则表现抑制作用.胶孢炭疽菌和黑线炭疽菌的致死温度分别为55和50℃10 min.     

4省（市）葡萄果实病害调查及病原初步鉴定

本研究在贵州、广东、安徽和上海共16个县（市）的66个调查点位进行葡萄主要病害的调查。并对安徽、贵州和广东共9个县（市）的葡萄病样进行采集,对病原菌进行分离纯化后,分别用ITS序列对其进行分子鉴定。结果表明：广东、贵州、安徽、上海均有不同程度的葡萄霜霉病、炭疽病的发生。其中,贵州省主要葡萄病害为炭疽病、霜霉病和灰霉病,葡萄霜霉病危害严重,发病率为60.79%,炭疽病仅危害水晶葡萄,发病率为47.64%;广东省主要葡萄病害为溃疡病、炭疽病、白粉病和白腐病,其中溃疡病发生普遍,发病率为48.28%;安徽省葡萄病害有葡萄酸腐病、炭疽病、灰霉病、白腐病、黑曲霉病,其中酸腐病发生较为严重,发病率为53%,巢湖市“夏黑”品种中发病率高达97.0%;上海市调查发现葡萄酸腐病、炭疽病和黑曲霉病。此外,自广东、贵州与安徽省共分离得到114株真菌,分别鉴定属炭疽菌属(Colletotrichum spp.)、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria spp.)、间座壳属 (Diaporthe spp.)和链格孢属 (Alternaria spp.)等共计15个属。通过调查,可为各省葡萄病害综合防控提供理论参考。     

13种杀菌剂对芒果炭疽病菌的室内毒力测定及田间防效

近年来芒果炭疽病在贵州芒果园发生普遍、危害极重,通过本研究掌握芒果胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides Penz）对不同杀菌剂的毒力及田间防治效果,将为芒果炭疽病的防治提供理论依据。采用生长速率法测定13种杀菌剂对芒果胶孢炭疽菌的毒力,结果表明：13种杀菌剂中450g/L咪鲜胺EW对胶孢炭疽菌抑菌效果最好,EC50小于0.01mg/l,250克/升吡唑醚菌酯EC、50%氟啶胺SC、50%多菌灵WP和12.5%氟环唑SC的EC50均小于1 mg/L,对胶孢炭疽菌具有较好抑菌效果。芒果幼果期进行田间防治,结果表明：450g/L咪鲜胺EW1500倍液、250克/升吡唑醚菌酯EC1250倍液、50%多菌灵WP1000倍液、12.5%氟环唑SC2000倍液、250g/L嘧菌酯SC1250倍液、50%氟啶胺SC1500倍液和70%甲基硫菌灵WP1000倍液等7种药剂可相对有效地控制芒果炭疽病的发生,防效为57.57%~65.57%。该研究将为贵州芒果炭疽病的防治提供理论依据及技术支撑。     

玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及rDNA-ITS序列分析

为了明确甘肃玉米穗腐病的病原菌,于2009年9月在甘肃省四大生态区采集玉米穗腐病样品,以组织分离法进行病原物的分离培养,对分离得到的镰孢菌菌落进行纯化和单孢分离后,以形态学为基础,参照Leisle分类系统进行鉴定。结果表明,分离到271株镰孢菌菌株中有105株经形态学鉴定为黄色镰孢,占分离镰孢菌的38.7%。分析发现黄色镰孢种群数量随采样区而异,陇东和陇南地区采集的样品中分离频率分别为52.0%,55.4%,本研究充分证明了黄色镰孢是甘肃省陇东和陇南地区玉米穗腐病的优势病原菌。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对沈单16和金穗96832进行致病性测定,证实了黄色镰孢对玉米果穗的致病性。随机选取3株黄色镰孢菌株进行rDNA-ITS基因序列分析,将PCR产物回收测序后在GenBank 上比对,菌株3-1-1与GenBank 中登记的黄色镰孢菌株K1004和K216、6-4-1和21-2-1与黄色镰孢菌株CBS122.73亲缘关系最近,同源性达99%。利用DNAStar 软件绘制其系统发育树状图,结果表明,菌株3-1-1与K1004和K216、菌株6-4-1和21-2-1与CBS122.73位于系统发育树的同一分支,聚为一类,与形态学的鉴定结果一致。     

福建黄果西番莲果腐病菌分离与鉴定及生物学特性

为探究引起福建黄果西番莲发生果腐病的病原菌及生物学特性。经分离果实上的病原菌,用柯赫氏法评价致病性,观察形态特征、进行分子生物学鉴定,再经过同源性分析与系统发育树构建,鉴定引起福建黄果西番莲果腐病的病原菌。另外,初步研究不同的温度、pH值、碳源、氮源等对果腐病菌菌落生长的影响。结果表明,根据形态、系统发育学的鉴定,引起福建黄果西番莲采后果腐病的病原菌是可可毛色二孢（Lasiodiplodia theobromae）。此外,28 ℃、6、葡萄糖、硝酸钾分别是L. theobromae菌落生长的最适温度、pH值、碳源、氮源。因此,本研究成果能为控制黄果西番莲果实采后病害发生提供理论依据。     

油梨茎腐病新病原菌的分离鉴定

【目的】2019年2月在云南省河口市的油梨活树上发现了一种茎腐病,本研究的目的是明确该病病原菌种类及其生物学特性。【方法】通过形态学鉴定及分子检测的方法鉴定该病原菌种类,并从温度、pH、培养基类型及光照条件等方面对该病原菌的生物学特性进行研究。【结果】通过形态学鉴定及分子检测,确定该病病原菌为南方灵芝[Ganoderma australe（Fr.)Pat.];该病病原菌菌落生长的最适温度为30℃,最适pH为6,最适培养基为PDA,黑暗条件有利于该病原菌生长。     

宁夏地区玉米镰孢茎腐病病原菌的分离与鉴定

为明确宁夏地区玉米镰孢茎腐病病原菌的种类及优势病原菌,本研究于2020年采集宁夏地区玉米(Zea mays L.)茎腐病样品36份,对所采集样品进行组织学分离、纯化和单孢分离,参照Nelson等分类系统进行形态学鉴定,并结合镰孢菌特异性引物EF-1α进行序列分析.本研究共获得209株镰孢菌,包括禾谷镰孢复合种(Fusa...     

线叶嵩草内生真菌抗植物病原真菌活性测定

从线叶嵩草Kobresia capillifolia中分离得到7株内生真菌,经过形态学方法鉴定有3株属于镰孢属Fusarium sp.,1株属于枝顶孢属Acremonium sp.,1株属于黑团孢霉属Periconia sp.,另外有2株未产孢,不能用形态学方法鉴定。测定这7株内生真菌在不同温度下的生长速度,并以棉花立枯丝核菌Rhizoctonia solani（简称R 1）、小麦根腐离孺孢Bipolaris sorokiniana（简称B 1）、终极腐霉Pythium ultimum（简称P 1）和黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum（简称F 1)作为试验菌进行了抑菌活性测定。结果表明,供试的内生真菌有71.43%表现出良好的喜低温生长的特性;7株菌株中有4株对小麦根腐离孺孢的抑制作用较强,菌株SY3的抑制作用最强,抑菌率达到了61.84%,抑菌区也在10 mm以上;有4株对棉花立枯丝核菌有抑制作用,但抑制作用较弱,抑菌区亦不明显;对黄瓜枯萎病菌的抑制作用都较弱,抑菌区不明显;仅有1株对终极腐霉有较强抑制作用,抑菌率为13.75%,抑菌区也达到了5～10 mm。     

苯醚甲环唑对采后芒果2种真菌的毒力测定及防腐保鲜试验

通过室内生长速率法测定10%苯醚甲环唑水分散粒剂对芒果炭疽菌和蒂腐菌的毒力,结果为：苯醚甲环唑对2种病菌表现很高的毒力,对2株芒果炭疽菌（MC01和MC02）的EC50分别为0.425 和 3.917 mg/L;对2株蒂腐菌（MB01和MB02）的EC50分别为0.326 和 2.421 mg/L。防腐保鲜试验表明：200mg/L苯醚甲环唑能有效减少芒果果实的发病指数、增加好果率及减少失重率,室温（27－32℃）贮藏21d后好果率为68%,苯醚甲环唑具有延迟果实后熟及提高贮藏保鲜的效果。