大熊猫粪便菌群ERIC-PCR指纹图谱的分析及优势菌群的鉴定

探讨1只野生大熊猫和不同年龄段圈养大熊猫粪便菌群的多样性和相似性,并鉴定野生大熊猫圈养之后,其粪便中的优势菌群.对来自3个年龄段9只(3只亚成体、3只成年体、3只老年体)圈养大熊猫及1只野生大熊猫圈养前、后的11份粪便细菌的DNA进行ERIC-PCR指纹图谱分析,并利用16S rRNA基因序列分析对优势菌条带进行鉴定.结果显示:该只野生大熊猫粪便菌群多样性比圈养大熊猫丰富;圈养大熊猫粪便菌群多样性:成年体＞亚成体＞老年体;16s rRNA和ERIC-PCR指纹图谱优势条带鉴定的优势菌结果有差异性.结果表明:大熊猫的肠道菌群多样性易受生长环境、年龄因素的影响;其次, 不同年龄段的圈养大熊猫,其肠道菌群的相似性与年龄因素不相关;利用ERIC-PCR指纹图谱优势条带鉴定优势菌的方法有一定的局限性.     

高海拔地区圈养成年大熊猫冬季粪便可培养细菌鉴定——以云南野生动物园为例

为了研究云南野生动物园圈养大熊猫冬季肠道微生物菌群结构,试验利用传统方法和现代分子生物学手段(16S rDNA分析)对其冬季粪便进行可培养细菌的分离、纯化和鉴定。结果表明:对冬季粪样通过传统方法分离鉴定的细菌种属有埃希氏菌属(Escherichia Castellani and Chalmers)、志贺氏菌属(Shigella Castellani);通过16S rDNA分析,鉴定的菌群归属于鲍氏志贺菌(Shigella boydii)、大肠杆菌(Escherichia coli)、弗氏志贺菌(Shigella flexner)、特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。在高海拔地区的环境条件下,大熊猫的肠道优势菌群为埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)、弗氏志贺菌(Shigella flexner)、鲍氏志贺菌(Shigella boydii)。     

健康和腹泻川金丝猴粪样菌群比较分析

通过对比健康与腹泻成年川金丝猴粪便菌群,初步探讨腹泻对川金丝猴粪便细菌区系的影响。采集成年川金丝猴稀软粪样和正常粪样各7份,利用变形梯度凝胶电泳(DGGE)和实时荧光定量(Real-time PCR)技术分别定性和定量检测粪样菌群变化。结果表明,健康与腹泻粪样菌群DGGE指纹图谱形成2个聚类,相似性为0.78,细菌多样性指数差异不明显。健康成年川金丝猴粪样菌群以梭菌属(包括柔嫩梭菌、梭菌clusterⅪVa、梭菌clusterⅣ)、拟杆菌-普氏菌属为主要优势菌群;肠道微生物定植抗力指标B/E值为0.97;腹泻粪样中双歧杆菌数量(P0.01)、乳酸杆菌数量(P0.05)显著低于正常粪样,而梭菌clusterⅠ和肠杆菌显著(P0.05)高于正常粪样,其他菌群差异不显著,B/E值(P0.01)极显著降低。表明腹泻导致川金丝猴粪样菌群结构失调。     

笼养和散养蛋鸡小肠细菌菌群区系的聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳分析

本试验对笼养和散养蛋雏鸡和成年蛋鸡的小肠中细菌种类进行分析。取8周龄雏鸡和30周龄产蛋鸡整个小肠内容物,进行聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析,结合指纹克隆,研究鸡小肠细菌菌群的DNA指纹图谱。结果显示,共从蛋鸡的肠内容物中分离出39株细菌,有4个菌门,包括变形菌(2株,5.1%),拟杆菌(4株,10.2%),放线菌(5株,12.8%)和厚壁菌门(21株,53.8%),以及7个环境样品(不可培养细菌)。不同阶段蛋鸡不同肠段存在不同的细菌种类,在成年母鸡和自由放养鸡肠道中的细菌种类比雏鸡和笼养鸡丰富。所有分离细菌中,共分离得到10株乳酸菌,除陪伴粪球菌外,其余9株乳杆菌作为微生态制剂后备菌保存。结果提示,饲养模式和饲养阶段对蛋鸡肠道中细菌群落种类分布有很大影响,散养模式细菌群落更丰富,成年鸡较雏鸡肠道细菌多。     

亚成体大熊猫肠道正常菌群变化的初步研究

对三只处于食性转换期前后的亚成体大熊猫肠道内好氧及兼性厌氧细菌的数量、种类进行了初步研究。研究发现在亚成体大熊猫处于食性转换期前后，肠道内的细菌种类和数量变化比较大。在以高蛋白为主食的食性转换前期，亚成体大熊猫肠道内的细菌含量在１０６～１０７ｃｆｕ／ｇ之间，其中优势菌群为肠杆菌（４２５％）和乳杆菌（３５６％）；而以纤维性食物为主食的食性转换后期，亚成体大熊猫肠道内的细菌含量在１０４～１０５ｃｆｕ／ｇ，其中肠球菌居多，占３８７％。     

野外放归大熊猫肠道菌群变化的研究

对四川卧龙中国保护大熊猫研究中心的一只野外放归亚成体大熊猫肠道菌群的组成和季节变化规律进行了研究,同时与其圈养双胞胎兄弟的肠道菌群进行了比较。从放归大熊猫粪便中分离出17种肠道菌,优势菌群为肠杆菌、肠球菌和乳杆菌。与圈养大熊猫相比,放归大熊猫肠道菌群中优势菌群的种类未发生改变,但是肠球菌数量增加,肠杆菌和乳杆菌的数量减少。研究发现放归大熊猫肠道菌群中的肠杆菌和肠球菌的数量随季节变化有较大波动,乳杆菌的数量随季节变化波动不大;而圈养大熊猫三种优势菌的数量随季节变化波动都不大。     

家兔胚胎胃肠道细菌分离及16S rRNA基因序列分析

为研究家兔胚胎胃肠道细菌菌群的种类,对常规饲养、正常妊娠的家兔胚胎后期胃肠道细菌进行分离,基于分离细菌的生理生化特性、16S rRNA基因序列的同源性比较及系统发育分析,初步确定家兔胚胎后期胃肠道中存在的微生物菌群有微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、棒杆菌属(Corynebacterium)以及蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)等细菌,其序列同源性均为97%～99%。分离细菌均为G+细菌,家兔胚胎胃肠道中细菌的平均数量达到0.8×102cfu/g～1.2×102cfu/g,本研究为哺乳动物胚胎时期存在于胃肠道中细菌的深入研究奠定了基础。     

圈养老年大熊猫肠道内菌群结构研究

为了研究圈养大熊猫肠道内菌群结构,试验采用高通量测序技术分析4只圈养老年大熊猫新鲜粪便中细菌和真菌组成,并对比分析不同年龄大熊猫肠道内的菌群结构。结果表明:在门水平上,圈养老年大熊猫粪便细菌主要由变形菌门(63.98%)、厚壁菌门(35.29%)组成,真菌主要由子囊菌门(46.82%)、担子菌门(2.18%)组成;在属水平上,细菌主要由大肠杆菌属(45.26%)、链球菌属(15.80%)、不动菌属(15.34%)、梭菌属(9.79%)和串珠菌属(5.93%)组成,真菌主要由腐质霉属(19.35%)、德巴利酵母属(15.82%)、镰刀菌属(2.91%)、曲霉菌属(1.51%)组成。不同年龄的大熊猫肠道内菌群组成存在差异,与亚成年、成年大熊猫相比,老年大熊猫肠道内细菌和真菌在门、属水平上组成相似,但细菌变形菌门丰度提高、厚壁菌门丰度降低,不动菌属丰度增加;真菌子囊菌门丰度提高、担子菌门丰度下降,德巴利酵母属丰度增加。     

动物园袋鼠馆内细菌总数测定和分离菌致病力的观察

采用自然沉降法对南京红山森林动物园的袋鼠馆环境空气进行了细菌总数的测定和病原菌的致病力观察。结果显示,环境空气中各笼舍在各种培养基细菌菌落总数,在NA上平均10.12×103cfu/m3,在MSA上平均8.45×103cfu/m3,在MAC上平均0.96×103cfu/m3,在SS上平均0.93×103cfu/m3,在血培养基上平均10.07×103cfu/m3。同一采样点不同的培养细菌总数不同。同一种培养基采样点不同细菌总数不同,舍内的细菌总数多于舍外。从40份长菌的样本中共分离到20种细菌,其中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、副假伤寒沙门氏菌、聚团多源菌致病力较强,致实验动物小白鼠死亡率分别77.78%(7/9)、66.67%(12/18)、50.00%(3/6)、58.33%(7/12)。     

短芒大麦草青贮微生物特性研究及优良乳酸菌筛选

以短芒大麦草为研究对象,利用传统培养法从叶围和青贮发酵体系中分离出乳酸菌、大肠杆菌、好氧细菌、酵母菌和霉菌,并计数;结合细菌形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析鉴定分离出的乳酸菌菌株;通过研究乳酸菌的生长曲线、产酸特性及耐酸性,筛选优质乳酸菌。以期探明短芒大麦草叶围及青贮发酵体系中微生物菌群特性及青贮料中乳酸菌多样性,筛选出具有促发酵效果的乳酸菌菌株,为有益微生物饲料研发奠定基础。试验结果表明,短芒大麦草经青贮发酵后各微生物菌群数量发生不同程度变化,乳酸菌数量由0 cfu/g FM增加到4.00×10⁸ cfu/g FM,酵母菌数量由8.50×10⁵ cfu/g FM增加到1.02×10⁸ cfu/g FM,而好氧细菌、大肠杆菌和霉菌数量变化不明显;从短芒大麦草青贮发酵体系分离得到4株乳酸菌,经鉴定Lx36为Lactobacillus pentosus,Lx37为Lactobacillus brevis,Lx53为Pediococcus pentosaceus,Lx54为Lactobacillus parabuchneri;筛选得到1株益于青贮的乳酸菌株Lx36,约在20 h后进入稳定生长期,OD值达到4.21,且发酵12 h的pH仅为4.08,并可以在pH=3.0环境条件下生长。综上所述,青贮发酵是体系中各种微生物相互作用的过程,微生物菌群的数量及变化直接影响青贮饲料发酵品质。短芒大麦草青贮饲料中乳酸菌种类较丰富,筛选得到的戊糖乳杆菌繁殖速度快、产酸能力强同时表现出了较强的耐酸性,具有潜在的生产应用价值,适宜用作促发酵的青贮添加剂菌种。     

家兔四肢动脉解剖

家兔四肢动脉的分布情况,国内外文献均十分简单,特别是缺少一张完整的图。前、后足部的血管图,大部分文献中均略去。本文对此进行了研究,绘出了完整的模式图,可供参考。     

微生物除草剂的研究现状及应用前景

本文概述了利用微生物及其代谢产物防治杂草的潜在优势和研究进展，介绍已商品化和具有开发潜力的微生物除草剂及具有除草活性的微生物天然植物毒素。     

鸡肾上腺神经的分布──WGA－HRP法研究

将ＷＧＡ－ＨＲＰ注入７５～９０日龄鸡肾上腺内，追踪支配鸡肾上腺传出神经元的胞体，结果显示：鸡肾上腺接受交感神经节前和节后神经元的支配，以节后神经元支配占主导；迷走神经的传出神经元也支配鸡肾上腺，并处于次要地位。     

畜禽粪便微生物处理及资源化工程的研究

在讨论了畜禽粪便污染严重性的基础上，应用微生物技术进行畜禽粪便处理与资源化工程研究，探讨解决畜禽粪便的综合治理新途径。     

"3S"技术在三江源区生态环境动态监测的应用探讨

“3S”技术已广泛应用于生态环境监测的各个领域。针对利用“3S”技术在三江源区进行生态环境动态监测的意义、特点及可行性进行了探讨,并根据三江源区生态环境存在的主要问题,制定了动态监测主要内容。     

计算机在动物生物节律研究中的应用

本文以绵羊时辰生理学和时辰生物化学指标昼夜节律为研究对象,应用计算机根据最小二乘法原理设计软件拟合指标的群体余弦曲线,找出曲线的振幅、峰相位及其95％的置信区问。如果对数学模式稍加改动,则可适合各种类型生物节律的编程计算。     

关于重构能源立法体系的思考

我国能源立法体系存在基本法缺失，单行法不完善，配套法规缺位等缺陷。重构能源立法体系应以可持续发展为立法宗旨，引入环境影响评价制度，建立绿色标识制度，强化企业的社会生态责任，从而增强与环境法、自然资源法等相关法律的衔接；建立能源领域的宏观调控制度，鼓励开发清洁的新型能源，提高能源利用效率；促进市场化改革，力求实现经济性、供应保障性和环境保护性这一“稳固三角”目标。