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统计并记录安徽省某地猪疫情的发病情况、临床症状、病理变化和用药情况,利用多种实验室诊断方法来综合判断:细菌学检验、寄生虫检查、ELISA法和RT-PCR法,最后确诊为猪繁殖与呼吸系统综合征(PRRS) 相似文献
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采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡对贵州省不同发病猪场进行血清学检测,其弱阳性检出率为54%。在此基础上参考GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计一对特异性引物,用提取上述检测的某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料(包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织)总RNA为模版,应用RT-PCR方法扩增出目的条带,大小为739 bp,与预期的结果相同。分析表明:该核苷酸序列与已报道的Hunan-3株的同源性为100%,与国内最早PRRSV分离株CH-1 a同源性为95%,与北美代表株VR-2332和欧洲代表株LV的同源性分别为89.2%和29.2%。说明采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡结合RT-PCR方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是准确、可行的。 相似文献
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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立 总被引:1,自引:2,他引:1
根据欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列,设计E1和E6 2套PCR引物和TaqMan荧光探针,建立E1和E6荧光RT-PCR方法,用于检测PRRSV。反应条件优化后,用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA进行PCR扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(CSFV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示,建立的E1和E6荧光RT-PCR可以检出欧洲型PRRSV,敏感性依次为616和216个拷贝的PRRSV重组质粒DNA,而CSFV等非PRRSV均为阴性。建立的E1、E6荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可作为检测欧洲型PRRSV的技术储备。 相似文献
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根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)的Nsp2基因部分缺失的特征,设计合成1对特异性引物,对长春某猪场4份疑似HP-PRRSV感染病死猪的淋巴结、脾脏、肺脏等病料进行RT-PCR检测,结果均扩增出226 bp的特异片段,与预想结果一致。取病死猪淋巴结、肺脏、脾脏等组织,用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,进行病理组织学分析,结果显示,淋巴结和脾脏中淋巴细胞严重坏死,肺脏呈弥漫性间质性肺炎病变,肝脏、肾脏、脑等器官实质细胞均出现不同程度的损伤。 相似文献
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为了让兽医工作者了解猪繁殖与呼吸综合征的实验室诊断技术,进而有效控制该病,文章对猪繁殖与呼吸综合征的病原学特征、实验室诊断技术研究概况作了综述,并提出了研究发展方向。 相似文献
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参考GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VL2332株的Lv基因序列,设计合成了一对引物,建立了检测PRRSV的RT-PCR方法。对2006年6-12月江苏省和福建省的5个大中型猪场送检的5份临床组织病料进行了检测,结果PRRSV均呈阳性。表明所建立的RT-PCR方法可用于临床组织病料中PRRSV的快速检测。 相似文献
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《畜牧与兽医》2016,(12):99-102
根据美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组特点,设计3对特异性引物,建立RT-PCR组合鉴别诊断方法。方法可鉴别诊断美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株(Am-LP-PRRSV)、高致病性NSP2基因缺失变异毒株(Am-HP-PRRSV)野毒及TJM-F92疫苗毒、JXA1-R疫苗毒。临床检测2012-2016年梧州市屠宰猪样品1 624份,发现PRRSV 4种毒株总体携带率为0.74%,其中Am-HP-PRRSV野毒占58.33%,Am-LP-PRRSV占8.33%,TJM-F92疫苗毒和JXA1-R疫苗毒各占16.67%。研究表明,具有高致病性缺失特征的变异野毒是PRRSV优势流行毒株,疫苗毒也占有相当高的比率,开展鉴别诊断非常重要。 相似文献
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美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立 总被引:10,自引:1,他引:10
参照美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M基因序列,设计引物和探针,并建立其荧光RT-PCR检测方法,以检测严重危害我国养猪业的此型PRRSV。该法能检测到1 TCID50的PRRSV。用此法检测猪瘟病毒、乙脑病毒、伪狂犬病毒、马动脉炎病毒、圆环病毒Ⅱ型和MARC145细胞的RNA,结果均为阴性。对126份临床样品进行检测应用,检测结果(7份阳性,119份阴性)与病毒分离完全符合。此法中的阳性对照为体外转录的dsRNA,具有高度的稳定性,解决了此类检测方法所用的RNA阳性对照所普遍存在的易于降解的难题。 相似文献
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不同引物RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的比较研究 总被引:9,自引:5,他引:9
用3对分别针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2进行RT-PCR,检测PRRSV,从其敏感性、特异性和临床样品检出率等方面进行比较,在此基础上进一步建立一步法RT-PCR检测方法。结果显示:3对引物对PRRSV均有很高的特异性;应用N1/N2引物病毒最低检测量为7.9 TC ID50,而AdGP5.1/AdGP5.2引物和RFLP5.1/RFLP5.2引物PCR最低检测量为79 TC ID50;运用N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物分别进行RT-PCR扩增检测临床样品,PRRSV检出率分别为28/48、27/48和25/48,且用AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物检测的阳性样品,用N1/N2引物检测也都呈阳性。运用N1/N2引物,通过一步法RT-PCR成功地从PRRSV S1株中扩增出374 bp的目的基因片段。结果表明,用N1/N2引物扩增PRRSV目的基因,其敏感性和临床样品检出率更高,更适合临床样品PRRSV的检测。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪群中的一种免疫抑制性传染病,是严重危害我国养猪业的主要疫病之一,应用各种诊断技术对该病做出准确的诊断是预防和控制该病的前提。PRRS诊断技术包括检测病毒、检测血清抗体技术及分型诊断,涉及的技术和方法包括病毒分离、免疫组化、RT-PCR、间接免疫荧光试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验、酶联免疫吸附试验和基因芯片技术等。每种诊断技术都有其各自的优势和局限性,应根据研究目的及工作条件等综合情况予以选择,文章就各种诊断技术的原理、方法及特点进行了概述和比较,并对今后的应用前景和发展趋势进行了展望。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展 总被引:14,自引:0,他引:14
猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病。已几乎遍极世界所有养猪国家,在中国的流行和分布也日益广泛,危害日益严重。此病的传播给世界养猪业造成严重经济损失,受到国内外学者的高度重视,对此病的研究也正在逐渐深入,特别是免疫学及其疫苗的研究正日益受到关注。文章就猪繁殖与呼吸综合征病毒的灭活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗的研究进展和使用现状做了系统地阐述,特别是通过合理地选择和使用免疫佐剂,如γ干扰素、霍乱毒素及可溶性β葡聚糖等来改进疫苗作用方面进行了阐述。 相似文献
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCC VR-2332)的部分ORF7保守序列、猪流感(SIV)A/Swine/HeNan/703/2001(H3N2)株的NP基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为300和457 bp的特异性基因片段,通过优化RT PCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,该方法能检出约10 pg总RNA病毒。应用该方法分别对河南省不同地区送检的26头份病死猪的鼻腔分泌物、气管、血液、肺组织等进行检测,结果9头份PRRSV阳性,4头份SIV阳性,其中4头份SIV和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和SIV复合RT-PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,为在分子水平上对PRRSV、SIV的混合感染进行早期快速诊断提供了科学依据。 相似文献