鸡巨型艾美耳球虫早熟株选育及其生物学特性研究

为选育鸡巨型艾美耳球虫(E.maxima)早熟株,并对其生物学特性进行研究,采用早熟选育法对E.maxima亲本株进行连续鸡体传代以获得早熟株,再分别将鸡E.maxima亲本株和早熟株孢子化卵囊以不同剂量口服接种14日龄无特定病原(SPF)雏鸡,测定E.maxima亲本株和早熟株的潜隐期、卵囊形态大小,并分析比较其致病性强弱和繁殖力高低。结果表明,成功选育出潜隐期为113 h的鸡E.maxima早熟株,其卵囊长和宽均显著小于亲本株卵囊。在整个试验过程中,各组鸡接种E.maxima亲本株和早熟株孢子化卵囊后均无死亡现象;当鸡E.maxima亲本株和早熟株孢子化卵囊接种剂量为0.5×10~4～20.0×10~4个/羽时,等剂量下E.maxima早熟株组鸡的相对体质量增加率显著大于亲本株组;接种量在10.0×10~4～20.0×10~4个/羽时,等剂量下E.maxima早熟株组鸡的肠道病变记分显著低于亲本株组;随接种剂量的增加,E.maxima亲本株和早熟株组鸡的相对体质量增加率逐渐降低,临床症状逐渐加重。此外,相同接种剂量下,E.maxima早熟株组卵囊产量均显著低于亲本株组,前者卵囊产量是后者的60%～75%;但随接种剂量的增加,E.maxima亲本株和早熟株组单卵囊繁殖力均呈下降趋势。综上,选育的鸡E.maxima早熟株与亲本株相比,致病力减弱、繁殖能力降低,能够为球虫多价活疫苗提供E.maxima虫种,以进一步加强鸡球虫病的防治。     

布氏艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫感染后鸡血清生化指标变化的研究

以15日龄公雏作为试验对象,利用 TECHNIOON RA-1000SYSTEM 血液生化分析仪,研究了鸡在人工感染 E.brunetti(41 500个卵囊/只)、E.maxima(42000个卵囊/只)和 E.acervulina(42500个卵囊/只)后3,5,7,9和11d 时其血清中葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶、尿酸、总蛋白、白蛋白、钙和镁的变化.结果表明:E.brunetti,E.maxima 和 E.acervulina 感染鸡后均可使其血清谷丙转氨酶活性升高,(E.     

巨型艾美耳球虫感染鸡空肠粘膜肥大细胞数量和组织胺含量的变化

通过用地塞米松处理鸡和用特异性抗原作刺激因子的微量全血淋巴细胞转化试验(LPA),研究了雏鸡抗 Eimeria maxima 再感染中细胞免疫现象。结果表明,地塞米松处理可损伤鸡抗 E.maxima 再感染的免疫力.这提示了 CD8+T 细胞、γIFN 及 IL-2等在抗 E.maxima 卵囊抗原刺激因子的微量全血 LPA结果表明,其刺激指数值与鸡抗 E.maxima 再感染抵抗力有关。此反应可用于体外监测鸡体抗 E.maxima再感染的抵抗力。     

6株巨型艾美耳球虫繁殖力的比较研究

用巨型艾美耳球虫(Eimeriamaxima)上海株、扬州株、南通株等不同地区的6株孢子化卵囊100个·只-1,经嗉囊接种7日龄无球虫黄羽公雏肉鸡,以麦克马斯特氏法计数感染后6～14d每天24h排出的卵囊。结果表明:广州株排卵囊量最多,与凤阳株和龙岩株相近;上海株排卵囊量最少,与扬州株、南通株相近;广州株与上海株、扬州株和南通株均差异显著。各虫株的显露期相似,在感染后第7天排卵囊量达峰值,第6～8天排出的卵囊量占总量的80%～90%,第10天接近0。     

11株巨型艾美耳球虫的免疫原性分析

用平均增重和病变记分或卵囊减少率等为试验指标,对11株巨型艾美耳球虫的免疫原性进行了分析.结果显示,各虫株每鸡免疫感染100个卵囊后,不仅对攻击1×105个同源株卵囊均产生大于70%的病变记分降低率,而且使每鸡攻击1×104个同源株卵囊时的卵囊产量均减少97.42%以上,在各虫株间无显著差异.各虫株对异源株的交叉免疫力程度不一致,美国株对国内10个虫株的卵囊减少率为20.09%～82.44%,仅3株大于75%,而国内10个虫株对美国株的卵囊减少率为27.43%～95.26%,有5株大于75%;扬州株、南通株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株间的相互卵囊减少率为-1.72%～96.67%,其中南通株对扬州株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株的卵囊减少率均大于75%,上海株对扬州株、南通株、凤阳株与广州株的卵囊减少率为-1.72%～57.69%.     

11株巨型艾美耳球虫的免疫原性分析

用平均增重和病变记分或卵囊减少率等为试验指标,对11株巨型艾美耳球虫的免疫原性进行了分析。结果显示,各虫株每鸡免疫感染100个卵囊后,不仅对攻击1×105个同源株卵囊均产生大于70%的病变记分降低率,而且使每鸡攻击1×104个同源株卵囊时的卵囊产量均减少97.42%以上,在各虫株间无显著差异。各虫株对异源株的交叉免疫力程度不一致,美国株对国内10个虫株的卵囊减少率为20.09%~82.44%,仅3株大于75%,而国内10个虫株对美国株的卵囊减少率为27.43%~95.26%,有5株大于75%;扬州株、南通株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株间的相互卵囊减少率为-1.72%~96.67%,其中南通株对扬州株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株的卵囊减少率均大于75%,上海株对扬州株、南通株、凤阳株与广州株的卵囊减少率为-1.72%~57.69%。     

不同感染剂量柔嫩艾美耳球虫对京海黄鸡血液指标影响及动态变化规律

为探究接种不同剂量柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊对京海黄鸡感染后不同时间点血液生化、抗氧化等指标的影响及动态变化规律,将180只30日龄京海黄鸡随机分为3组,分别感染0 (对照组)、0.75万个·只^-1(感染Ⅰ组)和1.5万个·只^-1(感染Ⅱ组)E.tenella孢子化卵囊,分别测定感染后第0、3、7天血液中23个生化、抗氧化和免疫指标,分析不同感染剂量和时间点对测定指标的影响。结果表明：感染后第3天,只有感染Ⅱ组碱性磷酸酶(ALP)显著高于感染Ⅰ组和对照组,感染Ⅱ组葡萄糖(GLU)显著高于对照组;感染后第7天,不同剂量组ALP、总蛋白质(TP)、球蛋白(GLB)、肌酐(CRE)、三酰甘油(TG)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素2 (IL-2)、过氧化氢酶(CAT)、白介素6 (IL-6)和白介素8 (IL-8)指标之间有显著或极显著差异。综合而言,不同剂量E.tenella孢子化卵囊感染后,对京海黄鸡不同时间点血液指标的影响不同,这为京海黄鸡球虫病感染后机体在防御过程中所起的作用提供了参考依据...     

巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化

[目的]为了获得纯净的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)裂殖子.[方法]对25日龄白羽肉鸡口服接种 3×105巨型艾美耳球虫卵囊,在其感染后48～124 h取十二指肠末端到卵黄蒂后5 cm处肠段,收集裂殖子并计数,确定分离裂殖子的最佳时间;将所取肠段均分为5段,分别对裂殖子进行计数,筛选分离裂殖子的最佳肠段;通过DEAE-52纤维素柱层析对裂殖子进行纯化并分管收集,确定收集较高纯度裂殖子的最佳时间.[结果]在感染后84 h所收集的裂殖子最多;此外,从空肠中后段及空肠末端肠段中分离出较多数量的裂殖子,占总数的62％以上;通过DEAE-52纤维素柱层析获得44 mL纯度较高的裂殖子.[结论]分离巨型艾美耳球虫裂殖子的最佳时间为感染后84 h,最佳肠段为空肠后段,收集1～44 mL洗脱液能够获得纯度较高的裂殖子.     

巨型艾美耳球虫纯种的分离鉴定和致病性观察

采用单卵囊分离技术,从长春市某鸡场鸡球虫混合感染样品中获得1株纯种球虫,鉴定为巨型艾美耳球虫(Eimeriamaxima).鉴定指标寄生于小肠中段、卵囊为卵圆形、卵囊大、金黄色.测200个卵囊的平均大小为(22.5-37.5)×(17.5-29.5)μm,形态指数为1.27.卵囊窄端有一颗折光性强的极体,无内外残体.测200个孢子囊大小为(16.5-19)×(8-10)μm.最短孢子化时间为31h,潜伏期132h.用此卵囊对40只2周龄的海兰公鸡分为一个不感染组和4个感染组,每只口服感染1万、2万、5万和10万个孢子卵囊.结果所有感染组与对照组的平均增重差异均为显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01).     

布氏艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫在鸡肾细胞及鸡胚培养中的发育

采用体外脱囊的方法,将布氏艾美耳球虫(Eimeria brunetti)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)的子孢子分别接种于鸡肾原代细胞和9日龄鸡的尿囊腔中,置40～41℃恒温箱内培养,结果如下:①E.brunetti 子孢子接种鸡肾原代细胞后,50h 发现第一代未成熟裂殖体;76h 发现第二代成熟裂殖体;128h 发现配子体,继续培养再无进一步发育。子孢子接种鸡胚尿囊腔后,16～48h 发现第一代裂殖体;60～72h 发现第二代裂殖体;未见到第三代裂殖体;144h 发现小配子体、大配子体和未成熟卵囊,168h 发     

秦皇岛株柔嫩艾美耳球虫对7种常用抗球虫药的耐药性

【目的】研究秦皇岛株柔嫩艾美耳球虫对克球粉、氨丙啉、马杜霉素、瑞冠球、金三特、球敌和尼卡巴嗪7种抗球虫药的耐药性。【方法】试验设7个感染药物组、1个感染球虫卵囊不给药组(阳性组)和1个未感染球虫卵囊不给药组(阴性组),采用最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)综合评定秦皇岛株柔嫩艾美耳球虫对以上7种抗球虫药物的抗药性。【结果】秦皇岛株柔嫩艾美耳球虫对7种抗球虫药物均产生不同程度的抗药性,其中对马杜霉素、尼卡巴嗪和氨丙啉呈现轻度抗药,对克球粉、瑞冠球和金三特呈现中度抗药,对球敌呈现完全抗药性。【结论】目前在秦皇岛地区可合理使用马杜霉素、尼卡巴嗪和氨丙啉,对克球粉、瑞冠球和金三特应慎用,对球敌应减少或暂停使用。     

两种鸡艾美耳球虫冰箱保存后的毒力观察

鸡艾美耳球虫（柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫）卵囊分成两部分处理,一部分常规冰箱保存6个月,到期后增殖1次;另一部分每月繁殖1次,为新鲜对照虫株。之后,进行致病性试验。结果显示：冰箱保存6个月后,虫株毒力明显下降,仅增殖1次不能达到新鲜虫株毒力水平。如果两种球虫卵囊冰箱保存6个月后,用于试验研究前需至少继代繁殖2次。     

氟哌酸等药物抗雏鸡柔嫩艾美耳球虫的作用

本研究以雏鸡艾美耳球虫病为模型,相对存活率、相对增重率、盲肠病变值和盲肠卵囊值为观察指标,美国默克公司的抗球虫指数为判定标准,探讨了氟哌酸等6种药物抗雏鸡柔嫩艾美耳球虫的作用。结果观察到,氟哌酸(150PPm混饲)的抗球虫指数为185,极有效; 葎草(1.8％混饮)、泽漆(13.6％混饮)和杨花散(2％混饲)分别为166、162和161,属中等效果;吡哌酸(350PPm混饲)和杨花口服液(625mg/kg体重,灌服)分别为150.5和149.8, 为弱效。由此可见,氟哌酸是一种较理想的抗球虫药。     

酵母细胞壁多糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡血清抗氧化能力的影响

【目的】旨在评价酵母细胞壁多糖对柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡血清抗氧化能力的影响。【方法】选取1日龄健康雏鸡180只,随机分为阴性对照组（雏鸡基础日粮+不攻虫）、阳性对照组（雏鸡基础日粮+攻虫）、酵母细胞壁多糖低剂量组（雏鸡基础日粮+酵母细胞壁多糖500mg/kg+攻虫）、酵母细胞壁多糖中剂量组（雏鸡基础日粮+酵母细胞壁多糖750mg/kg+攻虫）和酵母细胞壁多糖高剂量组（雏鸡基础日粮+酵母细胞壁多糖1 000mg/kg+攻虫）。14日龄时,除阴性对照组外其余各组雏鸡经口感染5 000个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊。分别于21日龄和28日龄时,心脏采血后分离血清,采用酶联免疫吸附法检测过氧化氢酶活性、总超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛的含量。于28日龄时摘取各组盲肠并石蜡包埋,切片后HE染色,在显微镜下观察盲肠的病理变化。【结果】与阳性对照组相比,酵母细胞壁多糖可以缓解柔嫩艾美耳球虫引起的盲肠病变,还可以显著提高同日龄柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡血清中的谷胱甘肽过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性和超氧化物歧化酶活性（P<0.05）且呈现一定正相关;显著降低其血清中丙二醛含量（P&l...     

蛹虫草等抗雏鸡柔嫩艾美耳球虫的作用

在笼养条件下,人工感染28日龄雏鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊(6×10~4/只)致病,分别试验虫草液(1mg/只/天混饮)、咪唑苯脲(300ppm混饲)和灭滴灵(0.2％混饲)的抗球虫作用。发现虫草和咪唑苯脲的抗球虫指数(ACI)分别为174和170,与目前最常用的抗球虫剂氯苯胍(本试验为对照品,30ppm混饲)相比,疗效相当。     

柔嫩艾美耳球虫六安分离株对五种药物的抗药性研究

以190只20日龄无球虫感染的青脚麻鸡为试验材料,研究了3株柔嫩艾美耳球虫六安分离株对常用的5种抗球虫药——氨丙啉、磺胺氯吡嗪、妥曲珠利、马杜霉素、海南霉素的抗药性。结果表明:柔嫩艾美耳球虫对5种药物均出现了不同程度的抗药性,马杜霉素的保护效果最好,磺胺氯吡嗪次之,海南霉素、氨丙啉、妥曲珠利无保护效果。     

3株巨型艾美耳球虫免疫原性差异株 未孢子化卵囊蛋白的SDS-PAGE分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)比较分析了3株巨型艾美耳球虫免疫原性差异株未孢子化卵囊可溶性蛋白。结果显示,尽管所用的3株巨型艾美耳球虫在免疫原性上存在不同程度的差异,但3株巨型艾美耳球虫未孢子化卵囊可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳图谱相似,至少有8条带,各带主次分明,其中有2条明显主带,分子量分别为42 000和39 000,还有3条较明显主带,分子量为36 000、26 000和22 900,其他可见带分别为109 800、86 900和62 800。结果表明SDS-PAGE电泳不能检测出E.maxima免疫原性差异株未孢子化卵囊可溶性蛋白的差异。     

麦杜拉霉素等7种药物对柔嫩艾美耳球虫效力的初步比较试验

对麦杜拉霉素(Maduramycin)、杀球灵(Diclazuril)和拉沙洛菌素(Lasalocid)等7种药物抗鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)进行效力比较试验.每只肉用雏鸡人工感染1×10~5个卵囊,在感染前两天按常用量将药物混入饲料中给予.与对照组相比,7种药物均表现出一定的抗球虫效力.抗球虫指数(ACI)以Maduramycin和Diclazuril最高,分别达到199.8和198.7,显示出极强的抗球虫效力.那拉菌素(Narasin)(186.2)、莫能菌素(Monensin)(184.4)、拉沙洛菌素(Lasalocid)(183)和尼卡巴嗪(Nicarbazin)(180),ACI达到180～186显示具有较高的抗球虫效力.与上述抗球虫药相比,腐霉素(Carriomycin)的效力较差,ACI为169,属中效抗球虫药.     

接种不同剂量柔嫩艾美耳球虫对雏鸡小肠组织结构的影响

20日龄无球虫感染的雏鸡60羽,随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,各试验组分别经口接种Eimeria tenella卵囊0.5×104、1.0×104、2.0×104、4.0×104和8.0×104个·只-1,对照组接种等体积生理盐水;接种7 d后.各试验组鸡全部宰杀并立即解剖取十二指肠、空肠和回肠,Bouin液固定,常规石蜡切片,HE染色,显微观察与摄影,研究接种不同剂量E.tenella卵囊对雏鸡小肠组织结构的影响.结果显示,与对照组相比较,各试验组小肠各段可见不同程度的病理组织学变化,其病理变化随E.tenella卵囊接种剂量的增大而趋于严重,其中试验V组空肠和十二指肠黏膜固有层和黏膜下层内常可见大量聚集的裂殖体.比较观察发现,空肠的病理损伤最为明显,其次为十二指肠,回肠的病理损伤最轻.结果表明,E. tenella在雏鸡小肠内寄生和损伤的主要部位是空肠,其次是十二指肠,最后为回肠,并且其对小肠各段黏膜组织结构的损伤程度与接种的E. tenella卵囊数量有明显相关性.