华山松大小蠹共生真菌新种Leptographium qinlingensis

报道了与危害中国秦岭华山松的华山松大小蠹相关的真菌新种,描述了其有性阶段和无性阶段的形态特征.研究标本保存于西北农林科技大学.     

华山松大小蠹和共生真菌过氧化物酶组织化学定位

通过石蜡和超薄切片对华山松大小蠹消化道和蓝变真菌Leptographium qinlingensis过氧化物酶的组织化学定位。结果表明:华山松大小蠹消化道内没有过氧化物酶,但在华山松韧皮部和木质部营养物质诱导下,幼虫消化道中肠和后肠分泌过氧化物酶。在被蓝变真菌侵染的不同阶段,华山松韧皮部和木质部组织内有强烈的过氧化物酶反应,且随被害阶段的发展过氧化物酶的反应逐渐增强。华山松大小蠹消化道和蓝变真菌分泌的过氧化物酶参与抵御寄主华山松生理生化抗性,蓝变真菌在克服寄主华山松树木抗性中起主要作用。     

华山松大小蠹体内外和坑道内蓝变真菌研究

对华山松大小蠹体内外和坑道内真菌进行了分离,各真菌的室内外人工接种和蓝变试验结果表明,华山松大小蠹体内外和坑道内有11属13种真菌,其中Alternariahumicola、Fusariumoxysporum、Leptographiumqinlingensis、Trichodermavirid、Verticilliumsp.5种真菌能够引起华山松木质部边材组织变色,但只有Leptographiumqinlingensis能够造成华山松木边材组织的蓝变,并且也只有L.qinlingensis能够在健康华山松木质部和韧皮部组织内发育,且与自然状态下被害华山松组织内真菌的危害性和引起的蓝变完全一致。     

红脂大小蠹、华山松大小蠹和云杉大小蠹形态学比较

对陕西省渭南地区的红脂大小蠹(Dendroctonus valens)、秦巴林区的华山松大小蠹 (D. armandi)和祁连山林区的云杉大小蠹(D. micans)的形态学进行了比较研究,结果表明,3种大小蠹在形态特征、危害症状等方面有显著差异.     

华山松大小蠹的入侵对华山松挥发物成分的影响

采用气质联动技术对秦岭林区华山松健康木、枯萎木针叶、树脂和韧皮部组织内挥发性物质的组成、含量和生物活性进行了分析。结果表明:华山松针叶、树脂和韧皮部组织内的挥发性成分主要由单萜、倍半萜和二萜组成,其中以α-蒎烯、β-蒎烯、乙酸-龙脑酯、β-石竹烯、α-石竹烯、α-杜松醇、异杜松醇、萜烯醇、杜松二烯为主;华山松针叶、树脂、韧皮部组织内挥发性物质在组成和含量上均有差异,其中以针叶中挥发性物质成分最丰富,其次是韧皮部组织,而树脂的成分则更纯;同时华山松健康木与枯萎木间挥发性物质的种类和含量也具有明显差异。     

华山松大小蠹危害动态的因子分析及预测模型

本文运用数量化理论Ｉ将定性因子定量化后，利用通径分析方法对影响华山松大小蠹虫情指数的１５个因子进行分析，结果表明对虫情指数直接影响作用最大是绝对湿度，间接影响最大的是海拔因子。详细地揭示了各影响因子的作用历程；建立了多元回归分析模型以达到危害程度的预测；用虫情指数能更合理地反映真实的危害规律。     

华山松大小蠹的危害状况分析及预测

对华山松林分标准地的定性因子利用数量化理论定量化后，以１３个变量对６２块标准地进行Ｍａｃｑｕｅｅｎ动态聚类分析，分为五类。对五个类别采用虫情指数、平均虫口和平均个体群大小作为指标，对华山松大小蠹危害状况作了分析；并用Ｂａｙｅｓ准则建立每类的判别函数，回判正确率高达９８．３７％。     

华山松大小蠹和红脂大小蠹过氧化氢同工酶酶谱的比较

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对华山松大小蠹和红脂大小蠹的过氧化氢同工酶进行了分析.研究结果表明,华山松大小蠹和红脂大小蠹成虫的过氧化氢同工酶具有明显的差异,2种大小蠹过氧化氢同工酶种间差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带染色深浅、酶带宽窄等方面.而同种个体之间几乎没有差异.     

华山松大小蠹幼虫分布状态及最佳抽样模型

在陕西省留坝县的华山松(Pinus armandi)林区,对华山松大小蠹(Dendroctonus arman-di)种群密度、分布状态和抽样模型进行了研究.结果表明:华山松大小蠹幼虫密度在华山松树干1～10 m高度范围内各不相等;危害致死华山松成年树的华山松大小蠹种群密度为23.2～52.8头·dm-2,平均37.4头·dm-2;平均值与树干4 m高处样方虫数均值接近;华山松大小蠹幼虫在树干上集中分布于树干7～8 m高处.     

华山松大小蠹对华山松挥发性物质行为反应的研究

以11种华山松挥发物单体和2种不同受害状态的华山松树皮挥发油为材料,利用嗅觉仪测定华山松大小蠹对不同浓度的不同挥发物的行为反应。结果表明:华山松大小蠹雌、雄成虫对(S)-(—)-β-蒎烯表现出趋避反应,而对10种挥发物质单体和不同被害阶段华山松挥发油均表现出趋向反应;在低浓度刺激下,华山松大小蠹雌、雄成虫对α-菲兰烯表现出显著的趋向反应;随着浓度的升高,华山松大小蠹雌性成虫对(S)-(—)-α-蒎烯、(—)-莰烯和α-菲兰烯也表现出明显的趋向反应。而华山松大小蠹雄性成虫则对(R)-(+)-α-蒎烯和3-蒈烯表现出明显的趋向反应;雌虫对α-菲兰烯的趋向反应显著高于(R)-(+)-α-蒎烯、(S)-(—)-α-蒎烯、(—)-莰烯和3-蒈烯,而雄虫对α-菲兰烯和(R)-(+)-α-蒎烯的趋向反应显著大于对(S)-(—)-α-蒎烯、(—)-莰烯和3-蒈烯的反应。同时华山松大小蠹雌虫对(—)-莰烯、健康华山松韧皮部挥发油和被害华山松韧皮部挥发油的行为反应显著大于雄虫。华山松大小蠹对一些华山松挥发物的行为反应具有性别差异性,也对不同种类和浓度挥发物的行为反应存在差异。     

秦岭细粘束孢对寄主华山松生理生化代谢的影响

研究人工接种试验条件下华山松大小蠹共生真菌秦岭细粘束孢对华山松苗木生理 生化代 谢的影响,以揭示秦岭细粘束孢对华山松的危害。结果表明,被感染秦岭细粘束孢的华 山松苗木随 着真菌在韧皮部和木质部组织内的危害和扩展,针叶叶绿素含量不断降低;接种21 d后韧 皮部反 应区内水分、可溶性糖及蛋白质含量显著减少;SOD超氯化物歧化酶、CAT（过氧化氢酶） 酶活性明 显降低,而MDA（丙二醛）含量则有所增加。这说明秦岭细粘束孢的大量侵害可以造成华 山松营 养物质含量和酶活性的降低,在削弱寄主树木抗性的同时加速寄主华山松韧皮部组织内 营养物质 的转化,并为华山松大小蠹在韧皮部内的生存创造营养条件。     

华山松大小蠹化学信息物质

在常温下(25℃)解剖华山松大小蠹(Dendroctonus armandi Tsai et Li)的雌、雄虫,以正己烷为溶剂提取华山松大小蠹的后肠和粪便挥发物,并进行GC-MS分析。结果表明:在室温状态下,雌虫后肠挥发物中含有23种物质,主要为萜酸类、萜烯类、雌雄甾类、醇类和醛类等;雄虫后肠中有25种,以有机酸(树脂型萜酸居多)、酯类化合物和萜烯类化合物为其主要成分;粪便中有33种,树脂型的萜酸最多。华山松大小蠹的化学活性物质以萜类化合物为主。     

华山松大小蠹不同龄期幼虫酯酶同工酶的比较研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对华山松大小蠹（Dendroctonus armandi)不同龄期幼虫的酯酶同工酶进行了分析测试。结果表明华山松大小蠹不同龄期幼虫的酯酶同工酶具有个体间的差异，其差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带染色深浅、酶带宽窄等方面。     

华山松大小蠹2个甲羟戊酸路径基因的克隆与表达

香叶基二磷酸合酶/法尼基焦磷酸（G/FPPS）和异戊二烯焦磷酸异构酶（IDI）是单萜和倍半萜生物合成途径分支点的关键酶。通过克隆华山松大小蠹DaG/FPPS和DaIDI基因的全长序列,预测基因和编码蛋白的性质、结构和功能,并对序列特征和不同发育时期（幼虫、蛹、初羽化期成虫和扩散期成虫）以及不同组织（头、前中肠、后中肠、后肠和剩余躯体）DaG/FPPS和DaIDI表达的研究,旨在揭示DaG/FPPS和DaIDI在华山松大小蠹信息化学物质合成中的分子调控机制。采用RT-PCR和RACE克隆华山松大小蠹DaG/FPPS和DaIDI基因,DNAStar、Blast、ExpasyProtscale、SignalP 4.1、PSORT和TargetP等多种生物信息学方法对基因全长cDNA序列、基本理化性质、系统进化关系、信号肽和蛋白亚细胞定位等进行分析。用Real-time PCR检测DaG/FPPS和DaIDI在华山松大小蠹不同发育时期和不同组织中的表达。结果表明,克隆获得华山松大小蠹香叶基二磷酸合酶/法尼基焦磷酸DaG/FPPS和异戊二烯焦磷酸异构酶DaIDI全长cDNA序列,分别命名为DaG/FPPS和DaIDI,DaG/FPPS编码的氨基酸序列与山松大小蠹DpF/GPPS相似度最高达95%,氨基酸序列含有一个RALS 四肽基序、7 个异戊烯基转移酶保守区（Ⅰ-Ⅶ）和2个典型的DD**D的天冬氨酸富含区;DaIDI编码的氨基酸序列与山松大小蠹IDI相似度最高,达到92%。Expasy Protscale结果表明DaG/FPPS蛋白疏水性氨基酸明显多于亲水性氨基酸,推测其为疏水性蛋白,而DaIDI蛋白亲水性氨基酸数量大于疏水性氨基酸,故推测DaIDI为亲水性蛋白,有较好的水溶性。信号肽预测结果表明,DaG/FPPS和DaIDI均不含信号肽,TargetP结果表明,DaG/FPPS和DaIDI蛋白含线粒体靶向肽,结合PSORT结果推测DaG/FPPS和DaIDI均定位于线粒体。华山松大小蠹DaG/FPPS和DaIDI在不同发育时期和不同组织中均有表达,其中完全羽化期与扩散期成虫保持一致,该阶段表达量最高,不同组织中前中肠表达量最高。     

华山松种子园针叶养分状况的研究

通过对华山松种子园内无性系针叶养分状况的分析,结果表明,无性系之间的营养元素含量差异极显著,尤其表现在Ｃａ,Ｋ营养上,而针叶的元素含量顺序为Ｎ,Ｃａ,Ｋ,Ｍｇ,Ｐ,Ｍｎ,Ｆｅ,Ｚｎ,Ｂ;不同月龄针叶养分含量差异极大,未完全抽长针叶养分含量顺序为Ｎ,Ｋ,Ｃａ,Ｍｇ,Ｐ。针叶内微量元素含量与无性系有较大相关性,而不同土壤上华山松针叶微量元素的含量差异更大,尤其是针叶Ｂ的含量,因此土壤施Ｂ可在针叶的含量     

华山松育苗技术研究

探索了华山松壮苗培育技术,对华山松容器苗喷施不同浓度BR-120生长调节剂及4种苗木类型育苗措施进行了研究,结果表明:喷施不同浓度BR-120生长调节剂对华山松70 d苗生长没有显著影响;芽苗切根、芽苗不切根、幼苗切根移栽、直播4种处理对苗高、地径、鲜重影响不明显,但对根系的生长有极显著影响.芽苗切根移栽根系发育较好,...     

松树感染云南半帚孢后韧皮中酶活性变化

云南松和华山松在感染纵坑切梢小蠹伴生菌———云南半帚孢后,体内与抗病性相关的过氧化物酶(PO)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性均明显升高 云南松自身的抗性酶活性较华山松的小,在感染后,酶活性的增加较弱,持续时间也较短,在感染的最初7d酶活性增加迅速,而后活性增加趋于平缓;华山松自身的酶活性较大,感染后增加的幅度较大,比云南松迅速,且在试验期内一直持续增加 因此,总体上,云南松的抗性较华山松的弱 这也是云南境内云南松蠹害严重,而华山松蠹害轻微的重要原因之一