2份香蕉野生近缘种的RAPD研究

利用RAPD技术对2份采自云南西双版纳的香蕉野生近缘种进行遗传分析。23个随机引物共扩增出166条稳定带，其中143条为多态性条带，多态性频率高达86％，说明这2份野生近缘种种间存在巨大的差异。在上述143条多态性条带中，22条为非特异性条带，占多态性条带总数的15％，它可能与这2个香蕉野生近缘种中差异的保守序列有关。     

应用RAPD技术研究甘蔗属及其近缘属种间亲缘关系

利用DNA随机扩增多态性(random amplified polymorphic DNA，RAPD)技术，研究了甘蔗属及其近缘属种间的亲缘关系。选择20个引物扩增，在得到的193个片段中，有3个片段是10个材料共有的，多态性达98％。聚类分析结果表明：甘蔗属可划分为两个组群，即热带种组群(包括热带种、印度种、大径野生种、中国种)和割手密种组群。该结论与Irvine的分类结果非常相似。     

梅、桃、李、杏、樱的RAPD分析

用ＲＡＰＤ技术对梅的野生种及其近缘种桃、李、杏、樱共计１７个样品的系统发育进行了研究．１２个１０碱基的随机引物共扩增出１３１条带,其中６５条为多态性带．通过对这些扩增带的分析,作者认为梅的基因中渗入了较多的杏、李基因．聚类分析的结果表明：李、杏在梅的系统发育过程中处于基本等同的地位,桃、樱与梅的亲缘关系则相隔较远．     

梅、桃、李、杏、樱的RAPD分析

用ＲＡＰＤ技术对梅的野生种及其近缘种桃、李、杏、樱共计１７个样品的系统发育进行了研究．１２个１０碱基的随机引物共扩增出１３１条带,其中６５条为多态性带．通过对这些扩增带的分析,作者认为梅的基因中渗入了较多的杏、李基因．聚类分析的结果表明：李、杏在梅的系统发育过程中处于基本等同的地位,桃、樱与梅的亲缘关系则相隔较远．     

防风及其近缘种的RAPD分析

采用RAPD分子标识法对防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk,硬苗防风Friocyclaalbescens(Franch).wolff,竹节防风P.dielsianumFeddeexwolff,前胡PeucedanumledebourieuoidesK,T,Fu,葛缕子CurumCarvil进行亲缘关系分析。利用SDS法提取防风及其近似种的总DNA,以随机引物进行随机扩增。从100个引物中筛选出8个有效引物,通过距离系数UPGMA法聚类分析,构建聚类关系树系图,获得了理想的RAPD。结果表明,RAPD法可准确鉴定正品防风及其近似种。     

桃花种质亲缘演化关系的研究——RAPD分析

利用３６个１０碱基随机引物首次对７个桃花（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ）近缘种和３０个品种进行ＲＡＰＤ反应。对选出１０个引物扩增出的具有多态性、可重复的、清晰的５６条带进行数据统计分析、ＵＰＧＡＭ聚类结果表明：毛桃（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ）和新疆桃（Ｐ．ｆｅｒｇａｎｅｎｓｉｓ）之间具有很近的亲缘关系,并与桃花品种间亲缘关系最近;寿星桃、垂枝在品种在聚类图上分别较早地聚合在一起,表明其类内具有     

河北省玉米螟优势种及其近缘种的研究

通过性信息素活性反应,形态鉴定和生殖隔离试验等方面研究,澄清了河北省玉米螟优势种是亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenee),而不是过去多年认为的欧洲玉米螟O.nubilalis(Hubner)。但欧洲玉米螟亦有少量分布,在张家口和芦台以大麻、苍耳、葎草等为主要寄主。此外尚见2个近缘种,其中紫玉米螟O.scapulalis(Warker)在芦台是取食葎草的主要虫种;克什米尔玉米螟,O.kasmirica(Moore)系中国新记录,仅寄生于大蓟。     

中国桃主要品种资源及其野生近缘种的分子身份证构建

 【目的】以国家果树种质郑州葡萄、桃圃保存的237份中国桃地方品种、育成品种及其野生近缘种为试材,进行种质分子身份证构建工作,并对构建方法进行探讨。【方法】采用筛选后的SSR标记对品种进行区分,然后根据引物对不同品种扩增条带分子量的大小进行编码、组合。【结果】从80对引物中筛选出来自桃8条染色体上的16对SSR引物,在供试种质间共检测出等位基因203个,每对引物平均检测到等位基因数为12.7个。根据等位基因既位于地方品种、育成品种,又位于近缘野生种的选择方法,筛选出123对等位基因并赋值后可用于构建种质的分子身份证。【结论】在237份种质中有202份具有的可辨分子身份证编码,继续对不同引物组合对种质的筛选效率进行分析,筛选出8对核心引物使176份种质具有可辨的分子身份证,平均每对引物区分种质达22.1份,即在保证每对引物区分效率较高的基础上,兼顾了总的区分数量。最后,为使区分品种简便化,依据引物的多样性指数先后选择引物组合,达到用最少的引物组合区分不同品种的目的。     

新疆棉区棉铃虫及其近缘种调查

1 新疆棉铃虫及其近缘种种类 棉铃虫原属于实夜蛾属(Heliothis).1965年Hardwick根据外生殖器将实夜蛾属中的一些种划入他所建立的新属Helicoverpa,其中包括分布于我国的棉铃虫[Helicoverpa armigera (Hubner)] 、烟夜蛾[Helicoverpa assulta (Guenee)] 和西藏棉铃虫(Helicoverpa tibetensis Hardwick)[1,2].     

桃花种质资源亲缘演化关系的研究——RAPD分析

利用３６ 个１０ 碱基随机引物首次对７ 个桃花（ Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ） 近缘种和３０ 个品种进行ＲＡＰＤ 反应．对选出１０ 个引物扩增出的具有多态性、可重复的、清晰的５６ 条带进行数据统计分析．ＵＰＧＭＡ聚类结果表明：毛桃（ Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ） 和新疆桃（ Ｐ． ｆｅｒｇａｎｅｎｓｉｓ） 之间具有很近的亲缘关系,并与桃花品种间亲缘关系最近;寿星桃、垂枝桃类品种在聚类图上分别较早地聚合在一起,表明其类内具有较近的亲缘关系;直枝桃类品种没有在树系图上聚合成一类,表明直枝桃花品种群演化关系较为复杂,多样性较丰富．该文还从分子生物学角度探讨了桃花品种的演化关系和‘白花山碧’桃的起源问题．     

新疆红枣裂果机理研究进展

[目的]为研究新疆红枣裂果机理和有效控制裂果提供理论依据.[方法]通过总结国内外相关文献,综述裂果机理的主要研究成果及防治技术.[结果]不同果树品种的裂果敏感性是受遗传因素控制,其亲本裂果性状可通过遗传对后代产生影响;果实内部生长应变力和果皮应变力在裂果过程中是相互对立的两个重要因素;果皮的细胞组织结构与厚度影响着果皮的强度,也影响着果实的裂果率;果实内含物质在发育成熟过程中的生理生化变化会诱导果实裂果;裂果发生还与矿质营养平衡有关;降雨量、蒸汽压、温湿度等气象因子也影响裂果的发生.[结论]目前国内外对裂果机理研究取得了重要的进展,但是枣裂果机理研究尚未形成体系,需进行深入研究.     

枣树杂交育种研究进展

枣树是中国独有的乡土树种,由于现有枣树品种大多存在缺陷,生产上迫切需要通过杂交的手段将不同枣树品种的优良性状整合起来,培育综合性状优良的新品种.但是枣树花小,人工去雄易伤害花器官,花量大而坐果率低,存在胚败育现象等问题都制约着枣树杂交育种工作的发展.该文综述了枣树开花、花粉萌发、生殖生理等方面的生物学特性,从枣树杂交育种的必要性、杂交方法和亲本选择等方面对枣树杂交育种研究进行了探讨,并对通过局部隔离法获得的枣树实生后代的性状遗传规律进行了总结,同时,根据目前枣树杂交育种的研究现状和科研环境,以及枣树转基因研究的不断深入,对枣树杂交育种发展的前景做了展望.     

改良CTAB-LiCl法提取枣总RNA体系的建立

试验以枣树田间枝条的枝皮及组培苗为材料,应用改进的CTAB法进行了总RNA的提取。针对枣组织中富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用β-巯基乙醇和PVP去除酚类,KAc及无水乙醇去除多糖,LiCl沉淀过夜的方法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,A260/A280介于1.8～2.0之间,A260/A230均大于2.0,证明得到的RNA纯度、完整性和产率均较高,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底。结果表明,本试验建立的改良CTAB-LiCl法适于进行枣总RNA的提取。     

枣呼吸类型的初步研究

以5川不同品种的枣为试材研究其呼吸特征,结果表明,在20℃条件下,半红期采收的赞皇大枣、园铃枣、冬枣、胜利枣、太白枣采手呼吸强度呈渐降形式,未出现呼吸高峰;用0.3%乙烯利处理赞皇大枣、园铃枣虽可使呼吸强度有所提高,但未能刺激呼吸高峰的出现;用回归分析方法建立的枣采后呼吸模型为Y=ax^b(a,b为常数且b<0）,据此认为供试的5个品种应属非跃变型果实。     

枣幼胚培养中褐化的研究

研究了建立枣幼胚离体培养体系时品种、外植体、活性炭、接种方式和基本培养基对褐化的影响,其中,外植体是枣幼胚离体培养时褐化的关键因素。取出早脆王胚珠,剥去珠被接种可以有效防止褐化。不同发育时期的胚珠褐化不同,其结果与品种及接种方法有关。完整接种的早脆王胚珠随其成熟度的增加褐化加重,但切开远胚端接种金丝丰和冬枣的幼嫩胚珠更容易褐化。加倍的MS培养基可以促进早脆王幼胚褐化,附加活性炭可以减轻早脆王完整胚珠褐化。     

大酸枣与酸枣、枣亲缘关系的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对大酸枣、酸枣及枣等11份种质材料进行了亲缘关系和遗传多样性检测,并采用离差平方和法进行聚类分析。结果表明,16条引物共获得115条谱带,其中多态性带84条,占总扩增谱带的73.04%。表明RAPD技术能较好地用于大酸枣、酸枣及枣亲缘关系的研究。从聚类分析图得,在等值线λ=15处,可将供试材料分为3类群:第1类包括无核小枣、金丝小枣、圆铃枣、冬枣4个枣品种;第2类包括大酸枣、s4、s5;第3类是由s1、s2s、3组成的酸枣群;表明大酸枣的分类地位处于供试酸枣和枣品种之间,推测大酸枣可能为供试酸枣与枣品种的中间类型。从欧氏距离上看出,大酸枣与供试酸枣的平均欧氏距离大于与枣品种间的平均欧氏距离,表明大酸枣与供试枣品种间亲缘关系较近。     

枣ATP1基因克隆及其在雄性可育和不育品种中的表达分析

以枣树雄性不育材料JMS1及雄性可育品种‘月光’及花粉中度可育品种‘冬枣’为试材,克隆ATP1基因,并比较其在枣雄性可育和不育材料之间的表达差异。枣ATP1基因包含完整开放阅读框为1 530bp,其编码蛋白与苹果和西瓜同源蛋白相似性系数分别达95.88%和98.62%。ATP1基因在3个品种中不存在碱基差异,且确定该基因为线粒体基因。利用实时荧光定量PCR技术检测ATP1基因组织特异表达发现,JMS1的嫩枝、老枝、叶、蕾中ATP1基因的表达量较高,但在花、花药、花萼、子房中,JMS1的ATP1基因表达量均低于‘月光’。在单花发育前期JMS1中ATP1表达量高于‘月光’和‘冬枣’,在单花发育后期其表达量低于‘月光’,但高于‘冬枣’。枣花蕾发育早期ATP1基因异常高表达可能影响了ATP合酶的合成,可能与JMS1花粉完全败育的主要原因有关。     

枣选择性扩增微卫星体系的建立及优化

【目的】建立和优化枣的选择性扩增微卫星（SAM）技术体系,丰富枣群体遗传学研究的方法,同时为枣利用SAM法开发SSR引物提供技术参考和模板。【方法】以冬枣、大荔龙枣和金丝小枣为试材,采用CTAB法提取样品DNA,对SAM试验过程中的酶切-连接、抑制性扩增、预扩增、选择性扩增等关键因子进行研究。【结果】利用PstⅠ和MseⅠ双酶切系统,分步法进行酶切-连接是后续试验成功的关键,抑制性扩增（20.0μL体系）模板取酶切连接液2.0μL,预扩增和选择性扩增（20.0μL体系）的模板分别取上步扩增的稀释产物各2.0μL;抑制性扩增和预扩增反应中,ExTaq取0.5 U,反应25个循环,产物稀释20倍进行下一步扩增;选择性扩增采用前6个循环中退火温度梯度降低（每循环降低1℃）的反应程序,体系中可将ExTaq用量增加到1.0 U以保证酶的保真效果。【结论】试验利用优化后的反应体系,选用16个MseⅠadapter+NN primer和SSR primer（PCT6）组成引物对进行筛选,获得了谱带清晰、分辨率高、多态性丰富的电泳图谱。该研究结果为利用SAM技术开展枣的亲缘演化、遗传多样性分析及SSR引物开发等方面的研究打下了基础。     

枣叶片营养元素含量年周期变化的研究

本文对四个枣品种叶片中八种矿质营养元素(N、P、K、Ca、Mg、Fe、Mn和Cu)含量的年周期变化进行了研究。结果表明,叶片矿质营养元素含量及其在生长季的波动情况因品种、年份不同而异。随着物候期的进展,叶片N、P、K含量呈下降趋势,Ca、Mn、Fe则呈上升趋势,Mg在不同年份差异较大,Cu在生长季前期下降,后期呈上升趋势。叶分析的采样适期为7月初到8月中。     

骏枣不同株系间的枣疯病抗性多样性

【目的】揭示骏枣品种内枣疯病抗性多样性,筛选高抗枣疯病的骏枣株系。【方法】以骏枣的16个株系为试材,通过田间调查和PCR检测,研究不同株系在嫁接侵染枣疯病后的症状表现和病原侵染情况;利用“合成-合理满意度”和多维价值理论的合并原则,对不同株系果实的相对含水率、单果重、可食率、果形指数、Vc含量、可溶性糖和可滴定酸含量等性状指标进行综合评价;采用AFLP技术对不同株系进行基因组遗传多样性分析。【结果】不同株系对枣疯病抗性表现出显著差异,可分为感病型、延迟感病型、延迟抗病型和抗病型4种类型,T15、J2、J5、J8这4个骏枣株系高抗枣疯病,其中,T15、J5和J8的果实综合性状在骏枣株系中亦居于较高水平;进一步的AFLP分析发现,不同抗性类型间在基因组水平上存在一定差异。【结论】筛选出了4个抗枣疯病骏枣株系,其中3个株系果实综合品质良好。