猪肠道乳糖酶的研究进展

乳糖是仔猪的主要能量来源,乳糖酶对乳糖的消化吸收起着至关重要的作用。乳糖酶缺乏导致乳糖不耐受,产生肠胃胀气、腹痛甚至腹泻等症状,严重影响着仔猪的成长。本文围绕猪乳糖酶的来源、乳糖酶缺乏与腹泻以及乳糖酶缺乏的治疗展开综述,旨在对仔猪的饲养提供一定的参考价值。     

用于低乳糖牛奶生产的乳糖酶添加剂候选菌株筛选及粗酶性质研究

在低乳糖牛奶加工过程中需要高活性的低温乳糖酶作为添加剂。为此,从采集土样中分离纯化获得1株低乳糖奶加工过程中需要的高乳糖酶活性候选菌株,应用形态学和分子生物学方法,初步鉴定该菌株为动球菌属(Planococcus sp.),命名为Planococcus sp.Y。研究表明,该菌株是1株低温菌株,其最适生长温度为25℃,最佳生长pH值为7.0,所产酶为胞内酶,粗酶液的最适酸碱度和温度分别为pH7.0和25℃。     

乳杆菌乳糖酶的基因异源表达及酶学性质分析

采用简并引物PCR和TAIL-PCR方法,从乳杆菌Lactobacillus sp. B164中克隆得到一个乳糖酶基因bg42-164。基因全长2 031 bp,编码676个氨基酸和一个终止密码子,预测分子量76 kDa,无信号肽序列。将bg42-164连接pET-30a(+)载体并转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后可检测到乳糖酶活力。SDS-PAGE分析乳糖酶BG42-164的蛋白分子量为76 kDa,使用组氨酸标签亲和层析方法进行蛋白纯化,并对纯化的乳糖酶BG42-164进行了酶学性质分析。该酶最适反应温度为50℃,经50℃处理30 min后,剩余酶活力保留80%以上,pH 6.0时该酶的水解活力最高。牛奶水解试验表明,乳糖酶BG42-164对乳糖的水解效果良好,5 mL牛奶中添加250 U酶蛋白,在50℃条件下2 h乳糖水解率为100%。该酶温度范围宽,乳糖水解效果好,为其在低乳糖奶生产中应用奠定了理论基础。     

低乳糖乳工艺的研究

乳糖酶在 3 -6℃下水解牛乳中乳糖 ,1 6h水解率达 5 5 % ,添加 0 .0 1 %质量分数的柠檬酸钾使水解时间缩短为 1 4h;工艺简便可行 ,适合规模化生产 .国产乳糖酶与进口乳糖酶水解效果相同 ,而生产成本显著降低 .     

凹凸棒土—壳聚糖耦合固定化乳糖酶及其在低乳糖乳制备中的应用

采用凹凸棒土吸附与壳聚糖溶液包埋耦合的方法进行乳糖酶的固定化.结果表明,当凹凸棒土∶壳聚糖为5∶1、吸附时间为4 h、加酶量为260 U.g-1时,固定化酶活力达107.6 U.g-1、酶回收率为50.6%;所制得固定化乳糖酶的适宜温度和pH值分别为40~45℃及6.4~6.8;用固定化乳糖酶水解牛奶中的乳糖,在温度为45℃时间为1.5 h时乳糖水解率即达69.5%,38℃、3 h水解率为71.3%.     

嗜热脂肪芽孢杆菌检测牛乳中抗生素残留的研究

基于嗜热脂肪芽孢杆菌繁殖分解乳糖产酸,将其应用于原料乳的抗生素残留检测。以嗜热脂肪芽孢杆菌为指示菌株,通过改变指示剂组成、添加增效剂乳糖酶以及对分析条件进行筛选,得到适宜的检测条件参数。具体条件参数为:菌液活菌数5×106,菌液添加量0.1mL,30g·L-1的乳糖酶溶液0.1mL,混合指示剂0.1mL,乳样0.1mL,发酵温度64℃,检测时间2.5h。与国家标准法(TTC法)相比较,所研究的方法对5种抗生素的检出限更低,结果更易于肉眼判断。     

阳离子交换树脂D151固定化乳糖酶研究

以吸附率最高的阳离子交换树脂D151为载体,戊二醛为交联剂,用吸附交联法对黑曲霉乳糖酶进行固定化研究,优化固定化条件,以期改善乳糖酶性质,使黑曲霉乳糖酶适于低乳糖乳的生产。结果表明:固定化酶的最适温度为60℃,比游离酶低10℃;最适pH较游离酶稍向碱性方向移动;固定化酶比游离酶热稳定性降低;固定化酶与游离酶的酸碱稳定性有较大差异。在最适温度条件下,固定化酶较游离酶而言,在牛奶天然pH条件下使用更为适宜。在pH 6.5、50℃条件下,游离酶的半衰期仅为9 d;而固定化酶在此条件下反复使用20 d,仍具有59%的残余活力。该研究为工业化利用固定化酶生产低乳糖乳提供了技术依据。     

黑曲霉乳糖酶固定化前后酶学性质比较研究

[目的]为低乳糖乳制品的工业化生产提供技术支持。[方法]以阳离子交换树脂D151为载体,采用吸附交联法对黑曲霉乳糖酶进行固定化,进而研究了固定化乳糖酶的酶学特性。[结果]固定化乳糖酶和游离酶的最适温度分别为60和70℃。在低于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,酶活力没有损失;在高于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,其酶活力呈现下降趋势,且固定化乳糖酶的活力下降更为迅速。固定化乳糖酶和游离酶的最适pH值分别为4．5和4．0,其pH值稳定范围分别为2．5—4．5和5．0～7．0。pH=6．5时,固定化乳糖酶和游离酶的活力分别为其最适pH值下的87．5％和3．8％。固定化乳糖酶和游离酶的半衰期分剐为24和9d。[结论]在牛奶的天然pH值下,固定化乳糖酶比游离酶更适用。     

过瘤胃甜菜碱对奶牛泌乳性能和生产性能的影响

实验选取黑龙江省大庆市某集约化奶牛场年龄、胎次、体况及泌乳量相近的健康奶牛40头,随机分为4组,每组10头,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组日粮中每头每天添加5、10和20 g过瘤胃甜菜碱,Ⅳ组为过瘤胃甜菜碱对照组。试验期从产前14 d至产后42 d,通过对试验奶牛产后乳蛋白（LP）、乳脂率（BF）、乳糖（SL）的分析,研究过瘤胃胆碱和甜...     

7~35日龄羔羊胃肠胃蛋白酶、凝乳酶、乳糖酶活性与其mRNA相对表达量和胃肠发育的关系研究

先后选取56只初生体重为(3 360±338)g的小尾寒羊公羔,随机分为14组(每组n=4),从4日龄起分别饲喂牛奶粉代乳和鱼粉代乳(各28只),并在第21日龄将饲喂牛奶粉代乳和鱼粉代乳的羔羊各8只转喂开食料。分别在7,14,21,28,35日龄将各组扑杀,取皱胃和十二指肠组织,测定皱胃胃蛋白酶、凝乳酶和十二指肠乳糖酶活性以及相应mRNA相对表达量,以研究饲喂不同代乳及开食料条件下7~35日龄羔羊3种消化酶与其mRNA相对表达量和胃肠发育的关系。结果表明,新生羔羊皱胃组织中凝乳酶活性随日龄平均每天降1.3U/g(r2=0.92,P0.05);而胃蛋白酶活性与日龄相关性低;十二指肠组织中的乳糖酶活性随日龄平均每天降低0.044U/g(r2=0.75,P0.05)。羔羊胃肠组织中的胃蛋白酶、凝乳酶、乳糖酶活性与相应mRNA相对表达量间的相关性差,胃蛋白酶与凝乳酶mRNA表达量随日龄呈高-低-高波动,而乳糖酶变化不显著。饲喂鱼粉代乳时羔羊的胃蛋白酶、凝乳酶活性降低,皱胃7日龄时重量为(36.0±3.0)g,35日龄时为(38.3±5.4)g,生长停滞。21日龄羔羊改喂开食料时对于原先饲喂牛奶粉代乳羔羊的胃蛋白酶、凝乳酶、乳糖酶活性影响不显著,但胃肠增重和日增重减少,而原先饲喂牛奶粉代乳羔羊的凝乳酶、乳糖酶活性呈降低趋势,对胃肠增重和日增重影响则明显。由本试验得出结论,羔羊胃肠胃蛋白酶活性与日龄相关性低,而凝乳酶和乳糖酶活性随日龄降低;羔羊代乳的性质对羔羊后期的消化、生长都有一定的影响;羔羊鱼粉代乳的消化障碍可能主要是由于皱胃发育停滞而非小肠消化障碍。     

宁夏地区荷斯坦牛乳成分及相关指标的非遗传因素、体细胞评分变化规律

目的 阐明非遗传因素对宁夏地区荷斯坦牛乳成分及相关指标的影响。方法 基于宁夏地区荷斯坦奶牛DHI测定数据,利用SAS 9.2软件GLM过程分析胎次、泌乳时期和产犊季节对9项泌乳性状的影响,并探究泌乳性状在不同体细胞评分中的变化规律。结果 胎次、泌乳时期、产犊季节、泌乳时期×产犊季节对9项泌乳性状的影响均达到显著水平(P<0.05)。对不同胎次进行比较,乳脂率和乳固形物含量在第2胎后显著下降(P<0.05),乳蛋白率和高峰奶量在第3胎后显著下降(P<0.05);日产奶量第4胎后稍有降低;乳糖率则呈现先下降后上升的趋势,在第3胎达到最低(P<0.05),为4.84%。体细胞评分随着胎次的增加逐渐上升,泌乳高峰日在第1胎次最晚出现(94.07 d),第4胎次最早(67.33 d)。对不同泌乳时期进行比较,日产奶量和乳糖率在第2、3胎随着泌乳时期的延长逐步下降(P<0.05),而乳蛋白率、乳固形物含量、体细胞评分和乳脂率呈上升趋势(P<0.05)。对不同产犊季节进行比较,1~3胎乳脂率和第1胎乳固形物含量春季至冬季均逐步下降;第1胎日产奶量和乳糖率呈上升趋势,到第2、3胎时在夏季分别处于最低水平;1~3胎乳蛋白率、体细胞评分、泌乳高峰日和高峰奶量春季至冬季均呈先升高后降低的趋势,且各性状不同胎次均在夏季达到最高水平。随着体细胞评分增高,乳糖率、日产奶量及高峰奶量整体上逐渐下降,乳脂率和乳蛋白率呈缓慢上升趋势,乳固形物含量和泌乳高峰日在体细胞评分分别为4和5时达到最高水平。结论 本研究结果为提高宁夏地区荷斯坦奶牛泌乳性能及生鲜乳质量提供了理论依据。     

草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状关联性分析

为研究草原红牛κ-酪蛋白基因的多态性及与泌乳性状相关性,采用PCR-RFLP方法检测κ-酪蛋白基因外显子5的遗传多态性。结果检测到TT、TC和CC三种基因型,统计分析表明,此多态位点与草原红牛乳蛋白和乳糖呈显著相关,乳蛋白:CC基因型极显著高于CT基因型和TT基因型(P<0.01),而CT基因型也极显著高于TT基因型(P<0.01)。乳糖:TT基因型和TC基因型极显著高于CC基因型(P<0.01),而TT和TC基因型之间差异不显著(P>0.01)。其他泌乳性状的基因型间差异不显著(P>0.01)。结果表明,κ-CN基因对草原红牛乳蛋白和乳糖具有较大的遗传效应,可初步推断κ-CN是控制这一性状的众多基因之一,是影响草原红牛乳蛋白和乳糖的一个主效基因或与主效基因相连锁,可作为选育草原红牛高乳蛋白及低乳糖奶牛的分子标记,用于标记辅助选择意义重大。     

断奶仔猪的乳糖消化和吸收研究

通过随机区组设计,用高乳糖含量的乳清粉和不合乳糖的玉米豆粕饲料分别饲喂断奶仔猪发现：十二指肠段、空肠前段和空肠后段是乳糖消化和吸收的主要区域。乳糖能诱导断奶仔猪小肠产生乳糖酶。在血液循环系统中,随着离肠系膜距离越远,其血液中血糖浓度呈现从高到低的梯度变化。     

阳离子交换树脂固定化乳糖酶的研究

[目的]以阳离子交换树脂为载体,研究黑曲霉来源乳糖酶固定化条件,以期改善乳糖酶性质,使黑曲霉乳糖酶更适于低乳糖乳的连续生产。[方法]以吸附率最高的阳离子交换树脂D151为载体,通过先吸附后交联的方法固定乳糖酶,优化固定化条件。[结果]结果表明,加酶量为50．0U／g（载体）,吸附pH值为4．0,吸附温度是25℃,吸附时间24h,交联剂戊二醛浓度为4％,交联温度是30℃,交联时间是6h,固定化效果最好。获得的固定化酶活力可达11．8U／g（载体）,固定酶回收率为37．2％。[结论]该研究为工业化利用固定化乳糖酶连续生产低乳糖乳提供了技术依据。     

天祝白牦牛乳与甘南牦牛乳理化性质比较

对天祝白牦牛(Bos grunniens L.cv.Tianzhu white yak)与甘南牦牛(B.grunniens cv.Gannan yak)2个牦牛品种的牛乳理化性质进行了比较分析。结果表明,天祝白牦牛产乳量高于甘南牦牛;甘南牦牛乳中的蛋白质、脂肪、全脂固体含量高于天祝白牦牛乳,天祝白牦牛乳中非乳脂固体、乳糖含量和密度、酸度高于甘南牦牛乳,冰点差别不大;胎次对牦牛乳脂肪、非乳脂固体含量和酸度的影响较大,对蛋白质、全脂固体、乳糖含量和密度、冰点等影响不大。     

奶牛初乳中常量成分和矿物元素的测定

采集46头荷斯坦奶牛分娩后2 h以内、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h的初乳和分娩后15 d以后的常乳,测定其常量成分和部分矿物元素含量.结果表明,除乳糖以外初乳中各项指标均显著高于常乳.分娩后第1次(2 h以内)所挤初乳,其蛋白质、脂肪、乳糖、灰分的含量分别是常乳的5.03、1.95、0.56、1.92倍;Ca、P、Na、Mg是常乳的1.90、2.2 4、2.11、5.56倍;Zn、Fe、Mn是常乳的6.21、2.81、1.64倍.初乳中的各种成分随泌乳时间的延长而逐渐向常乳接近.蛋白质含量是初乳质量的决定性因素,初乳的密度和全脂乳固体含量都和蛋白质含量有密切关系.在生产实践中,可根据初乳密度推测其蛋白质含量.     

木薯渣对奶牛产奶量和奶品质的影响

试验选用30头体重约400kg、健康无病、胎次相同,且处于泌乳中期,产奶量相近（P〉0.05）的荷斯坦奶牛,随机分为2组：对照组10头,用产奶期正常饲料饲喂;试验组20头,每头牛在对照组日粮基础上投5kg木薯渣替代5kg苜蓿干草,研究木薯渣对奶牛产奶量及奶品质的影响。结果表明：在产奶期日粮中添加木薯渣对奶牛的产奶量没有显著影响（P〉0.05）;从乳成分分析统计数据看,其对奶牛的乳成分影响不明显,乳脂、乳蛋白、乳糖、乳固形物和非脂固形物均无显著差异（P〉0.05）。     

两种微生态制剂对澳洲荷斯坦奶牛生产性能的影响

[目的]研究微生态制剂对奶牛生产性能的影响.[方法]在新疆中州牛场选择450头年龄、胎次相同,泌乳量接近的澳洲荷斯坦奶牛,随机分成三组.第-组为对照组(CT组),第二组(XP组)每天饲喂50 g"益康XP",第三组(PM组)每天饲喂24g"PM发酵粉";试验期3个月,每10d测日产奶量,每月数据汇总处理,每月底采集乳样,检测其乳脂率、乳蛋白、乳糖、乳中4脂固形物、乳密度、冰点、体细胞数、pH值、灰分和电导率.[结果]与CT组相比,XP组与PM组均显著提高奶牛产奶量和乳脂率(P<0.05);与CT组相比,XP组和PM组均能有效降低乳中体细胞数(P>0.05),且以PM组效果更佳.此外,与CT组相比,XP组和PM组对乳糖、乳中非脂固形物、乳密度、冰点、灰分、电导率和pH值影响并不显著(P>0.05),[结论]在大规模奶牛试验中,XP组和PM组均提高了奶牛产奶量和乳品质,且PM组添加剂减少奶牛乳中体细胞数效果更加明显.     

不同营养水平对母羊泌乳早期乳成分的影响

将30只滩×寒杂种妊娠母羊分成3组(各10只),于妊娠后期与泌乳期分别饲喂3个营养水平的饲粮(0.8×NRC,0.9×NRC和1.0×NRC).于泌乳前期(产羔后30 d内)采乳样2次,以研究营养水平和泌乳阶段对乳成分的影响.结果表明,乳的干物质、乳脂率和乳能值均随营养水平的提高而下降,L1组(0.8×NRC)和L2组(0.9×NRC)乳干物质含量显著高于L3组(1.0×NRC)(P<0.05);L2组乳脂率极显著高于L3组(P<0.01),L2组乳糖含量显著高于L3组(P<0.05);3个组之间的乳能值与乳蛋白含量差异不显著,但L3组乳蛋白含量呈现出高于L2组的趋势.     

Oral Insulin Stimulates Intestinal Department and Enzyme Maturation in Newborn Pigs

The effects of oral insulin on intestinal tissue growth and brush border enzyme activities in newborn pigs were examined in this study. Newborn unsuckled pigs were bottle-fed for3 days with artificial milk(M),milk supplemented with 60mIUmL-1 of insulin(IH)or hydrolyzed milk(HM). Compared with newborn unsuckled pigs,piglets bottle-fed for 3 days all gained in intestinal weight and length significantly despite a mild loss in body weight during the experimental period. The activities of lactase and alkaline phosphatase(AKP)in the small intestinal mucosa declined markedly in pigs fed with M,but the activity of maltase increased significantly during the experimental period. Dietary protein pre-hydrolysis had no significant effect on intestinal tissue mass or length,but it moderated the decline of intestinal lactase and AKP activities. Dietary supplementation of insulin significantly increased mucosal protein content and brush border activities of lactase,maltase,AKP and aminopeptidase(AP)in the small intestine.The effect. of insulin treatment was particularly obvious at the distal region of the small intestine. These results demonstrate that oral insulin can stimulate intestinal digestive enzyme activities in newborn pigs. The finding supports the hypothesis that milk-borne insulin plays a role in regulating postnatal gut development in the suckling young.