液态乳中三聚氰胺的HPLC法检测研究

参考国家标准GB/T 22388—2008第1法,采用HPLC法检测50批液态乳中的三聚氰胺含量,验证了该法的可行性,在此基础上对批次结果进行统计分析。结果表明,该法操作简便,回收率在90%以上,相对标准差小于1.5%,定量检出限1.0 mg·kg^-1。检测结果具有较高可靠性和准确性,比较适合乳制品中三聚氰胺含量的检测。     

新型的分子印迹固相萃取小柱分离富集饲料中的三聚氰胺

[目的]研制一种新型的分子印迹固相萃取小柱,用于分离富集饲料中的三聚氰胺。[方法]采用本体聚合法制备了三聚氰胺分子印迹聚合物,以该聚合物为填料制作三聚氰胺分子印迹固相萃取(MIP-SPE)小柱,优化了固相萃取条件,应用高效液相色谱(HPLC)法测定浓缩液中的三聚氰胺含量。[结果]自制的MIP-SPE小柱可以从饲料中选择性地分离、富集三聚氰胺,有效地去除饲料中的复杂基质,加标回收率约为95%。MIP-SPE小柱与空白印迹固相萃取小柱(NMIP-SPE)的对比试验表明,前者的萃取效率明显高于后者。[结论]自制的新型三聚氰胺MIP-SPE小柱可用于饲料提取液中的三聚氰胺高选择性分离富集,使用简便,具有广阔的应用前景。     

牛奶中三聚氰胺气质检测条件的比较

目前已有几种比较成熟的三聚氰胺检测方法,其中牛奶中三聚氰胺的气质检测方法(GB/T 22388-2008)上机耗时较长,且质谱图不太理想。与饲料中三聚氰胺的气质检测条件进行比较,发现按照饲料中三聚氰胺气质方法(NY/T 1372-2007)改变质谱条件中的升温程序后,质谱图更为理想,回收率可达85%,说明牛奶中三聚氰胺的检测沿用饲料中三聚氰胺的气质条件更快捷、更理想。     

甘肃创化学速检奶制品三聚氰胺方法 填补技术空白

甘肃省科技重大专项"奶制品、禽蛋及饲料中三聚氰胺化学快速检测方法的研发及产业化"近日通过成果鉴定。该成果研究建立并完善了用化学测试法快速检测奶制品、禽蛋及饲料中三聚氰胺的方法,填补了用化学方法快速检测三聚氰胺的技术空白。三聚氰胺"奶制品"事件发生后,甘肃省组织科研力量对三聚氰胺的检测方法进行研究,成功研制出液态奶中三聚氰胺化学快速检测方法并开发出检测试剂盒。此次是为进一步完善对奶制品、禽蛋及饲料中三聚氰胺的快速检测方法,对检测试剂盒进行产业化和推广应用,目前已建立甘肃省地方标准,取得了创新性的科技成果。     

气相色谱-质谱联用法测定奶粉中的三聚氰胺

[目的]建立奶粉中三聚氰胺的气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法。[方法]利用三乙胺、水、甲醇超声萃取样品中的三聚氰胺,结合气相色谱-质谱法对奶粉中三聚氰胺进行测定。[结果]使用三乙胺/去离子水/甲醇混合液对奶粉中的三聚氰胺进行提取后,进一步采取硅烷化衍生法,有效地去除了基质所带来的干扰,而在前处理中加入苯代三聚氰胺做内标显著地提高了方法的精密度。在0.1～50.0 mg/L范围内呈现良好的线性关系,最低检测限为0.1μg/g,添加奶粉中的三聚氰胺回收率在102.0%～104.2%,相对标准偏差为4.2%。[结论]该方法可满足奶粉中三聚氰胺的准确定性和定量测定要求。     

饲料和饲料原料中致泻性大肠杆菌的检测

[目的]了解饲料及饲料原料中致泻性大肠杆菌的污染情况。[方法]2015—2016年,应用多重PCR技术对463批饲料及饲料原料中致泻性大肠杆菌进行检测。[结果]463批样品共检出12批阳性样品,检出率为2.6%,其中以EPEC、ETEC、EHEC为主。EPEC阳性样品7批,阳性率1.50%;ETEC阳性样品3批,阳性率0.65%;EHEC阳性样品2批,阳性率0.43%。[结论]饲料和饲料原料中致泻性大肠杆菌污染比较严重,应进一步加强管理。     

衍生化-气相色谱质谱法测定牛奶及奶制品中的三聚氰胺的研究

建立了衍生化-气相色谱质谱法(GC-MS)检测牛奶及制品中三聚氰胺的方法。采用BSTFA和1%TMCS衍生化后,GC-MS定量检测,外标法定量。三聚氰胺溶液浓度在0.04~1.6μg.mL-1的标准曲线,呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 1。利用优化方法测定了9个样品中三聚氰胺的含量,当添加浓度为0.2、0.5、1μg.mL-1时,回收率在93.8%~106.4%,相对标准差(RSD)为3.8%~4.9%(n=5)。结果表明,灵敏度高、检出限低,可广泛应用于原料乳及其制品中含量较低的三聚氰胺的检测。     

渔用饲料中三聚氰胺检测的必要性及方法

对三聚氰胺的理化性质、用途、代谢、危害以及渔用饲料中存在三聚氰胺的可能性进行阐述,并对渔用饲料中三聚氰胺现有的检测方法进行综述。     

猪肉和猪肾脏中三聚氰胺的HPLC快速检测

建立高效液相色谱(HPLC)检测猪肉和猪肾脏中三聚氰胺,样品经三氯乙酸-乙腈(3:1,V/V)提取,利用阳离子交换固相萃取柱净化后,洗脱液于50℃下用氮气吹干,残渣用离子对试剂缓冲液-乙腈(90:10,V/V)溶解,用高效液相色谱法由紫外检测器检测、外标法定量.结果表明,三聚氰胺在0.2～80μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系,线性相关系数(r<'2>)为0.9999,其检出限为0.05 mg/kg.在猪肉样品中,三聚氰胺的平均回收率为85.68%～87.18%,相对标准偏差为1.24%～1.84%;在猪肾脏样品中,三聚氰胺的平均回收率为84.69%～87.23%,相对标准偏差为1.25%～2.48%.试验方法具有操作快捷、灵敏度高、重现性好等优点.     

饲料中沙门氏菌的分离鉴定与Dot-ELISA检测

[目的]建立检测饲料中沙门氏菌的Dot-ELISA法。[方法]采用Dot-ELISA法,对随机采集自西宁市某饲料厂的100份成品饲料、85份鱼粉和50份精蛋白进行了沙门氏菌检测。通过生化试验和血清学试验对饲料样品中的细菌进行了进一步的鉴定。[结果]通过Dot-ELISA检测,成品饲料、鱼粉和精蛋白中的沙门氏菌阳性率分别为38.00%、62.35%和60.00%。Dot-ELISA法与常规分离鉴定技术的符合率为82.23%。[结论]Dot-ELISA法具有较好的特异性和敏感性,与常规分离技术具有较高的符合率,可以用于饲料中沙门氏菌的检测。     

龟板浸膏甲酯化GC-MS干细胞活性指纹图谱的研究与应用

[目的]为了确定运用生物活性指纹图谱预测中药的干细胞活性的可靠性而进行了该试验。[方法]试验中,依次用石油醚、乙醚、二氯甲烷提取龟板浸膏,得到溶剂提取物,将一部分溶剂提取物甲酯化,并用MTT比色法及流式细胞仪研究了甲酯化产物的干细胞活性;采用GC-MS技术研究每一个甲酯化产物,根据总离子流色谱图的相同保留时间和相应峰面积,获得龟板浸膏甲酯化GC-MS生物活性(干细胞活性)指纹图谱。结果表明:甲酯化产物均能促进干细胞的体外增殖,用龟板浸膏甲酯化GC-MS生物活性指纹图谱来预测中药"四物汤"的干细胞活性,平均预测准确率达87.5%。[结论]因此,用这种方法来预测未知中药样品的干细胞活性,有一定的可靠性。     

高效液相色谱测定乳制品中三聚氰胺

建立了乳制品中非法加入的化工原料(三聚氰胺)的高效液相色谱测定方法。该方法采用已知浓度的一系列三聚氰胺标准溶液,通过液相色谱仪测其相应的峰面积和保留时间,保留时间定性,峰面积定量,以浓度和峰面积建立标准曲线回归方程,用此曲线对样品进行定性和定量分析。该方法的检出限为2.00mg/kg,线性范围2.00~10.00mg/kg,加标回收率80%~110%,相对标准偏差小于10%。该法具有样品预处理简单,灵敏度高,分析时间短等优点。     

高效液相色谱法测定罗非鱼鱼苗和不同来源罗非鱼中甲基睾丸酮残留

用高效液相色谱法(HPLC)法对投喂添加不同浓度甲基睾丸酮(MET)饲料的罗非鱼鱼苗、随机采取的罗非鱼成鱼及其跟踪饲料进行检测。刚孵化的罗非鱼鱼苗投喂添加不同浓度MET饲料30 d后,HPLC检测其体内残留量。继续投喂未添加药物的饲料,30 d后再次检测MET残留量。分别从不同的水产品批发市场、农贸市场和罗非鱼主要养殖产地,随机抽取罗非鱼成鱼样品,并从养殖产地随机抽取追踪饲料样品,高效液相色谱法检测MET残留。结果表明,投喂30 d后的罗非鱼苗种,对照组无MET残留,其余5个添加MET试验组的MET残留量随着添加浓度的增加而增加;继续投喂未添加MET的正常饲料30 d后,所有试验组均无MET残留;从各批发市场、农贸市场以及各个养殖基地随机抽检的罗非鱼样品及其跟踪饲料中MET阳性率为零。     

高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中麦角固醇

[目的]建立一种测定饲料中麦角固醇的高效液相色谱法。[方法]首先确定波长,流动相和流速等色谱条件,然后研究KOH浓度、乙醇与KOH溶液比例、皂化温度和时间对麦角固醇得率的影响,确定最佳皂化条件。[结果]高效液相色谱条件为色谱柱HC-C18（4.6 mm×150.0 mm,5μm）,流动相为纯甲醇,流速1.5 ml/min,检测波长281 nm,柱温30℃,进样量10μl;最佳皂化提取条件为KOH质量分数35%,乙醇与KOH溶液加入比例20∶10（V∶V）,皂化温度85℃,皂化时间2 h;优化后标准曲线方程为Y=12.541X-7.603,R^2=0.999 69,线性范围为0.550.0 mg/ml;添加水平为2.0,4.8和7.5 mg/kg时,加标回收率为101%105%,RSD为1.6%3.8%（n=5）,最低检测限为0.625 mg/kg。[结论]该检测方法快速、灵敏、准确、可靠,适合饲料中麦角固醇的测定。     

Simultaneous Determination of Hexoestrol,Diethylstilbestrol, Estrone and 17-Beta-estradiol in Feed by Gas Chromatography-mass Spectrometry

A method was developed for the simultaneous determination of four kinds of estrogens(hexoestrol, diethylstilbestrol, estrone, and 17-beta-estradiol) in feed by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS). After the sample was extracted by ethyl ether and cleaned-up on HLB phase extraction column, four kinds of estrogens were derived and quantified in gas chromatographymass spectrometry. The results showed that the linear detectable ranged from 2.5 ng·mL~(-1) to 250 ng·mL~(-1) for hexoestrol and from 5 ng·mL~(-1) to 500 ng·mL~(-1) for three other estrogens with the correlation coefficients(R~2) were no less than 0.990. The recoveries were in the range of 76.34%-96.33% and the relative standard deviation was no more than 22.7%. The limits of quantitation(LOQ) for all analytics were between 10 ug·kg~(-1) and 20 ug·kg~(-1).The method was accurate and sensitive and could meet the actual requirements for the analyses of feed samples.     

碱提甘蔗皮多糖提取工艺、初步结构及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

[目的]建立碱提甘蔗皮多糖的优化工艺,进一步探究其结构特征,并评价其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.[方法]采用单因素试验和响应面分析法(RSM)对碱提甘蔗皮多糖(SPAP)提取工艺进行优化,采用苯酚硫酸法测定多糖含量.SPAP经Sevag法除蛋白、AB-8除色素后进行结构表征,主要包括高效液相色谱法(HPLC)检测多糖分...     

HPLC法测定棉籽饼粕饲料中的游离棉酚

研究了高效液相色谱法(HPLC)测定棉籽饼粕中游离棉酚的方法。丙酮浸提提取游离棉酚,经微孔滤膜过滤,HPLC检测含量。最佳色谱条件:色谱柱Sepax sapphire C185μm 120A(。250 mm×4.6 mm);检测器为紫外检测器;检测波长,238 nm;柱温25℃;流动相为乙腈/水(含10 mmol/L KH2PO4)=80/20(V/V);流速1 mL/min。棉酚的最低检出浓度为0.94 mg/kg,平均回收率在96.23%~99.36%之间,相对标准偏差在3.24%~4.02%之间。与传统化学方法相比,高效液相色谱法,快速简便,结果准确,重现性好。     

蜂蜜中结晶阻滞剂的识别与检测方法研究

采用气相色谱-质谱联用仪对市售蜂蜜结晶阻滞剂化学组分进行了鉴定,鉴定出其主要成分为果糖和葡萄糖.高效液相色谱定量分析结果表明,果糖和葡萄糖含量分别为89.5％和9.6％.初步探讨了通过分析蜂蜜中果糖和葡萄糖比例来鉴别蜂蜜中结晶阻滞剂的方法.