中华绒螯蟹细菌性病原的分离和鉴定

对上海市崇明县、江苏省太仓市等地养殖的中华绒螯蟹以出现大量腹水为主要症状的病蟹进行细菌分离,经人工感染、生理生化试验和菌种鉴定,引起河蟹腹水病的致病菌为嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）和拟态弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｍｉｍｉｃｕｓ）。药敏试验结果表明,这两种致病菌都对环丙沙星、诺氟沙星和氯霉素高度敏感,这些药可作为防治该病的首选药物。     

中华绒螯蟹“腹水病”及“抖抖病”并发病病原的研究

于1998～1999年对中华绒螯蟹主要细菌性疾病“腹水病”、“抖抖病”并发病病原进行研究。结果表明经细菌学鉴定6株病原菌,其中5株为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),1株为拟态弧菌(Vibrio mimicus),用细菌人工感染蟹,其LD     

中华绒螯蟹擅抖病研究现状

中华绒螯蟹是我国特有的名贵水产品 ,在有些地区中华绒螯蟹养殖已成为水产养殖业中的支柱产业。１９９５年开始 ,皖、江、浙、沪地区发现了不明病因的中华绒螯蟹擅抖病。１９９８年据不完全统计已蔓延到上海、福建、江西、辽宁等省市 ,几乎覆盖了我国的河蟹主要养殖区 ,造成极大的经济损失。尽管总体上国外对蟹类病害的研究比国内要领先得多 ,但河蟹的养殖工作主要是集中在国内进行 ,有关中华绒螯蟹的病害研究国外没有涉及。因此由于国内大规模养殖而产生的河蟹病害促进了国内学者对河蟹病害包括“颤抖病”（又称抖抖病、抖脚病等）在内的研…     

中华绒螯蟹幼体副溶血性弧菌病的病原分离与药敏试验

受副溶血性弧菌感染的河蟹蚤状幼体的症状为：幼体游动无力，头胸甲发红，色素加深，背刺常折断，摄食减少，肠胃空；感染副溶血性弧菌大眼幼体的症状为：幼体游动无力，不能逆水游动、甚至平游，上下翻“筋头”，体表发红，有时附肢也红，色素加深，眼柄上色素细胞扩大呈树枝状。一、材料与实验方法１．病原菌分离及培养基直接从育苗场采得发病的中华绒螯蟹蚤状幼体，在验室内将中华绒螯蟹幼体用载玻片压碎，在显微镜下见大量的病原菌，用接种环挑取病原菌在培养基上划培养２４小时后再进一步进行分离、提纯病原菌，置于温箱（２５℃）中培…     

中华绒螯蟹"颤抖病"研究进展

综述了近年来中华绒螯蟹“颤抖病”研究进展,提出该病可能是由多病原引起,并展望了“颤抖病”的研究及防治前景。     

中华绒螯蟹“抖抖病”流行情况初步调查

河蟹“抖抖病”是对二龄蟹危害极大的常见病。该病正在我国华东地区的主要养蟹地流行并逐步蔓延。据调查,在流行区发病率为３０％～８０％,死亡率１０％～１００％;流行季节４～１０月,其中８～９月是流行高峰期。该病发生的主要原因是生态环境不良,病原体以弧菌为主,不排除病毒因素。     

中华绒螯蟹“颤抖病”防治

中华绒螯蟹（河蟹）是我国淡水名产之一，近年来随着养殖规模的扩大，河蟹的病害问题日显突出，其中“颤抖病”最为常见，是河蟹养殖过程中危害最严重的一种疾病。1 症状病蟹反应迟钝、行动缓慢、螯足的握力减弱、蜕壳困难、摄食量减少以至不摄食；鳃排列不整齐、呈浅棕色，少数甚至呈黑色；血淋巴液稀薄、凝固缓慢或不凝固；心脏、腹神经节肿大，心跳乏力，肝胰腺呈淡黄色、严重时呈灰白色，背甲内有大量腹水，步足的肌肉萎缩水肿；有时头胸甲的内膜也坏死脱落。该病的典型症状为步足颤抖、环爪、爪尖着地，腹部离开地面，甚至蟹体倒立，所…     

中华绒螯蟹的同属种类及其英文名称

余述绒螯蟹属中三个公认种的主要特征和地理分布,并对中华绒螯蟹目前使用的几个英文名称的合理性和取舍问题加以讨论。     

中华绒螯蟹疾病的防治

一、中华绒螯蟹的生态习性与其疾病发生的关系中华绒螯蟹的生态习性与其疾病的发生与否有着密切的联系,在某些方面易于导致疾病发生,而在另外一些方面可以抗御病原体的感染与侵袭。具体表现在：①中华绒螯蟹具有坚硬的背甲、腹甲与强大的螯足,可抵御外界的攻击,保护身体免受伤害,减少疾病发生。②血液中大量吞噬细胞和淋巴细胞具有较强的抗感染功能。③蟹卵呈块状。其外缘的卵粒被病原体感染时,内部卵粒一般不受牵连,可以继续孵化（如对链壶菌的感染）。④蟹的生长发育分五个阶段,各个阶段的抗病力不同,对药物的敏感性也不同,在防…     

蟹源拟态弧菌最佳产毒条件的筛选

通过体外试验，探讨了培养条件的改变对蟹源拟态弧菌(HX-4)产毒量的影响。结果表明，培养基种类、氯化钠浓度、初始pH、溶解氧、培养温度和时间的不同均可影响细菌产毒量，HX-4菌株的最佳产毒条件为细菌接种于起始pH为8．0，含0．5％NaCl-BHI培养基，28℃振荡培养36h或静置培养48h。同时，通过动物实验测定了外毒素的致病性，结果显示，外毒素粗提液对小鼠及河蟹均有致病性。粗提液的溶血活性越高，对动物的致死率也越高。具有蛋白酶活性而无溶血素活性的粗提液，对动物只有致病性，而无致死性。     

中华绒螯蟹苗期丝状细菌病病原HL－1的研究

从江苏省如东县中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)苗期暴发丝状细菌病的蚤状幼体分离得到丝状细菌HL-1，经感染试验证实其为中华绒螯蟹苗期丝状细菌病的病原。对HL-1的细胞形态、生理生化特征、致病性及药物敏感性研究结果表明，HL-1为无色、不分枝的丝状体，在固体培养基上形成指纹状菌落，菌丝可断裂形成微生子，在液体培养基中所形成的微生子可聚集成玫瑰花环样结构；HL-1过氧化氢酶阳性，几丁质酶阴性，需氧，鉴定为毛毒亮发菌(Leucothrix mucor)，其生长的pH适宜范围为5．0～10．0，盐度最适范围为10—40；在常用的32种抗生素中，HL-1仅对乙基西羧霉素高度敏感，而对其他31种抗生素大多数具耐药性。     

蟹源致病性拟态弧菌的粘附及侵袭特性

病原菌对机体的致病作用是由其产生的各种毒力因子共同作用的结果,其中病原菌对组织细胞或粘膜的表面粘附是造成机体感染的首要条件。病原菌的粘附因子主要包括菌毛粘附素和其它非菌毛粘附素(如鞭毛、外膜蛋白和血凝素等),其中以菌毛介导的病原菌对组织细胞的粘附是细菌在体内定居、增殖释放毒力因子发挥致病作用的关键。为了揭示拟态弧菌HX 4的致病机理,以经典粘附模式细胞HEp 2细胞作为体外细胞模型,探讨蟹源致病性拟态弧菌HX 4株的粘附特性以及受体物质和抗全菌抗体对细菌粘附作用的影响,同时采用庆大霉素清洗裂解培养法测定该菌对HEp 2细胞的侵袭力。结果显示,HX 4菌株能粘附HEp 2细胞,对HEp 2细胞具有侵袭力。细菌对HEp 2细胞的粘附方式为集聚性粘附,最佳粘附时间为1h,甘露糖和抗体能显著抑制该菌的粘附,表明HEp 2细胞上含有甘露糖样受体。该菌的粘附素除了主要是菌毛外,可能还含有鞭毛、外膜蛋白、血凝素等多种成分。     

中华绒螯蟹性早熟的早期判别

结合对生殖腺的组织学研究,对发生性早熟发育与未发生性早熟发育的中华绒螯蟹的２２个形态特征参数进行了比较,确定了判别雌、雄中华绒螯蟹性早熟的三个形态特征参数,建立了雌、雄蟹性早熟判别公式;对雌蟹的判别准确率达９０．９％,对雄蟹的判别准确率达９６．９％。     

中华绒螯蟹血淋巴细胞观察

本文通过显微和亚显微结构的观察研究，表明中华绒螯蟹血淋巴液中存在的细胞形态、超微结构不同的三种血淋巴细胞，即大颗粒细胞、小颗粒细胞和无颗粒细胞。血淋巴液中三种淋巴细胞的含量分别为：大颗粒细胞7.97%，小颗粒细胞15.58%，无颗粒细胞76.45%。光镜下大颗粒细胞体积最大，胞质内可见大量染色较深的粗大颗粒；小颗粒细胞体积较小，胞质内有较少的深染色细小颗粒；而无颗粒细胞体积最小，胞质内无颗粒。电镜下三种血淋巴细胞的结构特征表现为：大颗粒细胞胞质内含有大量粗大的电子致密颗粒，细胞器稀少；小颗粒细胞胞质内含数量较少、体积较小的电子致密颗粒，细胞器丰富，高尔基复合体可见；无颗粒细胞内无电子致密颗粒，细胞器稀少，部分细胞质接近透明。     

患颤抖病中华绒螯蟹体内类立克次体侵染的光镜和电镜观察

对江苏和安徽地区患颤抖病的中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis)各器官和组织进行光镜和电镜观察。结果表明，类立克次体（Richettsia-like Organisms,RLOs)广泛寄生于病蟹各器官和组织中。它们特异性地寄生于病蟹各器官的肌肉和结缔组织以及血细胞中，血淋巴中的小颗粒细胞是类立克次体的主要繁殖场所和传播载体。类立克次体对病蟹机体的结缔组织的广泛侵入，以及对胸神经节及神经与肌肉的接头-运动终板的侵染正是颤抖病症状（不食、肌无力、肢体阵发性颤抖）的病理结构基础。本研究旨在探讨RLOs与中华绒螯蟹颤抖病的关系，从而为建立有效的防治措施奠定理论基础。     

中华绒螯蟹“颤抖病”病毒提纯方法的比较

以患“颤抖病”中华绒螯蟹组织浓缩液为材料,比较了差速离心结合PEG盐析法(方法1)、葡聚糖柱层析法(方法2)和蔗糖密度梯度超速离心法(方法3)三种方法分离提纯病毒的效果,对提纯病毒进行紫外吸收测定及电镜检查等。结果表明:方法3是用于分子生物学等深入研究该病的比较理想的提纯方法;而方法1所得病毒浓缩液虽纯度不及方法3,但基本可以满足一般研究的要求,且对仪器及技术的要求相对较低;方法2则介乎方法1与方法3之间。故可根据具体需求和实验室条件选择适合的中华绒螯蟹“颤抖病”病毒提纯方法。     

左旋咪唑对中华绒螯蟹非特异性免疫功能及抗病力的影响

为测定在饲料中添加左旋咪唑(LMS)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的免疫调节作用,以0(对照)、100、200和300 mg·kg~(-1)干饲料的剂量将LMS添加于基础饲料中制成颗粒饲料,投喂中华绒螯蟹7 d,然后投喂不含LMS的对照组饲料。在投喂含LMS的饲料之前(0周)和投喂后2、4、6、8周,采样测定中华绒螯蟹的血细胞总量(THC)、不同血细胞数量(DHC)、吞噬活性、呼吸爆发(超氧阴离子的释放)、酚氧化酶(PO)活性和溶菌酶(LSZ)活性;并在投喂含LMS的饲料后的第4周,按1.2×10~7cfu·kg~(-1)体重的剂量,体腔注射接种中华绒螯蟹致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hyrophila)CL99920菌株,记录接种10d后中华绒螯蟹的累积死亡率。结果显示,各LMS处理组的血细胞总量(THC)、透明细胞(HC)数量、吞噬百分率、呼吸爆发、PO活性和LSZ活性均显著地高于对照组(P<0.05);颗粒细胞(GC)数量、血细胞吞噬指数与对照组无显著差异(P>0.05);LMS处理组的蟹对嗜水气单胞菌的抵抗力明显增强。研究表明,饲喂适量的LMS可增强中华绒螯蟹的免疫力和抗病力;在本试验条件下,200 mg·kg~(-1)干饲料的剂量为最适添加剂量。     

中华绒螯蟹病害的流行态势及其对产业持续发展的思考

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)养殖业是我国水产养殖支柱产业之一。随着中华绒螯蟹养殖产业飞速发展,病害问题也愈加严重,并逐渐成为了产业发展的瓶颈问题。本文就我国近年来中华绒螯蟹病害流行的态势、病害流行原因以及应对措施进行剖析,以期为推动该产业的持续发展提供相应的参考。