梅花鹿XY精子分选及冷冻精液制备

为分选梅花鹿XY精子及制备冷冻精液,2006年9月21~29日,对电刺激采集的梅花鹿精液经过长距离运输,流式细胞仪分离,冷冻,解冻后精液重分析和品质鉴定。结果显示:常规冻精和X、Y型冻精性别比分别为50%、91.21%和94.08%,常规冻精与X、Y型冻精组间差异显著(P<0.05);活率分别为0.43±0.04、0.45±0.04和0.43±0.03,常规冻精与X、Y型冻精组间差异不显著(P>0.05);存活指数分别为0.25、0.05和0.05,常规冻精与X、Y型冻精组间差异显著(P<0.05);顶体完整率分别为(77.6±1.0)%(、84.6±0.5)%和(82.2±0.6)%常规冻精与X、Y型冻精组间差异不显著(P>0.05)。用流式细胞技术可以分选获得梅花鹿XY冷冻精液,性别比和品质达到低剂量人工授精的要求。     

使用荧光染色和流式细胞术检测山羊精子

分别使用PI(碘化丙碇),FITC-PSA(异硫氰酸荧光素络合豌豆凝集素)和RH123(罗丹明)对山羊冷冻精子进行染色,再使用流式细胞仪进行检测、分析。试验发现,对于山羊的冷冻精子,PI染色阴性的为质膜完整的精子;FITC-PSA染色阴性的可能为顶体完整的精子,染色FITC-PSA+和FITC-PSA++,可能分别为顶体反应中的精子和顶体破损精子;RH123+应为线粒体无活性精子,有绿色荧光可能是因为染料残留在细胞膜上导致,而RH123++可能应为线粒体有活性的活精子。不同个体羊的精子对于低温敏感度不一样。不同个体羊之间的冻精顶体完整率、质膜完整率、线粒体有活性的精子比率之间差异显著,据此应选择合适的山羊个体进行精液冷冻。     

水牛精液中X和Y精子比率的鉴定

利用流式细胞仪分析水牛分离和未分离精液中精子的DNA含量,所得的直方图用高斯曲线拟合,分析计算出样本中X和Y精子的比率。结果表明:未分离的水牛精液中X精子的比率为50%,与正常水牛后代性别比率没有显著差异;而水牛的分离X精液样本中X精子占93%,分离Y精液样本中Y精子占89%。实验结果显示了流式细胞仪DNA分析法鉴定水牛精液中X和Y精子比率的可靠性,而流式细胞仪分离精子程序和方法在水牛上的应用是可靠而有效的。     

利用流式细胞仪建立牦牛X、Y精子分选体系的研究

旨在探索与优化牦牛精子分选条件,建立高效的牦牛X、Y精子分选技术体系.本研究制备了牦牛精液细胞悬液,采用不同量的DNA染料Hoechst33342和诱惑红共孵育精子细胞.利用流式细胞仪分选牦牛X、Y精子,通过比较分选效率、分选后精子活力及发育潜能,优化分选条件.运用RT-PCR检测分选精子的纯度,利用精子分析系统检测分...     

利用双向电泳技术分析山羊精子冷冻前后蛋白组的差异

建立稳定的山羊精子蛋白质双向电泳的技术平台,对精子上样量、蛋白质提取方法、二维电泳程序等相关技术都进行了优化,得到了相对清晰的冻精和鲜精的二维电泳图谱,并运用ImageMaster TM 2D Platinum软件进行了分析。结果表明：通过改进的热Trizol法提取山羊精子蛋白,当取精子3&#215;10^7、上样量为150μL时能取得较好的电泳图谱,鲜精的蛋白位点重复性较高的有650个&#177;10个,冻精的蛋白位点重复性较高的有600个&#177;10个。冷冻导致精子蛋白丢失约50个,而且冻精多表现为大分子量蛋白的丢失,大部分分布于60～100kb之间,其中60～80kb之间蛋白丢失约18个,80～100kb之间蛋白丢失近20个,12～60kb之间蛋白丢失近12个。实验初步探明了山羊精子融冻前后精子的蛋白变化规律,为进一步了解精子冷冻损伤的确切机理奠定了基础。     

利用流式细胞仪检测解冻山羊精子活性氧和质膜完整性

将冻精颗粒分别用2·9%柠檬酸钠、2·9%柠檬酸钠 GSH、VB12和TALP解冻,用DCFH-DA染色,流式细胞仪分别检测各组的荧光强度(FI),测定各种处理的ROS生成。将用干、湿两种方式解冻的精液用羟化荧光素和PI双染色,上流式分析质膜完整性。结果表明用VB12解冻,荧光强度(FI)最低,为2·97,有96·76%解冻精子的质膜出现不同程度的破损。     

不同染色与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子的分离及应用效果研究

为探究不同Hoechst 33342的染色浓度与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子进行分离及应用效果的影响,本实验采集6只关中奶山羊精液,使用浓度分别为10、11、12、13μL/m L的Hoechst 33342(5 mg/m L)染色液对精液样本进行染色,以流式细胞仪分离X精子和Y精子,应用3种不同冷冻程序冷冻精液,应用体外受精与胚胎发育技术评估关中奶山羊X、Y精液的分离准确性。结果表明：12μL/m L Hoechst 33342染色条件下,奶山羊X、Y精子分离效率达到91.02%,高于10μL/m L和13μL/m L(P<0.01),最高分选速度为4 134个/s(P<0.05);公羊个体的精液品质越好,其精子的分离速度越快,但对分离准确率的差异不显著;使用冷冻程序2进行关中奶山羊的X、Y精子冷冻的效果较好（P<0.05）;体外受精48 h后,使用Y精子进行受精的卵细胞的卵裂率高于使用X精子（P<0.05）,在胚胎培养第9天,使用Y精子进行受精的卵细胞的囊胚发育率高于使用X精子（P<0.05）。总之,当Hoechst 33342浓度为12μL/m L...     

荷斯坦公牛X和Y精子核形态差异及其影响因素分析

旨在分析荷斯坦公牛X和Y精子核形态(包括精子大小和形状)及其差异,探究流式分选及分选后冷冻对公牛X和Y精子核形态的影响.本研究使用荧光显微镜拍摄15头年龄相当、健康状况良好的荷斯坦公牛X和Y精子冷冻前后及新鲜精液分选前后共6类精子核图像,利用Image J插件Nuclear Morphology Analysis分析3...     

X、Y精子差异膜蛋白及其分离方法的研究进展

X、Y精子差异膜蛋白的分离是利用抗原抗体反应进行性别控制的关键环节,H-Y抗原是最早被发现并应用于性别控制的Y精子特异抗原,但由于抗原特异性较差,未能在生产中得到广泛应用。雄性性别传递偏移、性别偏移及其他相关研究表明,尽管在精子形成过程中,细胞间桥使两类精子部分基因的表达产物被共享了,但X、Y精子膜蛋白差异仍然存在。同时,差异膜蛋白分离技术的进步及这些技术的优化集成,使这种差异膜蛋白的分离成为可能。     

SX-MOFLO流式细胞仪分离牛精子的特征及生产效率分析

以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是目前最有效的哺乳动物性别控制方法之一。本文从精子分离的生产工艺和生产实践出发,阐明精子分离的一些具体特征和分离工艺的效率,进而探讨提出了该技术的应用瓶颈及发展方向。     

农区山羊羊舍设计及山羊舍饲

山羊羊舍是实施山羊舍饲的载体，农区在我国山羊生产中占的比重较大，本文旨在探讨农区羊舍设计、修建和山羊舍饲、保种、改良、育肥、草料、防病、环境方面的问题。农区开展种草，开发饲料资源，实施山羊舍饲，发展山羊生产还有很大的发展空间。     

广西右江河谷山羊圈养技术的研究

为充分利用广西农区丰富的秸秆、牧草、土地等资源,加快推进山羊业规模化、规范化和标准化生产,应用“一规范五推广”山羊圈养集成创新技术,引进隆林黑山羊和波尔山羊在右江河谷高热高湿地区圈养。建立了山羊圈养示范点43个,示范户203户,建设标准羊舍10350m^2,种植养羊牧草24.83 hm^2。饲养基础母羊6012只,圈养经产母羊产羔率为199.05%。山羊人工授精冻精、鲜精配种受胎率为76.56和81.43%。波尔山羊与隆林山羊杂交一代羔羊初生体重2.56-2.98kg,比隆林山羊提高14.29-24.67%。制订了DB45/T244-2005山羊圈养技术规范。项目技术成果为实现广西山羊生产由传统山区向平原农区发展重心的战略性转移和山羊产业持续发展与资源永续利用提供了科学新方法和现实经验。     

布尔山羊、关中奶山羊、陕南白山羊三品种杂交试验对比分析

利用陕南白山羊与关中奶山羊、布尔山羊三品种杂交试验,分别测定初生重、3月龄、6月龄、12月龄四个阶段的胸围、体长、体高和体重,将测定的各项指标分别与布陕杂一代、关陕杂一代和陕南白山羊的同阶段指标进行对比分析,结果表明,布关陕杂种羊在不同生长阶段的体重优于布陕杂一代、关陕杂一代和陕南白山羊。布关陕杂种羊的初生重比布陕杂一代、关陕杂一代、陕南白山羊分别提高18.8%、48.2%、66.2%;3月龄体重分别提高17.2%、28.1%、35.1%;6月龄体重分别提高17.7%、51.3%、65.6%;12月龄体重分别提高15.2%、52.3%、58.0%。     

新疆荷斯坦公牛阶段育肥及其效果评价

本文主要根据动物管理学、家畜营养学以及家畜营养调控等技术原理,将奶公牛分为四个阶段进行饲养,即犊牛期、育成期、育肥期和营养调控期。结果表明:奶公犊19月龄平均体重达到538.50 kg,育肥期150 d平均日增重达到1.27 kg,至少较本地传统饲养奶公犊提前出栏4个月左右,多获利润500元左右。本项目充分利用北疆地区奶公牛的过剩和本地的饲草饲料资源,进行的奶公牛阶段性育肥经济效益显著,其效果评价良好。     

黄淮山羊产羔数与胎次的关联性分析

[目的]研究黄淮山羊产羔数与胎次的关联性。[方法]对71只黄淮山羊母羊1~5胎次的产羔数据进行统计分析,将平均胎产羔数≤2和最高胎产羔数≤2的母羊归类为低产群体（n=37）,将平均胎产羔数>2的母羊归类为高产群体（n=34）,比较分析不同胎次与产羔数之间的关系。[结果]黄淮山羊平均胎产羔数2.56只,高产母羊群平均胎产羔数3.66只,低产母羊群平均胎产羔数1.66只。总体来看,母羊总群体和高产母羊群平均胎产羔数随着胎次的增加呈现先上升后下降的趋势,产羔数峰值均处于第3胎与第4胎之间。母羊总群体和高产母羊群产羔数与胎次的回归方程分别为Y₁=0.753X-0.096X²+1.394和Y₂=1.497X-0.196X²+1.400。[结论]黄淮山羊高产母羊群在第1~2胎便表现出良好的繁殖性能,母羊总群体、高产母羊群的产羔数随着胎次增加呈现倒“U”形,低产母羊群产羔数受胎次影响较小。     

Evaluation of Breeding Value and Selection of Bull Dams in the Danish Dairy Breeds: I. Studies on Realized Efficiency of Bull Dam and Bull Sire Selection

Abstract

The relationship between twice the adjusted daughter yield deviation (DYD) of the son and the average of the estimated breeding values (EBV) of his parents was investigated for milk and fat yield. Deviations from expectations of DYD minus the pedigree index and the regression of DYD on the EBV for each of the parents were estimated. The EBV of each bull dam was calculated in several ways using different combinations of pedigree information and their own records. In all, 1693 bulls (880 Black and White (BW), 418 Red Danish (RD) and 395 Danish Jersey (DJ)) with Direct Updating indices for milk and fat yield were included in the investigation. Mean discrepancies between estimated and observed genetic merit for kg of milk yield were ?348 for BW, ?213 for RD and ?228 for DJ, when all of the bull dams' individual records were utilized in breeding value estimation. The corresponding mean discrepancies for kg of fat yield were ?14.7, ?11.5 and ?11.9, respectively. The discrepancies were positively correlated with the number of lactation records included in the dams' EBVs. Regression coefficients of bull DYDs on bull dam breeding values were significantly lower than expected for RD and BW regardless of the number of individual lactation records included in the dams' indexes for milk and fat yield. For all three breeds, the regression coefficients were lowest for fat yield. The most probable cause of overestimation in bull dam EBVs is preferential treatment, particularly in second and later lactations. To avoid this bias, estimation of a bull dam's breeding value should be based on pedigree information and on records from only her first lactation.     

浅析郏县红牛布病防控工作

布病是目前世界上流行广、危害大的人畜共患病之一,给畜牧业生产、人民群众生命安全造成了严重威胁。了解布病知识,理清传播途径,把握临床表现,掌握防控措施,提升布病的防控工作能力,是做好布病日常防范的首要任务。     

日粮能量、蛋白水平对辽宁绒山羊精液品质的影响

本试验以辽宁绒山羊种公羊为对象研究了日粮能量、蛋白质水平对种公羊精液品质的影响.采用单因子随机试验设计,将18只成年种公羊按照采精量、产绒量和年龄平均分为3组,每组6只.日粮设两种蛋白质水平(360 g和310 g),能量设两个水平(19 MJ和16 MJ),组合成3种饲粮:高能量高蛋白组(HEHP)、高能量低蛋白组(HELP)和低能量低蛋白组(LELP).3组种公羊分别随机对应3种饲粮.结果表明,日粮蛋白质水平显著影响采精量、密度、有效精子数和冻精产量,日粮能量水平对采精羊百分率有显著影响,日粮能量和蛋白质水平对鲜精活力和冻精活力无显著影响,高能量高蛋白组的精子产量、采精羊百分率、精子活力最高.种公羊配种期日粮能量蛋白质的适宜水平分别为19 MJ和360 g.