荧光定量PCR分析水牛胚胎致密化相关基因表达方法的建立

胚胎致密化是哺乳动物早期胚胎发育过程中一个非常重要的环节,有研究发现致密化相关基因的表达水平与体外发育胚胎的质量之间存在着相互关联作用。为了分析水牛胚胎早期发育中致密化相关基因在mRNA水平上的表达并确定其定量分析方法,本研究根据黄牛有关基因序列设计了Cx43、Cx31、E-cad以及组蛋白基因(Histone H2A)引物序列,分析了黄牛和水牛致密化基因的同源性,并确定各目的基因在水牛胚胎的SYBR Green I实时定量PCR反应条件。     

滩羊毛皮特性及毛囊发育相关基因的研究进展

从滩羊的种质特性、滩羊二毛皮形成期的胚胎发育和生态环境因素、绵羊毛囊发育及相关基因研究方面进行了综述,滩羊二毛皮特性是在滩羊生长发育的特殊时期（出生到30d左右）表现的性状,在滩羊的胚胎期已被奠定,其形成可能与胚胎期的毛囊与毛纤维发育相关基因的表达及其调控有关。     

蜕皮激素受体和超气门蛋白基因在柞蚕发育过程及激素诱导后的表达模式

昆虫蜕皮激素受体和超气门蛋白形成的异源二聚体介导蜕皮激素信号,起始包括转录因子表达在内的蜕皮级联反应,从而使昆虫进入蜕皮和变态等生命过程。克隆了柞蚕的2个蜕皮激素受体相关基因,命名为Ap EcRB1(Gen Bank登录号:KY411159)和Ap USP1(Gen Bank登录号:KY411160)。2个基因的ORF序列全长分别为1 758 bp、1 401 bp,编码585个、466个氨基酸。半定量RT-PCR检测这2个基因除在柞蚕幼虫血淋巴中不表达之外,在其他组织中均有表达,在丝腺和脂肪体中的表达量较高。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析2个基因在幼虫蜕皮前及化蛹前后呈现大幅度上调表达的规律。注射20-羟基蜕皮甾酮(20E)诱导启动滞育蛹的发育,结果诱导组的滞育蛹经过17 d羽化,比对照组滞育蛹提早羽化。滞育蛹中2个基因的表达量在注射20E后均明显下降,其中Ap EcRB1在蛹发育后期的12 d内一直处于较低水平,但羽化前期其表达量急剧上升,蛹发育16 d(羽化前1 d)达到最高;Ap USP1基因的表达量从注射后8 d开始升高,至16 d时达到最高。以上研究结果丰富了柞蚕变态发育过程中蜕皮激素调控作用的分子信息。     

柑橘TIFY基因的结构特征及响应低温的表达分析

TIFY基因家族是一类包含TIFY结构域的植物特有转录因子,与植物的生长发育密切相关,且在非生物逆境响应中起着重要作用。本研究基于柑橘基因组测序结果,分析了3个TIFY基因家族成员的基因结构特征,并利用qPCR分析了低温胁迫下这些基因的表达水平。结果表明：(1)3个TIFY基因含有TIFY结构域和Jas motif,属于JAZ蛋白亚家族基因;(2)3个TIFY基因的启动子含有LTR、DRE core、STRE、TC-rich repeats等逆境相关顺式作用元件以及MeJA响应元件、ABA响应元件等激素响应相关元件,推测3个TIFY基因可以响应多种非生物胁迫;(3)Cs1g17220和Cs4g07130在果实中高表达,推测其可能与果实发育相关;(4)3个TIFY基因受低温诱导在早期上调表达,且受低温胁迫的程度越大,其受诱导上调表达的倍数越高。本研究将为进一步解析TIFY基因家族在柑橘中的作用和功能提供重要线索。     

猪骨骼肌发育过程中免疫相关基因的表达分析

为探究猪骨骼肌发育过程中免疫相关基因的表达模式以及相关生物学功能,本研究根据蓝塘猪和长白猪骨骼肌10个发育时期的转录组数据,对各时期免疫相关基因的表达数目和表达量进行分析,鉴定了相邻发育时期之间以及同一时期品种间差异表达的免疫相关基因,并对后者进行功能注释分析。结果表明:在蓝塘猪与长白猪骨骼肌发育过程中存在1 129个表达的免疫相关基因;胚胎期35 d和49 d、胚胎期91 d和生后期2d这2组相邻时期之间的差异表达免疫相关基因数目最多;品种间差异表达免疫相关基因数目则在胚胎期49d以及生后期180d最多,且趋向于在蓝塘猪上调表达,并富集在NIK/NF-κB信号传导、细胞凋亡的负调控等生物学过程中。本研究表明免疫相关基因在猪骨骼肌发育过程中存在表达,长白猪与蓝塘猪骨骼肌生长发育差异可能与NF-κB介导的细胞凋亡有关。     

家蚕Polycomb家族基因BmEsc功能结构域编码序列的克隆及表达分析

Polycomb蛋白(polycomb group proteins,PcG)主要包含PRC1和PRC2 2个核心蛋白质复合体,其中PRC2在靶基因转录抑制起始阶段发挥作用,ESC作为PRC2的一个关键蛋白质,通过参与组蛋白H3K27me3的修饰来抑制基因转录。为了研究家蚕PcG蛋白的功能,克隆了长度为876 bp的家蚕Esc基因(BmEsc)WD40功能结构域编码序列,构建重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,成功表达并纯化了目的蛋白质,可用于进一步的抗体制备和功能研究。利用实时荧光定量PCR检测BmEsc基因在家蚕不同发育时期的表达特征:非滞育卵中该基因的表达水平在卵期1~5 d相对较高,而滞育卵中该基因在卵期1~2 d的表达量低于非滞育卵,卵期6~9 d的表达量却高于非滞育卵,并保持较稳定水平;该基因在各龄幼虫龄中期的表达量较低,在5龄1~3 d和化蛹前的一段时期表达量较高,在蛹期的表达水平变化不大。初步推测BmEsc可能在家蚕早期胚胎发育、滞育卵中的靶基因沉默以及在幼虫蜕皮前后和化蛹变态前的组织分化过程中发挥重要作用。     

利用鸡胚表达谱数据筛选皮肤发育相关基因的研究

家鸡(Gallus domesticus)躯体被覆羽毛而跖部为鳞片状皮肤,代表了比较典型的皮肤结构,是研究皮肤调控机理的理想模型。本研究利用来航鸡胚胎期背部和跖部皮肤的表达谱数据(GSE62882),筛选不同日龄胚胎背部羽毛皮肤上皮(7 d、9 d)、间充质(7 d、9 d)和跖部鳞片皮肤上皮(9 d、11 d)、间充质(9 d、11d)的差异表达基因,探讨胚胎皮肤发育的调控通路。结果显示:羽毛皮肤上皮(7d、9d)鳞片皮肤上皮(9 d、11 d)差异表达显著基因(Padj0.05),分别为28个和116个;对4组极表达差异显著基因(P0.01)进行GO分析,发现富集在单细胞组织发育相关条目的差异基因最多,羽毛上皮(7 d、9 d)部分差异基因富集在细胞黏附;4组差异基因的KEGG分析中,筛选出共同的信号通路黏附斑激酶(FAK)信号通路,该通路介导的细胞黏附活动可能参与鸡胚胎皮肤发育过程。血小板源性生长因子(Platelet Derived Growth FactorSubunitB,PDFGB)、关键基因纤维连接蛋白1(Fibronectin1,FN1)和细胞基质蛋白(Periostin,POSTN)参与FAK信号通路,是值得关注的基因。     

牦牛乳脂合成关键酶基因全泌乳期的表达研究

试验以川西北高原的乳用麦洼牦牛为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术对麦洼牦牛乳腺组织中的氨酰-CoA合成酶长链家族成员1(acyl-CoA synthetase long-chain family member 1,ACSL1)、氨酰-CoA合成酶短链家族成员1、2(acyl-CoA synthetase short-chain family member 1、2,ACSS1、ACSS2)和脂肪酸结合蛋白家族成员3(fatty acid binding protein 3,FABP3)等乳脂代谢相关基因全泌乳期转录水平进行了分析。结果表明,4个基因在整个泌乳期均持续表达;分娩后30 d(30 d )ACSL1、ACSS1、ACSS2和FABP3基因的转录水平均比分娩前15 d(-15 d)显著增加(P<0.05),且达到最大值后逐步下降。产乳量测定结果表明,麦洼牦牛产乳量在120 d达到峰值,比乳脂代谢相关基因峰值表达水平晚90 d,其后产乳量逐步下降。结果表明,牦牛脂肪合成关键酶基因在全泌乳期的表达规律可能与牦牛对青藏高原生存环境的适应有关。     

Homeobox基因对毛囊生长发育作用机制的研究进展

Homeobox(Hox)基因作为一种重要转录因子,在调节动物体轴发育方面发挥着重要的作用。自Hoxc13基因被首次证明与毛囊生长发育有密切关系后,Hox基因家族其他成员也逐渐被认为在毛囊生长发育与周期变化过程中充当着一个重要角色。作者综述了Hox基因在毛囊生长中的作用机理,为今后绒毛用动物相关领域研究提供思路。     

反刍动物营养生理的分子生物学研究与展望

本综述讨论了反刍动物营养生理的分子生物学研究。许多研究证明 ,营养可以影响反刍动物生长轴、生殖轴(有关激素、受体) ,代谢以及有关酶的基因表达。机理研究认为营养因子除了作用于基因启动子外 ,还涉及转录后的调节。这是当前营养生理学的重要研究领域 ,它将促进基本理论和新技术的发展     

桑树资源综合利用研究进展

我国桑树资源丰富,全国各地都有栽培．本文对桑树的果、叶、根、枝在医药、食品、化工、畜牧业等方面综合利用进行了综述,为桑树资源将来进一步开发利用提供了科学依据。     

桑树资源综合利用进展及开发对策

综述了近10年来国内外有关桑树的果、叶、根、枝在医药、食品、化工、动物养殖等方面综合利用的研究进展,并对桑树资源进一步的研究和开发提出了建议。     

桑叶的营养价值及其在畜禽生产中的应用研究进展

桑叶含粗蛋白质、维生素(维生素A、维生素C)、微量元素(铁、锰、铜、锌)等营养组分及黄酮类等多种活性成分,是理想的动物蛋白质资源。研究发现,在猪生产中,添加15%桑叶可能会影响育肥猪的生长,但添加适量的桑叶(6%左右)可延缓宰后肌肉pH降低,增强肌肉的抗氧化能力,同时,桑叶可提高肌肉脂肪沉积,对肌肉氨基酸和脂肪酸组成(增加不饱和脂肪酸的含量)均有影响,并改善肉的风味。在家禽生产中,添加桑叶能降低鸡肉的pH,且可通过改变肌肉脂肪酸组成改善肉品质。此外,桑叶的活性成分已被证实能提高细胞或小鼠的抗氧化能力,具有降血脂、血糖及动脉粥样硬化等作用。本文简述了桑叶的营养价值及其在猪、肉鸡、蛋鸡生产中的应用,旨在为其作为蛋白质资源进一步应用于畜禽生产提供一定参考。     

桑叶黄酮对凡纳滨对虾肠道黏膜形态和肠道菌群的影响

本试验旨在研究桑叶黄酮对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道黏膜形态和肠道菌群的影响。选用初始体重为(1.32±0.01)g的凡纳滨对虾800尾,随机分为5组(每组4个重复,每个重复40尾),分别饲喂在基础饲料中添加0、50、100、150和300 mg/kg桑叶黄酮的试验饲料。饲养周期为50 d。结果显示:1)饲料中添加桑叶黄酮可促进凡纳滨对虾肠道肠绒毛发育,增加肌层厚度,添加100 mg/kg桑叶黄酮组绒毛高度最高且显著高于其他组(P<0.05),添加50 mg/kg桑叶黄酮组肌层厚度最高且显著高于其他组(P<0.05)。2)饲料中添加桑叶黄酮可增加凡纳滨对虾肠道菌群多样性,添加50 mg/kg桑叶黄酮组Shannon指数显著高于未添加组(P<0.05),Simpson指数显著低于未添加组(P<0.05)。3)与未添加组相比,添加100和150 mg/kg桑叶黄酮组弧菌属(Vibrio)与添加50、100和150 mg/kg桑叶黄酮组希瓦氏菌属(Shewanella)的相对丰度显著增加(P<0.05),各桑叶黄酮添加组红球菌属(Rhodococcus)与添加100、150和300 mg/kg桑叶黄酮组乳球菌属(Lactococcus)的相对丰度显著降低(P<0.05)。由此得出,饲料中添加50 mg/kg桑叶黄酮可促进凡纳滨对虾肠道发育,增加肠道菌群多样性。     

桑叶保健代用茶的成分测定与分析

为探明利用选792桑树品种研制出的桑叶茶中的1-DNJ、蛋白质、脂肪、可溶性总糖、铜、锌、铁、锰、磷、钾、硒、钙、18种游离氨基酸以及重金属砷、铅、镉、汞的成分含量与干桑叶中的成分含量是否存在差异,分别采用RP-HPLC法以及国标相应的检测方法,对主要成分1-DNJ及其它部分营养成分和重金属的含量进行了测定。比照分析的结果,桑叶茶和干桑叶中的蛋白质、脂肪、铁、锌、总游离氨基酸和重金属等成分含量总体无差异;主要成分1-DNJ含量比干桑叶低14.2%,可能与该成分具有热不稳定性有关。     

饲料中添加桑叶粉对单胃哺乳动物小鼠的脂肪代谢影响

以幼年及不同性别成年小鼠为动物模型,探讨桑叶作为动物饲料对单胃动物脂肪代谢的影响。在主要营养水平基本一致的条件下,给不同类型模型小鼠分别饲喂含20%和40%桑叶粉的饲料,幼年小鼠连续饲喂21 d、成年小鼠连续饲喂15 d,分别取血清、小肠、胰腺、腹部脂肪、肌肉等组织器官做检测。测定小鼠脂类代谢指标的结果表明,饲喂添加桑叶粉的饲料可不同程度降低小鼠血清甘油三酯含量,并极显著降低小鼠总胆固醇含量、腹脂系数和雌性小鼠肌肉脂肪含量(P<0.01),但可极显著促进雄性小鼠肌肉脂肪沉积(P<0.01);测定小鼠营养物质代谢关键酶活性的结果表明,饲喂添加桑叶粉的饲料可不同程度提高幼年小鼠血清中的淀粉酶活性,但会极显著抑制小肠中的蔗糖酶、麦芽糖酶以及血清中的脂肪酶活性(P<0.01),而胰腺脂肪酶活性则不同程度升高。另对小鼠的生长发育调查表明,饲喂含20%桑叶粉的饲料,不影响幼年小鼠正常生长发育,但可减缓成年小鼠体质量增长速度。推测当饲料中的桑叶粉质量分数≥20%时,桑叶粉中的活性物质可调节哺乳动物体内碳水化合物和脂肪代谢关键酶的活性,从而控制体内的脂肪沉积,这为生产低脂高品质畜禽产品以及拓宽桑叶新用途提供了新思路。     

桑叶粉和发酵桑叶粉对胡须鸡屠宰性能、肉品质及盲肠菌群的影响

试验旨在研究桑叶粉和发酵桑叶粉对胡须鸡饲养后期屠宰性能、肉品质及盲肠菌群的影响。选用95日龄岭南黄Ⅲ号胡须鸡392只,随机分为7组,即对照组,5%、10%、20%桑叶粉组,5%、10%、20%发酵桑叶粉组。每组4个重复,每个重复14只鸡（7公7母）。预试期4 d,正试期28 d。结果表明：①与对照组相比,除10%桑叶粉组外,其余各试验组鸡半净膛率显著降低（P<0.05）;10%发酵桑叶粉组鸡全净膛率显著降低（P<0.05）,20%发酵桑叶粉及10%桑叶粉组鸡全净膛率极显著降低（P<0.01）;饲喂5%发酵桑叶粉或20%桑叶粉使胡须鸡腿肌率分别极显著或显著降低（P<0.01;P<0.05）。②与对照组相比,各试验组胸肌剪切力和桑叶粉各组腿肌剪切力值均有所下降,但只有10%桑叶粉组胸肌剪切力值显著下降（P<0.05）;20%桑叶粉组腿肌pH_{45 min}显著增加（P<0.05）;各试验组腿肌b^*值均有所降低,其中20%桑叶粉组显著降低（P<0.05）。③与对照组相比,5%、10%桑叶粉组鸡盲肠大肠杆菌数量显著降低（P<0.05）,各试验组盲肠乳酸菌与大肠杆菌比值有提高的趋势,但差异不显著（P>0.05）。综合以上试验结果,桑叶粉可在胡须鸡生长后期日粮中添加至10%,发酵桑叶粉可添加至20%。     

Effects of Mulberry Leaf Meal and Fermented Mulberry Leaf Meal on Slaughter Performance,Meat Quality and Cecum Microflora in Huxu Chicken

This experiment was conducted to investigate the effect of mulberry leaf meal and fermented mulberry leaf meal on slaughter performance,meat quality and cecum microflora of Huxu chicken at the late growth stage.Three hundred and ninety-two Lingnan Ⅲ Huxu chickens aged ninety-five days were assigned to seven dietary treatments randomly,they were control group,5%,10%,20% mulberry leaf meal groups and 5%,10%,20% fermented mulberry leaf meal groups.Every treatment had 4 replicates,14 chickens per replicates (7 males and 7 females).The pre-trial period was 4 days,and the formal experiment period was 28 days.The results showed as follows:① Compared with the control group,expect the 10% mulberry leaf meal group,the semi-eviscerated percentage were significantly decreased in other experimental groups (P<0.05).Adding 10% mulberry leaf meal or 20% fermenterd mulberry leaf meal extremely significantly reduced the eviscerated percentage (P<0.01) and 10% fermenterd mulberry leaf meal reduced it significantly (P<0.05).The leg muscle percentage of chickens in 5% fermenterd mulberry leaf meal group and 20% mulberry leaf meal group reduced extremely significantly (P<0.01) and significantly (P<0.05),respectively.② Compared with the control group,the shear force of chest muscle in all experimental groups,and leg muscle in all mulberry leaf meal groups decreased,but only the shear force of chest muscle in 10% mulberry leaf meal group decreased significantly (P<0.05).Adding 20% mulberry leaf meal increased the pH_{45 min} of leg muscle significantly (P<0.05).The b^* value of leg muscle reduced in all experimental groups,and only that in the 20% mulberry leaf group reduced significantly (P<0.05).③ Compared with the control group,the number of E.coli of the cecum of chickens in 5% and 10% mulberry leaf meal groups reduced extremely significantly (P<0.05),and the ratio of Lactobacillus to E.coli of cecum in all experimental groups had an increasing trend (P>0.05).All over,the content of mulberry leaf meal in Huxu chickens'diet at the late growth stage could be up to 10%,and fermented mulberry leaf meal could be up to 20%.     

桑叶颗粒剂对糖尿病的治疗作用研究

为研究桑叶颗粒剂主剂对糖尿病的治疗作用,以四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠为实验动物进行了疗效研究。饲喂含1％和5％桑叶颗粒剂主剂的饲料,调查小鼠的临床表现及血糖值,结果表明,桑叶颗粒剂主剂可改善糖尿病小鼠“多饮”和体重降低的症状,1％和5％的主剂剂量均可极显著降低血糖值(P<0.01),5％的主剂剂量组即使停药后仍保持显著的降糖效果(P<0.05)。因此,桑叶颗粒剂对糖尿病小鼠有显著治疗作用。     

桑叶的综合利用和开发

本文介绍了国内外对桑叶综合利用和开发的最新进展，内容包括桑叶的功能性因子、桑叶在医药上的应用、食品上的开发应用和其他动物饲养中的应用四个方面。