天女木兰的组织培养

以天女木兰幼树和一年生的实生苗的幼嫩茎段为外植体,采用不同激素配比的培养基对天女木兰的组培技术进行了研究,培育出了天女木兰的组培苗。适宜天女木兰侧芽分化的培养基为:B5 0.5mg·L-16-BA 0.3mg·L-1IBA;适宜生根的培养基为:1/4MS 1.0mg·L-1IBA 0.5mg·L-1NAA。     

天女木兰组织培养的抗褐化研究

从外植体类型、外植体预处理方法、培养基类型、抗褐化剂类型及培养条件等方面研究了天女木兰(Magnolia sieboldiiK.Koch)组织培养过程中的褐化问题.结果表明,B5培养基对防止外植体褐化效果好,外植体在MS培养基中褐化严重.外植体的取材部位与天女木兰的褐化程度密切相关,侧芽褐化率相对较低,其次是顶芽,带芽的茎段褐化率最高.在B5+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA培养基中添加适宜浓度的抗氧化剂、吸附剂有利于抑制天女木兰的褐化,抗褐化效果是聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)＞维生素C(VC)＞活性炭(AC).用1 g/L VC浸泡外植体4·h可有效减轻褐化.培养初期一定的低温和暗培养可以减轻天女木兰的褐化.     

蜈蚣兰无菌繁殖系的建立

以蜈蚣兰茎段为外植体,以0.1%HgCl2溶液为外植体表面消毒剂,通过6,8,10和12 min等4个外植体表面消毒时间处理比较,研究对外植体污染率、死亡率和侧芽诱导率的影响,确定最佳消毒时间。结果表明,0.1%HgCl2溶液外植体表面消毒10 min效果最好,依此建立蜈蚣兰无菌繁殖系。     

天女木兰种子休眠特性的研究

从天女木兰(Magnolia sieboldiiK.Koch)种子的形态、种皮电镜观察、种子各部分抑制物质的生物测定和种子成熟过程中激素含量的变化等方面研究种子的休眠特性。结果表明:天女木兰种子秋季采收后其种胚尚未发育完全,是导致天女木兰种子深休眠的主要原因,但其种皮透性良好;种子不同部位存在不同程度的发芽抑制物质,主要存在于假种皮和胚乳中;种子成熟时胚乳中高浓度的ABA、IAA及低浓度的GA3是导致种子休眠的又一原因。     

三清山濒危植物天女木兰生育力分析

研究了三清山天女木兰种群生育力与年龄、海拔及树冠方向层位等的关系.结果表明:三清山天女木兰种群生育力低;天女木兰种群生育力随着年龄的增大而增大,径级达到Ⅴ级后其可育种子数量相对稳定,但可育率却逐步下降,这是由于其生理衰退所致;天女木兰种群可育种子数量随海拔的升高略有增大,其可育率呈显著增加,这是由于其在恶劣环境下增大生殖投资所致;天女木兰种群生育力在光照条件较好的冠层和方向,其生育力较高,即树冠南向和上层可育种子数量和可育率较高.     

不同浸种和催芽处理对天女木兰种子的催芽效果

【目的】对天女木兰种子进行不同浸种和催芽处理试验,探讨快速解除种子休眠的机理和促进种子萌发的技术。【方法】将天女木兰种子分别用100,200,300 mg/L GA3和清水浸种48 h,然后在室内进行低温层积((4±1)℃、150 d)和人工控制变温层积((4±1)℃5、0 d→(17±1)℃2、5 d→(4±1)℃、50 d→(17±1)℃2、5 d)催芽处理,并在层积过程中定期取样测定天女木兰种子的胚长占种子长的比例、呼吸速率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和蛋白酶活性。【结果】用GA3浸种后进行变温层积催芽的天女木兰种子,胚发育优于相应的低温层积催芽,并随着GA3质量浓度的提高催芽效果越好,且温度条件起主导作用;2种层积催芽方法下,天女木兰种子的呼吸速率均提高,且经GA3浸种的种子呼吸速率与清水浸种的种子相差不大;天女木兰种子中可溶性糖和可溶性蛋白含量在2种层积催芽方法下均比层积前有不同程度提高,不同GA3质量浓度浸种处理间差异不大;用2种层积催芽方法催芽的天女木兰种子蛋白酶活性升高,并且随着GA3质量浓度的提高而增强,层积后期蛋白酶活性低于层积初期,变温层积处理的蛋白酶活性高于低温层积处理。【结论】经300 mg/L GA3浸种并进行变温层积的天女木兰种子催芽效果最佳,温度条件在天女木兰种子的层积催芽过程中起主导作用。     

天女木兰种子蛋白双向电泳体系的建立

【目的】探索一套适用于天女木兰种子蛋白的双向电泳体系,为研究其种子萌发过程中的蛋白表达差异奠定基础。【方法】比较蛋白的不同提取方法(酚提取法、三氯乙酸-丙酮-酚提取法、三氯乙酸-丙酮法和Tris-HCl法)、IPG胶条pH梯度(pH3～11NL、pH3～10和pH4～7)、裂解液中的尿素浓度(6,7,8,9mol/L)和分离胶浓度(10%和12.5%)等条件,对天女木兰种子蛋白双向电泳结果的影响,筛选适宜的双向电泳条件。【结果】以Tris-HCl法提取种子蛋白,在IPG胶条pH为4～7、裂解液中尿素浓度为9mol/L、分离胶浓度为12.5%的条件下,可以获得分辨率高、背景清晰、重复性好的天女木兰种子蛋白双向电泳图谱。【结论】建立了适用于天女木兰种子蛋白的双向电泳体系。     

牛尾菜组织培养中外植体褐变现象控制研究

以幼嫩叶片、顶芽及茎段为外植体,研究不同外植体、消毒时间、抗氧化剂预处理、褐化剂以及不同培养基组合等对外植体褐变控制的效果.结果表明,嫩叶、顶芽及茎段的褐化率均随着0.1%升汞溶液消毒时间的延长而升高,而诱导率和污染率不断降低,最佳外植体为顶芽,消毒时间为10 min,诱导率达70.0%.采用3种抗氧化剂预处理20min,均可抑制顶芽褐化,强弱表现为PVP＞Vc＞Na2S2O3,Vc溶液可以加快侧芽的萌动及生长.3种抗褐化剂对茎段褐化均有不同程度的抑制效果,以0.3%AC抗褐化效果最佳,茎段未发生褐化,侧芽生长最好.在不同激素配比培养基中,随着6-BA和NAA浓度的提高,外植体发生褐化时间呈现提前的趋势,以MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L培养基中的外植体诱导率最高,为63.4%.此外,相对于基本培养基MS、1/2MS,在低无机盐离子浓度WPM基本培养基中,外植体褐化的时间有所推迟,可减缓外植体褐化程度.因此,适宜的外植体、消毒时间、抗氧化剂、抗褐化剂、激素组合配比和基本培养基,可以有效控制牛尾菜的褐化,提高诱导率.     

不同温度条件对天女木兰种子层积催芽效果的影响

通过对不同温度条件下天女木兰种子层积催芽效果的研究,以期获得快速促进种子萌发的技术。试验采用①天女木兰种子用清水浸种48 h,然后进行室内低温层积((4±1)℃,150 d);②室内控制变温层积((4±1)℃,50 d→(17±1)℃,25 d→(4±1)℃,50 d→(17±1)℃,25 d);③室外低温层积和室外自然变温层积催芽处理。并在层积过程中定期取样测定胚长占种子长的比例、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、过氧化物酶活性以及过氧化氢酶活性。结果表明:处理②的天女木兰种子,胚发育优于相应的其他层积催芽;天女木兰种子中可溶性糖和可溶性蛋白含量在层积催芽后均比层积前有不同程度提高;层积后种子中过氧化物酶活性和过氧化氢酶活性升高,室内控制变温处理在层积过程中各种酶的上升速度较其它快。总之,控制变温层积催芽处理的天女木兰种子催芽效果最佳。     

红枫杜鹃组织培养技术体系的构建

以红枫杜鹃(Rhododenron molle× Rhododendron schlippenbachii)的茎尖、茎段为材料,研究红枫杜鹃组织培养技术体系.结果表明:采用0.1%HgCl2消毒7min,茎尖、茎段诱导率均最高,分别为81%和72%,茎尖的效果优于茎段;红枫杜鹃在1/4MS、Read培养基和1/4 MS(铁盐加倍)3种培养基上的诱导率均为80%以上,其中1/4MS培养基诱导率最高(83%):正交试验中,1/4MS+ZT4.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+2,4-D0.03mg·L-1培养基上,红枫杜鹃诱导率为85%,高于其他处理;采用萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)、活性炭三因素二次正交旋转组合设计试验中,试管苗在1/2MS+NAA0.1mg·L-1+IBA0.5mg·L-1+AC1000mg·L-1培养基上平均生根率为64.7%,高于其他处理.移栽采用苔藓作为基质最好,成活率为80%.