高效液相色谱法测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量

研究建立了同时测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量的液相色谱方法。混合型饲料添加剂样品用甲醇提取,以C_(18)柱(150 mm×4.6 mm×5μm)为分析柱,紫外检测器检测,外标法定量。结果表明:在所选择的色谱条件下,空白载体中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚能达到很好的分离;丁香酚、香芹酚和百里香酚在1.0～500 mg/L内线性关系良好,肉桂醛在0.10～50.0 mg/L内线性关系良好;丁香酚、香芹酚和百里香酚最低定量限为50 mg/kg,肉桂醛最低定量限为5.0 mg/kg;加标回收率为83.7%～112%,变异系数为0.70%～6.39%。该方法样品前处理简单、简便可靠,可用于混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚的同步检测。     

基于TMT和PRM技术筛选车叶草苷干预CUMS大鼠海马组织的差异表达蛋白

【目的】基于蛋白质组学探讨车叶草苷对慢性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型大鼠海马组织的保护作用机制,为车叶草苷的开发利用提供依据。【方法】选取45只雄性SD大鼠预饲1周后,随机分为3组：空白组、模型组、车叶草苷组,每组各15只;空白组每笼饲养3只,其他组单笼饲养。试验周期为5周,于试验第3周开始,温和不可预知性刺激同时给药,车叶草苷组按0.070 g/kg BW剂量灌胃给药,空白组、模型组灌服等体积的生理盐水,每天一次。造模完成后提取大鼠海马组织总蛋白,利用同位素串联质谱标签(tandem mass tags, TMT)定量标记技术进行抑郁模型大鼠海马蛋白质组学分析,筛选潜在差异表达蛋白,借助平行反应监测(parallel reaction monitoring, PRM)技术对候选蛋白在海马组织中的表达情况进行靶向验证。【结果】筛选出车叶草苷组、模型组之间6个上调和17个下调的差异表达蛋白;GO功能和KEGG通路富集分析表明,它们主要参与神经活性配体-受体相互作用、互补和协同调节级联、胃酸分泌等信号通路;PRM成功验证...     

饲料添加剂牛至油中香芹酚和百里香酚含量的测定

试验建立了高效液相色谱法测定饲料添加剂牛至油中香芹酚和百里香酚含量的方法。采用高效液相色谱法,色谱柱Diamonsil C18(2)柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(60??4??2),检测波长274 nm,流速1.0 ml/min。结果显示,牛至油中香芹酚含量为37.81%,百里香酚含量为7.05%,香芹酚和百里香酚的回收率分别为98.2%、98.4%,变异系数分别为1.0%、1.3%。试验为牛至油中香芹酚和百里香酚的检测提供了准确、灵敏、可靠的分析方法。     

香芹酚和百里香酚对畜禽肠道健康的调控

肠道健康是制约畜禽业发展的重要问题.随着畜禽养殖业禁抗条例实施,探究理想的抗生素替代品已成为畜牧业亟须解决的问题.香芹酚和百里香酚是从植物中提取得到的单萜酚类同分异构体物质,可提高动物生长性能,具有抗菌、抗炎、抗氧化和改善肠道健康等功能.文章综述了香芹酚和百里香酚作为抗生素替代品对畜禽肠道健康调控机制的研究进展,以...     

不同提取液对牛至粉中香芹酚和麝香草酚提取效果分析

本试验使用1%β-环糊精溶液、1%羟丙基-β-环糊精溶液、10%丙二醇溶液,在40℃对牛至粉进行超声提取40 min,同时用纯化水提取作为阴性对照,乙腈提取作为阳性对照,获得牛至提取液,用高效液相色谱法测定不同提取液中牛至精油成分香芹酚和麝香草酚含量,以期了解环糊精和丙二醇对纯化水提取牛至中挥发油成分香芹酚和麝香草酚辅助提取作用。试验结果显示:5种提取液中香芹酚和麝香草酚的浓度差异极显著,由高到低依次为乙腈、1%β-环糊精溶液、1%羟丙基-β-溶液、10%丙二醇溶液、纯化水,其中1%β-环糊精提取液对香芹酚和麝香草酚提取效率达到乙腈的87.64%和69.45%。环糊精或丙二醇均可提高纯化水对牛至中香芹酚和麝香草酚的提取量,其中1%β-环糊精溶液最优,为牛至产品开发提供了新的思路。     

高百里香酚和香芹酚体外抑菌作用的研究

测定香芹酚和百里香酚单一成分及其联合使用对溶常见病原菌(埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和猪霍乱沙门氏菌)及常见益生菌(保加利亚乳杆菌和枯草芽孢杆菌)的抑杀浓度.[方法]稀释培养法测定最小抑菌浓度、最小杀菌浓度.[结果]本实验证实在一定的药物浓度下香芹酚和百里香酚能够杀灭常见病原菌,并且对肠道益生菌也有一定的抑杀作用.     

高效液相色谱法测定饲料香味剂中香芹酚和百里香酚含量的研究

本实验建立了高效液相色谱法测定饲料香味剂中香芹酚和百里香酚的方法。试样经甲醇提取后,用HPLC测定香芹酚和百里香酚。结果表明:香芹酚和百里香酚的线性范围为1.0～500.0μg/mL,回收率分别为96.8%～99.2%和97.6%～101.4%,变异系数分别为1.0%和1.6%;方法定量限为50mg/kg。本方法对饲料香味剂中香芹酚和百里香酚的检测分析准确性高、重现性好。     

基于TMT技术的牦牛妊娠期血清蛋白质组学分析

为了探究妊娠期内牦牛血清的蛋白质组特征,筛选并分析差异表达蛋白质(DEPs)在牦牛妊娠维持中的作用。本研究选择9头4岁半至6岁龄健康状况良好且当年未产犊的自然发情母牦牛进行人工授精(AI)。在AI后第30、60及90天采集其血清样品,并对授配母牦牛进行妊娠诊断。依据诊断结果将采集的样品进行回顾性分组,即妊娠第1、2、3月组及未妊娠组(未妊娠组样品来自AI后90天经妊娠诊断确诊为未孕的牦牛个体),每组样品3个生物学重复。利用串联质谱标签(TMT)技术对牦牛血清样品的蛋白表达情况进行定量分析,筛选差异表达蛋白,并对其进行GO功能富集和KEGG通路等生物信息学分析,进一步筛选与牦牛妊娠维持相关的潜在蛋白。结果显示,在4组牦牛血清蛋白样品中共获得497个蛋白,以差异倍数≥1.2或≤0.83,且P<0.05为条件筛选,共筛选到68个差异蛋白。GO功能富集和KEGG通路分析显示,这些DEPs在代谢、免疫系统、粘附、生物调节等生物学过程以及补体与凝血级联、金黄色葡萄球菌感染等与炎症和免疫途径相关的通路有明显富集。值得注意的是,妊娠期各组间差异蛋白富集通路中均包含有PI3K-Akt、Rap1、M...     

化学合成百里香酚和香芹酚对仔猪生产性能影响及机制

试验旨在研究使用低剂量抗生素时,添加不同剂量化学合成的百里香酚和香芹酚(TC500:每千克含250 g百里香酚和250 g香芹酚)对断奶仔猪生长性能、肠道形态和肠道微生物的影响。选用180头(35±3)日龄的三元杂交(杜×长×大)仔猪,随机分到5个组(每组6个重复,每重复6头牛,公母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂分别添加30、60、120和240 g/t TC500的试验饲粮,试验期35 d。结果表明:试验前2周和全期,添加量为240 g/t的试验组平均日增质量较对照组有增加的趋势(P<0.1);添加TC500极显著提高十二指肠的绒毛高度和小肠3个肠段的绒毛高度/隐窝深度(P<0.01),并且所有检测肠段的隐窝深度也有所降低,且差异极显著;试验组盲肠乳酸杆菌数较对照组显著提高5.53%。由此可见,化学合成的百里香酚和香芹酚能改善断奶仔猪的肠道微生物区系,促进肠道健康,并且添加量为240 g/t时能够促进仔猪生长。     

百里香酚和香芹酚对细菌形态结构的影响

探讨百里香酚及香芹酚的杀菌机制。将葡萄球菌和枯草杆菌分别接种至含百里香酚、香芹酚的肉汤中,37℃培养24h,显微镜下观察细菌形态和结构,测定细菌大小。结果在百里香酚及香芹酚胁迫下,葡萄球菌着色变深,菌体变大,多呈双球状、短链状或单个散在;芽孢杆菌着色变深,菌体变大、鲜有芽孢形成。     

饲料添加剂百里香油中百里香酚和香芹酚含量的测定

本实验采用高效液相色谱法测定了饲料添加剂百里香油中百里香酚和香芹酚的含量。色谱柱为DiamonsilC18(2)柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(60∶4∶2,V∶V∶V),检测波长为274 nm,流速为1.0 mL/min。结果显示,百里香油中百里香酚和香芹酚含量分别为22.70%和5.12%,回收率分别为98.42%和97.81%,变异系数分别为1.18%和0.90%。     

香芹酚和百里香酚对断奶仔猪结肠微生物的影响研究

试验旨在研究日粮添加香芹酚和百里香酚对断奶仔猪结肠微生物群落结构和代谢通路的影响。选取28日龄、体重8.5 kg±1.0 kg断奶仔猪64头,随机分为4组,每组16个重复,每个重复1头猪。A组（对照组）饲喂基础日粮＋抗生素,B组饲喂基础日粮＋20 g/t香芹酚,C组饲喂基础日粮＋20 g/t百里香酚,D组饲喂基础日粮＋20 g/t香芹酚-百里香酚混合物（质量比2：1）。试验期30 d。基于Illumina HiSeq测序平台,利用双末端测序（Paired-End）的方法进行测序。通过对OTUs聚类,进行物种注释及丰度分析;进一步进行α多样性、β多样性分析及显著物种差异分析和功能基因预测分析。结果显示：①各试验组结肠微生物多样性均显著高于对照组（P<0.05）;②D组结肠中厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度极显著高于对照组（P<0.01）,显著高于B和C组（P<0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）相对丰度显著高于对照组和C组（P<0.05）,Epsilonbacteraeota、螺旋体门（Spirochaetes）、变形菌门（Proteobacteria）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）。D组结肠中弯曲杆菌属（Campylobacter）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）,D组理研菌科RC9肠道群（Rikenellaceae_RC9_gut_group）相对丰度显著高于B组（P<0.05）,D组罗斯氏菌属（Roseburia）相对丰度极显著高于对照组（P<0.01）,D组螺杆菌属（Helicobacter）相对丰度极显著低于对照组（P<0.01）;③D组结肠微生物脂质代谢水平极显著高于对照组（P<0.01）,结肠微生物碳水化合物代谢、其他次生代谢物的生物合成和其他氨基酸代谢水平显著高于对照组（P<0.05）,结肠微生物能量代谢水平极显著低于对照组（P<0.01）。综上,在本试验条件下,断奶仔猪日粮中添加20 g/t的香芹酚-百里香酚混合物,改善了断奶仔猪结肠微生物群落结构,结肠中有益菌的相对丰度提高,有害菌的相对丰度降低,促进了结肠微生物的代谢功能。     

基于网络药理学方法研究阿司匹林丁香酚酯防治犬心血管疾病的作用机制

试验旨在采用网络药理学方法探讨阿司匹林和丁香酚的靶点、基因富集和通路来推测阿司匹林丁香酚酯(AEE)防治犬心血管疾病的作用机制。首先从DrugBank数据库检索阿司匹林、丁香酚获得其作用靶点,进而构建化合物-靶点网络,再将其靶点上传至STRING数据库,物种选择犬,得到作用于犬蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,最后将作用于犬的靶点上传至DAVID数据库,物种选择犬,筛选出错误率<0.01的基因富集和KEGG通路,从而构建靶点-通路网络图,用以推测AEE防治犬心血管疾病的作用机制。通过检索分析可知,阿司匹林和丁香酚已知的相应靶点有15个,其中8个靶点可作用于犬,关键靶点涉及TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1;基因功能富集(GO)条目4个,其中分子功能2个,涉及甾体结合和转录因子活性、序列特异性DNA结合,生物过程2个,涉及到DNA转录模板和DNA模板转录的正向调节;KEGG通路2条,涉及前列腺癌和癌症信号通路。综上所述,推测AEE可能通过调控TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1等靶点,基因功能富集于DNA转录模板、甾体结合、转录因子活性、序列特异性DNA结合、DNA模板转录的正向调控,通过前列腺癌及其他癌症信号通路来治疗犬心血管疾病。     

香芹酚对肉兔肠道形态、胃肠道pH、盲肠发酵和微生物区系的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同水平香芹酚对肉兔肠道形态、胃肠道pH、盲肠发酵和微生物区系的影响。选取120只35日龄新西兰肉兔,随机分为4组,每组30个重复,每个重复1只,对照组（CON组）饲喂基础饲粮,试验组（T1、T2、T3组）分别饲喂香芹酚添加水平为150、300和450 g/t的试验饲粮。预试期7 d,正试期28 d。结果表明：1) T1组的空肠绒毛高度显著低于CON、T2和T3组（P<0.05）,与CON组相比,T1、T2和T3组空肠绒隐比均有所提高,但差异不显著（P>0.05）,饲粮中添加香芹酚对回肠肠道形态无显著影响（P>0.05）。2）与CON组相比,试验组胃肠道pH均降低（P>0.05）。3）与CON组相比,饲粮添加香芹酚有增加盲肠中戊酸含量的趋势（0.05≤P<0.10）,盲肠的丙酸、丁酸和异戊酸含量均略有增加（P>0.05）,T2组盲肠中的丁酸和总挥发性脂肪酸含量高于CON、T1和T3组（P>0.05）。4）与CON组相比,饲粮中添加香芹酚显著降低了T3组的物种丰富度（P<0.05）,T2组的物种丰富度最高。5）饲粮中添...     

香芹酚和百里香酚对绵羊养分表观消化率、瘤胃发酵特性及纤维降解菌数量的影响

本试验旨在探讨香芹酚和百里香酚对绵羊养分表观消化率、瘤胃发酵特性及纤维降解菌数量的影响.选取9只健康装有永久瘤胃瘘管的小尾寒羊公羊,采用3×3拉丁方设计,预试期5 d,正试期15 d.对照组(CON)饲喂基础饲粮,试验1组(T1组)在基础饲粮精料中添加香芹酚(2 g/d),试验2组(T2组)在基础饲粮精料中添加百里香酚...     

基于TMT技术分析热应激对母兔卵巢组织蛋白表达的影响

实验旨在利用TMT蛋白组学技术研究热应激对母兔卵巢组织蛋白表达的影响.选择健康齐兴肉兔初产母兔200只,随机分为适温组(21±1)℃和热应激组(32±1)℃,每组100只兔.适应期2周,正试期为母兔配种至第1胎仔兔断奶(28日龄断奶),采集卵巢组织,应用TMT蛋白组学技术筛选差异表达蛋白.结果表明:热应激组和适温组齐兴...     

基于蛋白质组学分析羊乳、牛乳和人乳的蛋白质功能特性

为进一步了解羊乳、牛乳和人乳3种乳样蛋白质相关信息,对其基本成分进行测定,并通过蛋白质组学技术对所含蛋白质进行生物信息学分析.结果表明:羊乳和牛乳的蛋白质含量高于人乳,人乳的脂肪和乳糖含量较高;3种乳中共鉴定出3370种蛋白质,乳中蛋白质的生物过程主要集中在细胞和代谢过程,细胞定位主要分布在腔体和细胞器上,分子功能表现...     

基于TMT技术对低氧与常氧条件下牦牛PASMCs的蛋白组学分析

旨在利用串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)技术对牦牛肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)在低氧和常氧不同培养条件下的蛋白组学进行差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)分析,进而了解高原牦牛PASMCs的DEPs。本试验采用贴壁培养法培养PASMCs,分别在低氧与常氧条件下培养72 h,然后收集细胞,提取两组细胞的总蛋白,利用TMT标记蛋白定量技术筛选DEPs进行分析,并进行GO功能注释和KEGG通路分析。在比较低氧和常氧下PASMCs的2组蛋白样品中共获得6 859个蛋白,以FC (fold change)≥1.3或≤0.78,且P<0.05条件进行筛选,获得DEPs共531个,其中上调DEPs有186个,下调DEPs有345个。富集分析结果表明,DEPs主要富集在中枢碳代谢、糖酵解与糖代谢合成、HIF-1信号通路、次生代谢产物的生物合成等低氧适应相关通路中。在这些通路中发现其中有7个重要的DEPs (PGK、HK、LDH、PGAM、pfkA、IL6ST、PDK1)。亚细胞定位中质膜(28.9%)所占比例最高。结构域分析中主要以表皮生长因子样结构域为主。结果表明,DEPs分别富集在代谢、酶活性、低氧适应性等相关类别与通路中,并发现7个重要的DEPs (PGK、HK、LDH、PGAM、pfkA、IL6ST、PDK1)可能与缺氧环境的适应有关。这些结果为进一步研究牦牛PASMCs在低氧中的适应性提供了理论支持。     

牛奶和婴儿配方奶粉中三聚氰胺筛选和定量方法的验证及测定效果(一)

近年来在中国发生了向宠物食物和婴儿配方奶粉中添加三聚氰胺这种富含氮的极性化合物的事件。这些事件促使了分析多种食品和原料中三聚氰胺及相关化合物的分析方法的建立。从高度精密的色谱质谱联用仪到选择性免疫试验,这些方法的建立主要集中在筛选和定量2个目的上。本问主要研究了2种筛选方法和2种定量方法。筛选方法是酶联免疫吸附测定(ELISA)和液相色谱法联合紫外线(HPLC-UV)检测,而定量方法是气相色谱质谱联用(GC-MS)和液相层析串联质谱(LC-MS/MS)分析技术。本文的试验得到了4种方法的效果和测定数据以及以国内和欧洲的测定效果为体系的结果,这些方法有助于牛奶及以牛奶为原料的婴儿配方奶粉中三聚氰胺及相关化合物的测定。     

基于蛋白质组学技术分析初乳和常乳摄入对初生犊牛肝脏蛋白表达的影响

【目的】试验旨在对犊牛肝脏蛋白进行蛋白质组学分析,筛选与初乳、常乳摄入相关的蛋白。【方法】以经产荷斯坦母牛分娩的9头公犊牛为研究对象,随机分为初乳组(CI)、常乳组(M)和对照组(CT),每组3头。初乳组和常乳组犊牛分别饲喂初乳和常乳,于出生后24 h屠宰;对照组未饲喂初乳或常乳,于出生后2 h屠宰。采用Label-free蛋白组学技术对3组犊牛肝脏的蛋白表达谱进行分析,以Q<0.05为阈值筛选各组间的差异表达蛋白,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】在犊牛肝脏中共鉴定到3 901个蛋白,其中在初乳组、常乳组和对照组中分别鉴定到3 521、3 646和3 548个蛋白,有3 202个蛋白在3组中共表达。对差异表达蛋白进行分析显示,初乳组和常乳组犊牛肝脏中共筛选出287个差异表达蛋白,主要参与细胞代谢、应激反应、生长发育和氧化还原等生物过程,显著富集通路为内吞作用、氨基酸代谢和氧化磷酸化;初乳组和对照组犊牛肝脏中共筛选出154个差异表达蛋白,主要参与细胞代谢、单组织过程和肌酸合成等生物过程,显著富集通路为氨基酸代谢、黏着斑和内吞作用等。【结论】饲喂初乳的犊牛肝脏中差异表达...