五味子药渣多糖的提取及其免疫活性

提取并纯化得到五味子药渣多糖,对其体外免疫活性进行初步评价。经水提醇沉、乙醇分级、活性碳脱色、Sevage法和链蛋白酶联合脱蛋白,从五味子药渣中获得c SDP、f SDP和SDP 3种多糖。通过体外淋巴细胞转化试验验证3种多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,结果表明:3种五味子药渣多糖在一定质量浓度下对未经活化的小鼠淋巴细胞有增殖作用,对Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖有显著促进作用;多糖的纯化程度越高对小鼠脾淋巴细胞的增殖促进作用越强;五味子药渣粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

白术多糖的提取、纯化和活性研究

[目的]提取和纯化白术多糖,并探讨多糖中蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。[方法]采用醇沉分级、脱蛋白和Sephadex G-75制备柱从中药白术中提取分离得到cPAM、zPAM和PAM 3种多糖,并对这3种多糖进行体外淋巴细胞转化试验。[结果]3种白术多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖均有促进作用;浓度为5μg/ml的zPAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用;浓度为5和10μg/ml的PAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用。[结论]白术多糖的纯化程度与脾淋巴细胞增殖有一定关系;纯化程度高的多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖有促进作用;白术粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

林蛙油活性肽对小鼠免疫功能的影响

以林蛙油蛋白双酶水解超滤后获得的2种不同分子质量区间的活性肽BPOR1及BPOR2为试验原料,体外通过脾淋巴细胞增殖试验,分别加入不同剂量的BPOR1、BPOR2和Con A诱导,观察淋巴细胞的增殖情况,体内通过灌胃不同剂量BPOR1及BPOR2(100、300、600 mg·kg-1·d-1)30 d,以脾脏指数和胸腺指数的变化来观察2种活性肽对小鼠免疫器官的影响,利用流式细胞仪检测小鼠T淋巴细胞亚群的变化情况。结果表明:BPOR1可明显地促进小鼠脾淋巴细胞增殖,且具有对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖的协同刺激作用。2种混合肽对小鼠脾脏指数和胸腺指数比均有影响,并且都能影响小鼠CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的分布。可见,林蛙油活性肽能增加小鼠的免疫能力,且BPOR1的作用效果比BPOR2明显。     

迭鞘石斛所含多糖对小鼠免疫细胞影响的研究

[目的]研究迭鞘石斛（Dendrobinm chryseum Rolfe）所含多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的影响。[方法]分离提取小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,通过添加和不添加迭鞘石斛所含多糖进行体外培养,以MTT法检测这些免疫细胞增殖的变化情况。[结果]石斛多糖在中、高浓度时可极显著提高小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增值（P﹤0.01）,低浓度时没有增强作用。[结论]迭鞘石斛所含石斛多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的增殖有增强作用,说明对小鼠具有免疫增强作用。     

海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究

[目的]研究海带硫酸多糖的纯化方法、理化性质和生物学活性。[方法]海带粗多糖经离子交换纤维素分离纯化;采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法分别研究多糖含量、硫酸根含量和分子量等理化性质;采用促小鼠脾淋巴细胞增殖试验研究其提高免疫功能的作用。[结果]得到3种纯化的海带硫酸多糖,LPS-1、LPS-2、LPS-3,对其中LPS-3的理化性质检测表明,其糖含量为36.90%,硫酸基含量为11.91%,分子量2.69×10^6D。LPS-3能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有有丝分裂原样作用,对地塞米松引起的小鼠脾淋巴细胞增殖抑制具有显著的拮抗作用,但LPS-3不具有协同有丝分裂原ConA的作用。[结论]该分离方法可得到3种纯化的海带硫酸多糖,其中LPS-3具有显著提高免疫活性的作用。     

党参粗多糖的组成及其免疫活性研究

【目的】研究党参粗多糖的组成及其对小鼠主要免疫细胞活性的影响,为党参的开发利用提供依据。【方法】以东党参为试材,提取分离其粗多糖,利用气相色谱法对其单糖组成进行分析。制备小鼠（ICR雄性）脾脏B淋巴细胞悬液和纯化的巨噬细胞,分别应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）和中性红吞噬试验测定党参粗多糖对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响。【结果】党参粗多糖收率为9.7%,单糖组成为葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、木糖（Xyl）、鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、半乳糖醛酸（GalA）,其物质的量比为102.7∶7.9∶2.2∶1.8∶1.1∶1.0。党参粗多糖能够刺激小鼠脾脏B淋巴细胞增殖,并呈现一定的量效关系,当粗多糖质量浓度为400 μg/mL 时,可以显著促进小鼠B淋巴细胞的增殖(P<0.05);党参粗多糖可极显著增强小鼠巨噬细胞吞噬中性红的能力。【结论】本研究提取党参粗多糖的方法简单,提取的粗多糖可促进小鼠B淋巴细胞的增殖,提高巨噬细胞的吞噬功能,从而增强免疫细胞活性,有望成为新一代免疫调节剂。     

酵母多糖对小鼠免疫功能影响的体外实验研究

[目的]研究酵母多糖对小鼠免疫功能的影响,为酵母多糖相关产品的开发利用提供可靠的实验依据。[方法]分离提取小鼠的脾细胞,分为添加酵母多糖组和不加酵母多糖的对照组,检测小鼠脾细胞的增殖活性;留取细胞上清液,测定白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）含量;用流式细胞术检测T淋巴细胞和B淋巴细胞的数量,观察酵母多糖对T、B细胞增殖的影响。[结果]酵母多糖组增殖活性明显高于对照组（P〈0．01）;在一定剂量范围内,该组IL-2、IFN-γ的含量与酵母多糖呈剂量依赖关系,另外酵母多糖对T、B细胞均有明显的增殖效果。[结论]酵母多糖可显著提高小鼠免疫系统的功能。     

去铁胺对T淋巴细胞体外增殖、活化以及细胞周期的影响

分别采用MTT法、CFSE染色结合流式细胞术、双色荧光抗体染色结合流式细胞术、PI染色法检测去铁胺(DFO)对小鼠T淋巴细胞的药物毒性、对T淋巴细胞增殖、对Con A刺激下的小鼠T细胞CD69表达和淋巴细胞周期的影响。研究结果表明:DFO对淋巴细胞的毒性T细胞体外增殖、活化和细胞周期无影响;不同浓度的DFO(5、10、20、40μmol/L)能显著抑制受Con A刺激48 h和72 h后的T淋巴细胞增殖;低浓度的DFO(5、10μmol/L)对小鼠T淋巴细胞CD69的表达没有影响,高浓度(20、40μmol/L)的DFO可抑制T淋巴细胞CD69的表达;Ph能将T淋巴细胞抑制在G0/G1期。说明DFO除可通过抑制T淋巴细胞活化外,可能还通过其他机制抑制T淋巴细胞增殖,且DFO可以将淋巴细胞周期抑制在G0/G1期,可望发展成为一种新的免疫抑制干预药物。     

灵芝多糖的提取纯化及其免疫活性

【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖,研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响,为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖,经反复冻融、Sevag法脱蛋白和Sepharose CL-6B柱层析,纯化得灵芝多糖(GLP)。通过HPLC鉴定GLP的纯度,G.C.分析其单糖组成。采用MTT法、中性红试验、Griess法、比色法和ELISA法,分别检测GLP对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产量和iNOS活性以及TNF-α产量的影响。【结果】GLP为白色粉末,分子质量为51ku,HPLC分析GLP为单一狭窄对称峰,其单糖组成为葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),二者物质的量之比为16.8∶1。GLP能够刺激小鼠T淋巴细胞增殖,并呈现剂量依赖关系;当GLP质量浓度达到100μg/mL时,能显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力,提高其分泌iNOS的活力和NO的生产量;同时,当GLP质量浓度≥200μg/mL时,能显著促进腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的能力,具有剂量依赖性。【结论】GLP能够增强小鼠免疫细胞活性,有望成为重要的生物免疫调节剂。     

黄芩苷抗大鼠实验性关节炎的研究

研究黄芩苷对大鼠实验性关节炎的作用及其机制。应用蛋清、角叉菜胶注射诱发大鼠产生关：市性足肿胀;对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。与模型组比较,黄芩苷能抑制大鼠足肿胀程度。对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化有非常明显的增强淋巴细胞转化的能力;对蛋清、角叉菜胶引起的足肿胀均有明显抑制作用。     

蒲黄醇提取物对C57BL／6荷瘤小鼠免疫功能的影响

[目的]研究蒲黄醇提物对C57BIM6荷瘤小鼠免疫功能影响。[方法]通过建立Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,以抑瘤率为指标考察蒲黄醇提物的体内抗肿瘤活性,分别测定其抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数;四氮唑盐（MTY）法对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性进行测定;ELISA法测定荷瘤小鼠血清中白细胞介素一2（IL-2）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a水平。[结果]蒲黄醇提取物100mg／kg·d组对肿瘤生长有明显的抑制作用（P〈0．01）,其抑瘤率为48．3％,蒲黄醇提物三个剂量组均能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数。同时100和200mg／kg·d组能显著提高荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF—ol的水平。[结论]蒲黄醇提物具有提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的作用。     

脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响

[目的]研究脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响。[方法]试验组以低、中、高剂量组0.334、0.667和2.000 g/(kg·d)的脱毒菜籽多肽灌胃小鼠,对照组以等体积纯净水灌胃,30 d后进行二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应试验、Con A诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定试验、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性测定试验、试验前后小鼠体重以及脏器/体重比值试验。[结果]脱毒菜籽多肽对小鼠的耳廓肿胀、脾淋巴细胞转化、吞噬指数a和NK细胞活性均有显著影响,但对小鼠体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、脾抗体生成细胞量、血清溶血素水平和腹腔巨噬细胞吞噬能力均无影响。[结论]脱毒菜籽多肽具有增强免疫力的功能。     

苦豆子对小鼠免疫功能的影响研究

[目的]探讨苦豆子对小鼠免疫功能的影响,为中药免疫抑制剂的开发提供一定的参考依据。[方法]将8周龄昆明小鼠按低、中、高浓度分为3组,灌胃给药,每天给药量分别为5、10、15 g/kg,连续7 d,灌服0.5 ml/d饮用水的小鼠为对照组,通过淋巴细胞转化试验和常规HE染色试验,研究苦豆子水煎剂对小鼠淋巴细胞增殖率和脾脏组织结构的影响。[结果]与对照组相比,经3个浓度苦豆子水煎剂处理后小鼠的T、B淋巴细胞增殖率均极显著降低(P<0.01)。经中浓度和低浓度苦豆子水煎剂处理后小鼠脾脏红髓中B淋巴细胞密度明显降低,其中经中浓度苦豆子水煎剂处理后密度最小。[结论]苦豆子水煎剂可降低小鼠淋巴细胞增殖率和脾脏红髓中B淋巴细胞密度,从而对脾脏的免疫清除功能产生影响。苦豆子对小鼠的免疫功能有一定的抑制效应。     

苗药双肾草多糖含量测定及其免疫调节作用研究

[目的]测定苗药双肾草中多糖的含量并研究其免疫调节作用。[方法]以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定双肾草多糖的含量,并研究双肾草多糖对小鼠的免疫调节作用。[结果]双肾草多糖含量为58.5%;双肾草多糖可明显增加小鼠的脾脏重量,促进抗体的产生,对正常小鼠体液免疫具有一定的增强作用。[结论]双肾草多糖对机体的的特异性免疫功能有一定的促进作用。     

马尾藻多糖的提取及免疫研究

[目的]研究马尾藻多糖的提取工艺和药理免疫能力。[方法]以广西北海涠洲岛特有的马尾藻为材料,探索马尾藻多糖的最佳提取工艺,并对其进行免疫试验。[结果]结果表明,马尾藻多糖提取的最佳条件为：水浴温度80℃,提取时间10 h,胶体磨处理马尾藻2 min,藻粉∶水=1∶20,提取液的浓缩液体积数∶95%酒精=1.0∶3.0。马尾藻多糖对小鼠免疫的试验表明,多糖剂量为200、400、600 mg/kg.d时,小鼠脾的重量显著增加（P〈0.05） 当多糖剂量为400、600 mg/kg.d时,小鼠腋下淋巴结的重量显著增加（P〈0.05）,对单核巨噬细胞的吞噬功能有显著影响,能明显提高小鼠碳粒廓清速率,提高吞噬指数α（P〈0.05）,并对巨噬细胞增生以及淋巴小结形成有明显作用 当多糖剂量为600 mg/kg.d时,小鼠淋巴结不但产生明显的淋巴小结,而且形成大量巨噬细胞。[结论]该研究结果为马尾藻生理活性物质多糖的更进一步研究提供参考。     

林蛙皮活性肽对小鼠免疫功能影响的试验研究

[目的]探讨林蛙皮生物活性肽对正常小鼠免疫功能的影响。[方法]将小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、林蛙皮活性肽低、中、高剂量组,每组10只,连续灌胃给药28 d后,采用ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,检测T淋巴细胞增值,并通过溶血空斑试验和血清溶血素试验检测林蛙皮活性肽对小鼠体液免疫功能的影响。[结果]林蛙皮生物活性肽可明显促进ConA诱导的淋巴细胞增值,增加抗体生成细胞数量,增强血清溶血素抗体效价水平。[结论]林蛙蛙皮生物活性肽对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能均具有增强作用。     

魟鱼软骨多糖的免疫调节作用

[目的]观察魟鱼软骨多糖对小鼠免疫器官胸腺和脾脏重量的影响以及脾脏组织细胞IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[方法]腹腔注射环磷酰胺（CY）造成小鼠免疫抑制模型,以香菇多糖为阳性对照,魟鱼软骨多糖（低、中、高剂量）,灌胃给药14 d,试验结束后称量胸腺和脾脏重量计算胸腺指数和脾指数,检测脾脏中细胞因子的表达情况：运用抗原对应抗体进行免疫组化SP法检测脾中IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[结果]魟鱼软骨多糖能显著提高小鼠胸腺和脾脏重量,能拮抗环磷酰胺导致的免疫抑制,升高脾脏中细胞因子的表达水平从而提高机体的免疫功能。[结论]魟鱼软骨多糖对小鼠的免疫功能具有一定的调节作用,是一种良好的免疫调节剂。