食品中沙门氏菌能力验证样品的鉴定与分析

[目的]掌握食品中沙门氏菌能力验证中可疑菌落的分离及鉴定,分析食品中沙门氏菌检验过程中存在漏检的可能性及判定方法。[方法]按照沙门氏菌能力验证作业指导书及GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》的要求对编号为224号、740号、845号3份能力验证考核样品进行沙门氏菌的检测。[结果]3份样品中均检出沙门氏菌,其中224号样品中检出沙门氏菌双相亚利桑那亚种。[结论]3份能力验证样品结果均为满意。     

食品中金黄色葡萄球菌的PCR检测

建立一种快速聚合酶链反应(PCR)方法,用于食品中金黄色葡萄球菌的检测.针对金黄色葡萄球菌独有的SEA基因设计1对引物,在PCR体系中对相应片断进行扩增,最后通过电泳技术与阳性对照进行对比来判断阴阳性.结果表明,该方法检出率高,样品中模板DNA含量仅有0.05 pg即可检出金黄色葡萄球菌,24 h即可报告结果.因此,PCR方法是一种高效、敏感、特异性高的检测技术,可用于食品中金黄色葡萄球菌的快速检测.     

食品中蜡样芽孢杆菌检验方法验证结果分析

[目的]验证国标平板计数法、最大或然数(most probable numbe, MPN)计数法检测食品中蜡样芽孢杆菌的适用性。[方法]参照GB 4789.14—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽孢杆菌检验》中平板计数法、MPN计数法检测样品中蜡样芽孢杆菌浓度，对比不同方法的检测结果。同时以蜡样芽孢杆菌为阳性对照，蕈状芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌为阴性对照，验证方法的特异性。[结果]该方法具有特异性，能够准确检出蜡样芽孢杆菌的计数，方法精密度和重复性好，回收率在84%～100%。[结论]2种方法均具有适用性和可操作性，均能达到标准方法要求的技术指标水平，检验结果准确可靠。     

食品中金黄色葡萄球菌的快速检测及其评估

[目的]分析食品样品中金黄色葡萄球菌的含量,评估金黄色葡萄球菌快检试剂盒的可操作性和准确性.[方法]分别购买市售苹果脆片和真空包装水果玉米,采用国标GB 4789.10-2006和快检试剂盒测定其金黄色葡萄球菌含量,并以金黄色葡萄球菌为目标菌,采用人工污染样品,根据《食品快速检测方法评价技术规范》评估其快检试剂盒的相关...     

食品中金黄色葡萄球菌定量检测方法比较研究

[目的]探求一种适应食品微生物实验室检验要求的快速准确的方法.[方法]比较研究Baird-Parker平板法、MPN法、科玛嘉金黄色葡萄球菌显色培养基法和PettifilmTM测试片法这4种定量方法对金黄色葡萄球菌的选择性、灵敏度和在食品中的应用.[结果]试验显示,4种方法检测金黄色葡萄球菌选择性良好;MPN法、显色培养基法和纸片法灵敏度比Baird-Parker平板法稍高;4种方法应用在食品检测中,金黄色葡萄球菌检出率无显著差异.因此可选择显色培养基和PetrifilmTM测试纸片法作为日常检验的辅助手段,以提高检测灵敏度、缩短检验周期.[结论]研究可为食品检测方法的研究及应用积累一定的经验,为今后金黄色葡萄球菌的检测工作提供一定参考.     

食品中金黄色葡萄球菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用

【目的】金黄色葡萄球菌是一种人畜共患病的重要致病菌,主要经食品传播,引起食物中毒、组织及器官的化脓性炎症,建立快速、准确的检测方法对预防和控制金黄色葡萄球菌的传染具有重要意义。【方法】DNA环介导恒温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)是一种新颖的快速、高灵敏核酸扩增技术,本研究利用该技术建立金黄色葡萄球菌LAMP检测方法。基于金黄色葡萄球菌高度保守的Sa442基因序列,设计4条特异性LAMP扩增引物,两条外引物F3和B3及两条内引物FIP和BIP,在BstDNAPolymerase作用下,65℃恒温水浴中,对26个种类共45株细菌进行扩增,所试的20株金黄色葡萄球菌均为LAMP阳性,说明所设计的LAMP引物具有高度特异性。【结果】本LAMP方法对纯培养的金黄色葡萄球菌检测灵敏度为25CFU/mL,对污染食品中金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为42CFU/g,40—60min内即可完成检测。检验检疫实践证明,利用本LAMP方法对958份肉类、蛋奶及其制品、人工污染样品等进行检测,检出115份LAMP阳性,与国标法(GB)检测结果一致。【结论】本LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。     

出口金枪鱼中金黄色葡萄球菌测定方法比较

[目的]比较出口食品中金黄色葡萄球菌测定的2种方法。[方法]将出口食品中金黄色葡萄球菌测定方法（SN0172-92法和ISO6888法）,同时应用于洪泽湖食品厂经熟加工的金枪鱼的检测,比较2种方法的实效性和实用性。[结果]2种方法在检测结果上无实质差异,有较好的一致性,但存在一些不同之处：SN0172-92法计数准确性高,ISO6888法耗时短,成本低。[结论]SN0172-92法的耗时长,成本高,但精确度高。     

食品中金黄色葡萄球菌PCR检测方法的建立

目的:建立快速检测食品中金黄色葡萄球菌的PCR方法。方法:优化金黄色葡萄球菌DNA提取方法并设计基因特异性引物,采用PCR方法扩增金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)编码基因,验证检测的特异性及灵敏度。结论:所检出的金黄色葡萄球菌在497bp处出现特异片段,该方法具有较高的敏感性和特异性,可作为食品中金黄色葡萄球菌快速检测的手段。     

市售鲜牛奶中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

[目的]通过对石河子地区市售鲜牛奶中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性的分析,评估该区域鲜牛奶的安全性。[方法]采用稀释涂平板法分离金黄色葡萄球菌,结合接触酶、兔血浆凝固酶试验,nuc基因扩增,16S r RNA基因测序进行鉴定。同时,选用K-B纸片法测定分离菌株的耐药性。[结果]从10份样品中分离得到金黄色葡萄球菌16株。其中,47.8%的菌株表现为多重耐药,12株金黄色葡萄球菌对头孢他啶具有耐药性。[结论]样品中金黄色葡萄球菌多重耐药性严重,应该采取相应的措施加以监管。     

傅立叶变换红外光谱技术对2种葡萄球菌的快速分类鉴定

[目的]建立金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌2种菌的傅立叶变换红外光谱数据库及FT-IT分类鉴定方法。[方法]应用FT-IR技术对2种葡萄球菌进行指纹图谱数据采集,应用化学计量学分析方法对光谱进行分析。[结果]建立2种葡萄球菌的标准FT-IR光谱数据库,用于FT-IR技术对2种可疑目标葡萄球菌进行鉴定;建立一种基于主成分分析的聚类分析模型,可成功地区分2种葡萄球菌。[结论]傅立叶变换红外光谱分析方法简便、快速、易操作,结果重现性好,是一种区分金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的有效方法。     

26种中草药醇提液对金黄色葡萄球菌的抑制效果

[目的]研究26种中草药醇提液对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法]用无水乙醇制备26种中草药的醇提液,然后对金黄色葡萄球菌进行抑菌试验,筛选出抑菌效果好的中草药。[结果]大黄、甘草、长青叶、独活和山萸肉的醇提液对金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用,其中大黄的抑菌效果最好,对金黄色葡萄球菌的MIC值为1.9 mg/ml;其次为长青叶提取液,其MIC值为250 mg/ml。[结论]大黄对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好,具有一定的实用价值。     

电子束辐照对酱卤牛肉品质的影响

[目的]研究电子束辐照对散装熟肉制品品质的影响.[方法]以散装即食酱卤牛肉为研究对象,研究电子束辐照对即食熟肉菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、感官品质、脂质过氧化指标及货架期的影响.[结果]试验表明,6.0 kGy电子束辐照可将散装即食酱卤牛肉的微生物指标控制在国家规定的限量标准范围内;辐照后色泽评分增大,组织状态、气味和滋味、口感评分减小;辐照后引起牛肉过氧化值增加、硫代巴比妥酸反应物值（TBARS）降低.辐照对散装即食酱卤牛肉的感官和脂质过氧化指标的影响和未辐照相比均无显著性差异,并能延长货架期至10 d.[结论]研究可为推广电子束辐照在散装熟肉制品中的应用提供一定的参考依据,以保证散装熟肉制品的质量安全,延长货架期.     

5-硝基水杨醛双缩二氨基硫脲Schiff碱的合成·表征与抑菌活性研究

[目的]合成对称的5-硝基水杨醛双缩二氨基硫脲Shiff碱,并测试其抑菌活性。[方法]目标化合物经红外、元素、核磁、质谱确证其化学结构,并用管碟法测试其抑菌活性。[结果]4种不同浓度对2种细菌均有一定程度的抑菌效果,但对革兰氏阳性金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于大肠杆菌。[结论]该新化合物对革兰氏阳性金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果。     

部分鸡场致病性葡萄球菌的分离·鉴定·药敏试验

[目的]从合肥地区部分养鸡场病鸡组织中分离葡萄球菌,并对其进行鉴定和药敏试验。[方法]从合肥地区部分养鸡场病鸡组织中分离葡萄球菌,并通过形态特征观察、溶血性试验、血浆凝固酶试验、生化试验对其进行鉴定,最后对其进行药敏试验。[结果]共分离到9株葡萄球菌。经鉴定,其中4株为金黄色葡萄球菌,在临床分离的葡萄球菌中为优势群株;在凝固酶阴性葡萄球菌中2株为头状葡萄球菌,孔氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌和沃氏葡萄球菌各1株。这说明金黄色葡萄球菌是合肥地区家禽养殖场中葡萄球菌类疾病的主要病原菌。药敏试验结果表明,所有分离菌株对12种临床常用抗生素均呈不同程度的耐药性,对青霉素、复方磺胺甲噁唑和恩诺沙星有较高的耐药性。凝固酶阴性葡萄球菌与金黄色葡萄球菌在抗药性方面存在差异。[结论]在用抗生素防治葡萄球菌病时需通过药敏试验进行药物筛选。该研究结果可为养鸡场用药提供参考。     

酸奶中嗜热乳酸链球菌的分离鉴定及益生特性研究

[目的]探讨酸奶中嗜热乳酸链球菌的益生特性。[方法]利用MRS琼脂培养基从酸奶中分离嗜热乳酸链球菌,通过糖发酵试验对其进行生化鉴定。研究嗜热乳酸链球菌的抑菌特性和胆盐耐受性,并分析不同pH值对嗜热乳酸链球菌的的影响。[结果]镜检结果表明该菌为革兰氏阳性,经生化鉴定可确定该菌为嗜热乳酸链球菌。嗜热乳酸链球菌对人体肠道内的常见病原菌有抑制作用,尤其是对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用明显。嗜热乳酸链球菌可以耐受人体肠道的胆盐环境,并在其特定部位生存。嗜热乳酸链球菌可耐受强酸,能在胃酸中存活,在近中性pH值环境中生长较好。[结论]嗜热乳酸链球菌可在人体肠道内发挥益生作用,保护机体免受病原菌的侵害。     

竹加工废弃物提取物体外抑菌效果的比较

[目的]为开发新型饲料添加剂提供依据。[方法]利用体外抑菌实验,比较了2种竹加工废弃物提取物——竹粉提取物和竹原纤维加工废弃物（废渣）提取物的抑菌效果。[结果]竹粉提取物对革兰氏阳性茵（金黄色葡萄球菌）和革兰氏阴性茵（枯草芽孢杆菌、大肠杆菌）均有很强的抑茵效果,其抑茵效果明显优于竹原纤维加工废弃物（废渣）提取物。[结论]竹粉提取物可用于制备天然饲料添加剂。     

赶黄草提取液与抗菌药联用对金黄色葡萄球菌的体外抑菌研究

[目的]测定赶黄草水煎液与碱提液分别与阿米卡星、环丙沙星、四环素、阿莫西林联合用药时对离体金黄色葡萄球菌的分级抑菌浓度指数(FIC),比较分析联合用药效果。[方法]分别用水煎和碱提法提取赶黄草的有效成分,然后通过微量肉汤稀释法测取各种药物单独用药与联合用药时的最低抑菌浓度(MIC),并计算出FIC。[结果]赶黄草水煎液与四环素联合用药对鸭源金黄色葡萄球菌及赶黄草碱提液与阿米卡星联合用药后对金黄色葡萄球菌标准菌株表现为相加作用外,其余赶黄草碱提液与水煎液分别与四种抗菌药联合用药对金葡标`准菌株及鸭源菌株均表现为无关作用。[结论]结果为临床使用赶黄草中西联合用药防治鸭葡萄球菌病提供了理论依据。     

Detection and Analysis on Staphylococcal Enterotoxins in Raw Cow Milk from Different Regions of Jinan,China

[Objective] This study was conducted to investigate the pollution caused by staphylococcal enterotoxins (SE) in raw milk and the safety of dairy products in Jinan,and to provide a scientific basis for food safety risk analysis.[Method] A total of 130 raw milk samples were collected from different regions of Jinan,and detected for Staphylococcus aureus by referring to GB 4789.10-2010.Then,enzyme-linked immunosorbent assay was performed to detect whether the S.aureus strains produced enterotoxins,and the enterotoxin type was identified using colloidal gold-based immunochromatographic test strips.[Result] Fiftyseven of the raw milk samples were polluted by S.aureus,so the detection rate of S.aureus was 43.85％;and 11 of the strains produced enterotoxins.Among the 11 enterotoxin-producing strains,seven produced SEB,only one produced SEC,and the SE type of other three strains was not identified.[Conclusion] Enzyme-linked immunosorbent assay and colloidal gold-based immunochromatographic test strips can be used in combination to rapidly detect staphylococcal enterotoxins and identify enterotoxin type,although there are some limitations.SEB is the main type of staphylococcal enterotoxin causing pollution in milk of Shandong Province.     

肉品中两种致病菌的双重PCR快速检测技术的研究

[目的]建立一种同步检测肉品中金黄色葡萄球菌与沙门氏菌的双重聚合酶链式反应.[方法]采用7.5;氯化钠肉汤和GN增菌剂分别对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌进行增菌,根据金黄色葡萄球菌的femA基因与沙门氏菌的invA基因设计引物,通过PCR反应对目标基因进行扩增,并对反应体系进行优化.[结果]特异性实验显示引物特异性良好,经双重体外扩增体系优化显示条带清晰,无非特异性的扩增条带.[结论]双重PCR是一种灵敏度高的快捷检测方法,可为这两种致病菌的同时检出提供新途径.