禽核酸疫苗的研究进展

本文对禽用（鸡、鸭、火鸡）核酸疫苗的研究进行综述。首先描述禽用核酸疫苗的进展：病原,质粒以及免疫途径。其次,描述提高核酸疫苗免疫效果的方式：接种途径,疫苗剂量以及首免时间,增加宿主细胞对质粒的摄入,添加免疫增强分子,优化质粒骨架和密码子,疫苗抗原的选择,异源性的首免-加强免疫策略。最后,描述禽用核酸疫苗的其他特点：接种后质粒的去向,免疫反应的特点以及核酸疫苗的其他用途。     

增强DNA疫苗的免疫

核酸免疫指通过接种 DNA(虽然使用线性 PCR片段 ,但通常是环状质粒 )或 RNA诱导产生对其编码蛋白的免疫应答。核酸疫苗是疫苗领域较新的成员 ,目前还没有允许用于人医或兽医。然而 ,实验研究表明以质粒 DNA为基础的核酸疫苗可在人体内引起免疫应答 ,而且已有几例临床实验正在验证这种方法。这种方法具有许多优点 ,它不仅非常灵活 ,而且可针对许多动物模型产生保护性免疫 ,前景是非常乐观的。但是 ,还有许多方面有待提高 ,核酸疫苗一般不能引起与传统疫苗一样强的应答 ,因此 ,许多实验室都在研究以增强这种很有前途的疫苗的免疫原性。D…     

禽类疫苗免疫注意事项

ｌ　疫苗使用前 ,应检查药品名称、厂家、批号、有效期、物理性状、贮存条件等是否与说明书相符。对过期、无批号、物理性状及颜色异常或不明来源的疫苗 ,禁止使用。2　疫苗的保存、运输应严格按说明书要求的温度、条件进行。如Ⅰ系、Ⅳ系等冻干疫苗应在 - 15℃以下保存 ,油乳剂灭活茵应在 2～ 8℃保存。3　一般疫苗接种前后 3ｄ内 ,饮水中应加入抗应激类药品。特别是鸡群的产蛋期 ,如需接种疫苗 ,一定要用如欧多补、速补、维利素等药品 ,以减少应激反应 ,防止产蛋率下降。4　疫苗用量不要过度贪大 ,否则会因强烈应激反应 ,造成免疫抵制 ,影…     

提高核酸疫苗免疫效果的策略

核酸疫苗因能诱导机体产生保护性免疫,且具有安全、热稳定性、价廉等优点而受到高度重视,如何提高核酸疫苗的免疫效果一直是核酸疫苗研究的热点和难点问题。文章主要从优化方法着手,就核酸疫苗研制中质粒载体的构建、抗原加工分子的联合应用、接种途径和剂量以及核酸疫苗在禽病上的应用做一综述。     

影响核酸疫苗免疫效果的因素及提高核酸疫苗免疫效果的方法

核酸疫苗(nucleic acid vaccines)是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接导入动物体细胞内,并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的.     

增强DNA疫苗免疫效果的研究进展

随着DNA重组技术的发展和应用,DNA疫苗、病毒和细菌活载体疫苗等基因工程疫苗的研制日益成为医学领域的一大研究热点。DNA疫苗在许多方面优于传统的灭活苗和减毒苗,但其免疫效果的稳定性和确实性方面尚存不足。影响DNA疫苗免疫效果的因素很多,国内外的许多研究者在这方面作了大量有意义的工作。目前,多数研究者主要通过目的基因的选择、促进外源基因在体内表达、改善疫苗导入方式以及辅以免疫刺激序列和免疫佐剂等方面来提高DNA疫苗的免疫效果。如果DNA疫苗在免疫效果方面能得到大幅度的提高,则它进入临床使用大有前途。     

纹身法免疫增强DNA疫苗免疫效果的评价

为评价不同DNA免疫方法(皮内穿刺、肌肉注射)对DNA疫苗免疫效果的影响,将自行构建的表达传染性喉气管炎病毒gJ基因的真核表达载体pCDNA3.1-gJ和表达新城疫病毒F基因的真核表达载体pVAX1-F通过普通注射器裸DNA肌肉注射和纹身器皮下裸DNA纹身法投递,分别免疫BALB/c小鼠和SPF鸡,三免后2周用NDV强毒株进行攻毒.采集免疫后小鼠和鸡的血清,ELISA法检测抗体水平,并计算鸡攻毒后保护率,来评价这2种免疫途径的免疫效果.结果表明,纹身法皮下投递诱导的特异性免疫应答抗体水平显著高于DNA肌肉注射的抗体水平,而且通过纹身法投递质粒二免后产生的抗体水平显著高于肌肉注射三免后的抗体水平.此外,通过纹身法投递50μg质粒产生的抗体水平高于同一时期通过肌肉注射100 μg质粒产生的抗体水平}攻毒试验表明,和肌肉注射免疫相比,纹身法皮肤免疫的免疫保护效果更佳.以上结果表明,纹身法皮下投递DNA疫苗,能诱导产生更强大的免疫应答,而且还是一种经济实用的方法,它将满足实验室条件下产生更快更强大免疫应答的需要,也为今后DNA疫苗免疫方法和途径研究提供新的思路.     

禽沙门菌疫苗的免疫保护机制研究进展

沙门菌感染是一种流行极为广泛的食源性传染病,食用性动物是非伤寒型沙门菌感染的储存库。人们采取了多种方法防控禽类的沙门菌感染,其中疫苗免疫是一项被大力推广并行之有效的措施。沙门菌疫苗可以降低公共卫生所面临的风险,主要表现在可减少细菌的定植并减轻对组织的侵害程度,如生殖系统,并可减少粪便排毒从而减少环境污染。秘鲁圣马科斯大学Liliana Revolledo在第24届世界家禽大会上对禽类沙门菌的灭活苗和弱毒苗及其免疫保护机制进行介绍。     

核酸疫苗的免疫效果与安全性

核酸疫苗是通过基因重组手段将编码某种抗原蛋白质的基因与载体重组后直接导入动物体内,在宿主体内表达抗原从而引起机体免疫应答的新型疫苗,是一种与传统疫苗截然不同的新型疫苗,被誉为第三代疫苗。核酸疫苗可诱导细胞免疫并可抵抗母源抗体干扰,它的诞生给基因治疗和免疫学领域带来了不可估量的前景。核酸疫苗目的基因、质粒载体的选择,接种剂量以及应用的佐剂等因素直接影响到核酸疫苗的免疫效果。DNA疫苗自诞生以来,其安全性一直是人们关心的问题,也是DNA疫苗得以日后应用于临床的关键。     

禽用核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗是近 2 0年来发展起来的一种新型疫苗 ,它应用现代生物工程技术和分子生物学技术 ,克服了传统疫苗所存在的一些问题 ,具有传统疫苗不可比拟的优点 ,成为国内外学者争相研究的热点之一 ,呈现出良好的发展势头和应用前景。在禽病学领域 ,禽流感、新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊等疾病的核酸疫苗得到了较为深入的研究 ,为禽用核酸疫苗乃至其他领域的核酸疫苗的进一步研究提供了有益的参考 ,也将会为养禽业带来不可估量的经济效益。通过对禽用核酸疫苗研究概况的综述 ,不仅可以了解国内外研究动态 ,借鉴最新的研究方法和研究思路 ,也可以发现问题和提出问题 ,进而寻求新的研究方向     

禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗在小鼠体内免疫效果试验

应用PCR技术扩增获得禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆到pUCm-T载体,再亚克隆到真核表达质粒载体pCDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcA,体外转染Vero细胞,RT-PCR和间接免疫荧光试验检测其转录表达情况。动物免疫分为3组:pCDNA3.1(+)组、PBS对照组和pcA组,每组16只BALB/c小鼠,pCDNA3.1(+)组和pcA组以100μg/只的剂量肌注免疫,PBS组每只小鼠肌注100μL 1×PBS,各组均免疫3次,每次间隔2周。间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,三免2周后检测脾淋巴细胞IFN-γ分泌情况。强毒攻击,计算小鼠存活数目及保护率。结果显示,间接免疫荧光试验和RT-PCR检测结果均表明pcA可在体外培养的Vero细胞中表达目的蛋白。动物免疫后,pcA组免疫小鼠血清抗体水平持续上升,与pCDNA3.1(+)组和PBS组相比差异极为显著(P<0.01)。经提取的禽多杀性巴氏杆菌总外膜蛋白(Omps)刺激后,pcA组的刺激值(SI值)与pCDNA3.1(+)组及PBS免疫组相比均差异显著(P<0.05)。脾细胞产生的IFN-...     

柔嫩艾美耳球虫BJ株核酸疫苗的构建及其免疫保护效果研究

将 E.tenella BJ株的保护性抗原基因 TA4插入真核表达载体中 ,然后在其上游融合方式插入 Et1A基因 ,构建成核酸疫苗并进行体外表达。IFAT检测表明 ,p CT转染细胞的荧光亮度高 ,p CTE载体大 ,转染效率低 ,荧光较弱。动物保护性试验中 ,间隔一周两次免疫鸡后攻虫发现 ,核酸疫苗对球虫感染具有明显的保护作用 ,可显著减轻球虫感染引起的机体增重下降 ,其中 ,重组干扰素联合 p CT中剂量 (5 0 μg)免疫时 ,鸡的增重效果最为明显 ,盲肠病变值也最小 ,ACI可达 16 7.2。试验还发现 ,5 0 μgp CTE可达到 10 0 μg p CT的抗球虫效果 ,ACI在 16 0以上 ,说明融合插入两种基因构建的核酸疫苗对球虫感染的保护效果更佳     

H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对鸭免疫保护效力的研究

为评价H5亚型禽流感病毒(AIV)DNA疫苗pCAGGoptiHA5对鸭的免疫保护效力,本研究将pCAGGoptiHA5以20μg、30μg和50μg剂量免疫3周龄SPF鸭,首次免疫后3周加强免疫一次。2周后以105EID50的鸭源高致病力AIV由鼻腔攻毒,观察SPF鸭发病和死亡情况。分别于攻毒后3d、5d和7d采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离,检测鸭排毒情况及免疫和攻毒后血凝抑制(HI)抗体、中和(NT)抗体的动态变化。结果表明:30μg和50μg免疫组均可对免疫鸭产生100%保护,而20μg剂量组则可对免疫鸭提供80%保护。     

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对商品蛋鸡的免疫保护效果

将密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5以50μg和10μg剂量单次或加强免疫5周龄海兰褐蛋鸡。单次免疫后3周及加强免疫后2周,用100LD50高致病力禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[Gs/GD/1/96(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,并分别于攻毒后3、5、7d采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果表明,pCAGGoptiHA5以10μg加强免疫后,可以诱导商品蛋鸡产生较高水平的HI抗体,并可保护免疫蛋鸡不发生高致病性禽流感病毒攻击后的死亡。     

鱼类的DNA疫苗

DNA疫苗是继减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗和重组多肽疫苗之后的又一新型疫苗，比其他疫苗高效、安全且易于大量生产。本文主要对鱼用DNA疫苗的构建、作用机制、使用方法、使用效果及安全问题等方面研究近况作一综述，以促进我国对鱼用DNA疫苗进一步的研究和应用，从而加速我国水产养殖业的发展，并为深入研究和掌握鱼类的免疫防御机制提供一些依据。     

寄生虫半胱氨酸蛋白酶核酸疫苗的研究进展与应用前景

就寄生虫半胱氨酸蛋白酶的一些生理生化与免疫学性质进行了概括,阐述了该酶与宿主免疫应答之间的作用关系,证明了该酶具有作为研制高效核酸疫苗的条件,同时综述了寄生虫半胱氨酸蛋白酶核酸疫苗的发展以及应用前景。     

DNA疫苗的动物试验研究及其应用前景

介绍了DNA疫苗在动物试验研究方面的现状,如:动物免疫试验中动物模型的选择、疫苗的接种途径及其选择、免疫学效果评价、安全性评价和DNA疫苗研究存在的问题,以及DNA疫苗在控制畜禽疾病方面的应用前景和发展趋势.     

A DNA vaccine against dolphin morbillivirus is immunogenic in bottlenose dolphins

The immunization of exotic species presents considerable challenges. Nevertheless, for facilities like zoos, animal parks, government facilities and non-profit conservation groups, the protection of valuable and endangered species from infectious disease is a growing concern. The rationale for immunization in these species parallels that for human and companion animals; to decrease the incidence of disease. The U.S. Navy Marine Mammal Program, in collaboration with industry and academic partners, has developed and evaluated a DNA vaccine targeting a marine viral pathogen – dolphin morbillivirus (DMV). The DMV vaccine consists of the fusion (F) and hemagglutinin (H) genes of DMV. Vaccine constructs (pVR-DMV-F and pVR-DMV-H) were evaluated for expression in vitro and then for immunogenicity in mice. Injection protocols were designed for application in Atlantic bottlenose dolphins (Tursiops truncatus) to balance vaccine effectiveness with clinical utility. Six dolphins were inoculated, four animals received both pDMV-F and pDMV-H and two animals received a mock vaccine (vector alone). All animals received an inoculation week 0, followed by two booster injections weeks 8 and 14. Vaccine-specific immune responses were documented in all four vaccinated animals. To our knowledge, this is the first report of pathogen-specific immunogenicity to a DNA vaccine in an aquatic mammal species.