鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活 疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫程序研究

设计不同的免疫程序,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡,通过对ND、IB、H9抗体滴度监测,探讨ND、IB、H9抗体消长规律及鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)的免疫程序。试验结果表明,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡后,其诱导产生的ND、IB、H9抗体的消长规律基本同步;仅于10日龄免疫一次三联灭活苗,其抗体水平较低,于20、40日龄二免、三免或10日龄先用鸡新城疫病毒(La Sota株)、禽流感病毒(H9亚型,SS/94株)二联灭活疫苗作基础免疫,20或40日龄再用三联灭活苗作加强免疫,则上述3种抗体均快速上升,且维持时间长。根据试验结果,建议按照正常免疫程序作基础免疫的健康肉鸡,饲养期较短的可于20日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.3 mL/只;饲养期较长的则于40日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.5 mL/只。     

乳酸杆菌DNA对鸡新城疫油苗和禽流感油苗免疫增强作用的研究

提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂，按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲，每组20只，分别于15日龄和28日龄进行新城疫（ND）组和禽流感（AV）组首免，再分别于首免台2周加强免疫，在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明，与对照组相比，试验各组抗体水平达到显著或极显著水平，可提高抗体水平2^0.16～2^2.67。说明，2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

不同剂型新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平对比试验

不同剂型的佐剂对疫苗的免疫效果有较大的影响,本试验旨在对比不同剂型佐剂的新城疫-禽流感(简称"新-流")二联灭活疫苗的免疫效果,从而为生产上选择最佳剂型佐剂应用于新城疫-禽流流感二联灭活疫苗提供依据。分别将油包水型、水包油型、水包油包水型佐剂与新城疫及禽流感灭活抗原乳化成不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗,将这三种不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗分别免疫一组7日龄SPF鸡。每羽颈部皮下注射0.2 m L,同时设一组未免7日龄SPF鸡作为对照组,各免疫组与对照组SPF鸡于免疫组免后6、10、15、21、28、35 d进行采血,检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:免疫油包水型疫苗组SPF鸡免疫后新城疫与禽流感抗体上升最快,在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最高,其次是免疫水包油包水型的,而免疫水包油型疫苗组的SPF鸡新城疫与禽流感抗体上升最慢,而且在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最低。此外,从各免疫组可以看出,在免后6 d时新城疫抗体已开始产生,在1log2以下,而禽流感抗体仍未产生。可见免疫新-流二联苗后,新城疫抗体比禽流感抗体更早产生,油包水型新-流二联苗的免后抗体高于水包油包水及水包油型,而且能持续刺激机体产生高水平抗体,更具优势。     

不同新城疫、禽流感二联灭活疫苗免疫效果探讨

在家禽传染病中,新城疫和禽流感仍是制约养鸡经济效益的2种主要传染病.目前,免疫预防仍是防控鸡新城疫(ND)和H9N2亚型禽流感(AI)的有效措施[1].为有效防控新城疫和H9N2亚型禽流感,瑞普生物和河南农业大学禽病研究所通力合作,成功研制了鸡新城疫(La Sota株)、禽流感H9亚型(HP株)二联灭活疫苗.为进一步验证其临床免疫效果,特进行了田间免疫保护试验,并与市场上的部分同类产品进行了免疫效果比较,为有效防制新城疫和H9N2亚型禽流感提供试验数据和科学依据.     

重组鸡γ-干扰素联合鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫效果的研究

为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48h采集全血进行细胞因子检测,结果显示免疫后联合免疫组的IFN-γ和IL-4细胞因子水平要高于单独免疫疫苗组;免疫后7、14、21、28和35d分别采集血清测定抗体效价,通过检测血清中针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的HI抗体水平可知,联合免疫组产生的针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的抗体均高于单独免疫疫苗组。试验结果表明,重组鸡γ-干扰素对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)具有免疫增强作用。     

乳酸杆菌肽聚糖对鸡新城疫油苗和禽流感油苗的免疫增强作用的研究

该试验提取2株乳酸杆菌L．casei zhang和MC2-1的肽聚糖作为佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用此2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫组和禽流感组首免,再分别于首免后2周加强免疫,在二免后的第7天与第14天检测血清抗体HI水平。结果表明,与对照组相比试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.33-2^2.50。随着细菌肽聚糖量的增加,各试验组在提高抗体水平上也增加。2株乳酸杆菌肽聚糖对鸡接种新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

鸽群新城疫弱毒疫苗免疫效果跟踪报告

对40~45日龄鸽群实施新城疫低等毒力活疫苗（La系）免疫与新城疫低等毒力活疫苗（La系）加H5N2亚型禽流感灭活疫苗免疫效果的对比试验，首免后21 d进行二次免疫，并采用血凝抑制试验对80份血清进行ND和AIV H5血清抗体跟踪检测。结果表明，使用新城疫低等毒力活疫苗（La系）免疫的鸽群首免后7~21 d，ND免疫抗体随着日龄的增加而升高，但不能达到有效保护水平；首免后21 d进行二次免疫，跟踪监测到二免后35 d，ND免疫抗体呈波浪式上升；使用新城疫低等毒力活疫苗（La系）加H5N2亚型禽流感灭活疫苗免疫的鸽群抗体水平总体趋势基本相同，但ND免疫抗体水平波动较大，是否与同时免疫AIV H5有关则需要进一步试验探讨。     

禽流感-新城疫重组二联苗对石岐杂快大型肉鸡免疫效果研究

对江门地区两个种鸡场的H5、H9及ND母源抗体进行了监测,发现雏鸡19日龄时禽流感H5亚型母源抗体水平低于4log2,确定禽流感-新城疫重组二联苗首免日龄为20日龄;经禽流感-新城疫重组二联苗免疫后,肌肉注射和点眼滴鼻免疫的实验鸡组禽流感(H5)和新城疫(ND)抗体水平明显高于其它组群,肌肉注射2头份组H5抗体可在六天内升至4log2以上;肌肉注射2头份和点眼滴鼻组2头份组新城疫(ND)抗体水平达到4log2以上。     

VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒灭活疫苗的增效作用研究

试验旨在探究VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒（NDV）灭活疫苗（ND4416株）的免疫增效作用。选取160只健康鸽随机分为4组：ND4416株灭活疫苗组（NDV组）、ND4416株灭活疫苗与免疫增强剂（VA5）混合组（NDV+VA5组）、La Sota灭活疫苗组（La Sota组）及生理盐水空白对照组（C组）,进行免疫效力及免疫持续期试验。采用血凝抑制试验检测各组鸽免疫后不同时间点的血清抗体效价,结果显示,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗血清抗体水平（P<0.05）。脾脏淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能够有效刺激免疫鸽的淋巴细胞转化。在免疫后第30、90、180天,各组鸽子采用ND4416株进行攻毒试验,结果显示,NDV+VA5组在3个时间点的攻毒保护率均为100%,均高于La Sota组。免疫持续期试验结果显示,NDV+VA5组血清抗体水平在免疫后第21天达峰值11.20log₂,第180天仍能达到7.50log₂,攻毒保护率达100%,表明VA5免疫增强剂可延长鸽新城疫疫苗的免疫效力持续期至180 d。攻毒后体外排毒检测结果表明,VA5免疫增强剂能够缩短攻毒后鸽的体外排毒周期,减少体外排毒。综上,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗的免疫效果,为研制效果更好的鸽NDV疫苗提供了基础依据,同时也为免疫增强剂的应用增加了试验数据。     

基于悬浮细胞制备的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联灭活疫苗(La Sota株+BX13株)安全性和免疫产生期研究

为探讨悬浮细胞制备的鸡新城疫-H9亚型禽流感二联灭活疫苗(La Sota株+BX13株)(以下简称二联灭活疫苗)的安全性和免疫产生期，试验用新城疫病毒(NDV)La Sota株和H9亚型禽流感病毒(AIV)BX13株分别接种BHK-21和MDCK悬浮细胞，收获抗原液，制备二联灭活疫苗；采用1 mL/只的剂量接种21日龄SPF鸡进行二联灭活疫苗的安全性试验；以0.02、0.05、0.1、0.3、0.5 mL/只的剂量接种21日龄SPF鸡，免疫后7、14、21 d采血测定NDV HI和AIVHI抗体，并于免疫后21日龄攻毒进行免疫保护试验和免疫产生期试验。结果显示：二联灭活疫苗对SPF鸡安全，鸡只无不良反应，疫苗吸收良好；各剂量组免疫后抗体水平均逐渐升高，免疫后21 d NDV HI效价为6.1～8.5 log₂,AIV HI效价为7.5～11.2 log₂；免疫后21 d,0.02 mL/只剂量组对两种毒株的攻毒保护率均为9/10，其余剂量组均为10/10保护。研究表明，二联灭活疫苗对SPF鸡安全，以0.1 mL/只的剂量免疫SPF鸡21 d可...     

商品代AA肉鸡接种禽流感疫苗的免疫效力观察

分别应用不同禽流感疫苗接种不同批次的商品代AA肉鸡,通过血凝抑制试验测定免疫后不同时期的抗体水平,确定各种疫苗对商品代AA肉鸡的免疫效果。结果表明,在免疫20天后,禽流感（H5＋H9）二价灭活疫苗（H5N1 Re-1＋H9N2 Re-2株）刺激肉鸡群产生的HI抗体均高于禽流感灭活疫苗（H5亚型,N28株）、禽流感（H5N2＋H9N2）二价灭活疫苗（N28株＋SD696株）和禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）,与后三种疫苗接种商品代AA肉鸡的免疫抗体相比差异显著（P〈0.05）。     

新城疫分离株免疫保护试验

对经过鉴定的新城疫病毒穴NDV雪分离株,按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗,在隔离器中接种SPF鸡,设标准LaSota疫苗株作对照,进行免疫保护实验。免疫后,每7d采血监测NDV抗体。免疫后3周,利用ND强毒分离毒和F48E9分别进行交叉攻毒实验,同时设SPF鸡对照。每天观察,及时剖检发病鸡,检察鸡群病变,以确定疫苗的保护性,以便对常规生产中的免疫失败进行原因分析。     

表达新城疫HN和F基因重组禽痘病毒的免疫效力测定

将8日龄SPF鸡随机分组.分别接种rFPVHN、rFPVF、rFPVNHF重组禽痘病毒,接种量为每只鸡105PFU,另一组群用La Sota活苗经点眼、滴鼻接种10<'6>EID<,50>.于免疫后6d、12d和18d测定HI和微量中和抗体.结果发现,3种重组病毒均能刺激鸡群产生抗新城疫病毒特异抗体,但抗体产生时间比La Sota活苗缓慢,且抗体滴度亦低.然而共表达HN和F的rFPVNHF免疫鸡群的中和抗体水平明显比rFPVHN和rFPVF组群高.表明rFPVNHF的保护性免疫更优于HN或F单基因重组禽痘病毒.     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗。为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性。结果显示:肉鸡免疫后14 d即可激发抗体,免疫后21 d,新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)的血凝抑制(HI)抗体分别达8.6log2、6.2log2、8.3log2,出栏时仍维持在较高水平;于免疫后14 d抽样进行NDV、H9 AIV攻毒,对照组均100%发病或排毒,免疫鸡均可获得100%保护;在蛋鸡上,免疫三联苗(Re-9株)后28 d,NDV、IBV、H9 AIV的HI抗体效价分别达12.0log2、7.8log2、12.2log2,免疫后6个月仍可以维持在较高水平。结果表明:三联苗(Re-9株)在实际应用中免疫效果较好,本研究将为鸡新城疫、传染性支气管炎、H9亚型禽流感的防控提供有力支撑。     

五加芪粉对鸡免疫新流二联灭活疫苗免疫效果的影响

研究了五加芪粉对鸡免疫新流二联灭活苗后免疫功能的影响。180只20日龄鸡随机分为6组,每组30只,分别为五加芪粉高、中、低剂量组、阳性药物对照组、免疫对照组、空白对照组。于免疫后第10、17、24、31和38天检测血清中新城疫抗体水平、禽流感抗体水平、IL-2含量,并于免疫后第38天检测免疫器官指数。结果表明,0.2、0.5 g/L的五加芪粉组与免疫对照组相比,显著或极显著的提高了新城疫(ND)和禽流感(AI)抗体水平(P0.05,P0.01)。不同剂量的五加芪粉组和紫锥菊末组与免疫对照组相比,显著或极显著的提高了法氏囊指数、脾脏指数和胸腺指数(P0.05,P0.01)。免疫给药后第31天,0.2、0.5、1 g/L的五加芪粉组、紫锥菊末组与免疫对照组相比,显著或极显著的提高了IL-2的水平(P0.05,P0.01),以上实验结果初步表明五加芪粉可以提高鸡免疫新流二联灭活疫苗免疫效果,增强机体的免疫力。     

肉仔鸡新城疫疫苗免疫效果观察

为了解宝鸡某鸡场对内仔鸡新城疫的免疫情况,对免疫接种后鸡群随机采血分离血清,通过血凝抑制试验测定血清抗体效价,评价疫苗免疫对鸡群的保护作用.结果显示,用Clone-30株、La Sota株做4单位毒测得血清抗体效价均在25以上,而用当地分离株测得同样血清的抗体效价在21～22之间,并且试验后期鸡群发病.结果表明此次免疫...     

Protective efficacy of commercial Newcastle disease vaccines against challenge of goose origin virulent Newcastle disease virus in geese

Since 1997, severe outbreaks of Newcastle disease (ND) in geese in many regions throughout China have resulted in high morbidity and mortality, and great economic loss to farmers; however, no licensed, specific vaccine is yet available for this disease in China. In this study, goslings were immunized with different combinations and dosages of several commercial ND vaccines including La Sota vaccine, Mukteswar vaccine, recombinant live vaccine against avian influenza (AI) and ND (rL-H5 strain), and inactivated ND oil-emulsion vaccine (La Sota strain). The protective effects were evaluated based upon the level of antibody response and the degree of protection against the goose-origin virulent NDV strain. The result showed that two doses (i.e., one more than that for chicken) of La Sota vaccine priming, followed by 2-5 doses of Mukteswar vaccine boosting 2-3 weeks later, not only induced higher HI antibody levels, but also conferred longer-lasting protection. This immunization procedure can be recommended for prevention of ND in geese.     

表达犬瘟热病毒H基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究

为研制安全、有效的新型犬瘟热疫苗,本研究利用新城疫病毒(NDV) LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,构建出表达犬瘟热病毒(CDV)弱毒疫苗株Rockborn-20/8血凝素(H)蛋白的重组病毒rLa-CDV-H,并对其生物学特性进行鉴定,评估其作为犬瘟热活载体疫苗的安全性和有效性.通过免疫荧光和western blot试验证明了CDV H蛋白的正确表达;重组病毒株保持了LaSota亲本株的低致病性和高滴度鸡胚生长特性;重组病毒rLa-CDV-H接种12周龄比格犬后,可以诱导显著的CDV中和抗体反应.本研究表明重组病毒rLa-CDV-H具有作为犬瘟热重组病毒活载体疫苗的潜力.