诱导栉孔扇贝雌核发育时精子入卵的扫描电镜观察

取栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)精子在 80 0 μW/(cm2 ·s)的紫外线下辐射 ,然后与正常卵子受精 ,每隔 0 .5min取“受精卵”固定。在扫描电镜下连续观察精子的入卵过程 ,然后与正常精子的入卵过程进行比较。结果表明 ,紫外辐射后的精子可以划分为 3种类型 :I类精子 ,基本无明显变化 ,可以激发卵黄膜举起形成受精膜 ,同时诱发卵子发生皮层反应 ,在受精锥的作用下正常入卵 ,但入卵的时间较正常精子晚 ;II类精子 ,顶体膜破裂 ,顶体丝伸出 ;III类精子 ,顶体丝伸出 ,鞭毛脱落。由于II、III类精子在紫外辐射条件下诱发了顶体反应 ,融解卵膜的酶提前释放 ,因而不能入卵。精子鞭毛的脱落 ,使精子丧失了运动能力 ,是导致卵表面附着的精子数量较少的原因之一。无论是正常精子还是辐射后的精子 ,入卵后在卵表面都留下一个类似受精孔的通道。实验组中未发现有多精入卵现象     

史氏鲟精子入卵过程的扫描电镜观察

史氏鲟(Acipenserschrencki)隶属鲟形目(Acipenseriformes)、鲟科(Acipenseridae)、鲟属(Acipenser),是黑龙江特产和重要的经济鱼类之一,为淡水定居种类。鲟鱼是古老的生物类型,世界上约有28种,仅分布于北半球。由于自然环境的改变和人类活动的影响,所有鲟鱼均处于不同程度的濒危状态,有的已近灭绝[1,2]。我国有8种鲟鱼,其中黑龙江2种,即史氏鲟和达氏鳇。近年来,随着人工养殖技术的提高和完善,史氏鲟成为国内最主要的鲟鱼养殖种类。有关史氏鲟人工养殖、基因组DNA含量、胚胎发育等国内有较多研究,而对受精生物学方面研究尚未见报道。特殊…     

锯缘青蟹精子入卵过程的扫描电镜观察

利用扫描电镜详细观察了锯缘青蟹精子入卵的过程。精子以其核突起附着在卵膜上,并迅速发生顶体反应。顶体反应时,顶体囊外翻,顶体管前伸,精子核辐射臂收缩,并拖至顶体囊的后部。顶体管迅速穿过卵黄膜,携带核物质一同进入卵子。锯缘青蟹为多精着卵,数精入卵。本文同时探讨了精子顶体反应机制以及受精过程卵子的作用。     

索氏六须鲶受精早期精子入卵的扫描电镜观察

用扫描电镜对索氏六须鲶受精早期精子入卵过程进行系统观察,结果显示,索氏六须鲶在受精后３０－６０ｓ内完成精子入卵过程,在受精后２ｍｉｎ精子开始逐渐解体,直至受精后１５ｍｉｎ左右,受精卵外精子全部解体。通过对精子和卵子的精孔管的测量判定索氏六须鲶精方式为单精受精。     

大菱鲆成熟精子、卵子及精子入卵早期过程的电镜观察

通过人工授精和电镜技术,观察和描述了大菱鲆Scophthalmus maximus成熟精卵的形态、精子入卵的早期过程及精子入卵过程发生的一系列形态结构变化。大菱鲆卵子表面均匀地布满纵横交错的网纹,并整齐地分布许多微小孔,在动物极有一个受精孔。大菱鲆精子为无顶体类精子,由头部、中片和尾部三部分组成,中片有9～14个圆形线粒体。大菱鲆精子入卵速度非常快,授精后0～5s已经有精子通过受精孔(Micropyle)进入卵子。精子入卵过程还伴随着其他一些结构的变化,如精孔管管壁边缘由锯齿状变为平滑的环状等。     

黄鳝精子活力检测和精子入卵早期过程观察

采用Olympus3×51相差系统显微镜和SQIAS—1000彩色精液质量图文分析系统检测黄鳝精子活力。结果表明,在NaCl溶液浓度为0～0.3%时,黄鳝精子激活比例随溶液浓度升高而极显著增加(P<0.01);当NaCl浓度达到0.7%时,精子激活比例、直线运动速度和鞭毛摆动频率均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低。扫描电镜观察显示:黄鳝成熟卵卵壳膜上的精孔区呈漏斗状凹陷,其底部中央可见一精孔管外孔,口径约4.22±0.66μm;黄鳝精子入卵速度缓慢,受精过程较长,从精子附着于卵球表面到精孔管完全堵塞,约30s～5min。     

中国对虾精子入卵过程的观察

利用光镜和电镜对中国对虾精子入卵过程进行了观察。结果表明,精子的核物质籍胞吐作用穿过卵黄膜到达卵膜,其余部分则留在卵黄膜外。只有在卵子激活前到达卵膜的精子才能参与受精作用,其余的精子将被卵子激活所形成的胶质层推离卵子。中国对虾精子激活过程,没有发现顶体丝的形成。精子的入卵开始于卵子的皮层反应后期,此时精卵的接触逐渐密切,首先接触部位的卵膜稍有突起,然后开始下陷,同时这一部位的卵膜变得粗糙不平,随后卵膜解体,精子由此进入卵子。中国对虾精子的入卵位置是随机的,有多精入卵的现象。     

黄颡鱼精子入卵的扫描电镜观察

应用扫描电镜观察了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)成熟卵和精子的形态、卵子对精子的应答反应、受精孔的数量与形态、受精方式与过程。结果显示:黄颡鱼精子为鞭毛型,头部近圆球形,无顶体,单尾;卵为圆球形,卵膜表面多嵴,且有15～16条宽度不同的小沟;卵表面仅有1个受精孔,精孔管口内径约2.8μm。黄颡鱼为单精受精,受精后30 s内完成精子入卵过程。     

中华沙塘鳢(Odontobutis sinensis)精子入卵过程扫描电镜(SEM)观察

为探讨中华沙塘鳢(Odontobutis sinensis)单精入卵机制,指导中华沙塘鳢人工繁育技术,采用扫描电子显微镜(SEM)对中华沙塘鳢精子和成熟卵子的形态和精子入卵过程予以观察,较为准确地描述了中华沙塘鳢精子和成熟卵细胞的形态与结构。结果显示,中华沙塘鳢精子头部为椭圆形,长轴约为2.25±0.25μm,短轴1.00±0.20μm,颈部较短。成熟卵细胞呈鲜艳黄色,呈圆球形,直径为1.30±0.02 mm,黏性卵,具黏着丝。观察发现,中华沙塘鳢精子能够准确通过成熟卵细胞的黏着丝达到受精孔,整个授精过程平均需要60 s完成,相对于其他科鱼类时间较长。中华沙塘鳢授精15 s,精子开始通过黏着丝;20 s大量精子进入筛网;25 s精子位于筛网孔内部,部分穿过筛网;55 s大量精子通过卵细胞黏着丝;60 s精子入卵;120 s受精孔关闭。     

硬骨鱼类体细胞核的移植——(Ⅰ)鲫鱼体细胞核和鲤鱼卵细胞质配合的移植

用鲫鱼成体体细胞核作供体,直接移植到鲤鱼的去核卵内。移植后的卵子能进行分裂和发育.经过连续核移植,在193个移核卵中。获得一尾发育到孵出期的杂种幼鱼,存活224小时.     

嗜水气单胞菌对三种鱼血红蛋白的影响

以嗜水气单胞菌感染鲤鱼、鲫鱼、乌鳢,并检测了第4d和第8d的血红蛋白含量。同时,观察感染后鱼所出现的症状。结果表明,鲤鱼、鲫鱼出现典型的由嗜水气单胞菌引起的败血症症状,乌鳢则为腐皮病症状;与对照组相比,三种感染鱼的血红蛋白含量在第4d都显著下降(P<0.05),到第8d均极显著降低(P<0.01)。     

彭泽鲫(♀)与黑龙江野鲤(♂)的杂交利用研究

以彭泽鲫为母本、黑龙江野鲤为父本进行杂交,将杂交一代(F1)的生长速度、抗病力、群体产量、经济效益、同工酶、生物学性状等与双亲进行对比试验。结果表明,杂交一代(F1)具有明显的优势,其生物学性状及同工酶谱与母本彭泽鲫相似。     

鲤疱疹病毒2型和3型三重PCR检测方法的建立与应用

鲤疱疹病毒2型和3型主要感染鲫(金)鱼(Carassius auratus)、鲤鱼(Cyprinus carpio)和锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)及其杂交种,具有高度的传染性和致病性,对养殖鲤科鱼类危害严重。为了建立快捷、高效且能同时检测这2种类型鲤疱疹病毒的检测技术,本研究根据鲤疱疹病毒的DNA聚合酶基因(2、3型)、解旋酶基因(2型)和胸苷激酶基因(3型)的保守序列,设计了3对特异性引物,通过对三重PCR的反应条件进行优化,建立起鲤疱疹病毒2型和3型三重PCR检测方法,并运用该方法对实验室保存的鲫鱼和鲤鱼组织样品进行检测。结果显示,该三重PCR检测方法仅在鲤疱疹病毒阳性样品中扩增出3条特异性条带,表现出良好的特异性;以克隆的目的基因质粒为模板,进行10倍梯度稀释,该检测方法能检出的极限值为2.85×102 copies/μL,表现出较高的灵敏性;运用该方法检测122份鲫鱼和60份鲤鱼样品,其结果与运用国家标准(GB/T 36194-2018)和行业标准(SC/T 7212.1-2011)方法检测的结果一致。本研究表明,构建的三重PCR检测方法不仅具有较高的准确性和灵敏度,还能同时检测2种类型的鲤疱疹病毒,有效提高检测效率。     

湘云鲫、湘云鲤消化道的组织学研究

采用石蜡切片法和显微测量法研究了新型三倍体鱼－湘鱼鲫（Carassius auratus Triploid),湘云鲤（Cyprinus carpio Triploid)消化道的组织结构,并探讨了消化道组织结构和食性之间的关系,结果表明：湘云鲫,湘云鲤食道和肠道壁均由粘膜层,粘膜下层,肌层,浆膜层4层组成,缺乏粘膜肌,二者消化道的组织结构与其各自的食性一致,二者食道粘膜上皮由单层柱状细胞和杯状细胞组成,这与其它鱼类的不同,湘云鲫比湘云鲤具有对食物更强的消化吸收能力;／湘云鲫,湘云鲤肠道可分为前肠,中肠,后肠3段。     

锦鲤与草金鱼杂交子代肠道形态和酶学特性

：By comparing the intestinal characteristics of the orthogonal,reciprocal and self cross offsprings of Showa koi and long tail grass goldfish,we hope to produce and study the distant hybridization of koi and goldfish to provide theoretical basis. In this study,the intestinal parameters of the orthogonal,reciprocal,and self-crossed progeny of the Showa koi and the long tail goldfish were measured,and the morphological differences were analyzed; then the pH and digestion of the intestinal environment of the F progeny were measured and compared enzyme activity. The results showed that the reciprocal F generations were in intermediate between the parental inbred F generations in relative intestinal length,relative intestinal density,relative intestinal mass,and Zihler′s index; and the pH of the foregut was also in intermediate between Showa koi and long tail grass goldfish self-breeding between F generations; however,the intestinal amylase and lipase activities of reciprocal F generations were significantly higher than those of self-breeding F generations,while protease activity was in intermediate between self-breeding F generations. The intestinal parameters of the progeny and the reciprocal progeny of the Showa koi and long tail goldfish were higher than or between those of the two self-crossed progeny,and the intestinal traits of the two were integrated.     

冷休克诱导天然雌核发育银鲫♀×鲤鱼♂四倍体

本文报道了天然雌核发育方正银鲫四倍体杂种的初步研究。1984年,银鲫♀×鲤鱼♂授精2分钟后的受精卵在0～1.5℃的水中冷处理20分钟,获得四倍体杂种。1986～1990年,杂种子1代和它的回交杂种(F_1和第1～4次的回交杂种雌鱼)与雄鲤进行了回交。它们的染色体数目约为200±,红细胞核体积约为银鲫的1.3倍。1987年同池饲养的四倍体回交子代的体重是三倍体银鲫的1.47倍。四倍体杂种基本上保持了银鲫的性状与习性,而且相当稳定,同时它们也能够繁殖。因此,它们可作为水产养殖的鲫鱼新品种。     

大蒜素在鲤、鲫血浆中的药物代谢动力学研究

建立鲤(Cyprinus carpio specularis)、鲫(Carassius auratus)血浆中大蒜素含量的气相色谱检测方法,并研究大蒜素在鲤、鲫体内的药物代谢动力学特征。对鲤、鲫以7.5 mg/kg的剂量单次口灌大蒜素,于停药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24、36、48、72 h采集血浆,采用气相色谱法(GC)检测药物含量,通过DAS3.0软件分析药动学参数。结果显示:二烯丙基二硫醚(DADS)和二烯丙基三硫醚(DATS)的最低检测限均为10 ng/m L,DADS、DATS在鲤血浆中的平均回收率分别为77.05%~97.98%、73.39%~108.51%,在鲫血浆中的平均回收率分别为87.05%~95.68%、83.69%~102.75%。药物的两种主要成分在健康鲤鲫体内吸收较完全,分布广泛,DADS较DATS吸收快,消除慢。