EGF和IGF-1对山羊卵母细胞体外成熟的影响

研究了在培养液中添加不同浓度的EGF、IGF-1以及EGF联合IGF-1对山羊有腔卵母细胞体外成熟的影响。结果表明: (1)10, 20, 30μg/LEGF对山羊卵母细胞体外成熟无显著影响(P>0.05)。(2) 10μg/L的IGF-1对山羊卵母细胞体外成熟无显著影响(P>0.05); 20, 30μg/L的IGF-1能显著提高山羊卵母细胞体外成熟率 (P<0.05)。(3)添加 10μg/LEGF+20μg/LIGF-1组卵母细胞体外成熟率显著高于添加 20μg/L的IGF-1组(P<0.05),极显著高于添加 10μg/LEGF组和对照组(P<0.01)。可见,EGF和IGF-1对山羊卵母细胞体外成熟有协同作用。     

表皮生长因子对水牛卵母细胞体外培养核质成熟的影响

为了探讨表皮生长因子（EGF）对水牛卵泡卵母细胞体外培养核质成熟的影响，在以TCM199为基础的成熟液中加入不同浓度的EGF（0、10、25、50、100 ng/ml），体外成熟培养24~26 h，观察第一极体（PB1）的排放；随后进行孤雌激活检测其分裂率、囊胚发育率、囊胚孵化率，并用Hoechst33342染色后计算囊胚的细胞数。结果发现添加EGF各组的卵母细胞第一极体排放率显著提高（P<0.05）；成熟液中添加25 ng/ml EGF时，卵裂率及囊胚发育率（分别为80.0%、44.8%）明显高于对照组（分别为69.3%、31.9%，P<0.05），但对囊胚的细胞数影响不大。EGF不仅促进水牛卵母细胞体外培养的核成熟，而且有利于卵母细胞的胞质成熟，其中EGF的最佳浓度为25 ng/ml。     

血清、促性腺素、EGF和水对山羊卵母细胞体外成熟的影响

为了通过比较培养筛选出能改进和提高山羊卵母细胞体外成熟效率的培养体系 ,培养的山羊卵母细胞以 TCM-199为基础培养液 ,添加 :(1) 10 %血清 (胎牛血清 (FBS)或发情山羊血清 (EGS) ) 2 0 m g/ L促黄体素 (L H) 10 mg/ L促卵泡素 (FSH) 1m g/ L 雌二醇 (E2 ) ;(2 ) 10 % EGS 促性腺素 (L H∶ FSH=5 mg/ L∶ 0 .5 m g/ L 或 2 0 mg/ L∶ 10mg/ L )或者 0 .0 75 IU / m L人绝经期促性腺素 (HMG) 1mg/ L estradiol 17β;(3) 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10～ 2 0 μg/ L EGF。此外 ,以 M199 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10～ 2 0 μg/ L EGF为培养基 ,溶解于自制超纯水或储存的商品化超纯水来培养卵母细胞。培养条件为 38℃ ,5 % CO2 。培养 2 4 h后 ,在体式显微镜下统计处于 M 期的卵母细胞比例。结果显示 :在卵母细胞成熟液中添加 10 % EGS比 10 % FBS的成熟培养效果好 ;添加 HMG能够促进卵母细胞的成熟 ,其效果比添加不同比例的 L H/ FSH好 ;成熟液中添加 10～ 2 0μg/ L EGF能促进卵母细胞的成熟 ,但成熟率没有明显提高 ;新鲜的超纯水对于卵母细胞的培养是必要的。结论 :新鲜超纯水配制的 M199 10 % EGS 0 .0 75 IU / m L HMG 10～ 2 0μg/ L EGF培养液可以获得最佳卵母细胞培养效果     

激素对卵母细胞体外成熟的影响

激素对卵母细胞体外成熟的影响赵伟黄夺先（江苏省农科院牧医所２１００１４）近年来,随着商业化胚胎移植的发展,卵母细胞体外成熟和体外受精作为胚胎来源的主要途径已受到关注,而直接影响胚胎数量和质量的卵母细胞体外成熟显得尤为重要。影响卵母细胞体外成熟的因素很...     

表皮生长因子和胰岛素样生长因子对水牛卵母细胞胞质成熟的影响

以皮层颗粒（CG）单层分布于质膜下做为卵母细胞胞质成熟的标志,利用CG荧光染色法,研究了不同浓度表皮生长因子（EGF）和胰岛素样生长因子（IGF-1）及其组合对水牛卵母细胞胞质成熟的影响。结果发现：（1）添加不同浓度的EGF（10、20、30、50ng／mL）都可以提高胞质的成熟率,但是组间差异不显著（P〉0．05）;皮质颗粒的分布随着EGF浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变;（2）在成熟液中添加IGF-130ng／mL时效果较好,能显著提高卵母细胞胞质的成熟率;皮质颗粒的分布随着IGF-1浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变,在添加IGF一130ng／mL时,在皮层分布最好,随着IGF-1量的进一步增加,皮质颗粒又向中间分布转变;（3）添加20ng／mL EGF＋30ng／mL IGF-1组卵母细胞体外成熟率高于添加30ng／mL的IGF-1组,显著高于添加20ng／m LEGF组和对照组（P〈0.05）。由此表明,EGF和IGF-1对水牛卵母细胞体外成熟有协同作用。     

水牛卵泡颗粒细胞对卵母细胞体外成熟的影响

为了系统研究颗粒细胞对水牛卵母细胞体外成熟的影响,使用颗粒细胞条件液处理或单层颗粒细胞和卵母细胞共培养的方法,探讨颗粒细胞共培养对水牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响.结果显示,添加颗粒细胞传代接种第2天收集的20％颗粒细胞条件液到水牛卵母细胞成熟液中能显著提高水牛卵母细胞体外成熟率和囊胚发育率(P＜0.05);然...     

不同条件对牛卵母细胞体外成熟的影响

本研究分析了卵巢不同离体时间（＜３ｈ、４～５ｈ、＞６ｈ），不同培养时间（１８～２２ｈ、２３～２４ｈ、＞３０ｈ），不同成熟培养液（添加ＦＳＨ、ＨＣＧ、ＦＣＳ）以及不同培养温度（３４℃、３６℃、３８．５℃）对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明，小于３小时离体时间成熟率、受精率（７８．８３％、５８．０％）高于其它组；培养时间大于３０小时组成熟率高于其它组（９３．８１％），但受精率低于其它组（２３．０％）；添加ＨＣＧ与ＦＣＳ组成熟率、受精率（８９．４％、７８．９５％）大于ＦＳＨ组；培养温度以３８．５℃为佳，成熟率与受精率（８７．２％、７３．６％）皆高于另二组，差异显著。     

磷酸二酯酶抑制剂对水牛卵母细胞体外成熟的影响

本研究探讨了磷酸二酯酶(PDE)抑制剂Milrinone对水牛卵母细胞成熟的影响。水牛卵母细胞在含50μmol/L Milrinone的成熟液中培养16 h后,在不含Milrinone的成熟液中培养12 h、16 h和20 h,挑选形态正常的卵母细胞受精后培养,其分裂率(分别为59.1%,48.5%和50.6%)显著高于再培养8 h(29.5%)的卵母细胞(P0.05),但与其对照组(66.2%)相近,同时其卵母细胞受精后的囊胚发育率(分别为36.9%,33.6%和23.9%)亦显著高于8 h(15.5%)的卵母细胞(P0.05),但均与正常成熟培养的对照组(33.4%)相近。结果表明Milri-none对水牛卵母细胞的成熟具有明显的可逆抑制作用,经成熟抑制后的水牛卵母细胞恢复成熟后仍可保持较高的发育潜能。     

海狸鼠卵母细胞体外成熟培养初探

实验用ＰＭＳＧ或ＰＭＳＧ＋ＨＣＧ处理或未经激素处理的海狸鼠８只，共获卵巢卵母细胞１３８枚。激素处理对获取卵巢卵母细胞的数量没有影响，而对体外成熟发育至卵丘扩展和半成熟阶段有促进作用。三种不同培养液（Ｗｈｉｔｅｎ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＨＣＧ＋ＦＣＳ）共培养１２５枚卵母细胞，培养后卵丘扩展率及半成熟率分别为５６．５％，４５．７％，４７．６％和２１．７％，１２．３％，９．５％，以Ｗｈｉｔｅｎ液较高（分别为５６．５％和２１．７％），但只有ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ组有２枚卵母细胞出现第一极体。结果表明海狸鼠卵母细胞与其它啮齿动物的卵母细胞一样，能够在体外培养成熟，完成第一次减数分裂，排出第一极体     

Effects of EGF and IGF-I on in vitro Maturation and Cleavage of Ovine Oocytes

The study investigated the effects of epidermal growth factor(EGF) and insulin-like growth factor 1(IGF-I),alone or together,on the in vitro maturation and cleavage of ovine oocytes,aimed to optimize the in vitro maturation conditions for ovine oocytes.The results showed that the maturation and cleavage rates were 71.2% and 45.5% respectively when the medium was supplemented with 50 ng/mL EGF alone,which was significantly higher than other EGF supplemented groups (0,10,20,30,and 40 ng/mL) (P<0.05).The highest maturation and cleavage rates were 72.9% and 45.7% when the EGF concentration reached 100 ng/mL.The maturation and cleavage rates were 70.7% and 58.5% with 40 ng/mL IGF-I supplemented,which were significantly higher than other treatments (0,10,20,60,80,and 100 ng/mL) (P<0.05).The lowest maturation and cleavage rates were 38.8% and 20.0% when the IGF-I concentration reached 100 ng/mL (P<0.05).When 50 ng/mL EGF and 40 ng/mL IGF-I were used concomitantly,the maturation and cleavage rates were 85.6% and 61.0% respectively,which were significantly higher than the treatments with EGF or IGF-I alone (P<0.05).     

The presence of EGF- and IGF-1-receptors in the small intestine of fetal, neonatal and weaned piglets

During development, gut morphology and functions change. Some of these are mediated by milk-borne factors, e.g. insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and epidermal growth factor (EGF), of which the effects are in part dictated by the distribution of their receptors (R).

EGFR- and IGF-1R-immunoreactivity (IR) was evaluated in samples of the fetal, neonatal and weaned porcine small intestine.

EGFR-IR first appeared in the neonatal duodenum and was located basolaterally in villar and to a lesser extent in cryptal enterocytes. In weaned pigs, EGFR appeared apically in enterocytes with a region-dependent distribution along the villus–crypt axis. IGF-1R-IR was observed in smooth muscle cells in each age group. From the last trimester of gestation onward IGF-1R-IR was seen at the apical and basolateral side of villar enterocytes and in submucosal arterioles.

Thus, the age- and region-dependent presence of EGFR and IGF-1R has to be taken into account when evaluating effects of EGF and IGF-1 on growth or repair.     

牛卵母细胞体外成熟的影响因素

卵母细胞的体外成熟受多种因素的干扰和制约,不同种类、不同因素、不同的实验室条件等对卵母细胞的生长发育影响均很大。随着卵母细胞体外成熟技术的不断改进和完善,提高牛卵母细胞体外成熟的数量和质量以及充分利用良种资源等的研究就具有十分重要的意义。从体外成熟的作用机制、卵母细胞的获取、激素、成熟时间及人为操作等因素对牛卵母细胞体外成熟的影响进行了综述。     

铁对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响

本试验研究铁对体外生产牛胚胎的影响。从屠宰场收集牛卵巢,抽取卵巢表面的卵母细胞,采用体外成熟和体外受精的方法,研究不同浓度的铁(0.45mg/L,0.81mg/L,1.96mg/L,2.78mg/L)对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响。结果如下:当卵母细胞在体外培养22h时,不同浓度的铁之间对卵母细胞体外成熟影响较小,差异不显著(p>0.05),且与对照组之间差异不显著(p>0.05);在体外受精的研究中,铁浓度为1.96mg/L和2.78mg/L的受精卵培养液可以明显提高8细胞胚胎发育率,差异显著(p<0.05);铁浓度为1.96mg/L的受精卵培养液可以明显提高囊胚发育率,囊胚发育率为31.6%,与其他浓度的铁相比,差异显著(p<0.05)。本试验结果说明:在卵母细胞体外成熟阶段,培养液中的铁对卵母细胞体外成熟没有影响,但对受精后早期胚胎的发育有促进作用,1.96mg/L是比较合适的早期胚胎培养液中铁的添加量。     

EGF和IGF-I对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响

本文研究了EGF、IGF-I以及EGF和IGF-I联合对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响,以确立绵羊卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明：50ng／mL的EGF的成熟率和卵裂率分别为71．2％和45．5％,显著高于对照组和10、20、30、40ng／mL组（P〈0．05）,当EGF浓度达到100ng／mL时,成熟率和卵裂率最高,分别为72．9％和45．7％;40ng／mL IGF-1的成熟率和卵裂率分别为70．7％和58．5％,显著高于对照组和10、20、60、80、100ng／mL组（P〈0．05）,当IGF-I的浓度为100ng／mL时,成熟率和卵裂率最低,分别为38．8％和20．0％,与对照组和其它各试验组差异显著（P〈0．05）;50ng／mLEGF和40ng／mLIGF-I联合使用,成熟率和卵裂率分别为85．6％和61．0％,同对照组和50ng／mLEGF组、40ng／mLIGF-I组之间差异显著（P〈0．05）。     

IGF-1和IGF-1R基因在辽宁绒山羊皮肤组织中的表达

为了研究类胰岛素生长因子1(IGF-1)和类胰岛素生长因子1受体(IGF-1R)基因在绒山羊绒毛生长不同阶段皮肤组织中的表达差异,试验采用实时荧光定量PCR技术对非产绒期和产绒期辽宁绒山羊皮肤中IGF-1和IGF-1R基因的表达进行了测定。结果表明:辽宁绒山羊皮肤中IGF-1和IGF-1R mRNA的表达量在产绒期均极显著高于非产绒期(P<0.01),产绒期IGF-1、IGF-1RmRNA的表达水平分别是非产绒期的8.30倍和7.49倍。说明IGF-1和IGF-1R基因可能与山羊绒周期性生长有关。